壳聚糖纳米粒制备的研究进展

载药纳米粒作为药物、基因传递和控释的载体,是近年来出现的药物控释和缓释的新剂型。壳聚糖具有较好的生物黏附性、促吸收效应和酶抑制载体作用等特性。壳聚糖纳米粒作为一种新型药物载体,已成为目前国内外研究开发的热点。本文就壳聚糖纳米粒制备的研究进展情况进行了综述。     

壳聚糖纳米粒制备技术研究进展

目的：介绍壳聚糖的应用及其作为新型药物载体材料制备纳米粒的技术研究进展，为深入研究提供参考。方法：在广泛查阅文献的基础上，通过归纳和分类完成资料整理。结果：壳聚糖研究历史悠久，用于纳米粒制备的工艺方法较多，尤其用其包载基因、多肽及某些抗肿瘤药具有独到优势。结论：壳聚糖作为可生物降解的纳米粒载体材料具有重要的科研和应用价值。     

基因壳聚糖纳米粒表面修饰和转染研究

目的：研究递送基因纳米粒表面修饰对体外基因转染的影响。方法：利用末端活化的聚乙二醇(PEG)制备PEG化基因壳聚糖纳米粒;通过两端活化的PEG将糖蛋白配基连接到纳米粒表面,完成肝靶向纳米粒的制备;用透射电镜观察表面修饰对纳米粒粒径大小、粒子形态的影响;使用蛋白质测定试剂盒测算纳米粒表面蛋白连接量;利用体外转染实验考察表面修饰对纳米粒转染活性的影响;用倒置荧光显微镜观察并用流式细胞仪测定转染结果。结果：纳米粒PEG化使转染效率大幅度升高,半乳糖基牛血清白蛋白(Galn—BSA)使体系的转染效率比PEG化纳米粒略有下降,但比不经修饰的纳米粒转染活性高。壳聚糖纳米粒的表面PEG化能提高纳米粒的体外稳定性,从而提高体外转染效率,并适合于进行冷冻干燥。结论：长循环壳聚糖基因递送纳米粒在基因治疗研究中可能会发挥重要作用。     

壳聚糖纳米粒的研究进展

壳聚糖是一类带正电的直链多糖，具有良好的生物相容性和生物可降解性，且具有多种生物活性，能有效增加药物通过眼部、鼻腔及胃肠道粘膜上皮的吸收，降低药物的吸收前代谢，提高药物的生物利用度，因此壳聚糖在缓控释给药系统中具有广阔的应用前景，但其溶解性能有待于进一步提高。本文就壳聚糖纳米粒的制备方法、作物特点及应用作一概述。     

壳聚糖-甲基丙烯酸甲酯共聚物纳米粒的制备和表征

目的制备壳聚糖-甲基丙烯酸甲酯共聚物纳米粒。方法用自由基聚合法合成壳聚糖-甲基丙烯酸甲酯共聚物,该聚合物在水中形成具有疏水核心、亲水表面的纳米粒。测定纳米粒的形态、粒径和表面电位(Zeta电位),并研究了壳聚糖含量、聚合物总浓度和引发剂浓度对纳米粒粒径的影响。以胰岛素为模型药物,研究纳米粒的包封和释药性能。结果纳米粒呈球形,粒径均匀,表面荷正电。胰岛素的包封率可达90%以上。pH 5.8的磷酸盐缓冲液中胰岛素的释放较慢,16 h释放量为66.8%。结论该纳米制剂具有较好的物理性能和体外缓释特性。     

载基因壳聚糖纳米粒的制备及其相关性质的初步研究

目的制备壳聚糖载基因纳米粒,并对其体外相关性质进行初步研究。方法采用复凝聚法制备载基因纳米粒;用纳米粒度仪测量粒度分布、多分散性和Zeta电位;用透射电镜观察粒子的形态;用荧光分光光度法和比色法测定包封率和载药量,并对主要影响因素进行考察;用凝胶阻滞分析和电性结合分析对载药方式进行初步推测。结果所制备的载基因纳米粒形态规则,大多呈球形,平均粒径约150nm,PDI＜0．2,Zeta电位约20mV;包封率大于90％,载药量约30％;凝胶阻滞和电性结合分析结果表明,pDNA与壳聚糖分子间可通过电性结合作用而完全结合。结论采用复凝聚法可制备粒度分布均匀,形态规则,具有较高包封率和载药量的载基因壳聚糖纳米粒;电性结合作用是载基因壳聚糖纳米粒载药的主要方式。     

基因壳聚糖纳米粒表面修饰和转染研究

目的:研究递送基因纳米粒表面修饰对体外基因转染的影响.方法:利用末端活化的聚乙二醇(PEG)制备PEG化基因壳聚糖纳米粒;通过两端活化的PEG将糖蛋白配基连接到纳米粒表面,完成肝靶向纳米粒的制备;用透射电镜观察表面修饰对纳米粒粒径大小、粒子形态的影响;使用蛋白质测定试剂盒测算纳米粒表面蛋白连接量;利用体外转染实验考察表面修饰对纳米粒转染活性的影响;用倒置荧光显微镜观察并用流式细胞仪测定转染结果.结果:纳米粒PEG化使转染效率大幅度升高,半乳糖基牛血清白蛋白(Galn-BSA)使体系的转染效率比PEG化纳米粒略有下降,但比不经修饰的纳米粒转染活性高.壳聚糖纳米粒的表面PEG化能提高纳米粒的体外稳定性,从而提高体外转染效率,并适合于进行冷冻干燥.结论:长循环壳聚糖基因递送纳米粒在基因治疗研究中可能会发挥重要作用.     

结核多肽壳聚糖纳米粒的制备及表征

采用离子交联法制备壳聚糖纳米粒(CS-NPs)载体,并以粒径和多分散系数(PDI)为主要评价指标优化了工艺参数。通过文献检索,筛选出结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTC)标准强菌株H37Rv的保护性抗原蛋白Rv0180c(GLDKNKFDIRVVSPDEARRLY),经异硫氰荧光素(FITC)标记后载入优化的空白CS-NPs中,获得结核多肽壳聚糖纳米粒(Pep-CS-NPs)。所得空白CS-NPs的平均粒径、PDI和ζ电位分别为(148.13±2.24)nm、0.197±0.013和(+18.00±0.89)mV;4℃放置28 d,粒径未见显著增大。Pep-CS-NPs的平均粒径、PDI和ζ电位分别为(186.93±8.80)nm、0.254±0.014和(+12.07±1.68)mV,包封率和载药量为(45.20±2.95)%和(12.92±1.12)%。体外释放结果表明,Pep-CS-NPs缓慢释放多肽,48 h累积释放率为56.6%。本试验表明,离子交联法制备载多肽CS-NPs的工艺简便稳定、条件温和,所得制品粒径大小适宜、分布均匀,且具有明显缓释作用,有望作为治疗结核病的新型疫苗。     

壳聚糖纳米粒表面游离氨基与纳米粒特性研究

为研究对三聚磷酸钠(TPP)交联的壳聚糖纳米粒的表面游离氨基与纳米粒的性质之间的关联性,采用胶体滴定法测定壳聚糖纳米粒表面氨基游离率，考察表面游离氨基的数量及离解程度对纳米粒粒径、电位、形态及对药物包封率和体外释药特性的影响，并阐述这种变化机制。结果表明，随TPP浓度增加，表面游离氨基逐步减少，在一定TPP浓度范围内，纳米粒粒径减小，表面zeta电位降低，稳定性也随之下降，粒子易聚集，释药速度和程度也随之降低，但药物包封率未受到影响；随着pH升高，表面游离氨基离解程度降低，纳米粒粒径亦随之减小，表面zeta电位降低。酸性介质提高纳米粒的释药速度和程度，在中性和碱性介质中纳米粒的释药速度和程度明显降低。交联程度和pH影响表面游离氨基的数量或离解程度，进而影响纳米粒的体积相转变(溶胀/收缩过程)等重要性质。表面游离氨基与纳米粒性质间有密切的联系。     

壳聚糖载药纳米粒研究进展

目的介绍壳聚糖载药纳米粒近年来的研究进展。方法总结壳聚糖纳米粒的制备方法、释药特性、生物摄取及其应用。结果不同的制备方法可得到不同粒径和表面特性的壳聚糖纳米粒。壳聚糖纳米粒改变了壳聚糖的摄取机制，广泛应用于药物的器官靶向、DNA转染效率提高、药物的非注射途释给药等方面。结论壳聚糖纳米粒作为一种新型的药物载体，具有重要的研究开发价值。     

胰岛素壳聚糖胶态纳米粒的制备及体外释药性能

采用离子趋向凝胶化法制备了胰岛素壳聚糖胶态微粒,并考察了外观、粒径和体外释药性能.所得产品呈球形,表面光滑圆整,平均粒径为276nm,多分散系数为0.08.体外释药呈pH依赖性,释药速度受载药量及泊洛沙姆188含量的影响.     

载基因壳聚糖纳米粒的制备及其相关性质的研究

目的：制备壳聚糖载基因纳米粒，并对其体外相关性质进行初步研究。方法：采用复凝聚法制备载基因纳米粒；用纳米粒度仪测量粒度分布，分散性和Zeta电位；用透射电镜观察粒子的形态；用紫外分光光度法和比色法测定包封率和载药量，并对主要影响因素进行考察。用凝胶阻滞分析和电性结合分析对载药方式进行初步推测。结果：所制备的载基因纳米粒形态规则，大多呈球形，纳米粒平均粒径为263．2nm，粒径分布较窄，多分散度为0．213，Zeta电位为19．8mV；包封率大于90％，载药量约30％；凝胶阻滞和电性结合分析结果表明，非甲基化胞嘧啶鸟嘌呤的寡核苷酸链（CPG-ODN）与壳聚糖分子间可通过电性结合作用而完全结合。结论：采用复凝聚法可制备粒度分布均匀，形态规则，具有较高包封率和载药量的载基因壳聚糖纳米粒；电性结合作用是载基因壳聚糖纳米粒载药的主要方式。     

乌苯美司-壳聚糖纳米粒的制备及质量评价

目的制备乌苯美司-壳聚糖纳米粒(Uben-CS-NP),并利用现代科学技术对其进行质量评价。方法采用离子交联法制备Uben-CS-NP,并研究其形态、粒径、电势、pH值、包封率、载药量及体外释药行为。结果 Uben-CS-NP的制备方法可行,其形态圆整规则,粒径为300⁶00 nm,平均粒径为442 nm,zeta电势为+37.8 mV,pH值为6.0,包封率为69.1%,载药量为31.4%;体外释药:在1 h内突释,累积释药量达28.77%,之后缓慢释放,第12、24 h时累积释药量分别为42.56%、50.93%。结论 Uben-CS-NP的质量可控,体外释药符合Higuchi方程,缓释作用明显。     

盐酸环丙沙星壳聚糖纳米粒原位凝胶的制备与评价

目的 制备盐酸环丙沙星壳聚糖纳米粒原位凝胶,并评价其抑菌及创面愈合效果。方法 采用复乳法制备盐酸环丙沙星壳聚糖纳米粒,采用2因素2水平全因子析因实验设计考察了壳聚糖相对分子质量（X₁）和壳聚糖质量浓度（X₂）对壳聚糖纳米粒的药物包封率（Y₁）、粒径分布（Y₂）、多分散系数（Y₃）和Zeta电位（Y₄）的影响;并以泊洛沙姆407作为凝胶基质制备盐酸环丙沙星壳聚糖纳米粒原位凝胶。通过抑菌圈实验比较盐酸环丙沙星乳膏和盐酸环丙沙星壳聚糖纳米粒原位凝胶对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抑菌活性;使用无菌活检穿刺针在大鼠背部造成直径为5 mm的皮肤全切除的圆形人工创面,并使用金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的培养基感染24 h,建立大鼠创面模型,将模型大鼠随机分为模型组、盐酸环丙沙星乳膏组和盐酸环丙沙星壳聚糖纳米粒原位凝胶组,模型组大鼠创面未接受任何处理,给药组大鼠每2天给药1次,每次给药量均约为1 mg,观察并记录每组大鼠创面脱痂时间和愈合时间。结果 选择低相对分子质量壳聚糖、壳聚糖质量浓度为2.0 mg·mL^-1制备盐酸环丙沙星壳聚糖纳米粒,其中盐酸环丙沙星质量浓度为50.0 mg·mL^-1,其包封率为（85.3±0.9）%,平均粒径为（354.7±15.7）nm,PDI为0.357±0.014,Zeta电位为（22.2±0.5）mV,呈球状分布;盐酸环丙沙星壳聚糖纳米粒原位凝胶和盐酸环丙沙星乳膏对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为（38.4±0.2）、（29.2±0.3）mm,对铜绿假单胞菌抗菌圈直径分别为（41.3±0.6）、（32.1±0.1）mm;大鼠创面给予盐酸环丙沙星壳聚糖纳米粒原位凝胶后,其脱痂时间和愈合时间均较模型组和盐酸环丙沙星乳膏组显著缩短（P<0.05）。结论 成功制备盐酸环丙沙星壳聚糖纳米粒原位凝胶,其可以抑制创面细菌繁殖、加速伤口愈合。     

抗HER2抗体修饰的聚乙二醇化壳聚糖载基因纳米粒的制备与表征

以甲氧基聚乙二醇(mPEG)接枝壳聚糖(CS)为载体制备载小干扰RNA (siRNA)的纳米粒,并用抗人表皮生长因子受体2抗体(anti-HER2)进行表面修饰.扫描电镜观察到所得纳米粒的形态为类球形,平均粒径为(160±2.4)nm,平均ζ电位(23.5+1.7)mV,包封率为(64.2±1.6)％.体外释放试验表明,制品在初始12 h内(突释阶段)的累积释放率为14％～18％,144 h时累积释放率约70％.体外细胞试验表明,表面经anti-HER2修饰的纳米粒对SKBR-3乳腺癌细胞无明显毒性,提示其作为基因递送载体安全性较高、毒性较低.     

壳聚糖纳米粒作为基因载体的研究:影响转染效率的因素

目的:以增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)为报告基因,探讨影响壳聚糖(CS)介导的基因转染率的因素.方法:复凝聚法制备pEGFP/CS纳米粒,选用HEK293细胞,考察CS相对分子质量、CS中的氨基与pEGFP中的磷酸基的比值(N/P比)、纳米粒粒径、介质pH值和血清对转染率的影响.结果:相对分子质量5×103的CS获得较高转染率;转染率随N/P比增加而提高;介质pH≤6.8有利于转染;在230～1 290nm范围,粒径对转染效率无影响;CS介导的转染不受血清影响.结论:CS相对分子质量、N/P比和介质pH值是影响转染率的因素,低相对分子质量水溶性CS有利于提高转染.     

阿昔洛韦/赖氨酸壳聚糖纳米粒的理化性质考察

目的：考察阿昔洛韦/赖氨酸壳聚糖纳米粒的理化性质。方法：利用激光粒度分析仪,透射电镜,扫描电镜;高效液相色谱仪等测定载药纳米粒的形态、粒径、包封率和载药量,并考察载药纳米粒的体外释放行为。结果：微球呈类圆形,具有明显的核壳;载药的粒子平均粒径大小为107.96nm;包封率为（61.24±0.68）%;载药量为（15.36±0.65）%;体外释放符合Higuchi模型。结论：阿昔洛韦/赖氨酸壳聚糖纳米粒理化性能具有良好的稳定性,符合实验设计要求。     

壳聚糖纳米粒载体的应用研究进展

目的介绍壳聚糖纳米粒载体在药物、基因递送等方面的研究应用进展,为其在新领域的应用提供依据。方法广泛查阅中外文有关文献,整理分析归纳了其中27篇文献内容。结果壳聚糖纳米粒载体在药物和基因递送方面已经有诸多研究应用。结论壳聚糖纳米粒载体是一种有前途的非病毒递送载体,其特性和应用有待进一步探索。     

负载pVAX1-wapA的壳聚糖及季铵化壳聚糖纳米粒的制备研究

目的 制备负载抗龋DNA疫苗pVAX1-wapA质粒的壳聚糖和季铵化壳聚糖纳米粒,优化其制备工艺,测定其细胞转染效率。 方法 以包封率和粒径为主要指标,单因素法考察载体浓度、pH值、N/P、TPP浓度等因素的影响,Realtime-PCR检测细胞对质粒编码蛋白的转录表达水平以评价载质粒纳米粒的促转染作用。 结果 制得的载DNA疫苗纳米粒粒径均一,形态圆整。壳聚糖(CS)纳米粒粒径为(219.2±18.2) nm,Zeta电位为(24.7±3.5) mV,包封率为91.24%。季铵化壳聚糖(CSTM)纳米粒粒径为(222.5±15.6) nm,Zeta电位为(19.6±1.2) mV,包封率为87.66%。纳米粒可以促进pVAX1-wapA进入细胞,并成功被转录。 结论 制备的包载pVAX1-wapA的季铵化壳聚糖纳米粒可用于重组基因疫苗的运送。     

乙肝疫苗壳聚糖纳米粒体外分析方法研究

壳聚糖纳米粒是一种生物相容性好、生物可降解的新型给药制剂,近年来被广泛应用于生物医药领域。壳聚糖纳米粒能延长药物在吸收部位的滞留时间,还可以瞬时打开上皮细胞间的紧密连接,促进大分子药物通过组织上皮的转运作用,改善药物特别是蛋白质、多肽类药物的口服吸收,