幽门螺杆菌感染及其毒力因子对胃黏膜病理学改变影响的观察

目的：检测幽门螺杆菌(HP)感染患者血清中细胞毒相关蛋白CagA和空泡细胞毒素VacA抗体，观察不同菌株对胃黏膜组织学改变的影响。方法：利用免疫印迹法检测139例HP感染的胃十二指肠疾病患者血清中CagA和VacA抗体．这些患者胃黏膜病理变化均经胃镜证实。观察不同毒力的HP菌株对胃黏膜病理学改变的影响。结果：十二指肠球部溃疡及慢性萎缩性胃炎患者血清中CagA及VacA抗体的检出率明显高于慢性浅表性胃炎的患者，且CagA抗体阳性组患者胃黏膜炎症活动及萎缩的程度较CagA抗体阴性组差异有显著性，而在肠上皮化生方面差异则无显著性。结论：具有CagA及VacA基因的幽门螺杆菌可能在诱导胃黏膜炎症及萎缩方面起了较为重要的作用。     

Lack of correlation of vacA genotype, cagA gene of Helicobacter pylori and their expression products with various gastroduodenal diseases

目的　研究幽门螺杆菌vacA基因型、cagA基因 ,空泡形成细胞毒素和血清CagA抗体与胃十二指肠疾病的关系。　方法　应用多聚酶链反应方法对 6 2例慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者分离获得幽门螺杆菌菌株的vacA基因型和cagA基因进行测定 ;应用Hela细胞方法测定体外空泡形成细胞毒素活性 ;应用酶免疫测定方法检测同一患者的血清CagA抗体。结果　 6 2株幽门螺杆菌菌株均具有vacA基因 ,所有菌株的vacA基因型均为sla/m2型。cagA基因的总阳性率为5 6 4 5 % ;慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者分离获得幽门螺杆菌的cagA基因阳性率分别为 5 5 5 6 %、5 4 17%和6 3 6 4 % (P >0 0 5 )。空泡形成细胞毒素的阳性率为 37 10 % ,慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者分离获得幽门螺杆菌菌株表达空泡形成细胞毒素的阳性率分别为 33 33%、2 9 17%和 6 3 6 4 % (P >0 0 5 )。慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者血清CagA抗体分别为 70 37%、79 17%和 4 0 0 0 % (P >0 0 5 ) ,血清CagA抗体的总阳性率为 6 8 85 %。结论　幽门螺杆菌vacA基因型、cagA基因、空泡形成细胞毒素和血清CagA抗体不能预示H pylori感染个体将更可能发生何种类型胃十二指肠疾病。     

幽门螺杆菌CagA及其致病作用的研究进展

CagA是幽门螺杆菌最重要的毒力因子之一，CagA阳性的Hp菌株同胃炎、萎缩性胃炎、十二指肠疾病和胃癌等消化道疾病相关。本文综述了Hp的毒力因子CagA的基因组、CagA定植于胃上皮细胞、CagA酪氨酸磷酸化位点、CagA入胞的靶向以及CagA多态性、毒性与胃癌的关系的近年研究状况。     

胃十二指肠疾病患者感染幽门螺杆菌的cagA基因和血清CagA抗体状况

目的 :探讨幽门螺杆菌cagA基因和血清CagA抗体与胃十二指肠疾病的关系。方法 :用聚合酶链反应方法测定 62株由慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者感染HpcagA基因 ;用酶免疫方法测定同一患者血清CagA抗体。结果 :HpcagA基因阳性率为 5 6.45 %。慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者感染HpcagA基因阳性率分别为 5 5 .5 6%、5 4.17%和 63 .64 % ,三种疾病患者之间感染Hp的cagA基因阳性率无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者血清CagA抗体阳性率分别为 70 .3 7%、79.17%和 40 .0 0 % ,血清CagA抗体总阳性率为 68.85 %。慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者之间血清CagA抗体阳性率无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 :HpcagA基因和血清CagA抗体与Hp感染个体发生的不同类型胃十二指肠疾病之间无关联     

细胞毒素相关蛋白与儿童幽门螺杆菌相关性胃十二指肠疾病的关系

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)细胞毒素相关蛋白(CagA)与儿童胃十二指肠疾病的种类以及胃粘膜炎症程度之间的关系.方法采用免疫印迹法测定88例Hp相关性慢性胃炎、46例Hp相关性消化性溃疡患儿血清CagA抗体.结果 CagA抗体总检出率为85.1%,在慢性胃炎与消化性溃疡患儿中的检出率分别为84.1%与87.0%,两者差别无显著性意义(X2=0.20,P＞0.05);胃粘膜中重度炎症患儿血清CagA抗体阳性率为90.9%,轻度炎症患儿血清CagA抗体阳性率为58.3%,两者差别有非常显著性意义(X2=14.00,P＜0.01).结论 CagA与慢性胃炎、消化性溃疡的发病均有关,但不能作为区分Hp感染致不同胃十二指肠疾病的特异性标志物.CagA阳性Hp菌株感染能引起胃粘膜较重的炎症.     

CagA^ 幽门螺杆菌与上消化道疾病的关系

目的：探讨细胞毒素相关蛋白（Cytotoxin Associated Protein,CagA)阳性株幽门螺杆菌感染在胃、十二指肠疾病的发生中的意义。方法：分别观察34例慢性胃炎患、28例消化性溃疡患幽门螺杆菌的感染情况及CagA基因的阳性率，并与30例政党人群做了对比研究。结果：28例消化性溃疡患Hp感染率为92．9％，CagA基因的阳性率为96．2％；34例慢性胃炎患Hp感染率为91．2％，CagA基因的阳性率为51．6％；30例正常人群Hp感染率为53．3％，CagA基因的阳性率为6．25％；3组数据比较有明显差异（P＜0．05）。结论：CagA幽门螺杆菌在胃、十二指肠炎症及溃疡发病中起重要作用，应采用必要的治疗措施。     

幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A、空泡毒素基因A抗体与胃十二指肠疾病的关系

目的 研究不同幽门螺杆菌(Hp)菌株感染与胃十二指肠疾病发生的关系.方法 采用蛋白芯片技术测定血清中Hp细胞毒素相关基因A(CagA)、空泡毒素基因A(VacA)抗体.结果 消化性溃疡组和胃癌组CagA和VacA抗体阳性者显著高于慢性胃炎组(P＜0.01),而CagA和VacA抗体阴性在慢性胃炎组显著高于溃疡组和胃癌组(P＜0.01),溃疡组和胃癌组之间CagA和VacA抗体阳性和阴性率比较,差异无显著性(P＞0.05).结论 含CagA基因和VacA基因的Ⅰ型Hp可能是致病力强的高毒力株.     

山西省地区儿童幽门螺杆菌相关毒素的检测及临床意义

目的 探讨不同H．pylori菌株类型与小儿胃十二指肠粘膜疾病的关系，了解本地区儿童感染的H．pylori菌株类型。方法 胃镜下活检及快速尿素酶试验诊断H．pylori感染及观察胃十二指肠粘膜病理变化，用免疫印迹法测定153例H．pylori阳性患儿血清多种H．pylori毒素抗体。结果胃炎患儿Ⅰ型H．pylori菌株为14例（27％），十二指肠球部溃疡患儿Ⅰ型H．pylori菌株为43例（74％），两组检出率比较差异有显著性。CagA抗体阳性者粘膜中重度炎症58例（92％），CagA抗体阳性者粘膜轻度炎症21例（35％），两组检出率比较差异有显著性。结论本地区儿童感染的H．pylori为Ⅰ型和Ⅱ型毒力菌株，CagA抗体阳性能引起胃十二指肠粘膜较重的炎症。     

消化性溃疡、慢性胃炎幽门螺杆菌产毒株抗体的检测分析

目的研究消化性溃疡、慢性胃炎与幽门螺杆菌(Hp)产毒株之间的关系。方法用定性酶联免疫检测法测定患者血清幽门螺杆菌总抗体和产毒株抗体,并做统计学分析。结果胃溃疡(DU)、十二指肠溃疡(GU)、胃炎组检测Hp-Ab阳性结果存在显著性差异(P<005),DU感染Hp率较高;已被Hp感染的DU、GU、胃炎组细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体阳性结果无显著性差异(P>005)。结论幽门螺杆菌与消化性溃疡、慢性胃炎等疾病的发生密切相关。CagA阳性Hp菌株感染是引起上述疾病的一个非常重要的因素。测定产毒株Hp抗体,在Hp感染相关特定性疾病发展中起着重要的作用。     

幽门螺杆菌及其vacA基因亚型和cagA基因与胃上皮HLA—DR抗原表达的关系

[目的]探讨幽门螺杆菌及其空泡毒素基因（vacA)亚型，细胞毒素相关基因（cagA)与胃上皮HLA-DR抗原表达间的关系。[方法]（1）自39例幽门螺杆菌阳性患中分离培养出39株幽门螺杆菌菌株，采用PCR方法鉴定39株菌株的ca-gA及vacA亚型；（2）采用HLA-DR小鼠抗人单克隆抗体，对上述已行cagA及vacA亚型鉴定的幽门螺杆菌阳性患及22例阴性患的胃窦活检标本行免疫组化染色。[结果]（1）幽门螺杆菌阳性患胃上皮HLA-DR表达较阴性患更显；（2）幽门螺杆菌定植密度与胃上皮HLA-DR抗原表达程度间存在正相关；（3）感染cagA^ 菌株患较感染cagA^-株胃上皮HLA-DR抗原表达更明显；（4）本研究中vacAsla/m2亚型占90%，故未对不同vacA亚型与胃上皮HLA-DR表达间的关系进行统计分析。[结论]（1）幽门螺杆菌感染可诱导胃上皮HLA-DR抗原异常表达；（2）cagA^ 菌株可能通过胃上皮HLA-Ⅱ类分子介导而与宿主发生更为密切的相互作用，从而较cagA^-菌株引起更为显的胃上皮损伤。     

不同类型幽门螺杆菌与胃十二指肠疾病关系的研究

目的探讨不同类型幽门螺杆菌(Hp)与胃十二指肠疾病的关系。方法采用免疫印迹法检测116例已明确诊断的Hp感染患者血清中CagA、VacA和尿素酶抗体,并将Hp分为二个类型。结果Ⅰ型Hp在慢性胃炎(CG)、消化性溃疡(PU)和胃癌(GC)中阳性率分别为58.69%、95.45%和96.15%,显示CG组与PU、GC组均有显著性差异(P<0.01),PU和GC组无明显差异(P>0.05)。结论Ⅰ型Hp是胃十二指肠疾病的主要因素,而且更易致消化性溃疡和胃癌等严重的消化道疾病。     

幽门螺杆菌感染情况及其抗体与胃癌前疾病、胃癌的相关性研究

目的研究宁夏惠农区回、汉族人群幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的情况及其与胃癌前病变、胃癌的相关性。方法选择宁夏惠农区回、汉族383例,其中正常对照组99例(回族45例,汉族54例)、慢性萎缩性胃炎组97例(回族45例,汉族52例)、胃溃疡组75例(回族35例,汉族40例)和非贲门胃癌组112例(回族50例,汉族62例)。采用免疫印迹法检测血清Hp抗体、细胞毒素相关基因蛋白(CagA)、空泡毒素(VacA)、尿素酶B(UreB)、尿素酶A(UreA)。结果①回、汉族正常对照组Hp阳性率分别为68.9%和70.3%,差异无统计学意义(P>0.05);回、汉族Hp阳性率在胃溃疡和非贲门胃癌组中高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);②回、汉族CagA抗体阳性的Hp在慢性萎缩性胃炎、胃溃疡和非贲门胃癌组中高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。CagA+VacA、VacA、UreA和UreB抗体阳性率在对照组、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡和胃癌中差异均无统计学意义(P>0.05)。结论①宁夏惠农区回、汉族正常人群Hp感染率高,回、汉族之间Hp感染差异无统计学意义。②宁夏惠农区回、汉族人群胃癌前疾病及胃癌高发与CagA抗体阳性Hp感染率高密切相关,表明Hp致病因子中毒素CagA发挥着主要作用。     

幽门螺杆菌培养上清液对大鼠胃黏膜上皮细胞增殖的影响

目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)的代谢产物在胃黏膜上皮细胞增殖中的作用.方法:用液体培养的方法培养产毒Hp菌株NCTC11637,然后提取上清液,用浓缩上清液(concentrated broth culture supernatant,CCS)灌鼠胃.采用放射免疫方法测定血请胃泌素,用免疫组织化学SP(streptavidin/perosidase)法检测胃黏膜增殖细胞核抗原 (proliferation cell nuclear antigen,PCNA)和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达.结果:灌服CCS组与对照组比较,胃黏膜PCNA标记指数阳性率升高、差异具有显著性,胃黏膜细胞表皮生长因子受体在灌服CCS组有4/8阳性,对照组无1例阳性;血清胃泌素升高,但统计学上差异无显著性.结论:产毒Hp培养上清液可以促进胃黏膜上皮细胞的增殖,可能促进胃癌的发生.     

cagE在胃肠疾病患者中的分布及其临床意义

目的：研究cagE在幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）感染的不同胃肠疾病患者听 分布及其与Hp感染相关疾病的关系。方法：合成cagEU1-cagEU2和cagE3-cagE4两组引物，应用聚合酶链反应（PCR）法扩增145株临床分离培养的Hp菌株cagE片段，结果：Hp临床菌株的cagEU1-cagEU2 PCR产物总检出率为75.9%（110／145），慢性胃炎、十二指肠溃疡、胃溃疡、复合溃疡中检出率分别为69.4%、85.4%、76.5%、75.0%，溃疡组略高于胃炎组，但差异无显著性（P＞0.05）。cagE3-cagE4总检出率为42.1%（61／145），慢性胃炎、十二指肠溃疡、胃溃疡、复合溃疡中检出率分别为38.9%，47.9%，35.3%，50％，差异无显著性（P＞0.05）；cagE总检出率为79.3%（115／145）。结论：cagE在不同的消化道疾病患者感染的Hp中均有较高的检出率，在不同疾病中的分布无特异性，cagE尚不能单独作为与某种疾病相关的致病相关基因。     

幽门螺杆菌CagA蛋白肽段的基因克隆、表达及抗原性检测

目的 克隆幽门螺杆菌CagA蛋白肽段的基因，确定CagA蛋白与相应抗体亲和力最强的肽段。方法 根据幽门螺杆菌cagA全基因序列以DNAMAN软件设计5对引物，采用PCR方法扩增出5条门螺杆菌cagA基因片段。将PCR扩增产物插入原核表达载体pGEX－3X并转化至大脉杆菌Top10中，形成5种重组质粒。经PCR、双酶切和测序鉴定后，以异丙硫半乳糖苷（IPTG）诱导其表达CagA蛋白肽段。包涵体经8mol/L尿素初步纯化后，运用ELISA方法检测其抗原性并确定相应抗体亲和力量强的CagA蛋白肽段。结果 5条cagA基因片段在大肠杆菌中都得到了表达，表达的蛋白均具有强弱不等的抗原性，其中66kD的蛋白肽段与抗CagA抗体亲和力最强。结论 66kD的蛋白肽段与抗CagA抗体亲和力最强。     

中国幽门螺杆菌感染者血清抗Hp IgG亚型的变化及其临床意义

目的:探讨中国幽门螺杆菌(Hp)感染者血清抗Hp IgG亚型的变化及其与Hp相关疾病的关系.方法:采用ELISA法检测中国广西和上海地区证实为Hp感染者血清抗Hp IgG亚型的水平.其中上海患者55例,广西患者74例.结果:129例感染Hp的患者血清中IgG亚型以IgG1和IgG2为主,其水平分别为(10.5±4.0)和(9.0±3.4),IgG3和IgG4的水平非常低,但IgG各亚型之间无显著差异.在上海地区十二指肠溃疡患者血清中IgG2水平显著高于非溃疡性消化不良患者(P＜0.05),IgG1、IgG3和IgG4水平在消化性溃疡患者和非溃疡性消化不良患者之间无显著差异;广西地区也如此.结论:抗HpIgG2水平可能是Hp感染致十二指肠溃疡的预测因子.     

健脾解毒方通过抑制环氧化酶2下调幽门螺杆菌诱导的人胃癌细胞血管内皮生长因子表达

目的：探讨健脾解毒方对幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）感染胃癌细胞诱导的血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的调控作用及可能的机制。方法：采用Hp标准株NCTC11637与人胃癌MKN45细胞共培养的方法感染MKN45细胞,实验中共分7组：对照组、Hp感染组、NS398抑制组、空白血清组和5%、10%、20%健脾解毒方药物血清组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测Hp感染对人胃癌MKN45细胞VEGF和环氧化酶2（cyclooxygenase-2,COX-2）mRNA表达的影响及健脾解毒方血清对Hp感染诱导的人胃癌MKN45细胞VEGF和COX-2mRNA表达的影响;采用COX-2特异性抑制剂NS398（50μmol/L）抑制COX-2的表达后,检测Hp感染后人胃癌MKN45细胞VEGF mRNA表达的变化。结果：与对照组比较,Hp感染MKN45细胞6h后,Hp感染组COX-2mRNA的表达明显上调（P〈0.01）;感染12h后,VEGF mRNA表达亦明显上调（P〈0.01）;而采用COX-2特异性抑制剂NS398抑制COX-2表达后,Hp感染组VEGF mRNA的表达相比抑制前明显下调（P〈0.01）。与Hp感染组比较,5%、10%和20%健脾解毒方药物血清均可下调Hp诱导的人胃癌MKN45细胞VEGF和COX-2mRNA的表达,并呈一定的剂量依赖效应。结论：Hp感染可诱导人胃癌细胞VEGF和COX-2表达,健脾解毒方通过下调COX-2表达进而下调VEGF的表达,这可能是其防治胃癌的重要作用机制之一。