血清可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体检测的临床意义

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factorrelated apoptosis-inducing ligand,TRAIL)是TNF超家族成员之一,其最早由Wiley等[1]于1995年从人心肌c DNA文库中克隆并命名。TRAIL具有膜结合型和可溶型(s TRAIL)2种形式,在金属蛋白酶作用下,可被水解形成s TRAIL,s TRAIL保留了死亡受体结合域及功能域,与膜型TRAIL具有相同的生物学活性。目前大量研究表明,在自身免疫性疾病、肝病、     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对类风湿关节炎滑膜细胞的影响

目的探讨重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(hTRAIL)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)的作用。方法原代培养RASF,不同浓度hTRAIL(0、100、200、400、800、1000 ng/ml)干预4 h,检测hTRAIL对RASF的增殖和凋亡及其相应受体DR5 mRNA和蛋白表达的影响。结果 100、200、400、800、1000 ng/ml hTRAIL干预可抑制RASF增殖;可上调DR5 mRNA(0.801±0.036、0.947±0.032、0.969±0.048、1.052±0.031、0.992±0.072)和蛋白(0.650±0.118、0.803±0.142、0.968±0.130、0.945±0.136、0.864±0.160)表达(F=78.478,F=18.627,均P<0.01);高浓度hTRAIL(400、800、1000 ng/ml)可诱导RASF发生凋亡[(5.82±0.43)%、(7.32±0.49)%、(8.78±0.81)%](F=304.573,P<0.01)。结论 hTRAIL可诱导类风湿关节炎滑膜成纤维细胞凋亡。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在大肠癌中的表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)在大肠癌组织中的表达情况及其与临床病理的关系。方法采用免疫组化SP法和流式细胞分析方法对41例大肠癌组织和9例癌旁正常组织TRAIL的表达情况进行检测并比较。结果TRAIL蛋白免疫组化染色定位于细胞膜和细胞浆,癌组织中阳性表达率为24.4%,明显低于正常组织的66.7%(P<0.05);流式细胞分析该蛋白表达量,癌组织平均荧光指数为0.92±0.09,亦明显低于正常组织的1.05±0.12(P<0.05)。癌组织中,TRAIL蛋白表达随着分化程度的降低呈逐步下降趋势(P<0.05);淋巴结转移与否的表达无统计学差异。结论大肠癌组织中TRAIL表达下降,并与组织分化程度有关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对乙型肝炎病毒启动子的调控作用

目的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）能够诱导乙型肝炎病毒（HBV）感染细胞发生凋亡,但抑制病毒复制的具体机制不清楚,研究通过非凋亡浓度TRAIL对4种HBV启动子调控作用的研究,探讨HBV复制的可能调控机制。方法采用噻唑蓝法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记荧光法,检测不同浓度TRAIL作用后人肝癌细胞株HepG2的存活率。使用HBV的4种启动子重组质粒,4种启动子分别控制乙肝表面抗原、X抗原、核心抗原、PS1抗原基因的转录与表达。将受HBV上述4种启动子调控的荧光素酶报道基因表达质粒（SpLUC、XpLUC、CpLUC、PS1pLUC）转染HepG2细胞,6 h后按300、30、3 ng/mL浓度梯度加入可溶性TRAIL,采用双荧光报道基因分析系统检测细胞化学发光值,计算相对荧光素酶活性。结果 300 ng/mL是可溶性TRAIL诱导HepG2细胞凋亡的浓度阈值。采用远低于凋亡阈值浓度（30 ng/mL）的TRAIL可明显上调对HBV的Sp启动子活性（P〈0.001）,另3种质粒的相对荧光素酶活性在加入TRAIL后改变不大。结论 TRAIL仅对HBV的Sp启动子活性具有上调作用,其生物学意义值得进一步研究。     

重组pichia pastoris高密度发酵表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的研究

目的优化rhsTRAIL(重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)毕氏酵母工程菌在5升Braun发酵罐中的发酵表达工艺参数。方法研究培养基种类、种细胞密度、甘油含量、pH值、甲醇浓度、甲醇流加速率及诱导时间等参数对酵母菌生长与目的蛋白表达的影响。结果在无机盐培养基中，按10％接种OD600=8-12的种菌后，24h酵母菌增殖至OD600=76；甘油含量为1％时，菌体生长速度快(OD600=160)；培养基pH值=5．0，甲醇终浓度为1％时，诱导96h表达量最高达到120mg／L。结论rhsTRAIL在毕氏酵母中发酵工艺参数为：无机盐培养基，pH值：5．0，接种10％ OD600=8-12的种菌，甘油含量1％，甲醇终浓度1％，诱导96h。     

肝细胞癌患者肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的基因多态性与血清水平的临床意义

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因多态性及血清可溶性TRAIL(sTRAIL)水平及临床意义。方法收集HCC患者173例和健康人对照170例,提取全血基因组DNA,用测序法和PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法分析TRAIL基因第5外显子3'端非编码区(UTR)1289C/T、1525G/A、1588G/A、1595C/T基因多态性;用ELISA法检测血清sTRAIL浓度;用电化学发光法和生化定量分析法分别检测血清甲胎蛋白(AFP)和α-L岩藻糖苷酶(AFU)浓度。结果 HCC组与对照组比较,1289C/T、1588G/A、1595C/T基因型分布差异均有统计学意义(P0.05);HCC组1289C、1525G、1588G、1595C等位基因频率明显高于对照组(P0.05)。HCC组血清sTRAIL水平(78.8±49.2)pg/mL明显低于对照组(106.2±64.4)pg/mL(P0.05);根据TNM分期,Ⅰ、Ⅱ期HCC患者sTRAIL浓度明显高于Ⅲ、Ⅳ期(P均0.05)。HCC组根据TNM分期和肿瘤大小分组,TRAIL基因1289C/T、1525G/A、1588G/A、1595C/T位点基因型分布差异无统计学意义(P均0.05);根据TRAIL基因各位点基因型分组,组间血清sTRAIL水平差异均无统计学意义(P均0.05);HCC患者sTRAIL浓度与血清AFP、AFU浓度无相关性(P0.05)。结论 TRAIL基因(1289C/T、1525G/A、1588G/A、1595C/T)多态性及血清sTRAIL水平与HCC发生、发展可能相关,此结论还需继续研究。     

肝细胞生长因子在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体作用下对原代肝星状细胞增殖及凋亡的影响

背景:活化的肝星状细胞是肝纤维化的关键因素,研究表明肝细胞生长因子能促进星状细胞凋亡,其具体机制可能与增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导星状细胞凋亡有关。目的:观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体作用下,肝细胞生长因子对原代肝星状细胞增殖、凋亡的影响并初步探讨其可能机制。方法:将SD大鼠原代肝星状细胞复苏、传代,细胞增殖明显时用于实验。实验分为4组:空白对照组为单纯肝星状细胞培养;肝细胞生长因子组:将100μg/L肝细胞生长因子作用于肝星状细胞;TRAIL组:将2mg/L的TRAIL作用于肝星状细胞;肝细胞生长因子+TRAIL组:将肝细胞生长因子预先刺激肝星状细胞24h,再加入2mg/LTRAIL。结果与结论:MTT检测显示肝细胞生长因子及TRAIL分别在50～200μg/L、0.5～1.5mg/L各浓度下对肝星状细胞增殖抑制率无影响,TRAIL在2mg/L作用下对肝星状细胞有抑制作用。流式细胞仪检测肝细胞生长因子+TRAIL组的中晚期凋亡率明显高于空白对照组及肝细胞生长因子组(P<0.05);肝细胞生长因子+TRAIL组DR5荧光强度明显高于其他3组(P<0.01)。提示在TRAIL作用下,肝细胞生长因子能促进肝星状细胞的凋亡、抑制其增殖。可能与肝细胞生长因子上调活化肝星状细胞表面DR5表达有关。     

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体及其在骨髓增生异常综合征和白血病方面的研究进展

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)是TNF超家族新成员，它可以选择性诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常细胞无毒性作用，这种特性使其可能在肿瘤治疗中发挥巨大潜力。本文就TRAIL及其在骨髓增生异常综合征和白血病方面的研究进展作一综述。     

TNF相关凋亡诱导配体联合阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡及其机制的研究

本研究探讨人重组可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（hrsTRAIL）单用或联合阿糖胞苷（Ara—C）诱导HL-60细胞凋亡作用及其机制。在体外以人类急性白血病细胞株HL-60为研究对象，分5组进行细胞培养：对照组、Ara—C组、rsTRAIL组、同时给药组（Ara—C＋rsTRAIL）、先后给药组（Ara—C→rsTRAIL）。采用MTT比色法测定细胞生长抑制率；应用Annexin V／PI染色和流式细胞术检测细胞凋亡率；使用流式细胞术检测不同浓度的Ara—C对细胞表面DR5表达水平的影响及rsTRAIL单药组、先后给药组细胞表面DR5表达水平和细胞内caspase-8活性。结果表明：rsTRAIL能抑制HL-60细胞生长并诱导HL-60细胞凋亡。先后给药组诱导HL-60细胞凋亡率大于同时给药组。先后给药组细胞表面DR5表达水平和细胞内caspase-8的活性高于rsTRAIL组。5mg／L、10mg／LAra—C作用于HL-60细胞24小时，其细胞表面DR5表达水平升高，大于对照组。结论：rsTRAIL抑制HL-60细胞生长．诱导HL-60细胞凋亡。Ara—C上调HL-60细胞表面DR5表达水平。增强rsTRAIL诱导HL-60细胞凋亡的作用。Ara—C和rsTRAIL联合用药时，在先加Ara—C、再加rsTRAIL组诱导HL-60细胞凋亡的效果比同时给药组效果好，其机制可能与Ara—C上调细胞表面DIL5表达水平和（或）增强细胞内caspase-8的活性有关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对骨髓基质细胞的毒性作用

背景:已证实肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)能选择性诱导白血病细胞凋亡,并且不影响正常造血干/祖细胞的功能。但TRAIL对作为造血微环境核心的骨髓基质细胞的毒性作用如何,据作者查新检索目前尚未见系统报道。目的:通过观察TRAIL对骨髓基质细胞的凋亡诱导效应及其造血支持功能的影响,继而评价TRAIL对骨髓基质细胞的毒性作用。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2006-03/10在解放军沈阳军区总医院中心实验室完成。材料:血常规、骨髓涂片细胞检查正常的骨髓标本11份,取自解放军沈阳军区总医院血液科。化疗药物柔红霉素为浙江海正药业股份有限公司产品,国药准字H33020925。方法:Percoll 贴壁法体外分离培养骨髓基质细胞,达80%融合时胰蛋白酶消化扩增,取处于对数生长期的细胞,分为4组,空白对照组不进行任何干预,柔红霉素组加入0.5μmol/L柔红霉素作用24h,TRAIL组加入200μg/L TRAIL作用18h,联合组加入0.5μmoL/L柔红霉素作用6h后再以200μg/L TRAIL作用18h。取第2代骨髓基质细胞,60Co射线照射消除内源性造血集落,接种后去除悬浮细胞,TRAIL组以200μg/L TRAIL作用基质细胞层18h,按1×105/孔将骨髓单个核细胞接种于基质细胞层,扩增5d后加入甲基纤维素培养体系,于37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度条件下培养10d。主要观察指标:荧光显微镜观察诱骗受体在骨髓基质细胞的表达及定位,流式细胞仪检测柔红霉素对骨髓基质细胞诱骗受体表达的影响,AnnexinⅤ/PI标记TRAIL对骨髓基质细胞的凋亡诱导作用及对其造血支持功能的影响。结果:诱骗受体DcR1和DcR2在骨髓基质细胞中均有表达,主要定位于胞膜及胞浆。0.5μmol/L柔红霉素作用24h后,基本不影响诱骗受体DcR1和DcR2的表达水平。与空白对照组细胞凋亡率比较,TRAIL组无明显变化(t=0.973,P>0.05);柔红霉素组、联合组均显著升高(t=5.141,P=0.001;t=4.187,P=0.002),此两组间比较差异无显著性意义(t=1.222,P>0.05)。与空白对照组比较,TRAIL组骨髓单个核细胞数、粒-巨噬集落形成单位均无明显变化(t=1.313,P>0.05;t=1.172,P>0.05)结论:TRAIL的诱骗受体DcR1及DcR2在骨髓基质细胞均有表达,使骨髓基质细胞免于TRAIL的凋亡诱导效应,且TRAIL不增强柔红霉素对骨髓基质细胞的细胞毒性作用。     

早期胰岛素泵强化治疗对初诊2型糖尿病患者胰岛功能及病程改善的影响

<正>大量临床研究[1]表明,2型糖尿病患者血糖、血脂的紊乱主要是由于胰岛细胞功能损伤、胰岛素分泌相对缺乏和胰岛素抵抗引起。初诊的2型糖尿病患者由于发病时间较短,糖尿病引起的心、脑、肾、眼及血管等并发症尚未出现,此时若采取早期的胰岛素强化治疗,不仅能够迅速地控制血糖水平,还可以明显地改善β细胞功能及胰岛素抵抗,逆转部分胰岛β细胞的功能。本科采用早期胰岛素泵强化治疗初诊2型糖尿病患者,取得     

护理干预对骨科患者术后尿潴留的作用

尿潴留是一种能够引起患者膀胱过度膨胀和永久性逼尿肌损伤的泌尿系统疾病,其主要临床表现为患者膀胱内尿液充盈,而不能自行排出.行骨盆骨折、下肢骨折等手术的骨科患者术后常因膀胱括约肌反射性痉挛引起尿液排出受阻,特别是行硬膜外麻醉者,阻滞后的支配膀胱的骶神经因其恢复能力较差,尿潴留的发生率非常高[1].一般临床上的解决方法是利用留置导尿管来预防尿潴留,但是这种方法给患者带来很多不便和疼痛,并且会在一定程度上增加尿路感染的可能性.为了减少术后尿潴留的发生、减轻手术带给患者的身心影响、提高患者术后的生活质量,本研究选取在骨科接受手术的患者100例,采用常规护理及综合护理干预两种护理方式进行护理,以探讨综合护理干预对骨科术后尿潴留症状的改善情况,现报告如下.     

全自动血型、配血、抗体筛查分析仪数据接收模块的建立及应用

目的 通过LIS建立血型、交叉配血、抗体筛查结果的数据接收,对实验结果进行数字化和图像化管理,保障临床用血安全.方法 通过仪器与医学检验信息网络系统(Laboratory information management system,LIS)、医院信息管理系统(HIS)连接,建立血型、交叉配血、抗体筛查结果数据接收,将实验结果数字化和图像化.结果 LIS系统将检验仪器设备与计算机技术相结合,使患者的样品采集登陆、实验数据存取、报告审核、打印分发、实验数据统计分析等繁杂的操作过程实现智能化、自动化和规范化.结论 通过在LIS上建立血型、交叉配血、抗体筛查结果的数据接收,使实验结果实现网络化、信息化、自动化,系统结果稳定可靠,值得推广.     

银杏达莫联合丁苯酞治疗急性脑梗死的临床疗效

目的:探究与分析银杏达莫联合丁苯酞治疗急性脑梗死的临床疗效。方法:80例急性脑梗死患者采取随机数字表法分为银杏达莫组40例和联合用药组40例。2组患者均给予常规治疗,银杏达莫组在常规治疗基础上加用银杏达莫注射液,联合用药组在银杏达莫组治疗基础上加用丁苯酞注射液,均治疗2周。比较2组患者神经功能缺损程度评分、血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平及不良反应。结果:银杏达莫组神经功能缺损程度评分总有效率为85.0%,联合用药组为92.5%,联合用药组明显高于银杏达莫组(P0.05)。治疗前2组血清hs-CRP水平差异无统计学意义(P0.05),治疗第7、14天2组较治疗前均降低,联合用药组较银杏达莫组降低更显著(P0.05)。银杏达莫组不良反应发生率为20.0%,联合用药组为22.5%,2组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:与单独使用银杏达莫比较,使用银杏达莫联合丁苯酞治疗急性脑梗死的临床疗效更显著,可显著改善神经功能,改善预后,并且不增加不良反应。     

以脑梗死为首发表现的原发性血小板增多症治疗分析

目的:探讨原发性血小板增多症合并脑梗死的治疗方法。方法:回顾性分析6例以脑梗死为首发表现的原发性血小板增多症患者的临床资料。结果:6例患者年龄为36~83岁,平均(60.0±12.0)岁;临床表现有偏瘫、失语、头晕及头痛等。1例患者在溶栓时间窗给予阿替普酶,效果显著,未出现出血等并发症。6例患者均给予小剂量阿司匹林及羟基脲,随访半年未再发脑梗死,其中2例加用干扰素α,血小板数得到控制。结论:羟基脲、干扰素α、阿司匹林及阿替普酶可防治原发性血小板增多症并发脑梗死。     

丁苯酞软胶囊联合人尿激肽原酶治疗进展性脑梗死的临床疗效观察

目的:探讨丁苯酞软胶囊联合人尿激肽原酶治疗进展性脑梗死的临床疗效。方法:急性进展性脑梗死患者72例,随机分为对照组35例,治疗组37例。2组均接受脑梗死常规治疗及人尿激肽原酶治疗,治疗组加用丁苯酞软胶囊。于治疗前、后,比较2组的美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及疗效。结果:治疗后,治疗组的NHISS评分低于对照组(P0.05),显效率高于对照组(P0.05)。结论:丁苯酞软胶囊联合人尿激肽原酶治疗进展性脑梗死有助于提高临床疗效,安全可靠。     

微创穿刺血肿清除术治疗老年高血压基底核区脑出血的疗效

目的:探讨微创穿刺血肿清除术治疗老年高血压基底核区脑出血的短期疗效。方法:对老年高血压基底核区脑出血患者100例的临床资料进行回顾性分析。其中60例行微创穿刺血肿清除术,为微创组;40例行常规开颅血肿清除术,为手术组。对比2组术前与术后格拉斯哥昏迷量表评分(GCS)、血肿量、脑疝情况、急性脑积水情况、手术时机及术后患者的病死率。结果:2组术后1个月病死率差异无统计学意义(P0.05)。术后1个月,2组GCS评分均高于同组术前(P0.05);微创组GCS评分及其改善程度均高于对照组(P0.05)。微创组术前GCS、脑疝、手术时机为术后1月病死率的主要影响因素(P0.05);其中,术前GCS和手术时机是术后1月预后的独立影响因素(P0.05)。结论:微创穿刺血肿清除术对治疗老年高血压基底核区脑出血具有明显的短期疗效,手术时机和术前GCS是术后1个月预后的独立影响因素。     

强化认知训练对老年卒中相关性肺炎的预防作用

目的:将认知训练应用于老年脑梗死吞咽障碍及认知障碍患者,观察卒中相关性肺炎(SAP)及吞咽障碍改善情况。方法:将72例脑梗死吞咽障碍、认知障碍患者随机分为康复组和对照组,各36例。对照组给予神经科常规治疗、行为治疗及低频电刺激治疗;康复组在此基础上增加认知训练;分别于治疗前及治疗4周后观察SAP发生率,采用视频透视吞咽检查(VFSS)评定吞咽功能,采用洛文斯顿作业疗法认知评定量表(LOTCA)评定认知功能。结果:康复组治疗4周后SAP发生率明显减少,VFSS评分、LOTCA评分明显高于对照组(P0.05)。结论:在吞咽功能训练基础上,强化认知期的功能训练,可明显提高老年脑梗死患者的吞咽反射水平及咽部肌肉的收缩功能,增强吞咽再学习的训练疗效,降低SAP的发生率。     

对冲性双额叶脑损伤致中央型脑疝的临床特点及手术救治时机探讨

正对冲性双额叶脑损伤是一种临床常见的创伤性脑损伤,严重的脑组织损伤可继发脑水肿、脑血肿~([1])。其病情似缓实急,变化迅速,容易被忽视,稍延误患者的颅内压将增高,迫使一部分脑组织向压力较低处移行,从而形成中央型脑疝~([2])。保守治疗常使用脱水及神经系统保护药物,其中有很大比例需转急诊手术,如何准确把握手术救治时机仍然是     

双侧丘脑旁正中区梗死1例

正双侧丘脑旁正中区梗死临床上少见,Kumral等~([1])研究中仅占缺血性卒中的0.6%。现将我科收治的1例患者报道如下。1临床资料患者,男,因"被发现意识不清1 h余"于2015年1月9日入院。既往有脑梗死病史,自行停药半年,否认原发性高血压、糖尿病、心脏病史。入院查体:血压160/92 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),双肺呼吸音粗,未闻及干湿性罗音。心律68次/分,律齐,未闻及杂