甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤后Nogo-A表达的影响

目的：探讨大剂量甲基强的松龙（MP）对急性脊髓损伤（SCI）大鼠脊髓组织中Nogo-A蛋白表达的影响。方法：将56只成年SD大鼠分为正常对照组（A组,n=8）、急性脊髓损伤组（B组,n=24）和急性脊髓损伤后大剂量MP治疗组（C组,n=24）,C组在损伤后早期从尾静脉注射大剂量MP治疗。分别在术后3、7、14d对B、C组大鼠后肢运动功能行BBB评分,再在各时间点处死动物,取受损节段脊髓行HE染色及免疫组化染色观察形态学变化和Nogo-A在脊髓组织中的分布特点;同时应用Western-blot方法测定各组相应时间点Nogo-A表达量,并与A组比较。结果：B、C组大鼠在损伤后各个时间点后肢运动功能均有一定程度的恢复,Nogo-A蛋白在各组大鼠脊髓组织中均呈阳性表达,分布于神经细胞的细胞浆和脊髓神经纤维周围呈包裹神经纤维的状态。B、C组各个时间点Nogo-A表达均显著高于A组（P〈0.05）,7d时最高,14d时的表达量仍高于正常组;C组在各个时间点的表达量显著低于B组,差异有显著性（P〈0.05）。结论：大鼠急性脊髓损伤后Nogo-A显著升高,早期应用大剂量MP对Nogo-A的表达具有明显的抑制作用。     

红花注射液对大鼠脊髓损伤后继发性损伤的影响

目的探讨脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后红花注射液对脊髓的保护效果。方法将18只SD大鼠随机分为假手术组（A组）,脊髓打击损伤组（B组）、红花溶液组（C组）,每组6只。观察3组大鼠SCI后1 h、24 h、48 h的脊髓组织病理学变化,检测这3个时间点乳酸（lactic acid,LD）含量、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活性、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量。结果术后C组LD含量、LDH活性比B组低,差异有统计学意义（P〈0.05）,特别是在术后48 h（P〈0.01）;与B组相比较,C组术后24 hMDA含量明显较低,SOD活性明显升高,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论红花注射液能减轻脊髓继发性损伤,对SCI后的脊髓神经功能具有一定的保护作用。     

实验性大鼠胚胎脊髓移植对损伤脊髓影响的观察

目的 建立了一个胚胎脊髓（ｆｅｔａｌ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ）组织的低温保存方法笔一个损伤移植模式。方法 通过病理学、组织化学和免疫组织化学的研究,选用胎龄１４天的Ｗｉｓｔａｒ大鼠,分离胚胎脊髓,逐步降温,最后置于液氮中保存。１５天后取出,快速复温,并植入损伤大鼠脊椎内。全部动物于伤后８周处死。结果 经过低温保存的移植物能够在异体脊髓内存活并与宿主组织融合,其在损伤移植区的胶质细胞增生少于对照组。     

外源性供氧对脊髓损伤后继发性脊髓水肿的影响

目的　观察外源性供氧对脊髓损伤组织学的影响。方法　采用Allen法于兔L2 椎体水平造成急性脊髓损伤。对照组不予治疗 ,携氧复合液治疗组和复合液治疗组兔分别在伤后 30min开始给药。于伤后 48h、3、7d、4周分别从各组中取 5只兔 ,进行脊髓组织含水量、丙二醛(MDA)及形态学观察。结果　伤后 48h、3、7d携氧复合液组伤段脊髓组织含水量分别为 (69.1 4±0 .92 ) %、(71 .93± 0 .87) %、(71 .63± 1 .0 1 ) % ;脊髓组织MDA含量分别为 (2 8.54± 5 .98) μmol/g、(2 7.81± 3 .64) μmol/g、(2 6.1 4± 4 .2 6) μmol/g,均显著低于对照组 (P <0 .0 1 )。组织形态学检查携氧复合液组的病理改变较对照组轻。结论　脊髓损伤后早期外源性供氧对继发性脊髓损伤有保护作用。     

bFGF对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响

目的 :探讨大鼠脊髓损伤后应用碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)对脊髓损伤区细胞凋亡的影响。方法 :利用Allen氏WD(weightdrop ,WD)技术 ,以 10 g× 2 .5cm致伤力造成SD大白鼠T8脊髓损伤模型 ,并于损伤平面以下蛛网膜下腔置细塑料导管。bFGF治疗组 (A组 )分别于术后即刻 1、2、4、8、12、2 4及 48h经导管注入bFGF溶液 2 0 μl(含bFGF10 0 u) ,以后每周经导管注入 2 0 μlbFGF ;对照组 (B组 )则在同时间注入等量生理盐水。损伤后 1、3、7、14、2 8d对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测 (TUNEL) ,采用计算机图像分析技术进行定量分析。结果 :A、B两组中均发现凋亡细胞 ,B组细胞凋亡率大于A组。结论 :bFGF能抑制脊髓损伤后脊髓损伤区的细胞凋亡。     

FTY720对大鼠急性脊髓损伤后RhoA表达的影响

目的观察大鼠急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后芬戈莫德(fingolimod,FTY720)对RhoA表达的影响,进一步探讨FTY720治疗SCI的可能机制。方法采用改良Allen’s法建立大鼠急性SCI模型。雌性SD大鼠75只,随机分为假手术组(n=15)、损伤组(n=30)和FTY720组(n=30)。FTY720组伤后30min一次性腹腔注射FTY7200.5mg/kg,假手术组和损伤组以相同方法给予浓度为0.9%的生理盐水。分别于伤后1天、3天、7天、14天及21天,应用RT-PCR和Western印迹法分别检测RhoA mRNA和RhoA蛋白的表达。结果损伤组RhoA mRNA和蛋白的表达于伤后3天开始明显增加,7天达到高峰,21天仍维持高水平表达;在同一时间点,与FTY720组和假手术组比较,差异有统计学意义(P0.05)。FTY720组伤后1天、3天和7天的RhoA表达高于假手术组(P0.05)。假手术组各时间点RhoA表达维持在较恒定水平。结论大鼠急性SCI后RhoA表达增加,FTY720可能通过抑制SCI后RhoA的表达,以达到减轻继发性SCI、促进脊髓神经功能恢复的目的。     

早期补镁对脊髓损伤后继发性脊髓水肿的影响

目的：探讨镁对脊髓损伤后继发性水肿的影响。方法：按改良的Ａｌｌｅｎ’ｓ重物打击法制备兔脊髓损伤模型,将动物分为５组,Ａ组为正常对照组;Ｂ、Ｄ组分别为损伤后２４ｈ和４８ｈ不用镁组;Ｃ、Ｅ组分别为损伤后２４ｈ及４８ｈ用镁组,于脊髓损伤后３０ｍｉｎ一次性给予硫酸镁（６００ｍｇ／ｋｇ,皮下注射）。分别取材测定伤段脊髓组织水、钙、镁含量及观察局部的组织病理学改变。结果：各损伤组脊髓组织含水量显著高于正常对照     

新生鼠和成年鼠脊髓损伤后胚胎脊髓移植对大鼠损伤脊髓功能恢复的影响

目的研究新生鼠和成年鼠脊髓损伤后胚胎脊髓移植对大鼠损伤脊髓功能恢复的影响。方法将新生鼠和成年鼠腰段脊髓半切洞损伤,取E14胚胎脊髓组织移植到损伤区,手术后4、8、12周,进行组织学检查,联合行为评分,感觉诱发电位,运动诱发电位检查。结果组织学检查发现移植的胚胎脊髓在宿主脊髓中存活。联合行为评分,感觉诱发电位,运动诱发电位潜峰时的恢复,新生鼠移植组均优于成鼠移植组(P<0.05)。结论通过各种功能检查(CBS,SEP,MEP)表明胚胎脊髓移植能够促进脊髓损伤后新生鼠和成鼠运动功能的恢复。     

脊髓损伤后大鼠骨细胞形态学特点

目的：探讨脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)后大鼠骨细胞形态学变化特点及在SCI后骨代谢改变中的意义。方法：20只3个月龄SD大鼠均分为SCI组与对照组。SCI组于T10椎体处完全横断脊髓；对照组仅行椎板切除术，6周后处死动物取材。透射电镜观察股骨近段超微结构。原位凋亡染色法计数股骨近段骨细胞凋亡指数。结果：SCI组骨细胞有4种改变：(1)细胞器减少，骨陷窝增大，絮状物质增多、凝聚以及骨陷窝壁嗜锇板层形成等骨细胞性溶骨表现；(2)退变相骨细胞表现为胞质和细胞器出现严重囊性改变如线粒体空泡化，细胞壁不完整，细胞器不清晰；(3)出现核固缩，细胞处于崩解状态为坏死的形态学改变；(4)异染色质凝集、边聚，细胞出芽起泡等典型凋亡样改变。SCI组小梁骨中骨细胞凋亡指数显著高于对照组(P＜0．01)。结论：骨细胞的溶骨、退变、坏死和凋亡样改变是SCI后骨细胞的形态学特征，也可能是SCI后骨代谢偶联失调的细胞学基础。     

甲强龙对大鼠急性脊髓损伤后OMgp表达的影响

目的探讨甲强龙对急性脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓组织中少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMgp)表达的影响。方法将80只SD大鼠分为A组(单纯椎板切除对照组)、B组(急性脊髓损伤组)和C组(急性脊髓损伤后甲强龙治疗组),C组在损伤后早期从尾静脉注射甲强龙治疗。对各组大鼠后肢运动功能行BBB评分评价神经功能状况;分别在术后1、3、7、14 d处死各组大鼠,分别取受损节段脊髓行免疫组化染色;应用实时荧光定量PCR技术(RealTime-PCR)方法观察OMgp mRNA的表达。结果 B、C组大鼠在损伤后各个时间点后肢运动功能均有一定程度的恢复;B、C组各个时间点OMgp mRNA表达均显著高于A组(P<0.05),7 d时最高;C组在各个时间点的表达量显著低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠急性脊髓损伤后OMgp显著升高,早期应甲强龙对OMgp的表达具有明显的抑制作用。     

Changes of intracellular calcium and the correlation with functional damage of the spinal cord after spinal cord injury

OBJECTIVE: To observe dynamic changes of intracellular calcium ([Ca(2+)]i) after spinal cord injury, and to study the relationship between the changes of [Ca(2+)]i and the functional damage of the spinal cord. METHODS: The rats were subjected to a spinal cord contusion by using a modified Allen's method. The [Ca(2+)]i in the injured segment of the spinal cord was measured by the technique of La(3+) blockage and atomic absorption spectroscopy at 1, 4, 8, 24, 72, and 168 hours after injury. The motor function on the inclined plane was measured at the same time. RESULTS: The spinal cord [Ca(2+)]i increased significantly (P<0.05 or P<0.01) aft er spinal cord injury. There was a significant correlation (P<0.05) between the changes of [Ca(2+)]i and the motor function. CONCLUSIONS: [Ca(2+)]i overload may play an important role in the pathogenesis of spinal cord injury.     

自噬蛋白p62在急性脊髓损伤大鼠脊髓组织中的表达

目的观察p62在早期急性脊髓损伤(SCI)模型大鼠脊髓组织中的表达变化,探讨p62在急性SCI的作用。方法将SD大鼠随机分为假手术组和造模后1、3、7、14 d组,每组6只。采用高空重物坠落击打方法造成大鼠SCI。采用Basso、Beattie、Bresnahan(BBB)评分法评估大鼠神经功能,取损伤的脊髓组织进行HE染色,观察病理学改变。通过实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法和免疫组织化学方法检测急性SCI后大鼠脊髓组织中p62的表达变化。结果造模后1、3、7、14 d组BBB评分分别为(2.00±0.89)分、(4.67±1.03)分、(7.83±0.75)分、(14.50±1.05)分,均低于假手术组(21.00分),差异有统计学意义(P 0.05)。造模后1、3、7、14 d组损伤的脊髓组织神经元和白质髓鞘发生肿胀,随时间的延长逐渐出现变性和坏死。造模后1、3、7、14 d组p62表达逐渐增加,并呈持续增长趋势。结论 p62在大鼠发生急性SCI后表达持续增加,提示p62在急性SCI后发挥一定作用。     

腺苷治疗大鼠脊髓损伤的初步研究

目的 通过观察大鼠脊髓损伤后内源性细胞外腺苷含量的变化以及外源性腺苷对脊髓损伤后脊髓组织细胞外钙离子和神经功能的影响,探讨腺苷在脊髓继发性损伤中的作用。 方法 ＳＤ大鼠５８只,制作成Ｔ１３脊髓腹侧压迫模型,用微透析技术每２０ｍｉｎ连续收集脊髓损伤后脊髓组织细胞外液,用高效液相色谱法仪紫外检测法检测细胞外液腺苷的含量;伤前１５ｍｉｎ蛛网膜下给予非特异性腺苷受体激动剂２－氯腺苷,伤后立即开始每１０ｍｉ     

大剂量甲基强的松龙对大鼠急性脊髓半切损伤的早期神经保护作用

目的研究大剂量甲基强的松龙（methylprednisolone,MP）对大鼠急性脊髓半切损伤的早期神经保护作用。方法 50只SD大鼠随机取10只仅行椎板切除,作为对照组。其余40只随机分为2组,脊髓半切损伤组及MP治疗组各20只。各组动物再随机平分为2个小组,分别在脊髓半切损伤后1d、7d进行BBB法神经功能评分、脊髓组织形态学观察、神经中丝（neurofilament NF）和胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）免疫组化测定。结果脊髓半切损伤后立即使用大剂量MP明显提高了伤后7d时MP治疗组的BBB评分;对损伤脊髓的组织形态学有明显改善;明显提高了NF的表达,抑制了GFAP的表达。结论早期大剂量使用MP对大鼠急性脊髓半切损伤有神经保护作用。     

神经毒素在脊髓损伤中的作用

目的 探讨神经毒素兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）和神经肽在脊髓损伤的作用。方法 应用高效液相色谱法检测脊髓损伤后伤段组织中谷氨酸（Ｇｌｕ）天门冬氨酸（Ａｓｐ）两种ＥＡＡ的含量变化；应用放射免疫分析技术测定脊髓损伤段组织中神经肽之一强腓肽ＤｙｎＡ１－１３含量的变化；观察了蛛网膜下腔注射Ｇｌｕ，ＤｙａｎＡ１－１３兴奋性氨基酸受体拮抗剂３－（２－羧基哌嗪）丙基－１－磷酸（ＣＰＰ），ＤｙｎＡ１－１３抗血清（Ａｎ－     

脊复康对急性脊髓损伤大鼠行为影响的观察

目的 探讨中药复方“脊复康”对急性脊髓损伤大鼠运动功能恢复的影响。方法 90只雄性SD成年大鼠在无菌手术下,造成第12胸髓右侧半横断损伤模型。术后随机分成4组,即脊复康(J)组、激素(M)组、补阳还五汤(Y)组、空白对照(B)组。J组术后经食管插管逐日灌喂脊复康颗粒剂溶液。M组术后腹腔注射甲基强的松龙,隔日1次,共5次;Y组灌喂补阳还五汤煎剂;B组灌喂等量生理盐水。在术后1d、3d、7d、14d、28d,采用BBB法对各组大鼠的运动功能进行评分。在3d、7d、15d,从每组随机抽取5只,做病理学检查。另取6只为正常对照(N)组。结果 在脊髓半横断损伤的实验中,伤后3周,损伤诱发的运动功能障碍,可以在相当的程度上恢复达到正常水平。伤后3dJ组的BBB分值较M和B组的高(P>0.05);伤后7d,J组的BBB分值较B组高(P<0.05);伤后2周时,J组的BBB分值与N组没有差异,而M和B组的与N组的有统计学差异。结论 在大鼠脊髓半横断损伤的实验中,投给脊复康可以加速其运动功能的恢复,其机制有待于进一步的探讨。     

继发性脊髓损伤的细胞凋亡研究现状

细胞凋亡，又称程序性细胞死亡，在继发性脊髓损伤过程中起着关键作用。本文对继发性脊髓损伤细胞凋亡的作用、诱导因素和防治途径作一综述。     

乌司他丁对急性脊髓伤神经细胞保护作用的实验研究

目的研究乌司他丁对急性脊髓损伤大鼠微环境调控的影响及神经功能的预防和保护作用。方法选用SD大鼠80只,采用改良Allen重物打击法制成脊髓损伤模型,随机分为4组：脊髓损伤组（SCI组,n=20）;使用乌司他丁组（U组,n=20）;使用甲基强的松龙组（M组,n=20）;乌司他丁＋甲基强的松龙联合用药组（U＋M组,n=20）,所有给药组在脊髓损伤后0．5h、4h、8h、24h、36h、48h、60h、72h给药。在脊髓损伤后24h、72h、1周、2周、3周5个时间段进行神经功能评分、脊髓病理形态学观察。结果使用乌司他丁可明显改善损伤脊髓的病理形态;神经功能评分明显增高。结论大鼠急性脊髓损伤后使用乌司他丁能有效的保护神经细胞,抑制细胞进一步衰亡。