白背叶根对肝纤维化大鼠模型的实验研究

目的 通过大鼠肝纤维化动脉模型，研究白背叶根防治肝纤维化的作用。方法 采用40％CCl4花生油溶液制备大鼠肝纤维化模型，观察白背叶根对大鼠肝纤维化血清中各项指标的影响。观察的指标包括：白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB)、丙氨酸转氯酶（ALT）、天门氨酸转氨酶（AST）、透明质酸（HA）、层粘蛋白（LN）、前三型胶原（PⅢC）和四型胶原（Collagen Ⅳ）。结果 白背叶根能显著降低大鼠血清中GLB、ALT、HA、LN和四型胶原的水平，并能减轻肝脏内纤维增强程度。结论 白背叶根具有抗肝纤维化作用。     

生姜油提取物对过氧化氢致大鼠肝细胞损伤的保护作用

目的 比较=三个不同生姜油提取物对过氧化氢(H2O2)损伤培养的大鼠肝细胞的保护作用.方法 用硅胶柱层析分离生姜油后获取A(主要为萜烯类)、B(姜油酮类)、C(姜酚类和姜烯酚类)三个不同提取部位溶液.6只SD大鼠分为6组,4组分别以生姜油A、B、C三个不同部位和联苯双酯制备含药血清干预,另2组给溶媒制备对照血清.利用H2O2体外诱导大鼠肝细胞损伤模型,检测肝细胞经含药血清处理后上清液中ALT、AST、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的变化.结果 生姜油A部位含药血清能显著降低ALT和AST水平,抑制MDA的产生,升高GSH-Px活性;B部位亦能明显降低ALT和AST水平,抑制MDA的产生,升高GSH-Px活性,但降低ALT作用不如A部位;C部位能降低ALT和AST水平,升高GSH-Px活性,但对MDA含量无明显影响且降低AST作用不如A部位.结论 不同成份的生姜油提取物含药血清对H2O2引起的大鼠肝细胞损伤均有不同程度的保护作用,但以A部位效果较好,其机制可能与其抗氧化作用有关.     

白背叶根提取物的急性毒性及抗炎作用研究

目的:探讨白背叶根提取物的急性毒性及抗炎作用。方法:选取昆明种小鼠50只,雄雌各一半,根据给药情况分为给药组(研究组)与生理盐水组(对照组),分析白背叶根提取物给药前后小鼠体重变化情况、白背叶根提取物对二甲苯导致小鼠耳廓肿胀的影响。结果:给药后小鼠的行动略微缓慢,但是在1h后恢复正常。通过15d的观察,研究组小鼠大小便、饮水、进食正常,与对照组相比,体重无明显差异(P0.05);与空白对照组相比,白背叶根提取物中、高剂量可以显著降低二甲苯导致小鼠耳廓肿胀程度(P0.05);地塞米松也可以显著降低二甲苯导致小鼠耳廓肿胀程度(P0.05)。结论:白背叶根提取物急性毒性较低,可以发挥较好的抗炎效果,应该在临床上多加广泛推广与应用。     

白背叶根质量标准的建立

目的:完善和提高白背叶根的质量标准。方法:显微鉴别白背叶根横切面和粉末;采用TLC法对白背叶根水溶性成分和脂溶性成分进行定性鉴别;特征图谱采用HPLC法以芦丁为参照物确定各特征峰的相对保留时间及相对峰面积,色谱柱:SPOLAR C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.4%磷酸溶液梯度洗脱;检测波长为328 nm;流速:1.0 ml·min-1;柱温:35℃。结果:显微特征明显;薄层色谱斑点圆整、清晰、重复性好。特征图谱供试品色谱呈现5个特征峰,与参照物(芦丁)峰的相对保留时间应在规定值±5%之内,其中峰3、峰4相对峰面积不低于0.23和0.66。结论:所建立的方法简便快捷,重复性好,结果准确可靠,能有效控制白背叶根质量,可作为白背叶根的质量标准的主要控制指标。     

叶下珠对肝细胞损伤的保护作用

实验证实叶下珠能明显降低ＣＣｌ_４引起的小鼠血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）的升高；抑制肝脏脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）的生成。叶下珠体外与大鼠肝细胞共同孵育，能抑制ＣＣｌ_４所致的肝细胞膜流动性降低，降低肝细胞内钙离子浓度。结果提示，叶下珠的保护肝脏损伤作用可能与其抗脂质过氧化和膜保护作用有关。     

白藜芦醇苷体外对过氧化氢导致小鼠肝细胞损伤的保护作用

目的　观察中药虎杖的活性成分白藜芦醇苷对过氧化氢 (H2 O2 )所致肝细胞损伤的影响。方法　用邻苯三酚自氧化法测过氧化物歧化酶 ,用硫代巴比妥酸 (TBA)法测丙二醛 (MDA)含量 ,用改良Hafeman方法测还原谷胱甘肽含量 ,用 5 ,5’ 二巯基 2 ,2’ 二硝基苯甲酸 (DTNB)法测谷胱甘肽过氧化物酶活性。谷丙转氨酶 (ALT)、一氧化氮 (NO)和一氧化氮合酶 (NOS)采用测试药盒测定。结果　白藜芦醇苷系列浓度 (0 0 5 ,0 1,0 5 ,1,2 ,4mmol·L-1)作用肝细胞后 ,能显著降低H2 O2 引起的NO和MDA水平升高 ,抑制NOS活性 ,升高SOD和GSH px活性 ,减少GSH消耗 ,明显减少了H2 O2 导致的肝细胞悬液中ALT浓度增高。结论　白藜芦醇苷在一定浓度范围内对H2 O2 所致的小鼠肝细胞氧化损伤具有保护作用。     

诃子提取物对过氧化氢所致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的研究诃子提取物对过氧化氢（H2O2）所致心肌细胞损伤的保护作用。方法采用H2O2处理体外培养心肌细胞,造成氧化应激模型,通过检测细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）漏出量,丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性来反映诃子提取物对H2O2氧化模型的影响,并采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）测定细胞的代谢率。结果与模型组相比,诃子提取物能显著减少LDH和CK漏出量（P〈0.01）,升高A值（P〈0.01）,降低培养液中MDA含量（P〈0.05,P〈0.01）,升高SOD活性（P〈0.01）。结论诃子提取物可减轻H2O2对心肌细胞的损伤程度,对心肌细胞具有保护作用,其机制可能与稳定细胞膜和抗氧化有关。     

银杏提取物对过氧化氢损伤的培养大鼠心肌细胞的保护作用

探讨银杏叶提取物对过氧化氢损伤的培养心肌细胞的保护作用及其机制。方法；比色法测定乳酸脱氢酶活性；戊巴比妥酸法测定细胞内质质过氧化物含量；透射电镜下观察细胞超微结构。结果：过氧化氢导致心肌细胞ＬＤＨ释放从（２１６６±２４７）Ｕ．Ｌ＾－１增至（５１８０±６４８）Ｕ．Ｌ＾－１ＭＤＡ含量从每１０＾６细胞９３．５±０．２）ｎｍｏｌ增至（７．２±０．４）ｎｍｏｌ；．心肌细胞超微结构受到严重损伤。     

齐墩果酸抗环磷酰胺所致大鼠肝细胞损伤作用

目的研究齐墩果酸（OA）对环磷酰胺所致大鼠肝细胞损伤的保护作用。方法分离大鼠肝细胞，进行原代培养。检测实验大鼠肝细胞上清液中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）和肝细胞MTT值。结果环磷酰胺可使肝细胞上清液ALT、AST及LDH活力升高，肝细胞MTT值减小，齐墩果酸能抑制上述变化。结论齐墩果酸可抗环磷酰胺所致肝细胞损伤。     

海莲与尖瓣海莲叶性状与显微特征比较研究

目的：对海莲叶、尖瓣海莲叶的性状与显微特征进行比较研究,为其鉴别提供参考依据。方法：采用外观性状观察、显微鉴别的方法。结果：海莲叶、尖瓣海莲叶在药材性状、显微鉴别特征方面无明显差异,药材性状表现为干燥叶展平后均呈矩圆形或倒披针形,网状脉序,革质;显微鉴别特征均为两面叶,叶表皮为复表皮,由2层细胞组成,外层表皮细胞含单宁,下表面具气孔,多为不等式类型;中脉维管束为无限外韧型;叶肉组织薄壁细胞均含单宁和草酸钙结晶,海莲薄壁细胞含单宁多,含草酸钙结晶少。结论：本实验研究了海莲叶、尖叶海莲的性状及显微鉴别特征,为海莲药材鉴别、开发利用提供参考。     

Evidence of crocin against endothelial injury induced by hydrogen peroxide in vitro

Crocin, the digentiobiosyl ester of crocetin, was investigated for its cytoprotective effect on hydrogen peroxide-induced injury in bovine aortic endothelial cells (BAECs). The morphology of BAECs was observed by inverted phase contrast and electron microscopy. The MTT assay was used to measure cell viability. Cell apoptosis was evaluated by DNA argarose gel electrophoresis. The cells treated with H₂O₂ (200 μM) showed apoptotic changes as revealed by cell shrinkage, condensation of nuclei, membrane blebbing and formation of apoptotic body. A concentration-dependent inhibition of cell injury was seen in cultures treated with crocin at dosages ranging from 1 to 10 μM. Furthermore, in the H₂O₂-treated group, agarose gel electrophoresis displayed a “DNA ladder”. Whereas in the 10 μM crocin-pretreated group, cells remained intact and no “DNA ladder” was observed in agarose gel electrophoresis. Only very little DNA debris appeared on DNA-fragmentation analysis in the 1 μM crocin-pretreated group. Our data demonstrated that crocin has preventive effects on the cell apoptosis induced by H₂O₂, which may contribute to its utilisation for cardiovascular diseases (e.g., atherosclerosis and hypertension).     

Evidence of crocin against endothelial injury induced by hydrogen peroxide in vitro

Crocin, the digentiobiosyl ester of crocetin, was investigated for its cytoprotective effect on hydrogen peroxide-induced injury in bovine aortic endothelial cells (BAECs). The morphology of BAECs was observed by inverted phase contrast and electron microscopy. The MTT assay was used to measure cell viability. Cell apoptosis was evaluated by DNA argarose gel electrophoresis. The cells treated with H₂O₂ (200 μM) showed apoptotic changes as revealed by cell shrinkage, condensation of nuclei, membrane blebbing and formation of apoptotic body. A concentration-dependent inhibition of cell injury was seen in cultures treated with crocin at dosages ranging from 1 to 10 μM. Furthermore, in the H₂O₂-treated group, agarose gel electrophoresis displayed a “DNA ladder”. Whereas in the 10 μM crocin-pretreated group, cells remained intact and no “DNA ladder” was observed in agarose gel electrophoresis. Only very little DNA debris appeared on DNA-fragmentation analysis in the 1 μM crocin-pretreated group. Our data demonstrated that crocin has preventive effects on the cell apoptosis induced by H₂O₂, which may contribute to its utilisation for cardiovascular diseases (e.g., atherosclerosis and hypertension).     

平卧菊三七对二乙基亚硝胺诱导小鼠肝脏损伤的影响

目的:探讨平卧菊三七茎提取物(Ethanol extraction from Gynura Procumbens stem,EEGS)对二乙基亚硝胺(Diethylnirtosamine,DEN)诱导小鼠化学性肝损伤的保护作用。方法:40只昆明雄性小鼠,随机分为5组(每组8只):空白对照组、给药对照组、DEN模型组、EEGS治疗组(50 mg·kg^-1和200 mg·kg^-1),模型及治疗组每周经口给予165 mg·kg^-1 DEN,8周后停止DEN处理,成模之后,治疗组及给药对照组每天灌胃相应剂量的EEGS,7 d后处死小鼠。血清用于检测ALT、AST活性;HE、TUNEL和PAS染色分别检测组织病理学、细胞凋亡及糖原水平;RT-PCR检测肝TNF-α、AP-2等基因表达变化。结果:与模型组相比,EEGS(200 mg·kg^-1)能有效降低DEN诱导的血清ALT、AST活性以及TNF-α mRNA和AP-2 mRNA的升高,而对PPAR-γ、HGF mRNA的升高及IL-6 mRNA的降低无明显作用;且能有效减少凋亡细胞数量并抑制糖原增多,明显改善肝实质细胞的减少和脂肪变性等病理变化。结论:EEGS通过下调TNF-α,抑制炎症、细胞凋亡,阻止肝脏脂肪化,减轻DEN引起的化学性肝损伤。     

卡维地洛对过氧化氢致血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的观察卡维地洛(carved ilol)对过氧化氢(hydrogenperoxide,H2O2)致内皮细胞损伤及表面粘附分子表达的影响。方法采用H2O2作为外源性自由基生成系统,模拟内皮细胞的脂质过氧化损伤,建立离体培养的ECV-304细胞氧化应激损伤模型,观察卡维地洛对H2O2致内皮细胞损伤及表面粘附分子表达的影响。结果卡维地洛各浓度组均明显改善H2O2(1.0×10-6mol.L-1)所致ECV-304细胞形态学损伤,提高细胞生存率,降低LDH释放,并可使细胞内及细胞培养液中MDA含量降低,SOD活性升高,亦可下调ICAM-1蛋白及细胞内ICAM-1mRNA表达水平,上述作用随药物浓度增加呈增强趋势。结论卡维地洛可保护内皮细胞结构和功能的完整性,提高内皮细胞抗氧化能力,并从转录水平抑制脂质过氧化诱导的粘附分子表达增加,降低单核-内皮细胞粘附,有利于减少动脉粥样硬化的始动环节和早期事件的发生。     

国产沉香化学成分的研究 Ⅱ.白木香醇和去氢白木香醇的分离和结构

自国产沉香[系瑞香料(Thymelaceae)植物白木香(Aquilaria slnensuis(Lour.)Gilg.)的含有黑色树脂的木质部]的挥发油中经硅胶柱层析和制备性薄层层析分离得到两个新的沉香呋喃类倍半萜,分别命名为白木香醇(baimuxinol)和去氢白木香醇(dehydrobaimuxinol)。经光谱IR,¹H NMR,MS分析和化学方法,确定它们的结构分别为式(Ⅰ)和(Ⅱ)。     

Effects of borneol on the level of DNA damage induced in primary rat hepatocytes and testicular cells by hydrogen peroxide

The aim of this paper was to evaluate genotoxic effects of borneol and its ability to change DNA-damaging effects of H₂O₂ in rat hepatocytes and testicular cells. Both in vitro and ex vivo approaches were used in the case of hepatocytes. Testicular cells were tested only ex vivo, i.e. shortly after isolation from rats supplemented by borneol. Cytotoxicity of borneol increased in in vitro conditions in a concentration-dependent manner and it was associated with DNA-damaging effects at toxic concentrations. While non-toxic concentrations of borneol applied in vitro protected cells against H₂O₂-induced DNA damage and interfered only partly with rejoining of H₂O₂-induced DNA strand breaks, cytotoxic concentrations of borneol manifested synergy with H₂O₂, i.e. enhanced DNA-damaging effects of H₂O₂. On the other side, borneol given to rats in drinking water decreased the level of DNA damage induced by H₂O₂ in both hepatocytes and testicular cells. Our results show that though at higher concentrations (2-h treatment with >2 mM borneol >0.3084 mg/ml) borneol acts cytotoxically and genotoxically on primary hepatocytes cultured in vitro, if given to rats during 7 days in a daily concentration of 17.14 or 34.28 mg/kg it reduces genotoxicity of H₂O₂ in both hepatocytes and testicular cells.     

国产沉香化学成分的研究——Ⅰ.白木香酸和白木香醛的分离和结构测定

用气相色谱方法比较了国产沉香(Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg.)和进口沉香(A.agallocha Roxb.)挥发油的组成,发现两者有一定差别。国产沉香的挥发油经硅胶柱和氧化铝柱层析得到两个新的倍半萜,分别命名为白木香酸(baimuxinie acid)和白木香醛(baimuxinal)经光谱(UV,IR,PMR和MS)分析,衍生物制备以及X线衍射单晶解析,确定它们的化学结构分别为式(Ⅰ)和(Ⅱ)。同时得到一已知化合物沉香螺旋醇(agarospirol)(Ⅲ)。     

漏芦对大鼠原代肝细胞细胞色素P4501A1酶活性及其mRNA表达的影响

目的研究漏芦对细胞色素P450A1酶活性及其mRNA水平的影响。方法以大鼠原代肝细胞为研究对象,实验组分别加入不同浓度(15.6,31.2,62.4 mg/ml)药物处理48小时,用氨基比林N-脱甲基酶(aminopyrence N-demethylase,ADM)活性反映CYP1A1酶活性;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定药物作用前后酶基因mRNA表达的相对水平变化。结果漏芦作用后,CYP1A1酶活性及相应mRNA的表达呈浓度依赖性抑制。药物在15.6,31.2,62.4 mg/ml对CYP1A1酶活性的抑制率分别为18.1%,46.9%,55.1%;对CYP1A1mRNA表达水平的抑制率分别为14.8%,18.1%,31.0%。结论漏芦浓度依赖性抑制CYP1A1酶活性,在转录水平下调大鼠肝细胞CYP1A1的表达。