鸭跖草不同提取方法提取物的体外抗病毒实验研究

目的:为建立鸭跖草抗病毒谱-效相关评价系统,对鸭跖草不同提取方法提取物体外抗病毒活性进行筛选,最后选择鸭跖草75%乙醇冷浸提取物抗呼吸道合包病毒(RSV)活性和鸭跖草蒸馏水回流提取物抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)活性进行下一步研究。方法:采用体外抗病毒实验CPE法结合MTT染色法,以半数治疗浓度(EC50)和半数细胞毒性浓度(TC50)并以治疗指数TI值作为评价指标,观察鸭跖草不同提取物对肠道病毒71型(EV71)、单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)和呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用。结果:中药材鸭跖草对于肠道病毒71型(EV71)病毒未见明显效果;75%乙醇冷浸的鸭跖草浸取液对呼吸道合胞病毒(RSV)病毒有较好的抗病毒效果,并且测得鸭跖草75%乙醇冷浸浸取液抗呼吸道合胞病毒(RSV)的治疗指数为21.1,阳性对照药治疗指数为29.8;采用蒸馏水提取的鸭跖草提取液对单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)病毒有较好的抗病毒效果,且测得鸭跖草蒸馏水回流提取物抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)的治疗指数为19.6,阳性对照药治疗指数为36.7。结论:鸭跖草在抗呼吸道合胞病毒(RSV)和单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)有一定的效果,为进一步进行鸭跖草抗病毒研究和建立鸭跖草谱-效模型提供了科学依据和数据支持。     

全蝎白术白头翁混合发酵品不同极性部位体外抗病毒研究

目的探讨全蝎白术白头翁混合发酵品(SAPHFP)不同极性部位体外抗病毒作用及可能活性成分的含量。方法对SAPHFP分别采用超声水提、50%、80%乙醇回流提取,提取物通过MTT法分别对RSV、EV71、COX-B2、HSV四种病毒株进行体外抗病毒作用的实验;采用Lowry法、苯酚-硫酸法及NaNO_2-AlCl_3-NaOH比色法分别测定三种极性部位中的总蛋白、总多糖及总黄酮的含量。结果 SAPHFP三种提取成分中,50%乙醇提取物对病毒的抑制率最好,尤其是对EV71和HSV病毒,TI指数分别为46.30、56.82。三者的体外抗病毒有效率均高于阳性对照药利巴韦林;SAPHFP的50%乙醇提取液与未发酵品比较,感染了HSV病毒的正常细胞其存活率显著提高;水提液中总蛋白、总多糖、总黄酮含量最高,分别为:177.1269、517.7191、9.624298。结论 SAPHFP水提、50%、80%乙醇提取物体外对四种病毒均有一定的抑制作用,体外抗以上病毒株的活性与供试品中所含的总蛋白、总多糖、总黄酮含量不完全成对等关系。     

地龙抗呼吸道合胞病毒的有效部位筛选

目的:研究地龙不同极性的粗提取物经纯化分离后对呼吸道合胞病毒(RSV)的体外抗病毒活性,从而确定抗病毒的有效部位。方法:预实验依次用乙酸乙酯、95%乙醇水溶液、水作为溶剂提取药物,采用RSV-Hep-2细胞感染模型,初步检测地龙的体外抗RSV活性。依据预实验的结果,分别采用水提醇沉法和醇提水沉法对粗提取物进一步地分离和纯化,将处理后的上清液和沉淀物分别进行体外抗病毒实验。然后根据实验结果将醇提水沉后的沉淀过大孔树脂DM130,分别用25%、50%、75%的乙醇水溶液洗脱,将洗脱液浓缩后做抗病毒实验,在显微镜下观察细胞的病变,用酶标仪测定中性红染色A540值,计算其治疗指数。结果:乙酸乙酯、乙醇、水3种粗提取物中水粗提取物对呼吸道合胞病毒的抑制效果最好,TI=74.21。将粗提取液水提醇沉或醇提水沉后发现醇提水沉的沉淀对呼吸道合胞病毒的抑制效果最好,TI=107.11。将地龙醇提水沉的沉淀过大孔树脂DM130发现75%乙醇2号水溶液冲洗的洗脱液抑制呼吸道合胞病毒的效果最好,TI=63.05.结论:地龙的醇溶性成分对RSV病毒具有明显的抑制作用。     

鸡骨草不同洗脱部位体外抗病毒实验研究

目的:研究中药鸡骨草的抗病毒活性及有效部位。方法:采用细胞体外抗病毒实验法,结合CPE法及MTT法,以TI值(治疗指数)为研究指标,以利巴韦林、阿昔洛韦为阳性对照药,研究鸡骨草及其不同萃取部位对呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒(HSV-1)、柯萨奇病毒(COX-B5)的抑制作用。结果:鸡骨草对RSV、HSV-1有较好的效果,TI值分别为15.56和13.55;30%乙醇部位对COX-B5效果较好,其TI值为16.11;50%乙醇部位对RSV效果较好,其TI值为27.86;70%乙醇部位对HSV-1效果较好,其TI值为14.93。结论:鸡骨草提取物具有体外抗RSV、HSV-1、COX-B5的活性。     

羊栖菜提取物的体外抗病毒作用

目的:探讨羊栖菜提取物的体外抗病毒作用。方法:对羊栖菜的提取物进行了常见的第三类病原体病毒呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒1型(HSV-1)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A_(16)、柯萨奇病毒B_2、柯萨奇病毒B_3、柯萨奇病毒B_5(CVA_(16)、CVB_2、CVB_3、CVB_5)等7种病毒的抗病毒效应研究,显微镜下观察细胞存活率。结果:羊栖菜提取物对上述7种病毒的抑制能力远远优于广谱抗病毒药物利巴韦林,尤以对EV71的抑制效果最为明显,抑毒指数极高。结论:羊栖菜提取物对这7种病毒均具有良好的抑制作用,为进一步研究羊栖菜提取物对第三类病原体病毒的广谱抗病毒作用奠定基础。     

头花蓼对多重耐药金黄色葡萄球菌抗菌作用研究

目的研究头花蓼对多重耐药金黄色葡萄球菌的抗菌活性。方法采用纸片扩散法测定抑菌圈直径,微量肉汤稀释法测定各实验菌株的最低抑菌质量浓度(MIC)和半数抑制质量浓度(IC50值),液体转染法测定最低杀菌质量浓度(MBC)。结果头花蓼提取物对各多重耐药金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑制作用,60%乙醇提取物对各耐药菌的抑菌圈明显大于水提物,并大于没食子酸。60%乙醇提取物与水提物对各耐药菌株的MIC值范围为0.78³.12 mg/mL和IC50值范围为0.463.12 mg/mL和IC50值范围为0.46¹.81 mg/mL,均小于没食子酸的MIC值和IC50值。60%乙醇提取物MBC值范围为1.561.81 mg/mL,均小于没食子酸的MIC值和IC50值。60%乙醇提取物MBC值范围为1.56⁶.25 mg/mL,小于水提物和没食子酸。结论头花蓼乙醇提取物体外抗多重耐药金黄色葡萄球菌作用优于没食子酸,提示头花蓼除了没食子酸外还存在其他抗菌成分。     

红景天甲醇冷浸提取物的体外抗病毒谱及抗病毒机制的研究

目的:为建立红景天抗病毒谱-效相关评价系统,对红景天抗病毒机制进行初步探究,通过对红景天甲醇冷浸提取物体外抗病毒活性进行筛选,最后选择红景天甲醇冷浸提取物抗柯萨奇病毒B型(COX-B5)活性进行研究病毒机制的初步研究。方法:采用体外抗病毒实验CPE法结合MTT染色法,以半数治疗浓度(EC50)和半数细胞毒性浓度(TC50)并以治疗指数TI值作为评价指标,观察红景天甲醇冷浸提取物对手足口病病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒B型(COX-B5)、单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)和呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用。结果:中药材红景天对于四种病毒感染都有一定程度的抑制效果,其中以肠道病毒的抑制效果最好,红景天甲醇提取物对呼吸道合胞病毒(RSV)的治疗指数为26.35,对单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)的治疗指数为14.03,对柯萨奇病毒B型(COX-B5)的治疗指数为33.82,对手足口病病毒71型(EV71)的治疗指数为27.28。在此基础上,选取红景天甲醇冷浸提取物抗柯萨奇病毒B型(COX-B5)活性做进一步的抗病毒机制研究,结果发现,红景天甲醇冷浸提取物在预防性治疗中,其治疗指数TI值为11.31,在抑制病毒穿入感染中,其治疗指数为19.29,在药物病毒直接作用的灭杀组中,药物的治疗指数为35.26。结论:中药材红景天对于肠道病毒的抑制有明显的效果,但其作用机制较复杂,并非针对病毒吸附感染复制的某一单一环节,作用机制有待进一步研究,红景天作为低毒高效的传统中药材,在抗病毒领域有很大潜力,有待进一步研究开发。     

基于药效学跟踪试验提取分离龙须藤总黄酮及其含量测定

目的:考察龙须藤的最佳乙醇提取浓度,并以硅胶柱色谱法分离得到龙须藤总黄酮,对分离得到的龙须藤总黄酮进行含量测定。方法:采用药效学跟踪试验,参考龙须藤不同浓度乙醇提取物对膝关节炎症模型大鼠的抗炎作用,选取龙须藤的最佳乙醇提取浓度,采用硅胶柱色谱方法从龙须藤乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到龙须藤总黄酮,HPLC对分离得到的龙须藤总黄酮进行含量测定。结果:龙须藤的70%乙醇提取物抗炎作用最好,采用溶剂系统为二氯甲烷-乙酸乙酯(8∶1~4∶1)梯度洗脱分离得到的龙须藤总黄酮中3',4'-亚甲二氧基-5',5,6,7-四甲氧基黄酮、3',4',5',5,7-五甲氧基黄酮含量分别为21.3%,46.7%。结论:龙须藤的最佳乙醇提取浓度为70%,溶剂系统为二氯甲烷/乙酸乙酯(8/1~4/1)梯度洗脱分离龙须藤总黄酮的方法可行。     

九味感冒口服液的解热和体外抗病毒作用研究

目的:了解九味感冒口服液对动物发热模型的解热作用及体外抗病毒作用.方法:(1)解热实验:用2,4-二硝基苯酚和内毒素分别制作大鼠和家兔发热模型,九味感冒口服液分3个剂量组经口给药,于给药后不同时间测定动物体温,比较组间体温差异.(2)体外抗病毒实验:选择呼吸道合胞病毒、柯萨基B3病毒和流感病毒B进行抗病毒观察.结果:(1)解热实验:对2,4-二硝基苯酚和内毒素诱发的发热模型均有明显的解热作用,给药后l h作用最为明显.(2)体外抗病毒实验:可抑制呼吸道合胞病毒、柯萨基B3病毒和流感病毒B在细胞上的繁殖,抑毒指数分别为83.4、125和125.结论:九味感冒口服液具有明显的解热和抗病毒作用.     

广西小叶红叶藤不同极性溶剂提取物体外抗氧化活性

目的:研究小叶红叶藤Rourea microphylla不同溶剂提取物的抗氧化活性.方法:用冷浸法制备小叶红叶藤乙酸乙酯提取物(EAE)、丙酮提取物(AE)和乙醇提取物(EE),采用紫外分光光度法测定DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基清除率2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+)自由基清除率和铁离子还原能力,对小叶红叶藤3种提取物体外抗氧化活性进行考察.结果:小叶红叶藤乙醇提取物(EE)抗氧化能力最强,其ABTS+自由基及DPPH自由基半清除浓度(IC50)分别为0.66,0.60 g·L-1,还原能力强弱的顺序为EE＞ EAE＞ AE,与各提取物总黄酮含量一致.结论:小叶红叶藤提取物特别是乙醇提取物具有作为天然抗氧化剂和功能性食品进行研究和开发的潜力.     

黄芩清肺汤抗菌、抗病毒活性组分的剂量配比研究

目的确定黄芩清肺汤抗菌、抗病毒活性组分的有效剂量配比。方法采用体内实验方法,观察各受试样品的抗病毒、抗菌作用。结果黄芩提取物、栀子提取物、二者不同剂量比例的混合物以及黄芩栀子合提物均具有抗甲、乙型流感病毒、金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌的作用。黄芩栀子合提物的有效剂量大于其它提取物(或混合物)。黄芩提取物、栀子提取物以3∶1组成的混合物药效作用较其它受试物为优。结论黄芩清肺汤抗菌、抗病毒活性组分的有效剂量配比为3∶1。     

中药矮地茶不同提取方法提取物体外抗病毒研究

目的:为建立矮地茶抗病毒谱-效相关评价系统,对矮地茶不同提取方法提取物体外抗病毒活性进行筛选。方法:采用细胞体外抗病毒实验法,结合CPE法及CCK-8试剂盒,以TI值(治疗指数)为研究指标,以利巴韦林、阿昔洛韦为阳性对照药,研究矮地茶不同提取方法提取物对呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒(HSV-1)、柯萨奇病毒(COX-B5)、手足口病病毒(EV71)的抑制作用。结果:矮地茶对RSV、HSV-1、COX-B5均有直接杀灭作用,水提液对COX-B5的直接杀灭效果较好,TI值为16.282,最大抑制率分别为87%,较阳性对照药利巴韦林相差不大(TI值为17.482,最大抑制率为85%)。结论:矮地茶提取物具有体外抗RSV、HSV-1、COX-B5的活性。     

滨蒿总黄酮提取物的抗流感病毒作用

目的:观察滨蒿总黄酮提取物(滨蒿总黄酮)在体内外的抗流感病毒作用。方法:体外抗病毒实验观察样品对狗肾传代细胞(MDCK)的毒性,观察病毒致细胞病变(CPE)法测定样品在体外抑制甲、乙型流感病毒的半数抑制浓度(IC50),并计算选择指数(SI)。体内抗病毒实验用流感病毒鼠肺适应株(PR8)滴鼻感染小鼠建立流感病毒性肺炎模型,以死亡保护率、生命延长率和肺指数等为指标,评价样品的保护作用。结果:滨蒿总黄酮对甲、乙型流感病毒致细胞病变的IC50分别为74.6μg/mL、98.5μg/mL,SI分别为16.8、12.7;滨蒿总黄酮以200、400mg/kg剂量灌胃给药对小鼠流感病毒性肺炎模型有明显的保护作用,其死亡保护率分别为36.4%、54.5%;生命延长率分别为29.0%、38.2%;滨蒿总黄酮400mg/kg剂量对流感病毒性肺炎小鼠肺指数有明显的抑制作用,抑制率为25.9%。结论:滨蒿总黄酮在体内外均有明显的抗病毒作用。     

大理独蒜与丫蒜提取物体外抑菌效果研究

目的:研究大理独蒜和丫蒜的乙醇提取物对金黄色葡萄球菌标准株(ATCC 25923)、大肠杆菌标准株(ATCC 25922)、白色念珠菌标准株(ATCC 90029)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床分离株(1420)和耐超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌临床分离株(021606)的抑菌效果。方法:采用乙醇萃取法制备独蒜提取物与丫蒜提取物,采用K-B法进行体外抑菌实验,常量稀释法检测MIC。结果:经t检验、Games-Howell检验分析,大理独蒜与大理丫蒜的提取物对实验菌株均有不同程度的抑菌效果,不同蒜种对同一菌株的抑菌效果也不相同。丫蒜提取物对实验中耐超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌(021606)的抑菌效果比对大肠杆菌标准株的抑菌效果好,差异具有统计学意义;而独蒜提取物对实验中白色念珠菌的抑菌效果比对实验中其他细菌的抑菌效果好,同时独蒜提取物对白色念珠菌的抑菌效果比丫蒜提取物强,差异具有统计学意义。结论:大理独蒜和丫蒜提取物对实验中的细菌和白色念珠菌的抗菌效果有一定的差异,为大蒜提取物在临床和食品防腐剂的开发应用方面提供了实验依据。     

狐狸尾不同极性溶剂提取物体外抗氧化活性研究

目的:研究狐狸尾Uraria lagopodioides不同极性提取部位的体外抗氧化活性。方法:以乙酸乙酯、丙酮和95%乙醇为溶剂分别对狐狸尾进行冷浸提取,得到各种溶剂提取物EAE,AE,EE,采用紫外分光光度法分别测定总黄酮含量,并将各提取物配制成0.2～1.2 g.L-1,采用ABTS.+法、DPPH.法和铁离子还原能力法测定不同浓度提取物抗氧化活性。结果:测得狐狸尾EAE,AE,EE总黄酮含量分别为74.0,65.7,84.2 g.kg-1;狐狸尾各提取部位具有较强ABTS.+,DPPH.清除能力及还原能力,其中乙醇提取部位(EE)具有优异的抗氧化能力,在3个体系中,其半清除浓度(IC50)分别为0.52,1.36,4.88 g.L-1。结论:狐狸尾各提取物具有作为天然抗氧化剂和功能性食品进行研究和开发的潜力。     

窝儿七不同提取物中总黄酮总酚含量及其抗氧化活性的研究

目的:研究窝儿七不同提取物的抗氧化活性与其总黄酮和总酚含量的相关性。方法:采用NaNO_2-Al(NO_3)_3-NaOH显色法和Folin-Ciocalteu比色法分别测定窝儿七药材5种提取物中总黄酮和总酚的含量,并用DDPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、还原能力以及T-AOC总抗氧化能力方法,评价不同提取物的抗氧化活性。结果:正丁醇提取物中总黄酮含量最高,为45.62 mg/g,乙酸乙酯的总黄酮含量也较高,乙酸乙酯提取物中总酚含量最高,为106.05 mg/g。窝儿七的五种提取物的总黄酮、总酚含量与抗氧化活性有一定的相关性,其DDPH自由基清除能力为乙酸乙酯>正丁醇>70%乙醇>水>氯仿。ABTS自由基清除能力为乙酸乙酯>70%乙醇>正丁醇>氯仿>水。羟自由基清除能为乙酸乙酯>正丁醇>70%乙醇>氯仿>水。还原能力为乙酸乙酯>70%乙醇>氯仿>正丁醇>水。总抗氧化能力(T-AOC)为乙酸乙酯>正丁醇>70%乙醇>水>氯仿。结论:窝儿七的乙酸乙酯提取物最多,抗氧化活性最强,乙酸乙酯可作为抗氧化活性物质提取的最佳溶剂,为窝儿七综合开发提供实验依据,也为其抗氧化研究提供参考。     

阳荷提取物体外抗菌作用研究

目的:研究姜科姜属植物阳荷根茎乙醇提取物的体外抗菌活性.方法:运用乙醇渗漉法提取得到阳荷总提取物,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到不同极性部位;用滤纸片法对乙醇提取物及各萃取物进行体外抗菌活性测定,有抑菌作用的萃取物进一步用微量肉汤稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC).结果:阳荷根茎乙醇提取物、石油醚和氯仿萃取物具有抑制金黄色葡萄球菌等3种革兰阳性菌和大肠埃希菌等3种革兰阴性菌生长繁殖的活性,MIC值在312.5 ～1250 mg·L-1.总提取物对地衣芽孢杆菌、无乳链球菌和大肠埃希菌的MBC均为1250 mg· L-;石油醚和氯仿萃取物对6种测试菌株均有杀灭作用,MBC值在625～1250 mg·L-1.结论:阳荷根茎乙醇提取物及石油醚和氯仿萃取物能显著抑制金黄色葡萄球菌、地衣芽孢杆菌、无乳链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌的生长繁殖,具有明显的灭活作用.     

聚酰胺-大孔树脂联用纯化菊叶总黄酮初步研究

目的:初步研究聚酰胺-大孔树脂联用纯化菊叶总黄酮的方法和工艺。方法:首先用聚酰胺吸附,水洗除杂。然后加到大孔树脂柱中,用乙醇洗脱,测定总黄酮含量。结果:聚酰胺与大孔树脂联用可有效纯化菊叶中总黄酮。最佳工艺条件为:树脂选择X-5型,洗脱剂选择70%乙醇,提取液量(mL)与聚酰胺量(g)比例为1.5∶1,树脂(g)-提取液(mL)为4∶3,色谱柱径高比1∶20,洗脱液收集量为2 BV,总黄酮纯度达87.48%。结论:该工艺稳定性良好,为菊叶提取物研究与开发提供了一种思路。     

宝铎草提取物体外抗菌活性的研究

目的:研究宝铎草提取物的体外抗菌作用.方法:运用平板打孔法分析宝铎草提取物对常见病原性细菌和单细胞真菌的敏感性.采用微量液体稀释法检测宝铎草各提取物对常见病原性细菌和单细胞真菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).结果:宝铎草提取物,除水层外,对不同病原性细菌具有不同的抑制作用,其中水洗脱部分对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌均有抑菌作用,95％乙醇总提物(1∶40)和95％乙醇洗脱部分(1∶40)对金黄色葡萄球菌具有杀菌作用.而宝铎草水层提取物对细菌和单细胞真菌均未见明显抑制或杀灭作用,所有提取物对单细胞真菌亦均未见显著性作用.结论:宝铎草的部分提取物对所试细菌株有抑菌作用,而对单细胞真菌均未见明显的抑菌或杀灭作用.     

卷柏总黄酮纯化工艺研究

目的:研究聚酰胺富集卷柏总黄酮的工艺参数.方法:以总黄酮和阿曼托双黄酮的含量以及总黄酮的收率为考察指标,经聚酰胺吸附柱富集后,分别采用紫外分光光度法和高效液相色谱法测定.结果:纯化工艺条件为:卷柏提取物与聚酰胺比为50:3(mg/mL),树脂径高比为1:6,用10倍量柱体积的50%乙醇除杂,用6倍量柱体积的80%乙醇洗脱,洗脱流速为1.0 mL/min.结论:本法富集纯化卷柏总黄酮工艺稳定可行.