RhD阴性血型抗原分析在临床输血安全中的应用研究

目的 从临床输血安全的研究角度,实施有效的管理和应用,指导对RhD阴性血型稀有血液资源的保存与实用性稀有血型库的建立.方法 采用瓷板法对RhD抗原进行初筛,RhD初筛阴性的血液标本,用间接抗人球蛋白法(IAT)进行确认试验;RhD确认阴性的试验标本再进行吸收和放散试验;再用盐水试管法对RhC、Rhc、RhE和Rhe抗原...     

云浮地区无偿献血者RhD阴性血型库的建立与临床应用

目的了解云浮地区无偿献血者Rh血型分布规律,建立无偿献血者RhD阴性血型库,以满足临床需求,保障输血安全。方法采用RhD初筛试验及确证试验对2005年1月至2009年12月共87 000例无偿献血者血标本进行RhD血型鉴定,经初筛和确证试验为RhD阴性的血标本用抗-C、抗-c,抗-E、抗-e进行Rh血型抗原分型;并建立RhD阴性献血者资料库,采用计算机管理系统对资料库定期进行更新和维护;对确认为RhD阴性的血液分别制备成悬浮红细胞、新鲜冷冻血浆,普通冷冻血浆,冷沉淀,浓缩血小板等血液成分并贮存及时应用于RhD阴性受血者。结果经RhD初筛试验及确证试验鉴定为RhD阴性献血者235例(0.27%),其中O型93例(39.57%),A型65例(27.66%),B型62例(26.38%),AB型15例(6.38%);Rh抗原表型为ccdee和Ccdee者占84.26%;5年来共向临床RhD阴性受血者供应RhD阴性血液248 U,未发生溶血性输血不良反应及产生同种抗体。结论建立RhD阴性献血者资料库,提供Rh血型抗原表型相配合献血者的血液,不仅可有效预防溶血性输血反应,而且可以避免产生同种抗体,并提高血液输注的疗效;还可为云浮地区科学、合理地开发和利用血液资源,确保临床用血的需要和安全发挥更为重要的作用。     

呼和浩特地区 RhD 阴性献血者表型库的建立及应用

目的：了解该地区 RhD 阴性献血者表型分布,建立 RhD 阴性表型数据库。方法 RhD 初筛阴性的554份标本采用间接抗球蛋白试验确认。排除重复献血者后,剩余标本为366份,对其进行 Rh 血型表型分析。结果 RhD 阴性表型分布特征为ccdee（56．28％）＞ Ccdee （29．51％）＞ ccdEe （7．38％）＞ CcdEe （3．55％）＞ CCdee （3．01％）＞ ccdEE （0．27％）,未检出 CcdEE 、CCdEe 、CCdEE 型。结论建立 RhD 阴性表型数据库,有利于为 RhD 阴性及含有 Rh 同种抗体的患者提供相匹配血液,满足其急救用血,且对科学管理 RhD 阴性血源和合理运用 RhD 阴性血液有重要意义,为该地区尤其蒙古族 RhD 阴性血型积累了资料。     

湖南省RhD阴性献血人群11种红细胞血型系统基因频率及多态性研究

目的 了解湖南省RhD阴性人群红细胞血型系统抗原基因频率的分布情况,为临床用血及建立多重稀有血型库建设奠定基础.方法 抽取本中心2019年6月～2020年6月献血者中经血清学方法确认的300名RhD阴性献血者血样,采用SSP-PCR方法做RHD基因分型,对分型结果为RhD阴性RHD基因缺失型的献血者标本,采用SSP-P...     

茂名市无偿献血人群Rh阴性血型的调查与应用

目的了解茂名地区无偿献血人群Rh阴性血型抗原的分布情况,建立Rh阴性稀有血型献血者档案库和稀有血型流动血库。方法采用微板快速检测法对RhD抗原进行初筛;初筛阴性者采用间接抗球蛋白法进行确认;确认阴性者用试管法对Rh因子C、c、E、e进行筛选。结果在155 954人中筛出Rh阴性献血者245人,其中O型102人,A型58人,B型70人,AB型15人;245人的Rh表现型:ccee 113人,Ccee 86人,CCee 19人,ccEe 12人,ccEE9人,CcEE6人。结论茂名地区无偿献血人群RhD阴性分布频率为0.16%;245名RhD阴性献血者中在ABO血型分布频率:O型(41.6%)>B型(28.6%)>A型(23.7%)>AB型(6.1%);245名RhD阴性献血者的表型频率分布率:ccee(46.1%)>Ccee(35.1%)>CCee(7.8%)>ccEe(4.9%)>ccEE(3.7%)>CcEE(2.4%)。     

采供血区域无偿献血者RhD阴性血型库的建立与临床应用

目的了解奉节县和巫山县地区无偿献血者RhD血型分布规律,建立无偿献血者RhD阴性血型库,以满足临床需求,保障输血安全。方法采用RhD初筛试验及确证试验对2004年3月15日至2011年6月30日,共103例无偿献血者血标本进行RhD血型初筛和确认鉴定,并建立了RhD阴性献血者资料库,采用纸质记录,计算机管理系统记录,对资料库定期进行更新和维护;与献血者常保持联系和沟通,一旦医院需要和血站预约后,便和献血者进行联系,请他们来献血,邀请的献血者采用先近后远的原则,采集的血液经初复检合格后再发往所需的医疗机构。结果经RhD初筛试验及确证试验鉴定为RhD阴性献血者,7年间49 000人次,再次献血30%(49 000～14 700)初次献血者34 300人,共103例,占献血人次的3‰。其中O型43例(41.7%),A型28例(27.2%),B型24例(23.3%),AB型8例(7.70%);7年间向临床RhD阴性受血者供血9 400mL,未发生溶血性输血不良反应及产生同种抗体。结论建立RhD阴性献血者资料库,提供RhD血型抗原表型相配合献血者的血液,不仅可有效预防溶血性输血反应,而且可以避免产生同种抗体,并提高血液输注的疗效;还可以为采供血辖区科学、合理地开发和利用血液资源,确保临床用血的需要和安全发挥更为重要的作用。     

潍坊地区329例RhD(-)者Rh表现型、MN、P血型抗原分布

目的探讨潍坊地区RhD阴性献血者Rh表现型、MN及P血型分布特点。方法采用血清学凝集方法对329名RhD阴性献血者的Rh表现型、MN及P血型进行分型。结果Rh表现型:ccdee占58.06%,Ccdee占27.36%,ccdEe占7.6%,CcdEe占3.04%,CCdee占2.43%,ccdEE占0.91%,CCdEe占0.30%,CcdEE占0.30%;MN血:M占22.49%,N占26.45%MN占51.06%;P血型:P1占41.3%,P2占58.7%。结论摸清了潍坊地区RhD阴性献血者红细胞血型分布特点,建立了稀有血型管理档案,为Rh阴性患者储备了宝贵的血液。     

63039例无偿献血者Rh血型常规检测结果的分析

目的调查凉山彝族自治州(以下简称凉山州)无偿献血者RhD阴性献血者Rh血型抗原表型分布状况。方法对该站采集的63 039例无偿献血者血液进行RhD阴性筛查,对初筛阴性血用抗人球蛋白试剂确认并分型,然后进行统计分析。结果63 039例血液样本经全自动血型仪用盐水法初筛为阴性后,再经抗人球蛋白鉴定199例Rh阴性(0.32%),A型61例,B型44例,O型74例,AB型20例。共检出Rh血型系统6种表型,其中以dccee最常见,为43.22%,由高到低依次为dCcee、dCCee、dccEe、dCcEe、dccEE。结论通过筛查凉山州Rh血型分布,建立RhD阴性献血者档案,有利于及时招募献血者提供稀有血型血液,保障血液供应。     

北京地区稀有血型库的运行及临床应用研究

目的了解北京市RhD阴性血使用及稀有血型筛选情况,更好地完善稀有血型库,保障稀有血型患者的紧急用血问题。方法回顾性分析2009-2015年RhD阴性血使用及2014年1月-2016年7月RhD阴性确认、Duffy血型表现型、不规则抗体筛查及鉴定、Rh表现型检测情况。结果 2009-2015年共向临床医院供应RhD阴性全血4U,洗涤红细胞11 U,悬浮红细胞3 098 U,冰冻解冻去甘油红细胞1 584 U,单采血小板223 U,新鲜冰冻血浆7 210 U;不同年份悬浮红细胞与冰冻解冻去甘油红细胞使用量差异有统计学意义(χ2=177.805,P0.05)。2014年1月-2016年7月检验科使用IgM抗-D试剂检测RhD阴性的无偿献血者标本1 075份,RhD阴性确认试验检出Rh弱D型65例(6.05%),其中ccEe 31例(47.69%),CCee 13例(20.00%),Ccee 11例(19.62%)、Cc Ee 10例(15.38%);1 010例RhD阴性标本表型频率以ccee 629例(62.28%)、Ccee 267例(26.44%)2种表型为主;617例RhD阴性标本Duffy血型表现型检测Fy(a+b-)499例(80.88%),Fy(a+b+)99例(16.05%),Fy(a-b+)19例(3.08%)。结论采供血机构应制定RhD阴性悬浮红细胞基础库存量,联合冰冻解冻去甘油红细胞为应急保障的稀有血型供应模式,并不断增加稀有血型的筛选,完善稀有血型库,以满足稀有血型血液临床需求。     

扬州市RhD阴性无偿献血者抗原分布及不规则抗体调查

目的了解扬州市RhD阴性无偿献血者抗原及不规则抗体分布情况。方法通过对扬州市92 655名无偿献血者初筛后,经确认为RhD阴性者。结果扬州地区无偿献血者92 655份标本中,检测出RhD抗原阴性396份,阴性频率为0.40%,其血浆中筛查出不规则抗体阳性4份(1.11%)。结论对无偿献血者RhD阴性血型的分布进行调查分析,有利于献血者的科学管理,减少血液浪费。     

新生儿脐血RhD阴性稀有血型资料库的建立研究

目的 建立新生儿脐血RhD阴性稀有血型资料库,了解天津脐血库存储人群Rh血型分布情况.方法 收集2001年10月至2011年8月天津脐血库存储的154 882例健康新生儿脐血样本作为研究对象,使用试管法检测样本ABO抗原和RhD抗原,RhD阴性确认采用间接抗人球蛋白试验.结果 154882例脐血样本中检出RhD阴性58...     

陕西地区RhD 阴性儿童患者Rh 表型分布特征研究

目的　了解陕西地区RhD 阴性儿童血型表型的多态性，为儿童输血提供科学安全的参考依据。方法　随机选 取2018 年9 月~2019 年4 月于西安交通大学附属儿童医院就诊的59 582 例儿童血细胞检测标本，采用试管法检测RhD 抗原。筛选的RhD 阴性标本用间接抗人球蛋白法进行确认，并调查其C，c，E，e 抗原表现型频率。结果　检出RhD 阴性儿童269 例，Du 2 例，陕西地区儿童患者RhD 阴性率为4.48‰，其中男性147 例，女性120 例。不同性别的RhD 阴性儿童患者的ABO 血型构成比不全相同。继续深入分析2019 年1 ~ 4 月期间就诊的儿童患者中，91 例确认的RhD 阴性标本ccee 的表型频率为46.15%（42/91），Ccee 为40.66%（37/91），ccEe 为6.59%（6/91），CCee 为4.40%（4/91）， CcEe 为1.10%（1/91）和ccEE 为1.10%（1/91）。结论　陕西地区RhD 阴性儿童患者中，B 型男性人群多于女性，A 型女性人群多于男性。Rh 表现型以ccee 和Ccee 为主，CcEe 和ccEE 表型频率最低，Rh 血型表型分布研究对促进临床 儿童输血安全具有重要意义。     

Detection of RhD(el) in RhD-negative persons in clinical laboratory

The Rhesus (Rh) blood group is the most polymorphic human blood group system, and it is clinically significant in transfusion medicine. About 15% of Caucasoid people are RhD-negative, whereas in the Asian population, the RhD-negative blood type only occurs in 0.1% to 0.5%. However, approximately 30% of apparently RhD-negative Taiwanese people actually were RhD(el). Traditionally, we verify RhD(el) by a serologically adsorption-elution procedure with polyclonal anti-D. In our recent report, RhC phenotype is highly associated with RhD(el), and RHD1227A is a useful genetic marker for RhD(el). For setting up a rapid protocol to detect RhD(el) in clinical laboratory, a total number of 395 Taiwanese serological RhD-negative blood samples, those with RhC (+) phenotypes as selected by serological tests, were further screened by adsorption/elution tests and RHD1227A allele by specific sequence primer-polymerase chain reaction (SSP-PCR) for RhD(el). Among 395 blood samples collected from RhD-negative subjects, the incidence of RhC (+) was 43% (171/395). One hundred and twenty six of the 171 RhC (+) samples were positive for both adsorption/elution for RhD detection and SSP-PCR assay for RHD1227A. The sensitivity and specificity were 96.9% and 97.5%, respectively, for RHD1227A detection as compared with the traditional adsorption/elution test. Our results also indicated that RHD1227A was highly linked to Ce haplotypes (95.2%). In conclusion, combined RhC (+) phenotyping and RHD1227A analysis can be a simple and accurate laboratory screening protocol for RhD(el) detection in RhD-negative population.     

番禺地区RHD变异体基因分型研究

目的研究分析番禺地区RHD变异体基因分型特征。方法采用微量板法对2010年11月～2011年8月到本站参加献血的26 172名次献血者进行RhD阴性筛查;采用抗球蛋白法对初筛RhD阴性的标本进行确认,采用吸收放散试验对经抗球蛋白法确认为RhD阴性的标本进行Del表型筛选;采用RH基因变异体基因分型检测试剂盒(PCR-SSP法)对献血者模板DNA进行扩增,对扩增产物进行电泳分析,根据电泳图谱判断RHD基因分型。对血清学与基因分型结果不符的标本进行测序分析。结果初筛检出60名RhD阴性,经抗球蛋白法确认59例为RhD阴性,阴性频率为0.23%;吸收放散试验检出10例Del表型。60例初筛阴性的基因分型检测发现40例RHDEXON1～10全缺失基因型,发生频率约为67.8%;10例RHD 1227A DEL基因型,发生频率约为16.9%;7例部分D,发生频率约为11.9%;1例RHD弱D15基因型,发生频率约为1.2%;2例RHD基因分型阳性需作进一步碱基测序分析。结论本地区血清学RhD阴性献血者中,存在RHD 1227A DEL、RHD-CE(2-9)-D,RHD-CE(5)-D、RHD-CE(6-9)-D和RHD弱D15等基因型,血清学结合基因分型能更准确鉴定RhD血型。     

检出免疫性抗体的RhD阴性献血者基因型分析

本研究分析检出免疫性抗体的RhD阴性献血者的RhD基因型。对自2008年4月1日至2011年9月30日哈尔滨市自愿无偿献血者血清学检测确证为RhD阴性的献血者进行免疫性抗体筛查,对检出免疫性抗体的样本采用PCR-SSP及DNA序列分析进行RhD的基因型检测。结果表明,1265例RhD阴性献血者检出免疫性抗体12例(占0.95%),其中9例为抗-D抗体,3例为抗-(D+C)抗体;基因型检测结果 10例为RhD阴性、2例为RHD 711DelC。结论:RhD阴性和RHD 711 DelC献血者易被免疫产生抗体;RhD阴性人群尤其是女性应提高意识,避免误输RhD阳性血液,避免多次妊娠导致新生儿溶血病。     

中国新疆维吾尔族Rh血型系统RHCE基因分型的研究

本研究目的旨在探讨新疆维吾尔族RHCE基因分型特点。根据文献设计RHCE基因检测的引物,采用序列特异性引物-聚合酶链反应(SSP-PCR)检测非血缘关系RhD阴性样本维吾尔族89例、汉族233例及RhD阳性样本汉族109例。结果表明,维吾尔族及汉族无论RhD阴性或RhD阳性全部样本中RHE/e基因分型结果与血清学检测结果一致;89例维吾尔族RhD阴性样本RHC/c等位基因分型结果与其血清学检测结果一致,而233例汉族RhD阴性及109例汉族RhD阳性样本中RHC/c基因错误定型率为5.05%。结论:本研究方法适合用于维吾尔族RHE/e基因分型,在本研究中用于维吾尔族RHC/c基因分型中未发现有错误,但今后仍需进一步验证。     

山东汉族RhD阴性个体基因多态性研究

目的研究山东汉族人群RhD阴性个体RhD基因多态性。方法采用标准血清学方法和抗球蛋白实验筛选Rh阴性个体;对Rh阴性个体再用吸收放散实验确定DEL型。运用多重聚合酶链反应（PCR）方法分析RhD阴性个体基因存在情况。结果67例Rh阴性个体中DEL型16例,占Rh阴性个体的23．88％,其6个RhD基因特异性的第3、4、5、6、7、9外显子全部存在;剩下51例Rh阴性个体中1例缺失第5外显子,其余50例6个外显子全部缺失。结论山东汉族人群RhD阴性个体中存在一定比例的DEL型,且所有DEL样本均具有完整的RhD基因,在排除DEL型后的RhD阴性个体可能携带RhD基因,但其比例较低。     

番禺地区RhD阴性献血者部分D频率调查发简

目的 分析番禺地区RhD阴性献血者部分D（partial D）基因分型特征.方法 采用微量板法对献血者进行RhD阴性筛查;采用抗人球蛋白法对初筛RhD阴性的样本进行确认;采用PCR-SSP法（RH基因变异体分型检测试剂盒）对献血者基因组DNA进行扩增,对扩增产物进行电泳分析,根据电泳图谱判断部分D基因分型.结果 初筛检出60例RhD阴性,经抗人球蛋白法确认59例为RhD阴性,阴性频率约为0.23％.59例RhD血清学筛选阴性的基因分型检测发现2例部分D,血清学筛选RhD阴性中出现部分D的频率约为3.4％.结论 本地区血清学RhD阴性献血者中,存在RHD-CE （5）-D、RHD-CE（6-9）-D等位基因型,采用PCR-SSP法对RhD阴性表型献血者进行基因分型,可以准确鉴定RHD基因型.     

Non-invasive foetal RHD genotyping via real-time PCR of foetal DNA from Chinese RhD-negative maternal plasma

Background  A majority of studies predicting the foetal RhD blood group in free foetal DNA from RhD-negative maternal plasma have been conducted in Caucasian populations, whereas limited data have been accumulated for Asian populations. In this study, we assessed the feasibility of prenatal genotyping of RHD in RhD-negative Chinese pregnant women.
Materials and methods  Cell-free plasma DNA was extracted from 78 RhD-negative Chinese women carrying a singleton foetus (gestation between 14 and 40 weeks). Foetal DNA was confirmed by testing SRY or nine different polymorphic STR loci in the maternal plasma and buffy coat. Foetal RHD exons 5, 7 and 10 and intron 4 were successfully amplified with RQ-PCR. The RHD 1227A allele was examined in all RhD-positive individuals. The foetal RHD genotyping results were compared with the infant cord blood serological analysis.
Results  Among the 78 specimens, RHD genotyping results of 70 cases were in complete concordance with serological results from foetal umbilical cord blood. Sixty of these cases were identified as RhD-positive, and 10 cases were typed as RhD-negative. In addition, five cases were 'false-positives', while three cases were considered inconclusive. The detection rate was 89·7% (70/78). In four of the five 'false-positive' cases, the RhDel phenotype was assessed by detecting the RHD 1227A allele. Thus, this method yielded a 94·9% (74/78) accuracy rate.
Conclusions  The correct foetal RhD phenotype may be accurately predicted from RhD-negative maternal plasma in Chinese subjects. The RHD 1227A allele proved to be an important genetic marker in the RhDel Chinese population.