高压氧对小鼠aGVHD时细胞因子浓度的影响

目的：观察异基因骨髓移植小鼠，经高压氧作用后，血清中促进aGVHD的细胞因子TNF－α、IL－2及抑制aGVHD的细胞因子IL－4、IL－10浓度及比值的变化，探讨HBO抗aGVHD机理，为HBO的临床应用提供实验依据。方法：复制aGVHD动物模型，经高压氧作用后，用ELISA法检测血清细胞因子浓度并计算比值。结果：经高压氧作用后，血清中细胞因子浓度及比值降低。结论:HBO厅明显抑制aGVHD，提高aGVHD小鼠的生存率。     

口服耐受对异基因骨髓移植术后细胞因子水平影响的实验研究

目的探讨骨髓移植前供鼠经口服受鼠脾淋巴细胞诱导免疫耐受对于预防移植物抗宿主病(GVHD)的作用。方法用主要组织相容性抗原(MHC)完全不合的纯种近交系小鼠[供鼠:雄性C57BL/6J(H-2b)鼠;受鼠:雌性BALB/c(H-2d)鼠]建立异基因骨髓移植(allo-BMT)GVHD动物模型,随机分为4组(每组10只):A组为口服耐受组,移植前供鼠用受鼠脾淋巴细胞喂养;B、C组为受鼠在移植后分别使用雷帕鸣、环孢菌素A+甲氨蝶呤;D组不使用免疫抑制剂作为模型对照。ELISA法检测各组小鼠骨髓移植后细胞因子水平的差异。结果 A组小鼠IL-2、IL-6、IL-8、TNF-α水平较B、C、D组明显减低,且增长较其亦明显缓慢(P<0.05或P<0.01);而IL-10水平较B、C、D组增高(P<0.05)。结论供鼠口服耐受可明显抑制受鼠GVHD,其效果优于传统免疫抑制药物。     

同种异基因骨髓移植小鼠aGVHD模型的建立

目的探讨同种异基因骨髓移植小鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)模型的建立。方法将小鼠分为单纯照射组(A组)、同基因移植组(B组)、异基因移植组(C组),观察三组小鼠的造血重建、aGVHD的发生。结果 B组和C组WBC>1.0×109/L的时间分别为9.33±2.31d、10.33±1.65d(P=0.501);三组小鼠照射后前6d变化类似:体重进行性下降,伴活动减少,嗜睡,皱毛,弓背但无腹泻。A组小鼠于第6d开始死亡,死亡高峰在移植后9～12d,第12d全部死亡;B组小鼠第7d起体重逐渐增加,至移植后3w时体重恢复正常并继续增加,该组小鼠未出现aGVHD的症状,全部存活时间>60d;C组小鼠第7～10d体重略回升,11d后体重再度开始下降,并在11d左右再次出现活动减少,嗜睡,弓背,脱毛,腹泻等典型的aGVHD表现,死亡高峰在移植后第15～17d,第17d全部死亡,三组小鼠生存时间存在显著性差异(P<0.01)。对各组小鼠的肝脏、脾脏标本作常规病理切片结果显示:三组小鼠肝脏、脾脏第3d、第7d未见病变,单纯照射组小鼠第12d(濒死前)肝脏病变:肝脏部分肝细胞轻度水肿,出现空泡;脾脏髓质脾小体明显消失,大量红细胞坏死,含铁血黄素沉积。同基因骨髓移植组小鼠肝脏第14d病理学检查未见异常;脾脏可见脾小体缩小,髓质淋巴细胞未减少,纤维组织增生。异基因骨髓移植组小鼠第14d(发生aGVHD后3d)肝脏病变:肝脏出现肝细胞点状坏死,嗜酸性变,汇管区淋巴细胞浸润;脾脏髓质脾小体消失,脾窦扩张、瘀血、纤维组织增生,组织细胞增生典型;单纯照射组小鼠照射后6～12d全部死亡,同基因移植组小鼠全部长期生存,无GVHD征象,异基因移植组小鼠出现aGVHD征象;aGVHD的发病率为100%。结论 C57BL/6→BALB/C作为MHC不相合异基因移植动物模型,具有重复性好,发病率高,aGVHD表现典型,可作为aGVHD研究的理想参照。     

非清髓性造血干细胞移植与移植物抗宿主病

慢性移植物抗宿主病(cGVHD)是异基因造血干细胞移植(Allo-SCT)最常见的晚期并发症,约占移植后非疾病复发相关的死亡率中的50％[1]。非清髓性异基因造血干细胞移植(NST)是近年兴起的一种新型移植理念和方式,治疗血液系统恶性肿瘤的机理是建立异体造血干细胞的植入,随后发挥移植物抗肿瘤(GVT)效应。随着经验积累,人们发现cGVHD在NST仍然是一个急待解决的严重并发症。众所     

苦参碱对异基因造血干细胞移植后小鼠细胞因子影响的实验研究

目的：探讨苦参碱对畀基因造血干细胞移植后小鼠细胞因子的影响。方法：用雄性C57BL／6小鼠作为供鼠，雄性BABUC小鼠为受鼠，输入供鼠T淋巴细胞诱导出急性移植物抗宿主反应。BALB／C受鼠随机分为7组：A空白对照组、B单纯照射组、C骨髓移植组、D足量CsA组、E半量CsA组、F苦参碱组、G苦参碱联合半量CsA组。利用酶联免疫吸附试验测定各组小鼠血清INF-γ、IL-4等细胞因子浓度变化，并进行组间比较。结果：移植后7天，4组实验组小鼠（足量CsA、半量CsA、苦参碱、苦参碱联合半量CsA组）血清INF-γ浓度较骨髓移植组降低，足量CsA组与苦参碱联合半量CsA组及苦参碱组的差异，均具有显著统计学意义（P〈0．01）；4组实验组小鼠血清IL-4浓度较骨髓移植组无明显变化，差异无显著统计学意义（P〉0．01）。结论：苦参碱可降低小鼠血清INF-γ浓度，但对IL-4浓度的影响不明显。     

供鼠细胞经氟达拉滨处理后移植对aGVHD的影响

目的 探讨临床注射用氟达拉滨对大鼠同种异基因骨髓移植(Allo-BMT)后造血重建及急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响.方法 建立大鼠Allo-BMT模型,以清洁级Wistar大鼠为供鼠,清洁级SD大鼠20只随机分为A、B、C三组,受鼠接受全身照射(TBI)6.0Gy作为清髓性预处理.4h后,A组输注生理盐水作为对照组,B组经尾静脉输注供鼠骨髓及脾混合单个核细胞,C组经尾静脉输注用氟达拉滨体外培养24h的供鼠骨髓及脾混合单个核细胞.移植后每天观察三组受鼠造血恢复情况及aGVHD的发生情况.结果 移植后B、C组大鼠的外周血像平均恢复时间分别为(18.50±1.05)和(15.17±1.47)d(P＜0.05).A组大鼠的血像持续降低至死亡.临床aGVHD评分,B组明显高于C组[(7.33±1.63) vs. (4.67±1.23)分,(P＜0.05)].肝脏和结肠病理分级比较,B组以Ⅳ～Ⅴ级、C组以Ⅱ～Ⅲ级aGVHD病理变化为主,两组差异显著(P＜0.05).结论 大鼠Allo-BMT模型中,经氟达拉滨体外培养的供鼠细胞能显著减轻受鼠的aGVHD.     

sIL-2R在急性移植物抗宿主病中的临床研究

目的探讨细胞因子sIL-2R在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后急性移植物抗宿主病（aGVHD）发病机理中的作用。方法观察20例Allo-HSCT患者aGVHD的发病情况，移植前后定期采集20例患者的外周血，采用双夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测其细胞因子sIL-2R的浓度。结果①异基因造血干细胞移植后20例患者全部获得造血功能重建，中性粒细胞恢复到0．5×10^9／L及血小板恢复到20×10^9／L的中位时间分别为移植后13．5d及18d；②发生aGVHD的患者，sIL-2R浓度较移植前明显升高，sIL-2R浓度在aGVHD阳性组明显高于aGVHD阴性组（P〈0．01）。结论①细胞因子sIL-2R在aGVHD的发病中起重要的正向调节作用，检测异基因造血干细胞移植后患者血清的sIL-2R水平有助于预测aGVHD的发生；②sIL-2R与感染无相关性。     

异基因骨髓移植和非清髓性干细胞移植嵌合形成过程的比较

目的 研究异基因骨髓移植（allo-BMT）和非清髓性干细胞移植（NST）两种移植方式在供体细胞嵌合状态的形成及转归上的差异,探讨早期供体细胞植入的关键因素。方法 对20例接受allo-BMT和18例NST的患者进行回顾性比较,研究两组患者疾病类型、干细胞来源、预处理方案和移植物抗宿主病预防方案。用复合扩增荧光标记STR-PCR结合毛细管电泳方法对移植后＋7、＋14、＋21d,＋1、＋3、＋6、＋9、＋12个月的嵌合体进行动态检测。结果 （1）NST组在受体年龄、单个核细胞（MNC）、CD34^＋及T细胞数量上均明显高于BMT组,造血重建方面,中性粒细胞绝对值恢复时间与BMT组无差别,但血小板恢复明显早于BMT组。（2）NST组患者供体细胞完全嵌合状态（FDC）的建立比BMT组早（1个月vs 3个月）,移植后早期（＋1个月）FDC比例亦明显高于BMT组（38．9％vs 20%）,而混合嵌合状态（MC）的发生率明显低于BMT组（61．2％ vs 80％）,移植1个月后各时间段两组在嵌合体形成上均无显著性差别。（3）氟达拉滨为基础的NST预处理方案与标准预处理方案相比并未延迟供体细胞的植入。（4）NST组慢性移植物抗宿主病的发生率明显高于BMT组（80％vs 50%,P〈0．01）,与NST组输入高剂量的CD34^＋细胞相关。结论 在供体细胞早期植入和嵌合体形成的过程中,移植物中造血干细胞和T细胞数量至关重要,并可能起决定性作用。     

慢性移植物抗宿主病的临床及实验研究进展

异基因造血干细胞移植（Allo-hemapoietie stem cell trans- plantation, Allo- HSCT）已经成功地应用于治疗血液病、肿瘤、代谢性疾病以及自身免疫性疾病等多种疾病。但是,由于其严重的甚至致命的并发症如移植物抗宿主病（graft versus host disease, GVHD）,使其应用受到了一定程度的限制。     

经皮自体骨髓移植治疗四肢骨折后延迟愈合

目的 观察经皮自体骨髓移植治疗四肢骨折内固定术后延迟愈合的临床效果. 方法 41例四肢骨折内固定术后延迟愈合的患者在知情同意情况下,按数字表法随机分为两组;对照组20例采用传统疗法,观察组21例采用经皮自体骨髓移植治疗.观察两组临床治疗效果和并发症发生情况. 结果 观察组愈合优秀13例（61.9%）、良好7例（33.3%）、失败1例（4.8%）,与对照组的6例（30.0%）、11例（55.0%）、3例（15.0%）相比较,差异有统计学意义（u=4.1934,P＜0.05）.观察组并发症总发生率为9.5%,与对照组并发症总发生率15.0%相比较,差异无统计学意义（χ^2=0.034,P＞0.05）. 结论 经皮自体骨髓移植治疗四肢骨折内固定术后延迟愈合疗效较佳,且并发症较少.     

喘可治对小鼠异基因骨髓移植中移植物抗宿主病效应的影响

<正>喘可治注射液(简称CKZ)主要成分为淫羊藿、巴戟天提取物,临床传统用于治疗哮喘。前期研究结果显示,喘可治具有复杂的免疫调节作用,影响T细胞的活化、细胞因子分泌(TH1/TH2平衡)、增殖和凋亡等行为,具有一定双向调节功能,即免疫反应过强时抑制免疫应答,免疫反应过弱时     

雷帕霉素治疗异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病的初步研究

目的探讨新型免疫抑制剂雷帕霉素(西罗莫司)对异基因造血干细胞移植后急性重度移植物抗宿主病(GVHD)及慢性广泛型GVHD的免疫抑制作用。方法选取我科1999—2008年已行异基因造血干细胞移植患者,使用雷帕霉素联合基础免疫抑制剂治疗GVHD。结果1例患者获得完全缓解,2例明显改善,其中2例患者慢性广泛性GVHD持续好转并无病存活,其余5例患者死亡。结论雷帕霉素可以抑制T淋巴细胞增殖效应,增强免疫耐受,对难治性GVHD有一定疗效,但其不良反应大,对骨髓抑制明显,易发生严重感染、出血等并发症。     

Novel role of curcumin combined with bone marrow transplantation in reversing experimental diabetes: Effects on pancreatic islet regeneration, oxidative stress, and inflammatory cytokines

Therapeutic utility of bone marrow transplantation in diabetes is an attractive approach. However, the oxidative stress generated by hyperglycemia may hinder β-cell regeneration. The present study was undertaken to investigate the therapeutic potential of curcumin, a dietary spice with antioxidant activity, bone marrow transplantation, and their combined effects in the reversal of experimental diabetes. Diabetes was induced in mice by multiple low doses of streptozotocin. After the onset of diabetes, mice were treated with curcumin (10 mM; 100 μl/mouse, i.p., for 28 days) or received a single bone marrow transplantation (10⁶ un-fractionated bone morrow cells), or both. Parameters of diabetes, integrity of pancreatic islets, pancreatic oxidative stress markers, and serum pro-inflammatory cytokines, were evaluated. Treatment with either curcumin or bone marrow transplantation significantly reversed streptozotocin-induced hyperglycemia/glucose intolerance, hypoinsulinemia, and damage of pancreatic islets. Interestingly, combination of curcumin and bone marrow transplantation elicited the most profound alleviation of such streptozotocin-evoked anomalies; including islet regeneration/insulin secretion. On the other hand, curcumin, either alone or combined with bone marrow transplantation, blunted the pancreatic lipid-peroxidation, up-regulated activities of the antioxidant enzymes, and suppressed serum levels of TNF-α and IL-1β. Curcumin and single bone marrow transplantation proved their therapeutic potential in reversing diabetes when used in combination. Curcumin, via its antioxidant and anti-inflammatory effects, evidently enhanced the ability of bone marrow transplantation to regenerate functional pancreatic islets. Hence, the use of natural antioxidants combined with other therapeutic regimens to induce pancreatic regeneration is a promising strategy in the management of diabetes.     

骨髓移植术后巨细胞病毒肺炎患者体内CD11b的表达及临床意义

目的探讨骨髓移植术后巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,CMV)肺炎患者体内中性粒细胞表面黏附分子CD11b的表达及诊断价值。方法收集我院2000年11月至2016年10月收治的骨髓移植术后患者60例,依据CMV-pp65抗原检测结果分组,同时选择我院门诊体检健康者33例为对照组。采用流式细胞仪分别检测上述各组的CD11b表达情况,并计算CD11b在诊断骨髓移植术后CMV肺炎过程中的受试者工作曲线(ROC曲线)。结果本研究高活动性CMV感染组17例(28.33%),CMV活动性感染组29例(48.33%),阴性对照组(未感染CMV)14例(23.34%)。高活动性CMV感染组CD11b表达率为39.11%±4.98%,与CMV活动性感染组、阴性对照组和健康对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。CD11b在诊断骨髓移植术后高活动性CMV感染的最佳临界值表达率为43.47%,敏感度为100%,特异度为59.47%,ROC曲线下面积为0.631;CD11b诊断骨髓移植术后CMV肺炎活动性感染者的最佳临界值表达率为69.34%,敏感度为86.92%,特异度为98.81%,ROC曲线下面积为0.987。结论骨髓移植术后CMV肺炎患者体内CD11b表达下调,可作为鉴别诊断骨髓移植术后CMV肺炎活动性感染的实验室依据。     

抗淋巴细胞血清联合脾细胞促进异基因骨髓细胞形成嵌合体诱导免疫耐受

目的:探讨抗淋巴细胞血清(ALS)联合异基因脾细胞(SC)在促进异基因骨髓细胞移植诱导小鼠皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:第-5～-3天,C57BL/6(H-2b)受体小鼠每天腹腔注入0.5 ml抗淋巴细胞血清(ALS),共3天。第0天,C57BL/6受体小鼠通过尾静脉输注均源自BALB/c(H-2d)的1×108脾细胞(SC)及2×107骨髓细胞(BMC)。第二天,受体鼠腹腔注入200 mg/kg的环磷酰胺(CP)。第六天进行从BALB/c到C57BL/6的尾-尾皮肤移植。每天观察移植皮片存活情况,共观察100天。并于骨髓细胞移植后30天、50天及70天对受体小鼠外周血进行嵌合体检查。结果:抗淋巴细胞血清和(或)异基因脾细胞的输注能促进异基因BMC的植入,并能延长移植皮片的存活时间。在30、50天及70天,SC BMC CP、ALS BMC CP及ALS SC BMC CP移植组受体小鼠体内能检测到供体骨髓源性细胞,ALS SC BMC CP移植组的嵌合率较高,随着时间推移,嵌合率下降,而且移植皮片存活时间与嵌合率具一定相关性。结论:抗淋巴细胞血清(ALS)联合异基因脾细胞能协助异基因BMC植入,形成嵌合体,促进免疫耐受的诱导,使移植皮片存活时间延长。     

Mortality,length of stay and costs associated with acute graft-versus-host disease during hospitalization for allogeneic hematopoietic stem cell transplantation

Objective: Acute graft-versus-host disease (aGVHD) is a common and life-threatening complication of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT). The extent to which aGVHD increases inpatient costs associated with allo-HSCT has not been thoroughly evaluated. In this analysis, mortality, hospital length of stay (LOS) and costs associated with aGVHD during allo-HSCT admissions are evaluated.

Methods: This is a retrospective analysis of discharge records from the National Inpatient Sample database for patients receiving allo-HSCT between 1 January 2009 and 31 December 2013. Allo-HSCT discharges with an aGVHD diagnosis were included in the aGVHD group and those without any graft-versus-host disease (GVHD) diagnosis comprised the non-GVHD group. Mortality, LOS and costs were compared between the two groups, as well as within subgroups, including age (<18 vs. ≥18 years) and survival status (alive vs. deceased) at discharge.

Results: Overall, mortality (16.2% vs. 5.3%; p?<?.01), median hospital LOS (42.0 vs. 26.0 days; p?<?.01) and median total costs ($173,144 vs. $98,982; p?<?.01) were significantly increased in patients with aGVHD versus those without GVHD during hospitalizations for allo-HSCT, irrespective of age group. Patients with aGVHD who were <18 years of age had a lower mortality rate but greater hospital LOS and total costs versus patients aged ≥18 years. Patients who died during allo-HSCT hospitalization had longer LOS and incurred greater costs than those who survived in both the aGVHD and non-GVHD groups.

Conclusion: Occurrence of aGVHD during allo-HSCT admissions resulted in a tripling of the mortality rate and a near doubling of hospital LOS and total costs. In addition, death during allo-HSCT hospitalizations was associated with greater healthcare utilization and costs. Effectively mitigating aGVHD may improve survival and substantially reduce hospital LOS and costs for allo-HSCT.     

自体骨髓移植治疗前臂骨折骨不愈合及骨缺损的临床研究

目的探讨经皮自体骨髓移植治疗前臂骨折骨不愈合及骨缺损的临床效果。方法对21例前臂骨折骨不愈合及骨缺损的患者,应用经皮穿刺自体骨髓移植方法进行治疗。结果所有患者随访12～28个月。本组中有20例骨折愈合,其中13例新鲜骨折全部愈合,8例陈旧骨折不愈合中愈合7例,未愈合1例。结论自体骨髓移植经皮注射于骨不愈合及骨缺损部位可以诱导成骨,有修复骨折及骨缺损作用,临床应用简单,对前臂骨折骨不愈合,伴有皮肤损伤的骨缺损有较好的效果。     

硼替佐米对骨髓移植清髓照射小鼠肝及小肠内NF-κB表达的影响

目的研究硼替佐米对骨髓移植照射预处理小鼠肝及小肠内NF-κB表达的影响,进一步探讨硼替佐米防治小鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)的作用机制。方法骨髓移植预处理方法为BALB/c小鼠接受7.0 Gy X射线全身照射。实验分为:A组为空白对照组:未作任何处理;B组:单纯全身照射组;C组:全身照射加用硼替佐米组。观察各组小鼠的外周血白细胞计数及生存时间,Western blot法检测肝及小肠组织总蛋白及细胞核内NF-κB的表达。结果 B、C组中用于白细胞计数及生存时间观察的8只小鼠均在10 d内全部死于骨髓衰竭。照射后+1、+3、+5 d,B组肝及小肠组织总蛋白及细胞核蛋白中NF-κBp65表达均高于A组(P0.05),而C组均明显低于B组(P0.05)。结论硼替佐米可能通过一定程度上抑制照射预处理损伤所致肝脏及小肠组织中NF-κB的表达与激活,起到减轻aGVHD的作用。     

骨髓活检在急性非淋巴细胞白血病化疗前、后的应用

应用骨髓活检对15例初治ANLL化疗前、后骨髓病理变化进行定量分析。结果表明:骨髓活检标本对确定骨髓内细胞分布、间质变化、骨髓细胞增生程度和判断化疗效果均较骨髓穿刺涂片优越,二者相互配合可以比较全面地反映骨髓的病理变化。