两种恶性疟原虫多价重组复合抗原免疫活性初步鉴定

本研究将两种恶性疟原虫复合抗原，即乙型肝炎病毒表面抗原／４５肽和β－半乳糖苷酸／４５肽，同时免疫新西兰白兔，结果表明；ＨＢｓＡｇ／４５肽免疫组抗体效价明显高于β－半乳糖苷酶／４５肽免疫组。     

野生型Rb基因导入促进血管平滑肌细胞衰老的观察

目的观察腺病毒载体介导的人野生型Ｒｂ基因导入后促进血管平滑肌细胞衰老的作用，并探讨Ｒｂ基因抑制平滑肌细胞增生的机理。方法用外源性Ｒｂ基因重组腺病毒载体感染体外培养的兔主动脉血管平滑肌细胞。以细胞超微结构、３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入、流式细胞术分析细胞周期和β－半乳糖苷酶染色等方法观察平滑肌细胞的衰老变化。结果Ｒｂ基因导入可使平滑肌细胞发生衰老，表现为细胞线粒体肿胀，脂褐素堆积，ＤＮＡ合成减少，细胞停滞在Ｇ０／Ｇ１期，与衰老相关的β－半乳糖苷酶表达增加。结论野生型Ｒｂ基因通过促进细胞衰老而对平滑肌细胞增生起抑制作用     

肝细胞移植临床前研究：大鼠肝细胞分离,培养和逆转录病毒转导

目的建立完善的肝细胞培养系统，研究逆转录病毒载体转移并表达于大鼠原代肝细胞。方法采用表皮生长因子（ＥＧＦ）刺激大鼠原代肝细胞增殖，以表达β－半乳糖苷酶的双顺反子逆转录病毒载体（ｐＧＣＥＮ／β－ｇａｌ）感染肝细胞。Ｘ－ｇａｌ原位染色方法检测肝细胞内ＬａｃＺ的表达，采用ＰＣＲ方法扩增ＮｅｏＲ基因，从ＤＮＡ水平证实逆转录病毒载体整合入肝细胞。结果ＥＧＦ在体外可刺激肝细胞增殖并维持肝细胞功能，肝细胞表达β－半乳糖苷酶基因，肝细胞中可扩增出ＮｅｏＲ基因片断。结论双顺反子逆转录病毒载体可有效介导β－ｇａｌ和ＮｅｏＲ基因表达于大鼠肝细胞，提示可用于标记原代大鼠肝细胞，有利于研究肝细胞移植后移植之肝细胞在体内的寿命、分布及功能。     

恶性疟原虫杂合113肽抗原基因在减毒鼠伤寒沙门氏菌SL…

我们先前已经将人工合成的恶性疟原虫杂合１１３肽基因克隆到表达载体ｐＷＲ４５０－１中，获得了重组质粒ｐＷＲＡＢ。现将ｐＷＲＡＢ先转化到ＬＢ５０００修饰后，再转化到疫苗菌ＳＬ３２６１，得到重组减毒鼠伤寒沙门氏菌ＳＬ３２６１。ｐＷＲＡＢ在ＳＬ３２６１中以β－半乳糖苷酶－杂合多肽抗原ＡＢ融合蛋白（ＧＺ－ＡＢ）一约１３．３％，免疫双扩散发现从ＳＬ３２６１中纯化的ＧＺ－ＡＢ可与抗ＧＺ－ＡＢ抗体反应，滴度为１：     

杜氏利什曼原虫抗原基因在大肠杆菌内表达的初步研究

以λｇｔ１１噬菌体为载体，杜氏利什曼原虫前鞭毛体基因组ＤＮＡ为靶片段构建基因文库，并以杜氏利什曼原虫前鞭毛体全虫制备的高价兔免疫血清为探针，对文库进行筛选，获一持续阳性表达克隆，其表达肽段经Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ证实分子量为３９ｋＤａ，与β－半乳糖苷酶分子呈非融合状态存在。     

杜氏利什曼原虫抗原基因在大肠杆菌内表达的初步…

以λｇｔ１１噬菌体为载体，杜氏利什曼原虫前鞭毛体基因组ＤＮＡ为靶片段构建基因文库，并以杜氏利什曼原虫前鞭毛体全虫制备的高价兔免疫血清为探针，对文库进行筛选，获一持续阳性表达克隆，其表达肽段经Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ证实分子量为３９ｋＤａ，与β－半乳糖苷酶分子呈非融合状态存在。     

尿酶测定对诊断肝硬化早期肾损害的意义

尿酶测定对诊断肝硬化早期肾损害的意义周曾芬，代维，李敏丽，王玉明，段勇，周崇斌，张秋霞１９９３年６月～１９９４年４月对４４例肝硬化检测了尿Ｎ－Ｚ酰－β－Ｄ－葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）、Ｎ－Ｚ酰－β－Ｄ－半乳糖苷酶（ＧＡＬ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）和γ－谷氨酰...     

血清甲状腺激素（T3,T4）的固相酶联免疫测定——方法学探…

本实验用β－半乳糖苷酶分别标记Ｔ３及Ｔ４，均获得具有良好酶活性及免疫原活性的酶－抗原结合物。以国产聚苯乙烯微孔板为固相载体，建立了血清Ｔ３及Ｔ４的固相酶联免疫测定法。方法学检测数据如下：最小检出量，Ｔ３为０．０２ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｔ４４．０ｎｍｏｌ／Ｌ；回收率，Ｔ２为１．０２，Ｔ４０．９８；批内变异系数，Ｔ３为７．２％，Ｔ４５．３％；批间变异系数，Ｔ３为８．２％，Ｔ４１０．５％；两种抗血清对相应抗原的     

化学合成恶性疟原虫杂合45肽抗原基因在大肠杆菌中的表达

为了使化学合成的人恶性疟原虫杂合４５肽抗原基因在大肠杆菌中表达，我们将ＨＰＦＡＧ与表达载体ｐＷＲ４５０．１质粒重组连接，转化大肠杆力，获得一批转化子。这些转化子经质粒ＤＮＡ斑点杂交试验，蛋白质ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＤＮＡ酶解分析，表明化学合砀ＨＰＦＡＧ与表达载体质粒发生了重组，且有６个重组子在大肠杆菌中与β－半乳糖苷酶呈融合蛋白形式表达。     

家蚕素Ⅱ基因在293FT细胞中的表达

目的探讨家蚕素Ⅱ(BombyxinⅡ)基因在293FT细胞中的表达。方法应用脂质体将携带具有6个组氨酸标签的家蚕素Ⅱ基因的真核表达载体与携带β半乳糖苷酶基因的真核表达载体共同导入293FT细胞。采用β半乳糖苷酶细胞原位染色检测β半乳糖苷酶基因在细胞内的表达,从而判断基因的细胞转染效率;应用逆转录PCR方法检测家蚕素Ⅱ基因在细胞内mRNA水平的表达;应用免疫组织化学方法检测6个组氨酸标签蛋白在细胞内的表达,从而间接判断家蚕素Ⅱ基因在蛋白水平表达情况。结果β半乳糖苷酶原位染色显示基因转染组可见到染成蓝色的细胞,正常未转染组未见到蓝色细胞;逆转录PCR结果显示只有转染携带家蚕素Ⅱ基因的真核表达载体的293FT细胞中可检测到家蚕素Ⅱ基因表达;免疫组化结果显示只有转染携带家蚕素Ⅱ基因的真核表达载体的293FT细胞中可见到染成棕黄色的细胞颗粒。结论通过基因转染技术,成功使家蚕素Ⅱ基因在293FT细胞得以表达,为进一步研究其降血糖生物活性奠定实验基础。     

模拟抗原表位基因测定及合成多肽的血吸虫病诊断价值的研究

目的测定能用于血吸虫病诊断及疗效考核的噬菌体展示肽基因序列,研究合成多肽抗原的血吸虫病诊断价值.方法扩增目的噬菌体,制备和纯化噬菌体DNA,对目的噬菌体中外源性肽的基因序列进行测定和演绎氨基酸序列分析.根据血清反应强度和演绎氨基酸序列选择2个噬菌体的展示肽段进行人工多肽合成.以合成的多肽为抗原,建立血吸虫病诊断方法,检测急、慢性血吸虫病人血清,观察方法的敏感性及特异性;同时检测治疗前及治愈后的血吸虫病人血清,观察该合成抗原的血吸虫病疗效考核价值.结果测定了14个噬菌体展示外源肽的基因序列,序列分析表明,其中有6个噬茵体的外源肽基因序列完全相同,其余8个噬菌体展示肽的基因序列不相同.分析演绎氨基酸序列,发现1个噬菌体展示肽中的3个连续的氨基酸(GVK)残基与血吸虫23 kDa分子氨基酸残基相同.合成多肽抗原检测急、慢性血吸虫病人血清,敏感性分别为92.3%和91.1%,与华支睾吸虫病人血清的交叉反应率为7.5%,检测健康人血清,特异性为95.5%.检测治愈后0.5年的同一病人血清,阴转率为55.3%,治愈后1年的病人血清中IgG抗体的阴转率为63.2%.结论 9个具有血吸虫病诊断价值的噬菌体展示表位的基因序列被确定,并证明了合成多肽抗原有较好的血吸虫病诊断及疗效考核价值.     

内镜下Oddi括约肌测压的临床意义

为观察胆石症、胆囊切除术后等胆系疾病及功能性消化不良（ＦＤ）、糖尿病胃轻瘫（ＤＧＰ）等非胆系疾病Ｏｄｄｉ括约肌（ＳＯ）功能变化，通过内镜采用灌注式高分辨多道胃肠功能测定仪，对１５例胆系疾病患者、１３例非胆系疾病患者进行Ｏｄｄｉ括约肌测压。结果显示，胆系疾病组的胆总管压力、ＳＯ基础压及蠕动波振幅明显高于非胆系疾病组（６．８６±０．６３ｋＰａ与１．２７±０．１０ｋＰａ，Ｐ＜０．０１；７．３１±０．９５ｋＰａ与１．８７±０．１６ｋＰａ，Ｐ＜０．０１；３２．００±１．２ｋＰａ与２４．１４±１．５ｋＰａ，Ｐ＜０．０５）；同时，非胆系疾病组的十二指肠压、ＳＯ蠕动频率及间期较胆系疾病组明显降低、减慢及延长（１．４２±０．２６ｋＰａ与０．３０±０．１０ｋＰａ，Ｐ＜０．０１；３．６±１．２次／分与２．２±０．４次／分，Ｐ＜０．０５；７．４±１．２秒与１１．０±１．８秒，Ｐ＜０．０５）。结果显示，无论是胆系疾病还是ＦＤ及ＤＧＰ等非胆系疾病均有ＳＯ功能紊乱，但表现形式相反，对指导临床诊断与治疗有一定价值。     

钉螺3种酶的酶谱分析

本研究用淀粉凝胶同工酶电泳法比较了安徽及云南两省的钉螺的酸性磷酸酶（ＡｃＰ，ＥＣ３．１．３．２）、过氧化物酶（Ｐｏ，ＥＣ１．１１．１．７）及酯酶（Ｅｓｔ，ＥＣ３．１．１．１）的电泳带型。ＡｃＰ及Ｐｏ的同工酶中ＡｃＰ１、ＡｃＰ２及Ｐｏ１、Ｐｏ２由单态位点编码。Ｅｓｔ的同工酶由４个位点编码，其中Ｅｓｔ３在安徽的钉螺中为１条电泳快带，相对迁移率（Ｒｆ）为０．３６２±０．０２７；在云南的钉螺中为１条电泳慢带，Ｒｆ为０．３４０±０．０３６。     

骨代谢指标测定在骨质疏松诊治中的应用价值

目的 比较妇女绝经前后骨代谢指标的变化，研究各指标在骨质疏松症治疗后的变化率，对各指标在骨质疏松症诊治中的应用作出初步评价。方法 48例绝经前妇女、48例绝经后妇女测定10项骨代谢指标．45例绝经后骨质疏松症患者．治疗前、治疗6个月后分别测定10项骨代谢指标，观察其变化率。12名绝经后妇女，每两个月测定10项骨代谢指标。共观察一年。结果 绝经后妇女骨代谢指标明显升高，绝经后骨质疏松症患者经抗吸收治疗后．大部分骨代谢指标明显降低，血清骨形成指标比尿骨吸收指标长期个体内的变异要小。结论 绝经后骨质疏松症患者骨转换加快，部分血清骨代谢指标优于尿骨代谢指标，尤以血清骨形成指标N—mid骨钙素和血清骨吸收指标CTX为优。     

五例尸检法乐氏四联症的解剖形态观察

本文报告5例未经心内手术矫治的法乐氏四联症,对其心脏解剖形态及合并畸形,作了详细的观察和描述。