HPLC指纹图谱技术结合PLS-DA在养阴清肺颗粒质量控制中的应用

摘要：目的:建立养阴清肺颗粒的HPLC指纹图谱,结合偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）,为其质量控制提供参考。方法:采用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相乙腈（A）-0.12%磷酸水溶液（B）梯度洗脱;体积流量:0.9 ml·min-1;分段检测波长为230 nm（检测芍药苷、甘草苷）、280 nm（检测麦冬甲基黄烷酮A）、254 nm（检测丹皮酚）、210 nm（检测梓醇、哈巴苷及哈巴俄苷）、330 nm（检测毛蕊花糖苷）;柱温:30℃;进样量:10μl。用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）建立指纹图谱共有模式和相似度计算,用SIMCA14.1软件建立PLS-DA模型做统计分析。结果:建立12批养阴清肺颗粒的指纹图谱,共确定20个共有指纹峰,通过与对照品指认了8个成分; 12批样品指纹图谱相似度为0.959～0.982,通过聚类分析（CA）可将12批样品聚成3类,结合主成分分析（PCA）、偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）发现8个成分是造成不同批次样品差异性的主要标记物。结论:该研究建立指纹图谱方法有助于养阴清肺颗粒整体质量控制,同时为其质量评价提供一种有效手段。     

基于UPLC指纹图谱结合化学计量学的肝爽颗粒质量评价研究

摘要：目的:建立肝爽颗粒的UPLC指纹图谱,并结合化学计量学等方法寻找表征不同批次肝爽颗粒质量差异性标志物,为科学全面地评价肝爽颗粒的质量提供参考。方法:采用UPLC法对18批肝爽颗粒进行分析,建立肝爽颗粒指纹图谱,使用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价,利用对照品对共有峰进行指认,并结合化学计量学方法对不同批次肝爽颗粒质量及控制方法进行分析和评价。结果:建立的指纹图谱确定23个共有峰,指认出10个成分,分别为阿魏酸（5号峰）、虎杖苷（6号峰）、菊苣酸（7号峰）、柚皮苷（11号峰）、橙皮苷（12号峰）、迷迭香酸（13号峰）、新橙皮苷（14号峰）、丹酚酸B（16号峰）、大黄素（21号峰）、大黄素甲醚（23号峰）;18批肝爽颗粒指纹图谱的相似度均在0.990以上;聚类分析和主成分分析（PCA）将18批肝爽颗粒基本分为3类;正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）筛选得到12个变量重要性投影（VIP）＞1的共有峰（峰7、2、19、22、3、20、14、5、1、11、13、4）,经对照品指认了其中5个差异性标志物（菊苣酸、新橙皮苷、阿魏酸、柚皮苷、迷迭香酸）。结论:该研究建立的UPLC指纹图谱方法合理、有效、准确、简便,结合化学计量学分析方法可用于评价肝爽颗粒的质量,为肝爽颗粒的质量控制提供科学依据。     

平消片HPLC指纹图谱研究及化学模式识别分析

摘要：目的:建立平消片的HPLC指纹图谱,为评价其质量提供依据。方法:采用Agilent SB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相乙腈（A）-0.05%磷酸水溶液（B）梯度洗脱;体积流量:1.0 ml·min-1;分段变波长测定214,278 nm;柱温:40℃;进样量:10μl。根据相似度评价,结合化学计量学方法对平消片进行质量评价。结果:建立12批平消片的HPLC指纹图谱,共确定20个共有指纹峰,通过与对照品指认了9个成分; 12批样品指纹图谱相似度均大于0.9,通过聚类分析（CA）可将12批样品聚成3类,结合主成分分析（PCA）、偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）发现8个成分是造成不同批次样品差异性的主要标记物。结论:所建立的HPLC指纹图谱方法稳定可行,可为平消片的质量控制提供参考。     

基于UPLC色谱指纹图谱及化学模式识别的新保肾片质量控制研究

摘要：目的:建立新保肾片UPLC指纹图谱,结合聚类分析、主成分分析和偏最小二乘法-判别分析,为新保肾片的质量控制提供一种新方法。方法:采用Agilent Poroshell 120 EC-C18（4.6 mm×50 mm,2.7μm）型色谱柱,以甲醇-0.2%冰醋酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速:0.8 ml·min-1,柱温:30℃,检测波长:260 nm,建立新保肾片的指纹图谱,采用"中药指纹图谱相似度评价系统"（2012A版）建立指纹图谱共有模式和相似度计算。结合SPSS和SIMCA软件进行聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）和偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）,对新保肾片进行整体质量评价。结果:建立了新保肾片的UPLC指纹图谱,确定了16个共有峰,通过对照品比对指认出没食子酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚5个成分。13批新保肾片相似度均大于0.987,表明药物总体质量较稳定。通过CA、PCA发现样品聚成2类,不同时间生产的药物仍存在差异,通过PLS-DA筛选出批次间的差异性成分主要为5号峰、10号峰和11号峰。结论:本研究所建立的指纹图谱和化学模式识别方法科学可靠、简便易行、高效快速,可更加全面系统地提供新保肾片化学成分信息,为综合评价制剂质量的稳定性和均一性提供了科学依据。     

基于指纹图谱及多元统计分析法评价杞菊地黄丸的质量

摘要：目的:建立杞菊地黄丸的HPLC指纹图谱,为评价其质量提供依据。方法:色谱柱:Inertsil ODS-3（4.6 mm×250 mm, 5μm）;流动相:乙腈-0.3%磷酸溶液,梯度洗脱;体积流量:0.6 ml·min-1;检测波长:254 nm;柱温:40℃;进样量:10μl。建立杞菊地黄丸的指纹图谱,根据相似度评价,结合化学计量学方法对杞菊地黄丸进行质量评价。结果:建立25批杞菊地黄丸的HPLC指纹图谱,共确定26个共有指纹峰,通过与对照品比对指认了8个成分;25批样品指纹图谱相似度为0.731～0.981,通过聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）、偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）,25批样品分成4类,分类结果与厂家呈相关性,并发现16个差异性标记物。结论:所建立的HPLC指纹图谱方法重复性好、专属性强,可为杞菊地黄丸的质量控制提供依据和参考。     

地瓜藤的UPLC指纹图谱建立及聚类分析、主成分分析

目的:建立地瓜藤的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱。方法:采用UPLC法。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEF C18,流动相为0.2%乙酸水溶液-乙腈(梯度洗脱),检测波长为254 nm,流速为0.1 mL/min,柱温为25℃,进样量为2μL。以14号峰为参照,绘制10批地瓜藤药材样品及2批混淆品的UPLC指纹图谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)进行相似度评价,确定共有峰;采用SPSS 20.0软件进行聚类分析,运用SIMCA 13.1软件进行主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析。结果:10批地瓜藤药材样品共有28个共有峰,相似度在0.839～0.935之间,2批混淆品的相似度分别为0.503、0.173,表明本方法可区别地瓜藤与混淆品。聚类分析和主成分分析结果均显示,10批地瓜藤药材样品可聚为2类,S3～S5、S9、S10聚为一类,其余聚为一类。正交偏最小二乘法判别分析结果显示,共筛选出变量投影值>1的7个成分,这7个成分可能是引起10批地瓜藤药材样品质量差异的主要成分。结论:所建指纹图谱及聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析可用于地瓜藤药材的鉴别和质量控制。     

藤络宁胶囊指纹图谱的建立及化学模式识别研究

摘要：目的:建立藤络宁胶囊HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别方法评价藤络宁胶囊的质量。方法:采用Agilent 5 TC-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5μm）进行色谱分离,流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,流速为1.0 ml·min-1,柱温30℃,检测波长345 nm,进样量为10μl。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）》对指纹图谱进行相似度评价,确定共有峰,结合聚类热图分析、主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析等模式识别方法,对不同批次藤络宁胶囊进行质量评价。结果:10批藤络宁胶囊HPLC指纹图谱有18个共有峰,相似度均在0.950以上;通过聚类分析将样品按不同批次分为2大类;主成分分析与聚类分析结果一致;最后采用正交偏最小二乘-判别分析筛选出了不同批次藤络宁胶囊的5个差异标志物。通过与对照品图谱比对,确定了3号峰为绿原酸、7号峰为东莨菪内酯、13号峰为丹酚酸B。结论:建立的指纹图谱方法稳定、可靠、重复性好,可用于藤络宁胶囊的质量控制。     

人参饮片、水煎液、配方颗粒的HPLC指纹图谱相关性研究

摘要：目的:建立人参饮片、水煎液及配方颗粒的HPLC指纹图谱,对其相关性进行评价。方法:采用HPLC法,色谱柱为XBridge BEH C18柱（150 mm×3.0 mm, 2.5μm）,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速为0.45 ml·min-1,柱温为32℃,气体流速为3.0 L·min-1,漂移管温度为100℃。测定15批人参饮片、水煎液、配方颗粒的HPLC指纹图谱,利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012年版）进行相似度分析,并采用SPSS 20.0软件、SIMCA 14.1软件对指纹图谱信息进行皮尔逊相关性分析、聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）。结果:15批人参饮片、水煎液及配方颗粒HPLC指纹图谱均确定了9个共有峰,并指认1、2、3、4、8号峰分别为人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd。15批人参饮片、水煎液、配方颗粒的指纹图谱与相应对照指纹图谱的相似度均在0.95以上,三者对照指纹图谱的相似度均在0.98以上。CA和PCA结果表明人参水煎液和颗粒结果较接近。OPLS-DA发现4种成分是造成不同批次样品差异性的主要标志性成分。结论:建立的HPLC指纹图谱反映了人参饮片、水煎液及配方颗粒多成分的整体面貌,三者间的化学成分基本一致,可为人参配方颗粒质量控制提供借鉴。     

不同产区掌叶大黄酒蒸前后指纹图谱的建立及3种差异性成分的含量测定

目的 建立掌叶大黄酒蒸前后高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并测定其中3种差异性成分的含量.方法 采用HPLC法建立掌叶大黄(酒蒸前)、熟大黄(酒蒸后)各15批样品的指纹图谱并进行相似度评价,通过主成分分析、聚类分析、偏最小二乘法-判别分析、正交偏最小二乘法-判别分析对指纹图谱进行化学模式识别分析.对30批样品中的3种...     

GC-MS指纹图谱结合化学计量学方法分析艾草精油质量

目的建立GC-MS指纹图谱方法结合化学计量学用于市售艾草精油产品的质量分析。方法采用GC-MS方法对6个厂家共16批次艾草精油样品进行测定,鉴定其中主要挥发油成分,并经指纹图谱相似度比较、主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)比较样品质量。结果共鉴定出50种化合物,除艾草中已知的萜类、烯类、醇类、酮类等化学成分外,检出邻苯二甲酸酯类化合物,各样品中共有成分鉴定出14种;指纹图谱相似度与PCA结果显示不同厂家间样品差异性较大; PLS-DA结果可选择出14种对其造成差异性贡献较大的主要成分。结论建立的方法可用于艾草精油产品的鉴别与质量控制。     

基于HPLC指纹图谱结合多种化学模式识别评价生脉饮(党参方)质量

目的：建立多批次生脉饮（党参方） HPLC指纹图谱并采用多种化学计量学分析评价多厂家多批次生脉饮（党参方）的整体质量。方法：采用Ultimate XB-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.15%甲酸水溶液,检测波长为260 nm,流速0.8 mL·min^-1,柱温20℃,对多批不同厂家和来源的生脉饮（党参方）制剂进行分析,建立中药色谱指纹图谱,并结合聚类分析、主成分分析与偏最小二乘法判别分析对生脉饮（党参方）质量进行评价。结果：建立了生脉饮（党参方） HPLC指纹图谱,确定了23个共有峰,并指认了其中7个色谱峰;多批次生脉饮（党参方） HPLC指纹图谱的相似度为0.061~0.798;聚类分析与主成分分析结果一致,结合正交偏最小二乘法判别分析发现3类主成分中包含的7个成分峰是造成不同批次生脉饮（党参方）质量差异的主要标志物。在多指标成分定量分析方法学考察结果中,7种指标性成分的加样回收率在97.32%~101.26%,RSD为1.89%~3.56%。结论：不同批次的生脉饮（党参方）之间虽有一定的相关性,但存在质量差异。生脉饮（党参方）检测方法的建立可以为其质量控制及评价提供参考依据,且具有一定的药用开发价值,为其进一步药效及制剂研究奠定基础。     

野生与栽培秦艽药材HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

摘要：目的:建立野生和栽培秦艽药材的HPLC指纹图谱,结合化学模式识别方法对两者进行判别,为不同来源秦艽药材鉴别和质量评价提供依据。方法:利用HPLC法,测定18批不同产地野生与栽培秦艽药材的HPLC指纹图谱,建立指纹图谱共有模式,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）计算相似度,运用聚类分析（HCA）和最小偏二乘法-判别分析（PLS-DA）对其进行模式识别研究。结果:建立了野生与栽培秦艽药材HPLC指纹图谱共有模式,标定了19个共有峰,18批不同产地野生与栽培秦艽药材指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均>0.93。HCA、PLS-DA能将野生与栽培秦艽药材明确区分,马钱苷酸、獐牙菜苷、6’-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷、獐牙菜苦苷等7个成分是导致二者差异的主要标记物。结论:建立的秦艽药材指纹图谱特征性强,结合化学模式识别方法可有效评价秦艽药材质量以及区分其野生与栽培品,为秦艽药材的质量控制和化学计量分类提供参考依据。     

酒大黄(唐古特大黄)配方颗粒超高效液相色谱指纹图谱及化学模式识别研究

目的 为酒大黄（唐古特大黄）配方颗粒的质量评价提供参考。方法 采用超高效液相色谱（UPLC）法,色谱柱为CORTECS UPLC T3柱（100 mm×2.1 mm,1.6μm）,流动相为甲醇-0.05%磷酸水溶液（梯度洗脱）,流速为0.25 mL/min,检测波长为265 nm,柱温为35℃,进样量为1μL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）建立21批样品的UPLC指纹图谱,并进行相似度评价。采用聚类分析（CA）法、主成分分析（PCA）法、正交偏最小二乘-判别分析（OPLS-DA）法评价样品质量,并筛查标志性成分。结果 共标定并指认出18个共有峰。21批样品的指纹图谱相似度均大于0.950,3种分析方法均将样品分为3类,OPLS-DA法分析显示,异莲花掌苷、白藜芦醇-4′-O-β-D-(6′′-O-没食子酰）葡萄糖苷、儿茶素、大黄酚、没食子酸、番泻苷A、莲花掌苷和大黄酚-1-O-β-D-葡萄糖苷为制剂的标志性成分。结论 该方法简单可行,可为酒大黄（唐古特大黄）配方颗粒的质量评价提供参考。     

基于指纹图谱、化学模式识别及多成分定量评价十一方药酒质量

目的:基于HPLC指纹图谱、化学模式识别及多指标同时定量的方法研究不同批次十一方药酒,为该制剂的质量评价提供参考。方法:建立11批十一方药酒样品的HPLC指纹图谱,并对其进行相似度评价、主成分分析(principal component analysis,PCA),采用偏最小二乘-判别分析(partial least square-discriminate analysis,PLS-DA)考察不同批次十一方药酒的差异性成分。采用HPLC多波长法对6种化学成分进行含量测定。结果:建立的指纹图谱标定33个共有色谱峰,相似度0.977~0.997,共指认12个色谱峰。PCA将样品分成2类,通过PLS-DA,表明差异性成分共16个,包含定量分析的6个成分。含量测定中各色谱峰分离度较好,线性关系良好(r≥0.999 4),平均加样回收率95.34%~102.41%,RSD≤2.90%。结论:该研究建立的HPLC指纹图谱及含量测定方法准确、简单,可为十一方药酒提供质量评价。     

基于指纹图谱及多元统计分析评价藿香清胃片质量

摘要：目的:建立藿香清胃片的HPLC指纹图谱,为评价其质量提供依据。方法:采用CAPCELL PAK C18?MGⅡ色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5μm）,流动相为乙腈（A）-0.15%磷酸溶液（B）,梯度洗脱,流速：0.95 ml·min-1,切换检测波长：210 nm（检测熊果酸）、240 nm（检测栀子苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷及甘草苷）、258 nm（检测栀槲皮素及香草酸）、309 nm（检测广藿香酮、藿香黄酮醇及毛蕊花糖苷）,柱温：30℃,进样量：10μl。建立藿香清胃片的指纹图谱,根据相似度评价,结合化学计量学方法对藿香清胃片进行质量评价。结果:建立15批藿香清胃片的HPLC指纹图谱,共确定24个共有指纹峰,通过与对照品比对指认了10个成分;15批藿香清胃片的指纹图谱相似度为0.972～0.998,通过聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）、偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）,15批样品分成3类,分类结果与厂家呈相关性,并发现5个差异性标志物。结论:所建立的HPLC指纹图谱方法重复性好、专属性强,可为藿香清胃片的质量控制提供依据和参考。     

护肝宁制剂HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

摘要：目的:采用HPLC法建立护肝宁的指纹图谱,并结合化学模式识别对其质量进行分析评价。方法:采用CAPCELL PAK C18MGⅡ（200 mm×4. 6 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0. 1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1. 0 ml·min-1,检测波长为280nm,柱温为30℃,建立11批护肝宁制剂的指纹图谱,通过相似度分析并结合聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）等模式识别技术对护肝宁制剂的质量进行分析评价。结果:建立的指纹图谱共标定27个共有峰,通过对照品保留时间和紫外吸收光谱确定5个共有峰,11批护肝宁样品指纹图谱的相似度均大于0. 86,表明该药物总体质量较为稳定,但通过CA及PCA均发现不同厂家不同批次药物之间仍存在差异,通过OPLS-DA筛选出对药物质量差异影响最大的4个共有峰。结论:建立的分析方法简便、准确、可靠,指纹图谱结合化学模式识别分析可更好地评价护肝宁制剂的质量,为该制剂的质量控制提供科学依据。     

基于多元化学模式识别分析的生姜UPLC指纹图谱研究

摘要：目的:建立生姜UPLC指纹图谱研究方法,通过多元化学模式识别分析,为生姜药材的质量控制提供参考。方法:采用Acclaim C18（2.1 mm×100 mm, 2.2μm）色谱柱,流动相为甲醇-乙腈-水,梯度洗脱,检测波长为280 nm,流速为0.4 ml·min-1,柱温为30℃,建立不同产地的生姜指纹图谱,利用总量统计矩分析、相似度评价、聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析等多元化学计量方法对生姜进行质量评价。结果:建立了18批生姜样品指纹图谱,确定了13个共有峰,18批样品相似度均大于0.9。经过聚类分析,18批生姜样品可聚为两类,采用主成分分析确定3个主成分为影响药材样品质量评价的主要因子;13个共有峰中对样品组分起关键作用的成分为峰3（6-姜辣素）、峰7、峰9、峰10、峰11、峰12。结论:利用UPLC法建立的生姜药材指纹图谱准确,可有效评价生姜药材的质量。     

小儿柴桂退热颗粒的UPLC指纹图谱及聚类、主成分分析

目的:建立小儿柴桂退热颗粒的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,并进行聚类分析与主成分分析。方法:采用UPLC法,色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18,流动相为甲醇-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为0.5 m L/min,检测波长为260 nm,柱温为40℃,进样量为0.5μL。以葛根素为参照,测定14批小儿柴桂退热颗粒样品的UPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)对14批样品进行相似度评价,确定共有峰。采用SPSS 19.0软件进行聚类分析与主成分分析。结果:14批样品的UPLC图谱有15个共有峰,相似度均>0.90;经验证,14批样品UPLC图谱与对照指纹图谱具有较好的一致性。14批样品可聚为两大类。结论:所建指纹图谱可为小儿柴桂退热颗粒的质量评价提供参考。     

小承气汤饮片（水煎液、颗粒）的UPLC指纹图谱相关性研究

目的 研究小承气汤饮片（水煎液、颗粒）的超高效液相色谱（UPLC指纹图谱相关性。方法 采用UPLC法建立15批小承气汤饮片（水煎液、颗粒）的指纹图谱,结合相似度评价、皮尔逊相关性分析、聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）对三者UPLC指纹图谱的相关性进行评价。结果 15批小承气汤饮片（水煎液、颗粒）UPLC指纹图谱均确定了16个共有峰,并指认了14个峰;15批小承气汤饮片（水煎液、颗粒）的指纹图谱与相应对照指纹图谱的相似度均大于0.90,三者对照指纹图谱的相似度均大于0.88。皮尔逊相关性分析结果显示,有8个共有峰在小承气汤饮片（水煎液、颗粒）之间具有极显著正相关关系。CA表明小承气汤水煎液和颗粒性质更接近,PCA发现4个特征值均大于1的主成分,包含了原始数据88%的信息,OPLS-DA筛选出7个变量投影重要性值大于1的差异性标志物。结论 小承气汤饮片（水煎液、颗粒）的主要化学成分组成具有一致性,可为小承气汤复方制剂的质量控制和临床使用提供数据支持。     

蒙药三子散HPLC指纹图谱结合化学模式识别研究

目的 建立蒙药三子散高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,通过化学模式识别方法综合评价其内在质量.方法 采用HPLC法,以京尼平苷色谱峰为参照峰,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》绘制15批三子散的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,标定并指认共有峰.结合聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析对1...