非小细胞肺癌患者血清死亡相关蛋白激酶基因启动子甲基化的分析

目的：分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清中死亡相关蛋白激酶（DAPK）基因启动子区域甲基化的改变状况及其临床意义。方法：运用甲基化特异性PCR技术，检测65例NSCLC组患者血清DAPK基因启动子区域甲基化的改变情况，并分析与临床病理资料的关系。结果：NSCLC组患者血清DAPK基因甲基化检出率为30．8％（20／65），而对照组未检出，DAPK基因甲基化检出率与NSCLC病理类型、分期及转移状态无明显相关性。结论：DAPK基因启动子区域异常甲基化是NSCLC早期辅助诊断的分子标记物之一。     

血浆DAPK基因启动子甲基化与非小细胞肺癌的关系

目的探讨死亡相关蛋白激酶(DAPK)启动子甲基化在非小细胞肺癌病人中的表达及其临床意义。方法采用甲基化特异性PCR的方法,对42例健康人和61例非小细胞肺癌病人外周血中DAPK基因启动子甲基化的情况进行检测。结果在42例健康人的血浆中均未检出DAPK基因的甲基化,而61例非小细胞肺癌病人中,18例检测到DAPK基因启动子甲基化(χ2=15.018,P<0.05)。DAPK基因启动子甲基化与非小细胞肺癌病人性别、肿瘤分化程度无关,但与病人淋巴结转移和临床分期有关(χ2=4.961、9.678,P<0.05)。结论 DAPK基因启动子甲基化与非小细胞肺癌的淋巴结转移和临床分期有相关性,有可能作为评估非小细胞肺癌分期的分子生物学指标。     

内蒙古地区ＲASSF 1A、P16、DAPK、ＲUNX3 基因甲基化在非小细胞肺癌中的研究

目的: 探讨内蒙古地区RASSF 1A、P16、DAPK、
RUNX 3 基因甲基化在非小细胞肺癌( nonsmall cell
lung cancer,NSCLC) 早期诊断及判断预后之间的关系。方法: 应用甲基化特异性PCR( ( methlation specific PCRMSP) 方法检测50 例NSCLC 病人和50 例健康人群外周血、30 例NSCLC 癌组织和30 例癌旁正常组织中RASSF
1A、P16、DAPK、RUNX 3 基因启动子区的甲基化率,分析NSCLC 病人与健康人群甲基化水平的差异,癌组织、癌
旁组织及外周血中各基因甲基化水平的差异,并分析年龄、性别、吸烟史、组织学类型及临床分期对基因启动子
区甲基化率的影响。结果: 肺癌组织中RASSF 1A、P16、DAPK 和RUNX 3 基因启动子区甲基化检出率分别为
66． 67%( 20 /30) 、56． 67%( 17 /30) 、63． 33%( 19 /30) 和56． 67%( 17 /30) ; 其对应的血浆标本中这4 个基因的甲基
化检出率分别为60． 00%( 30 /50) 、44． 00% ( 22 /50) 、60． 00% ( 30 /50) 和42． 00% ( 21 /50) ,两组标本甲基化检出
率存在着较好的一致性( P ＞ 0． 05) 。30 例癌旁正常组织标本和50 例健康人群血浆标本均未检测出基因甲基
化,与肺癌组比较差异有统计学意义( P ＜ 0． 05) 。RASSFIA 基因启动子区甲基化检出率与病人分化程度、淋巴
结转移有关( P ＜ 0． 05) ; P16 基因启动子区甲基化检出率与病人临床分期有关( P ＜ 0． 05) ;RUNX 3 基因启动子
甲基化与病人临床分期、分化程度、淋巴结转移有关( P ＜ 0． 05) 。结论: RASSF 1A、P16、DAPK、RUNX 3 基因启动
子区的甲基化与NSCLC 有关,检测外周血中RASSF 1A、P16、DAPK、RUNX 3 基因启动子区甲基化水平可能有助
于NSCLC 的早期预警、早期诊断与判断预后。     

非小细胞肺癌患者血浆氧化应激水平和Klotho启动子甲基化分析

目的：探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者血浆氧化应激损伤水平和Klotho蛋白启动子甲基化状态及临床意义。方法：选择66名在四川省人民医院确诊为NSCLC的患者,另选50名健康人群作为对照组,分别采集其血浆。血浆超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）和过氧化氢酶（catalase,CAT）水平采用试剂盒检测。qPCR和Western blot检测血浆Klotho的表达。Klotho表达量与氧化应激的相关性采用Pearson相关性分析。甲基化特异性PCR（MS-PCR）检测Klotho甲基化水平。CpG岛甲基化率采用焦磷酸盐测序法。结果：相对于对照组[（94.56±16.40） mU/L],观察组SOD含量[（79.86±18.24） mU/L]明显降低（t=4.487,P=0.000）,观察组MDA水平[（2.87±2.26） pg/mL]与对照组[（2.52±1.06） pg/mL]无统计学差异（t=1.675,P=0.097）,观察组CAT水平[（18.50±4.62） U/mg]与对照组[（25.26±3.54） U/mg]相比明显降低（t=8.605,P=0.000）。观察组（0.66±0.16）比对照组（1.04±0.10）血浆Klotho基因（t=14.93,P=0.000）降低;观察组（0.70±0.20）比对照组（1.04±0.10）血浆Klotho蛋白表达（t=10.92,P=0.000）降低,且Klotho蛋白表达量与SOD水平（r=0.768,P=0.000）和CAT水平（r=0.708,P=0.000）呈正相关。观察组Klotho启动子CpG岛甲基化水平升高。结论：Klotho甲基化可能是NSCLC患者血浆氧化应激状态的一个临床标志物。     

p16基因甲基化在非小细胞肺癌的表达研究

目的：探讨p16基因甲基化在人非小细胞肺癌组织中的表达情况。方法：应用甲基化特异性PCR法（MS-PCR）检测45例非小细胞肺癌组织,21例肺良性疾病组织中p16基因甲基化的表达情况。结果：肺良性疾病中p16基因甲基化阳性率为14．3％,低于癌组织中的57．8％,差异有统计学意义（P=0．001）;p16基因甲基化与非小细胞肺癌细胞分化程度及淋巴结转移情况有明显的相关性（P〈0．05）。结论：p16基因甲基化的表达情况与非小细胞肺癌的发生、发展有关。     

HCC患者GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化状态研究

目的 检测人原发性肝癌（HCC）中抑癌基因GSTP1的启动子区CpG岛甲基化的状况，并探讨其在肝癌发生中的作用。方法 以已知的GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化阳性的乳腺癌细胞株MCF-7为阳性对照，以11例正常人外周血单核细胞（PBMC）DNA为阴性对照，用甲基化特异性PCR（MSP）的方法对26例肝细胞癌患者的癌、远癌组织中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化的状态进行检测。结果 在26例原发性肝癌中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化在癌组织为88％（23／26），在远癌组织中为69％（18／26）；而在11例正常人外周血单核细胞均为甲基化阴性。结论 抑癌基因GSTP1基因启动子区CpG岛高甲基化可能是肝癌发生早期的分子事件，在人原发性肝癌的发生发展中具有重要的作用。     

钙粘素和增殖相关抗原在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 探讨上皮钙粘素(E-cd)和增殖相关抗原(Ki67)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及癌细胞发生侵袭、转移过程中的意义。方法 收集62例NSCSLC患者标本，采用免疫组化S-P法检测E-cd和Ki67抗原的表达水平。结果 E-cd在Ⅲ～Ⅳ期和Ⅰ～Ⅱ期的阳性表达率分别为33．3％和65．7％，Ki67在Ⅲ～Ⅳ期和Ⅰ～Ⅱ期的阳性表达率分别为(96．3％)和(68．6％)，伴有或不伴有癌旁转移的NSCLC病例间其E-cd和Ki67阳性表达水平差异均有显著性意义。结论 E-cd和Ki67的表达水平与NSCLC侵袭、转移密切相关，且二者在NSCLM中的表达呈显著负相关。     

甲基化CpG岛扩增联合代表性差异分析方法在筛查人非小细胞肺癌组织中高甲基化修饰序列的应用

目的探讨甲基化CpG岛扩增联合代表性差异分析(MCA/RDA)方法在筛查人非小细胞肺癌(NSCLC)组织中高甲基化修饰序列的应用。方法以92对NSCLC和癌旁对照组织DNA为研究对象,应用MCA/RDA方法筛查肺癌组织DNA中高甲基化修饰的CpG岛序列。应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和甲基化特异性PCR(methylation-sensitive PCR,MSP)技术,分析胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP-4)基因启动子区CpG岛的甲基化修饰与基因表达的相关性。结果获得5个经Slot Blot验证在肺癌组织中高甲基化修饰的CpG岛序列(IGFBP-4、KLK10、ADAM23、GADD45G和DUOX1)。甲基化抑制剂5-aza-2’-deoxycytidine处理NSCLC细胞可明显上调IGFBP-4基因的表达。在41例(44.6%)癌组织中检测到IGFBP-4表达水平显著低于癌旁对照组织。47例(51.1%)癌组织检测到IGFBP-4高甲基化显著高于癌旁组织的检出率(16.3%,15/92;P<0.001)。IGFBP-4高甲基化与基因表达呈负相关(r=-0.396,P<0.001)。IGFBP-4高甲基化与TNM分期(P=0.013)和淋巴结转移(P=0.022)相关。结论应用MCA/RDA方法筛查到5个在NSCLC组织中高甲基化修饰的CpG岛序列,并证实IGFBP-4启动子区CpG岛的高甲基化可能通过抑制基因的表达参与了NSCLC的发生。     

非小细胞肺癌患者血清p16基因启动子甲基化分析

目的：分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中p16基因启动子区域甲基化状况及其临床意义。方法：运用甲基化特异性PCR技术，检测65例NSCLC患者血清p16基因启动子区域甲基化情况，并分析与临床病理资料的关系。结果：NSCLC患者血清p16基因甲基化检出率为43．1％(28／65)，而正常对照组和良性肺部疾病组未检出；p16基因甲基化检出率与NSCLC病理类型、分期及转移状态无明显关系。结论：p16基因启动子区域甲基化是NSCLC早期辅助诊断的分子标记物之一。     

非小细胞肺癌中TMS1基因甲基化检测

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)中TMS1(taget of methylation-induced silencing)基因启动子区域的甲基化及TMS1蛋白表达状况,并研究其临床意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应和免疫组化的方法检测50例肺癌组织和50例对应癌旁组织中TMS1基因启动子区域甲基化的发生率及TMS1蛋白的表达情况。结果50例NSCLC肿瘤组织中有20例检测到了TMS1基因启动子的甲基化,检出率为40%,相应的癌旁正常组织没有检测到其甲基化(P<0.05)。TMS1蛋白在72%(36/50)的肺癌组织中表达下降,相应的癌旁正常组织均完全表达,没有1例表达下降(P<0.05)。TMS1基因甲基化与TMS1蛋白表达之间有着密切的关系(P<0.05)。结论TMS1基因启动子区域的甲基化是NSCLC的一个常见事件,并且与TMS1蛋白表达下降相关,在NSCLC的发生过程中起着重要的作用。     

非小细胞肺癌中p73的表达及意义

目的 探讨p73蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法 NSCLC 40例,用免疫组化二步法检测组织标本中p73蛋白的表达,按组织学分类后进行统计学处理。结果 p73蛋白在肺癌组织中的表达和肺癌淋巴结转移癌组织中的表达均明显上调,分别与肺支气管粘膜上皮不典型增生的表达比较,差异均有极显著意义(P<0.01);p73蛋白的阳性表达在肺癌的不同病理类型及分化程度中比较,差异均无显著意义(P>0.05);p73蛋白阳性表达在伴有淋巴结转移的肺癌组织中与无淋巴结转移的肺癌组织中比较,差异有显著意义(P<0.05)。结论 p73蛋白表达上调可能是NSCLC发生的重要因素;p73蛋白在伴有淋巴结转移的肺癌组织和肺癌淋巴结转移癌组织中表达均上调,推测p73上调可能促进肺癌的浸润与转移,这一基因变化可作为肺癌恶化、预后不良的动态监控标志物。     

同步放化疗对局部晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的 比较放射治疗联合紫杉醇加顺铂同步或序贯化疗治疗局部晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的疗效及不良反应.方法 将67例Ⅲ期NSCLC患者随机分成两组,同步放化疗组于放疗第1天即同时开始化疗,序贯放化疗组于入组后先给予化疗4个周期,再单独给予放疗.结果 近期有效率同步放化疗组为80.6%, 序贯放化疗组为55.6%(χ2 =5.74, P =0.02).同步放化疗组血液学毒性与放射性食管炎较序贯放化疗组严重,但经治疗后患者大多能耐受.结论 放射治疗联合紫杉醇加顺铂化疗同步治疗局部晚期非小细胞肺癌的疗效优于序贯应用,虽然不良反应增加但可耐受. Abstract： Objective To compare the efficacy and toxicities of concurrent chemoradiation(radiotherapy combined with PTX and DDP) with sequence chemoradiation(chemotherapy followed by radiotherapy) in locally advanced non-small cell lung cancer(NSCLC). Methods Sixty-seven patients with stage Ⅲ NSCLC were randomly divided into two groups. Concurrent chemoradiation group, chemotherapy started at the first day of radiotherapy, sequence group, four cycles chemotherapy followed by radiotherapy alone. Results Short time response rate(CR+PR) in concurrent group was 80.6%, 55.6% in sequence group(χ2=5.74,P=0.02). Hematology toxicities and radioactive esophagitis were much more severe than those in sequence group, however, most patients could tolerate after treatment.Conclusions Although more tolerated toxicities, concurrent chemoradiation(radiotherapy combined with PTX and DDP) is better than sequence chemoradiation(chemotherapy followed by radiotherapy) in locally advanced non-small cell lung carcinoma.     

CXCR4和MMP-13在非小细胞肺癌中的表达

目的 检测趋化生长因子受体4（CXCR4）和基质金属蛋白酶-13（MMP-13）在非小细胞肺癌中的表达,探讨二者与非小细胞肺癌临床病理特征的关系,以期为临床工作提供理论支持。方法 应用免疫组织化学技术检测75例非小细胞肺癌及50例正常肺组织中CXCR4和MMP-13的表达,探讨二者与肿瘤分化程度及淋巴结转移的关系。结果 非小细胞肺癌中CXCR4和MMP-13表达的阳性率明显高于正常肺组织。CXCR4和MMP-13的表达与非小细胞肺癌的胸膜侵犯、分化程度及有无淋巴结转移密切相关,非小细胞肺癌中CXCR4和MMP-13的表达呈正相关。生存分析显示,CXCR4和MMP一13高表达患者的预后差。结论 非小细胞肺癌中CXCR4和MMP-13高表达,二者共同促进肿瘤的发生发展,联合检测CXCR4和MMP-13可能与患者的预后有关。     

非小细胞肺癌泛素和上皮型钙黏附素的表达及其相关性分析

目的　探讨在非小细胞肺癌中泛素与上皮型钙黏附素表达及相关性。方法　选择 70例非小细胞肺癌为研究对象 (试验组 ) ,根据其转移、分化程度和组织类型再分组 ;30例肺部良性病变作为对照组。用免疫组化SABC法检测泛素、上皮型钙黏附素的表达。结果　试验组较对照组泛素阳性细胞数增高 ,上皮型钙黏附素明显降低 (P <0 0 1) ;转移、低分化者分别较无转移者和中高分化者泛素表达高、上皮型钙黏附素表达低 (P <0 0 1) ;鳞癌、腺癌组织泛素和上皮型钙黏附素表达无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;泛素与上皮型钙黏附素表达间不呈线性相关关系 (r =- 0 2 17,P >0 0 5 )。结论　泛素、上皮型钙黏附素在非小细胞肺癌发生、转移、分化中起重要作用 ,可能各自通过不同途径参与其发生、转移和分化的生物学行为。     

非小细胞肺癌EGFR基因突变与E-cadherin、Vimentin表达的相关性

目的：探究非小细胞肺癌患者肺组织中E-cadherin、Vimentin表达与EGFR突变的关系。方法：收集在本院进行治疗的非小细胞肺癌患者104例作为研究对象,采用PCR检测患者肿瘤组织中EGFR基因突变情况,采用免疫组化法检测肺组织中E-cadherin、?Vimentin表达情况,分析EGFR基因突变、E-cadherin、?Vimentin与患者临床参数的关系;Pearson相关系分析E-cadherin、?Vimentin相关性;Logistic回归分析影响非小细胞肺癌患者EGFR突变的危险因素。结果：非小细胞肺癌患者EGFR突变61例。非小细胞肺癌患者EGFR基因突变与患者性别、肿瘤组织类型、患者吸烟有关（P＜0.05）。与EGFR基因野生型患者相比,EGFR基因突变者肺组织中E-cadherin表达显著升高,Vimentin表达显著降低（P＜0.05）。E-cadherin、?Vimentin与非小细胞肺癌患者肿瘤分期相关（P＜0.05）。Pearson相关性分析显示,非小细胞肺癌患者E-cadherin与Vimentin呈显著负相关（r=-0.483,P＜0.05）。结论：非小细胞肺癌患者E-cadherin高表达,Vimentin低表达与EGFR突变患者耐药有关。     

三维适形放射治疗非小细胞肺癌45例

目的探讨3DCRT对高龄NSCLC患者的临床疗效。方法45例非小细胞肺癌患者,采用三维适形放疗,剂量DT总量64-70Gy,放疗后2个月～3个月行胸部CT检查评估疗效。结果45例患者中,CR15例,PR25例,SD3例,PD2例,总有效率89．0％;不良反应主要是放射性肺炎、放射性食管炎,白细胞减少,多属Ⅰ～Ⅱ级,经对症治疗后恢复。结论三维适形放射治疗对高龄非小细胞肺癌患者疗效较好,且不良反应较轻,可以耐受。     

微小核糖核酸21在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨微小核糖核酸21（miR-21）在非小细胞肺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用qRT-PCR方法检测120例非小细胞肺癌标本和120例癌旁肺组织标本中miR-21的表达水平。结果 miR-21在非小细胞肺癌组织中的表达水平明显高于其在癌旁肺组织中的表达水平（P=0.0060）。miR-21的表达情况与非小细胞肺癌患者TNM分期（P=0.0063）、癌细胞分化（P=0.0410）及淋巴结转移（P=0.0197）相关,与性别、病理类型和肿瘤直径无关（均P〉0.05）。结论非小细胞肺癌组织中miR-21表达异常提示其可能参与了非小细胞肺癌的发生、发展过程,是一个潜在的非小细胞肺癌分子标志物。     

GRP78核酸疫苗在非小细胞肺癌模型中的抗肿瘤作用研究

目的:研究GRP78核酸疫苗对非小细胞肺癌的预防作用及生存期影响。方法:将携带GRP78基因的真核表达载体肌肉内注射免疫C57BL/6小鼠,完成3次免疫后,接种小鼠非小细胞肺癌细胞(Tc-1),以此来观察该疫苗对非小细胞肺癌的预防作用及生存期影响。结果:免疫后的治疗组肿瘤生长体积小于对照组,平均生存期比对照组延长了25天,免疫细胞分泌细胞因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的水平和对靶细胞的杀伤率明显高于对照组。结论:GRP78核酸疫苗能够提高机体免疫细胞对非小细胞肺癌的杀伤能力,延缓肿瘤生长,延长生存期。     

吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察

目的:评价采用吉非替尼治疗化疗失败的局部晚期或转移性非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及不良反应。方法:42例化疗失败的局部晚期或转移性NSCLC患者予吉非替尼250mg每日1次口服直至病情进展或出现不可耐受的不良反应,评价近期疗效、生存期、生活质量及毒副反应。结果:CR1例、PR11例、SD18例、PD12例,有效率为28.57、临床受益率为71.43、中位无疾病进展时间为4个月、中位生存期为10个月、1年生存率为45.23;生活质量明显改善者占61.90;药物不良反应多为Ⅰ～Ⅱ度皮疹及腹泻。结论:吉非替尼应用于化疗失败的局部晚期或转移性NSCLC的二线或三线治疗疗效确切,不良反应轻微,而且可以明显改善患者的生活质量。