苄索氯胺法——一种新的脑脊液蛋白质检测方法

目的对苄索氯胺脑脊液蛋白质检测方法进行评价。方法用罗氏公司的苄索氯胺试剂，以比浊法进行脑脊液蛋白质测定，并观察了本法的精密度、灵敏度、检测范围等。结果苄索氯胺法的批内精密度为1．5％、2．3％，日间精密度为0．62％、0．72％；灵敏度为0．08g／L；检测范围可达1．9g／L。传统磺基水杨酸蛋白质测定法与之比较，回归方程为Y=0．854X＋0．097，r=0．985。结论本法简便、快速、准确且样本用量少，适合临床实验室推广应用。     

高效液相色谱法同时测定消毒剂中的苯扎氯铵和苄索氯铵

目的建立一种高效液相色谱法,同时测定消毒剂中的苯扎氯铵和苄索氯铵。方法用配备二极管阵列检测器(DAD)的高效液相色谱仪,采用Agilent TC-18C液相色谱柱,以乙腈/乙酸铵/冰乙酸(70/30/0.15,V/V/V)为流动相,使用DAD(检测波长270 nm)进行检测分析。结果苯扎氯铵和苄索氯铵在20~400 mg/L范围内,线性回归方程的相关系数r=0.9990。2种成分的分离度为1.87,可以较好地分离苯扎氯铵和苄索氯铵。日内精密度苯扎氯铵为0.98%,苄索氯铵为0.23%;日间精密度苯扎氯铵为0.80%、苄索氯铵为0.47%。平均回收率范围苯扎氯铵为96.3%~103%,苄索氯铵为99.5%~104.0%;RSD范围苯扎氯铵为1.0%~1.5%,苄索氯铵为0.64%~2.6%。灵敏度苯扎氯铵检出限(LOD)为0.364 mg/L,定量限(LOQ)为1.21 mg/L;苄索氯铵LOD为0.311 mg/L,LOQ为1.04 mg/L。结论建立的高效液相色谱法能更准确地测定苯扎氯铵的含量,并能与苄索氯铵进行区分测定。     

苄索氯胺法——一种新的尿蛋白定量检测方法

目的 对苄索氯胺法这种新的尿蛋白检测方法进行评价。方法 收集150例门诊就诊患者尿液,用苄索氯胺法检测其尿蛋白含量,以此评价该方法的线性范围、精确度、灵敏度、回收试验、重复试验。结果该方法线性范围上限达2.014g／L,回收率手工法为86．95％,自动法为106．85％,有良好的精密度（CV分别为4．97％和2．63%）,灵敏度为单一钨酸比浊法的19～34倍,该法与单一钨酸比浊法的相关性良好,相关系数r为0．9846。两法结果进行t检验,t=0．436,P〉0．05,结果 差异无统计学意义。结论 该方法有灵敏度高、重复性好的优点,结果稳定,标本用量少,适用于自动分析,是值得在临床上推广的方法。     

颗粒增强免疫比浊法测定血清同型半胱氨酸的方法学评价

目的：对胶乳颗粒免疫比浊法测定血清同型半胱氨酸（HCY）的方法学进行初步评价。方法：应用胶乳颗粒免疫比浊法测定HCY的精密度、标准曲线、干扰实验、稳定性实验、并与循环酶法测定血清HCY的结果进行相关性分析。结果：颗粒增强免疫比浊法测定HCY的精密度（批内CV为1.87%、0.75%,批间CV为2.29%、5.35%）较高;HCY浓度在0μmol/L～50μmol/L范围内线性良好;当抗坏血酸浓度1107mg/L、胆红素浓度445 umol/L、血红蛋白浓度6.7 g/L;甘油三酯浓度14.6 mmol/L、氨离子浓度75 umol/L时均未对测定结果产生干扰;试剂开瓶后稳定周期也可达到25天;颗粒增强免疫比浊法和循环酶法测定HCY相关性良好（y =0.9904x ＋0.0813,r=0.9981）。结论：颗粒增强免疫比浊法测定血清HCY具有较高的精密度,结果准确可靠,适合临床实验室推广。     

胱抑素C测定试剂盒的分析性能评估

目的 评价胱抑素C测定试剂盒(免疫比浊法)的各项分析性能,了解其是否满足临床要求.方法 评价胱抑素C测定试剂盒(免疫比浊法)的精密度、灵敏度、特异性、线性范围,并进行方法 学比对.结果 四川新成生物公司的胱抑素C测定试剂盒(免疫比浊法)的批内不精密度CV≤3.73%,批间不精密度CV≤4.05%;测定范围0.20～10.00mg/L;灵敏度LLD=0.20mg/L;试剂特异性好;与日本生研株式会社试剂盒比对相关性良好,y=1.0191x+0.022,R2=0.9969.结论 四川新成生物公司的胱抑素C测定试剂盒(免疫比浊法)精密度好、灵敏度高、特异性强、可测定范围广,能够满足临床实验室的需要.     

两种不同检测系统测定半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的方法学评价

目的评估两种半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cystatin C，Cys C）检测系统的分析性能。方法Cys C分别采用Dade Behring（德灵）公司出品的颗粒增强散射免疫比浊法（PENIA）和上海景源医疗器械有限公司出品的透射免疫比浊法试剂盒进行测定，评价的方法学指标为精密度、线性范围、抗干扰性、相关及偏倚。结果Cys C浓度在0．6—5．0mg／L时，两家试剂总变异系数（CV）〈8％，检测线性范围为0．4—6mg／L。血红蛋白〈10g／L，胆红素〈300mg／L，维生素C〈5g／L对两家试剂检测干扰〈10％，在可接受范围内。甘油三酯（TG）≤20mmol／L时德灵试剂检测不受影响（干扰〈10％）。景源试剂TG≥15mmol／L时低值血浆干扰〉10％，高值血浆不受干扰。50份血样进行相关性分析的结果显示景源检测试剂盒与德灵的PENIA测定方法相关性良好（r=0．98，P〈0．01）。线性回归分析经Cusum检验显示两方法间偏倚不具有统计学意义（P〉0．05），但是景源测定结果较德灵结果偏低，平均偏倚为-0．16。对同一份样本景源与德灵测定Cys C的最小至最大偏差范围为1．1％-23％，平均为5．1％。结论两种方法的精密度、抗干扰性、线性范围符合要求，但是系统问测定结果存在一定偏差。     

苄索氯铵原料毒理学评价

摘要 目的 评价苄索氯铵原料的毒理学安全性。方法 采用小鼠急性经口毒性试验、家兔多次完整皮肤刺激试验、家兔多次阴道黏膜刺激试验、豚鼠皮肤变态反应试验等方法,对苄索氯铵的急性毒性、刺激性和致敏性进行研究。结果 苄索氯铵对雌、雄ICR小鼠的急性经口LD50值均为316 mg/（kg·bw）［95%CI：205～488 mg/（kg·bw）］。5 000 mg/L苄索氯铵水溶液对新西兰白兔完整皮肤刺激指数为0.8,多次阴道黏膜刺激指数为1.9;对豚鼠皮肤致敏率为0%。结论 苄索氯铵原料为中等毒性物质;其5 000 mg/L水溶液对完整皮肤、黏膜分别为轻刺激性和极轻刺激性,且无皮肤致敏性。     

苄乙氯胺法用于微量蛋白测定的评价

目的 对测定微量蛋白的苄乙氯胺法(BCM)进行评价.方法 用基于免疫比浊法的苄乙氯胺试剂,分别对尿液和脑脊液中的蛋白进行测定,并评价该法的灵敏度、精密度以及线性范围等.结果该法的灵敏度为60mg/L;线性范围为2000mg/L;精密度批内为1.4%,日间为0.65%.与磺基水杨酸-硫酸钠法相关回归分析,Y=0.798X+0.085,r=0.972,二者有明显相关性.结论 该法准确、敏感、稳定,所用标本量少,非常适合临床实验室开展及推广.     

用双缩脲法测定脑脊液总蛋白含量的方法评价

脑脊液（CSF）总蛋白含量的测定常用来检测血脑屏障对血浆蛋白的通透性增加或鞘内免疫球蛋白的分泌增加．这需要一种快速而相当精确的方法。双缩脲法是生物液体总蛋白含量测定的一种可用的参考方法。为了获得足够的灵敏度,此法已作多种修改,但大部分修改都降低了这种简单方法的适用性,并需大量CSF。还有一些别的技术可供采用,但每一种方法都有一些缺陷。本文的目的就在于评价一步双结历法测CSF总蛋白含量的能力,并把它与苄索氯铵浊度法进行比较。该实验采用BM／Hitachigll分析仪。苄索氯铵浊度法按厂商的方法进行,并使用配套的定标液。标准曲线最高点为2．00g／L,高于此浓度者在分析首先用154mmol／L的NaCl稀释。作者采用宝灵曼公司介绍的双绩脲终点法测定。通过增加样品体积以提高灵敏度,用1．50g／L的蛋白作标准。157例患者CSF离心后,于几分钟内用两种方法分析。批内精确应通过连续测定3种浓度（0．30,0．60,2．00g／L）的质控物各20次。批同治确度则在16天内每天对一次,每次作新的标准。作者通过分析Precimat蛋白和血浆样品的系列稀释浓度,确定了理论浓度与实际浓度的线性范围。双缩脱法的精确度虽比等索氯铁法低．但在浓度为0．30g／L时是可接受的．而在0．60g／L和2．00g／L时则相当     

乳胶增强免疫比浊法测定髓过氧化物酶试剂盒性能验证评价

目的：评价血浆髓过氧化物酶（MPO）乳胶增强免疫比浊法试剂盒在AU2700全自动生化分析仪使用的性能验证。方法根据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的评价方案对北京九强公司生产的乳胶增强免疫比浊法髓过氧化物酶测定试剂盒进行了回收试验、干扰试验、临床可报告范围及精密度验证。结果北京九强生产的MPO乳胶增强免疫比浊法试剂盒的两个浓度水平质控品的实验室精密度CV为8．9％;回收率95．7％～108．3％。线性评价的相关系数r＝0．997,线性回归方程为Y＝1．033X-25．092;干扰试验中不同程度的标本溶血均对测定MPO造成严重干扰。抗坏血酸6．3～100mg/L,三酰甘油小于7．8mmol/L内无明显干扰,相对偏差小于10％,三酰甘油浓度大于7．8mmol/L对试验有明显干扰,相对偏差为11．5％～11．9％。结论九强公司在国内首次推出的髓过氧化物酶（MPO）乳胶增强免疫比浊法试剂盒在抗干扰、线性、正确度及精密度等方面的性能达到临床需求,值得在临床心脑血管危险因子检测中推广应用。     

免疫比浊法测定血清视黄醇结合蛋白方法学评价

目的对免疫透射比浊法测定血清视黄醇结合蛋白(RBP)进行方法学评价。方法采用免疫比浊测定法,根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)相关文件,对该方法进行精密度、线性、准确性等评价及临床初步应用。结果批内CV%4.0%,批间CV%5.0%。抗干扰性强,Hb≤4.0g/L、胆红素小于或等于420μmol/L、三酰甘油小于或等于10mmol/L对测定无影响;与进口试剂对比,Y=1.0075X+0.0029,r=0.9995,两者相关性良好,试剂开瓶稳定性良好。结论免疫比浊测定血清视黄醇结合蛋白,方法简便、快速、灵敏,结果准确,可用自动分析仪测试,适合临床检验科应用。     

Three turbidimetric methods for determining total protein compared

We used human serum protein fractions to evaluate the sensitivity and bias of three turbidimetric methods for determining concentrations of proteins. Each fraction (Cohn Fractions II, III, IV, and V) was assigned a protein concentration value that was determined by the biuret method, which we calibrated with purified monomer of human serum albumin. All three turbidimetric methods (those involving sulfosalicylic acid/sodium sulfate, trichloroacetic acid, and alkaline benzethonium chloride) gave acceptable results for Fraction V with crystallized human serum albumin as the reference material, but there was bias by each of the three methods for the three globulin fractions. The method involving alkaline benzethonium chloride with measurement at 450 nm had the best sensitivity within the range of linearity and the most consistent bias among the three globulin fractions. These results define the dilemma for valid calibration of these methods for total serum protein in cerebrospinal fluid and urine.     

两种检测方法测定C反应蛋白的比较

目的评估速率散射比浊法和免疫透射比浊法检测C反应蛋白(CRP)的分析性能。方法分别采用速率散射比浊法(美国Siemens Healthcare Diagnostica公司BN-Ⅱ特定蛋白仪)和免疫透射比浊法(芬兰OrionDiagnostica公司CRP快速检测仪)对CRP进行测定,方法学评价指标为精密度、线性范围、抗干扰性、相关性及偏倚。结果 CRP浓度为2.0～80.0 mg/L时,BN-Ⅱ特定蛋白仪总变异系数(CV)<6%;CRP浓度为8.0～80.0 mg/L时,CRP快速检测仪总CV<7%;检测线性范围为8.0～70.0 mg/L。血红蛋白(Hb)<10 g/L、胆红素(Bil)<300 mg/L对2种方法检测干扰<10%,在可接受范围内。甘油三酯(TG)<20 mmoL/L时BN-Ⅱ特定蛋白仪不受影响(干扰<10%)。CRP快速检测仪在TG>15 mmol/L时低值血清干扰>10%,高值血清不受干扰。50份血样相关分析的结果显示2台仪器测定结果的相关性良好(r=0.98,P<0.01)。线性回归分析经Cusum检验显示2台仪器间偏倚差异无统计学意义(P>0.05),BN-Ⅱ特定蛋白仪测定结果较CRP快速检测仪结果偏低,Bland-Altman曲线显示2种方法的平均偏倚为-2.1。结论速率散射比浊法和免疫透射比浊法的精密度、抗干扰性、线性范围符合要求。虽然系统间测定结果存在一定偏倚,但也符合临床检测要求。     

酶法糖化血红蛋白试剂盒方法学比对评价

目的评估一种酶法测定糖化血红蛋白（HbAlc）试剂盒的性能。方法酶法测定HbAlc,评价的方法学指标为试剂盒的线性范围、不精密度、抗干扰性、回收率,并分别与免疫法和高效液相（HPLC）法进行相关及偏倚分析。结果该试剂盒的检测在4．3-12．9％呈线性;不精密度测定低、中、高值批内及批间CV在0．89％～1．43％之间,总CV在1．77-2．16％;HbAlc标准为5．5％和10．5％其回收率分别为99．0％、102．1％;干扰实验：维生素C〈500mg／L、胆红素〈400mg／L、溶血素〈5000mg／L、乳糜〈2％时,对结果无明显干扰（干扰率（±5％）。酶法HbAlc与免疫法和HPLC法的测定结果比较其回归方程分别是：Y=1．0417X-0．7187和Y=0．9881X-0．0944,相关系数均为r=0．99,P〈0．05,检验方法之间具有显著的统计学意义,经验证酶法测定HbAlc与免疫法和高效液相法的偏倚都在允许范围内。结论酶法HbAlc试剂盒在不精密度、抗干扰性、线性范围均符合临床要求,与常规方法比较相关良好偏差较小,可完全满足临床对HbAlc检测需求。     

肝素锂对比浊法检测微量总蛋白的干扰分析

目的证实肝素锂对比浊法检测微量总蛋白的干扰效应,并对其进行相关方法性能评价。方法分别配对检测8份不同浓度微量总蛋白尿液干扰标本,筛查判断肝素锂是否是试验的干扰物;浓度0.172、0.427g/L微量蛋白质标本中分别加入不同量的肝素锂(干扰物试验系列样品,肝素锂浓度分别为0.000、0.025、0.030、0.035、0.040、0.045、0.050mg/L),重复检测4次,进行干扰物剂量效应试验。结果干扰标本检测结果显示,8份含肝素锂与不含肝素锂的配对标本中最大偏倚为159.37%,最小偏倚为11.37%,2组间结果差异有统计学意义(t=17.24,P0.05);浓度为0.025mg/L肝素锂对0.172g/L微量蛋白质标本干扰效果的95%置信区间为0.034~0.062;0.030mg/L肝素锂对0.427g/L干扰效果的95%置信区间为0.043~0.053;肝素锂浓度分别为0.025mg/mL和0.050mg/mL时,0.172g/L微量蛋白质标本的结果偏倚分别为27.33%、58.14%;肝素锂浓度分别为0.030mg/mL和0.050mg/mL时,0.427g/L微量蛋白质标本的结果偏倚分别为11.24%、18.74%;同系列浓度的肝素锂对0.172g/L和0.427g/L微量蛋白质标本的干扰物剂量呈线性相关,其线性方程分别为Y=1.974 X-0.001 03,Y=1.599 X-0.000 5。结论肝素锂是比浊法检测微量蛋白质的外源性干扰物,它对微量蛋白质检测结果为正干扰,特别对低水平微量蛋白质检测的干扰效果更明显,且随着肝素锂浓度升高,干扰效果越强。     

尿血红蛋白对苄索氯铵法定量测定尿蛋白的干扰评价

目的评价尿血红蛋白对苄索氯铵法定量测定尿蛋白的影响。方法参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)的EP7-A2方案,配制不同浓度血红蛋白的尿液标本做剂量-效应试验,同时收集50例不同隐血程度的尿液标本做临床标本的偏倚试验;尿蛋白定量在DPP罗氏生化工作站采用苄索氯铵法检测,与磺基水杨酸法进行比较。结果剂量-效应试验显示,当尿血红蛋白浓度达0.2g/L时即对苄索氯铵法测定尿蛋白产生显著性干扰(P0.05);临床标本的偏倚试验显示,不同程度的隐血对苄索氯铵法测定尿蛋白产生明显的正干扰。结论重视尿隐血阳性和/或含有红细胞的尿液标本,在采用苄索氯铵法测定尿蛋白时应评价其准确性,必要时使用磺基水杨酸法进行确认。     

罗氏尿微量清蛋白检测试剂盒性能评价

目的评价罗氏第2代尿微量清蛋白(ALBU2)在Cobas 8000C702全自动生化分析仪上的检测性能。方法 (1)精密度评价:以CLIA′88规定的允许误差TEa为依据,要求重复精密度1/4TEa,中间精密度1/3TEa;(2)线性范围及可报告范围评价:采用EP6-A方案,并延伸计算平均稀释回收率,以平均稀释回收率在90%~110%,评价临床可报告范围;(3)携带污染评估:评估血清清蛋白对尿量微量清蛋白检测的携带污染,以携带污染率≤0.5%标准判定;(4)方法比对分析:以Siemens BNⅡ为参考系统,将罗氏Cobas 8000C702与BN2结果进行相关性比对分析。结果重复精密度:低浓度CV为1.98%,高浓度CV为1.64%;中间精密度:低浓度CV为4.35%,高浓度CV为1.20%。线性范围验证:测量范围为5.6~413.55mg/L;临床可报告范围:最大稀释倍数为30倍,临床可报告范围为5.6~12 406.5mg/L。携带污染率:血清清蛋白(42.6g/L)对尿液微量清蛋白(6.9mg/L)的携带污染为0.28%。室内比对:标本浓度在200mg/L时,回归直线为Y=0.896 X+5.049,r2=0.994 4,医学决定水平处系统偏移通过;当标本浓度在201~413.55mg/L时,回归直线为Y=0.848 X-10.44,r2=0.917,医学决定水平处系统偏移未通过。结论罗氏ALBU2在Cobas 8000C702平台上检测能满足临床的需求,不同仪器间的比对,在不同浓度范围内有差异,应根据各自仪器的系统建立独立的参考范围。     

参照EP方案在不同检测系统评价尿微量白蛋白试剂的分析性能

目的 通过不同检测系统测定尿微量白蛋白的分析性能评价,以探讨新成生物公司尿微量白蛋白测定试剂盒与英国朗道测定试剂盒在分析性能上的差异.方法 在同一台全自动生化分析仪上,同时对两个检测系统的正确度、精密度、最低检测限、测定范围、方法学比对共五项性能指标进行评价.结果 在正确度实验,新成和朗道试剂的相对偏差分别都小于10%.精密度试验,两种试剂的批内CV分别都小于5%.两种试剂的检测低限分别为：0.87mg/L、0.27mg/L.线性试验结果,新成试剂的回归方程和相关系数分别为：Y＝0.9827X＋0.5455,R2＝0.9987（浓度范围0～400mg/L）,朗道试剂的回归方程和相关系数分别为：Y＝1.0356X-0.9091,R2＝0.9996（浓度范围0.0～202.8mg/L）,新成试剂的测定范围更广.方法 比对试验,试验结果表明两种试剂相关性良好,回归方程和相关系数分别为：Y＝1.2555X-1.6888,R2＝0.9976.结论 两种检测系统对尿微量白蛋白的测定能得到一致的结果,其性能指标均能满足临床使用要求,无明显差异.     

Roche Cobas 501生化分析仪血清肌酐分析测量范围的验证

目的通过对血清肌酐分析测量范围(AMR)的验证,探讨临床实验室如何按照国际标准要求进行生化分析仪定量检测项目分析测量范围的验证,保证检验结果准确、可靠。方法采用酶法在Roche Cobas 501生化分析仪上检测7个浓度水平美国病理学家协会(CAP)线性范围能力测试样品,这7个样品靶值涵盖厂家说明书标示肌酐分析测量范围低、中、高值,每个样品检测两次取其均值,计算其与靶值的偏倚。另外参照美国临床和实验室标准协会(CLSI)指南文件EP6-P的要求,收集含高值肌酐的新鲜患者血清,按一定比例混合、离心,计算混合物的浓度并将之作为高值样品(H),与经同样处理获得的低值样品(L)分别按5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H的关系配制,形成系列样品,在Roche Cobas 501生化分析仪上对各样品的肌酐进行检测,每个样品检测4次,数据进行回归分析。结果 7个水平的CAP样品与靶值的偏倚均小于北京善方医院检验科设定的允许误差±7.5%[(1/2×TE)%]。新鲜患者混合血清样品回归方程为Y=0.988 6 X+16.614,b=0.988 6,介于0.97~1.03,截距a与0经t检验,t_at_(0.05),P0.05,说明截距与0无明显差异,回归直线事实上通过0点。结论厂家说明书标示的血清肌酐分析测量范围验证通过,实验室可以采用。