关于黄芩的β-D-葡糖醛酸甙酶

作者曾对生药黄芩(Scutellariae Radix)β-D-葡糖醛酸甙酶(GUS)的纯化等予以报道,此次纯化GUS,在查明其各种性质的同时,探讨了其他生药中是否存在GUS活性。 将中国产干燥生药黄芩(300g)加工成粉末后,用100mM磷酸缓冲液(pH7.0)制成匀浆,分离硫铵(0%～40%),以二乙氨乙基琼脂糖凝胶高流速(DEAE-Sepharose Fast Flow)、PBE~(TM)94聚焦色谱法(Chromatofocusing)以及Sephacry-S-300等提纯出GUS,     

黄芩的黄芩甙分解酶(β-葡糖醛酸酶)

黄芩(scutellariae Radix)含有属类黄酮的葡萄糖醛酸的黄芩甙,经常在治疗胃脘堵塞并伴有呕吐等症的汉方方剂中配伍使用。经研究确认,将黄芩以冷水浸泡后,黄芩甙分解成黄芩黄素,认为这是由于酶反应而引起的。此次,作者根据黄芩浸出液中的黄芩甙及     

槲皮素葡糖醛酸苷对大鼠主动脉平滑肌细胞迁移及增殖的影响

槲皮素为多种食物中含有的多酚，具有抗氧化和抑制血小板聚集的作用，摄取槲皮素可预防动脉硬化。但是，经口摄取的槲皮素在吸收过程中，会与葡糖醛酸结合，以槲皮素3-O-β-D-葡糖醛酸苷（Q3GA）的形式存在血中。本次探讨了血小板衍生生长因子（PDGF）刺激对血管平滑肌细胞迁移、增殖以及细胞内信号传递的作用，同时探讨了Q3GA对此的影响。     

山奈酚在大鼠肝亚细胞体系和培养的肝细胞中与葡糖醛酸和硫酸的结合物

作者用雄性Wistar大鼠肝亚细胞体系和培养的肝细胞,研究了山柰酚的体内代谢。山柰酚100/μmol/L 与大鼠肝微粒体共同培养60 min,另将50/μmol/L的山柰酚与大鼠培养的肝细胞共同培养60 min,处理后     

山柰酚在大鼠肝亚细胞体系和培养的肝细胞中与葡糖醛酸和硫酸的结合物

作者用雄性Wistar大鼠肝亚细胞体系和培养的肝细胞，研究了山柰酚的体内代谢。     

硅胶柱色谱/RP-HPLC/LC-ESI-MS分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷

目的:建立分离纯化鉴定拳卷地钱中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的硅胶柱色谱/RP-HPLC/LC-ESI-MS方法.方法:拳卷地钱叶经过80%乙醇提取后,减压蒸馏,得粗提物.拳卷地钱叶粗提物用甲醇溶解后上硅胶柱,用甲醇-氯仿配比为25:1,25:2,25:3……2:25,1:25混合溶液洗脱,各洗脱液进行RP-HPLC分析,较纯的洗脱液进行LC-ESI-MS分析,为制备分离黄酮类化合物单体提供指导.结果:氯仿与甲醇配比为25:15、25:16、25:17、25:18的洗脱液经过RP-HPLC分析为单一组分,tR为12.1min,与对照品芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷共注射进行RP-HPLC实验,发现峰高增加,tR为12.1min,UV[λmax为336/296(sh)/267nm]和IR光谱与芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷基本一致.LC-ESI-MS测定结果表明,与对照品芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的分子量相同为446.结论:由此可以鉴定该洗脱组分为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷.     

LJ-22链球菌催化甘草甜素向18β-甘草次酸-3-O-β-D-葡糖醛酸的生物转化研究

甘草甜素(GL)是甘草的有效成分之一,具有类固醇作用及抗病毒、抗感染作用。近年研究表明,GL在人体肠道细菌的作用下,可转变为18β-甘草次酸(GA),或先转化为18β-甘草次酸-3-O-β-D-葡糖醛酸(GAMG),再转变为GA。本次对催化上述生化反应的酶及肠道细菌进行了研究。     

黄芩培养细胞的类黄酮代谢的研究

已从黄芩培养细胞中精制了参与黄芩甙代谢的β-葡糖醛酸酶及过氧化物酶,并正在明确这些酶的性质。本研究的目的是阐明黄芩甙代谢的生理作用。     

对黄芩培养细胞过氧化物酶的研究

已从黄芩(Scutellaria baicalensis)中精制了二种过氧化物酶(过氧化物酶-1、2),二种酶与内源性黄酮的代谢有关。本次研究的目的是明确过氧化物酶的生理功能。以MS培养基(BAP:0.5mg/L,2,4-D:0.5mg/L)培养的黄芩细胞,在0.1％酵母提取物或者     

HPLC测定苗药半截烂中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的含量

目的:建立高效液相色谱法测定半截烂中芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷含量的方法。方法:采用色谱柱:phenomenex-C18(4.6×150mm,10μm),流动相:0.05%磷酸水:乙腈(80:20,V/V),流速:1.0m L/min,柱温:35℃,检测波长λ=350nm。结果:芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的回归方程为Y=3058927.58X+61.97,r=0.99951,表明芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷在0.2-0.14μg范围内线性关系良好。结论:所建立的方法简便、准确、重现性好可做为的测定方法。     

黄芩中的千层纸黄素A对人宫颈癌细胞HeLa S3的作用

探讨了黄芩中的黄酮类化合物千层纸黄素A对人宫颈癌细胞HeLa S3的作用。 方法:用MEM+10% FCS的培养基培养HeLa S3细胞,接种于96孔微板(3 000个/孔),添加受试药物后第3d用荧光试剂alamar蓝检测细胞增殖抑制作用,并计算IC50。用琼脂糖凝胶电泳法分析DNA片段;Hoechst 33342染色观察核凝集;用荧光基质DEVD-AFC检测caspase-3酶的比活性。 结果:千层纸黄素A可抑制HeLa S3细胞增殖,IC50约为2mg/mL 。根据细胞呈圆形固缩的形态学变化,认为可能为细胞凋亡。剂量为2mg/mL时,第3d出现梯带与核固缩。caspase-3的酶活性经日增加。 …     

视神经节细胞的体外培养与纯化

进行大鼠视网膜神经节细胞体外培养及纯化的方法学研究.取出生72h内的SD大鼠乳鼠视网膜制成细胞悬液,放于已包被多聚鸟氨酸和层粘连蛋白(laminin,LN)的培养皿中,加20%EMDM血清培养液、于37℃、5%二氧化碳孵箱中培养,同时分别在混合培养的视网膜神经细胞中加入5′-溴-2′-脱氧脲苷(Brdu)和羊抗鼠IgG、小鼠抗大鼠Thy1.1抗体,于4小时,24小时,48小时,72小时观测细胞存活情况;并采用MTT法测定不同方法培养的视网膜细胞在不同时间的存活率,绘制细胞生长曲线.通过对不同方法培养的细胞观察可见,视网膜混合培养细胞和加入Brdu培养的细胞,于3～4小时开始贴壁,48小时开始伸出粗细长短不等的突起,72小时后突起增多,并伸长;加入羊抗鼠IgG、小鼠抗大鼠Thy1.1抗体的细胞,其呈多边形,大多数细胞质折光强,72小时后很少见到活细胞;混合培养细胞数量在48小时后增加约70%,加入Brdu后,混合培养的细胞数量在48小时无明显减少,纯化的视网膜神经细胞在48小时后明显减少.本实验通过用两种方法培养视网膜神经细胞发现,Brdu可抑制视网膜非神经细胞的增长,RGCs纯度为60-70%,采用羊抗鼠IGg和小鼠抗大鼠TIhy1.1抗体可起到纯化RGCs的目的,RGC纯度≥90%.     

黄芩苷及黄芩水提液对体外培养的滋养细胞生长的影响

目的:体外分离、培养人早孕绒毛细胞滋养层细胞(cytotrophoblast,CTB),并对其进行鉴定。研究黄芩苷及黄芩水提液对CTB细胞活力的影响。方法:复合酶消化法分离、培养CTB,HE染色及免疫细胞化学鉴定细胞,选取不同浓度的黄芩苷及黄芩水提液作用于CTB,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色实验分析TNF-α对CTB细胞活力的影响。结果:黄芩苷和黄芩水提液作用后的滋养细胞活性(A值)高于空白对照组,两药组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芩苷和黄芩水提液对滋养细胞的生长增值有促进作用,黄芩苷明显优于黄芩水提液。     

豆科植物中分离得到的齐墩果烯型三萜葡糖醛酸甙对大鼠肝脏细胞的保护作用与分子结构的关系

实验材料与方法:动物为6周龄雄性Wistar大鼠,化学物质脱氢大豆皂甙(Dehydrosoyasaponin)Ⅰ(2),羽扇豆皂甙(lupinoside)PA_4(3)和PA_1(5),comploside Ⅱ(4),subproside V(6),astragaloside Ⅷ(8),wistariasaponins YC_2(7)和YC_1(9)分别从豆科植物羽扇豆(Lupinus polyphyllus×arboreus)、扁茎黄芪,白花藤萝(Wistaria brachybotrys)中分离得到。保肝作用的研究方法与以前的方法相同,均采用体外分析法,由于丙氨酸氨基转移酶(ALT)的活性与免疫性肝     

HPLC同时测定野葛花中鸢尾黄素-7-O-木糖葡萄糖苷、鸢尾苷、鸢尾苷元的含量

目的:建立HPLC同时测定野葛花中鸢尾黄素-7-O-木糖葡萄糖苷、鸢尾苷、鸢尾苷元含量的方法。方法:采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液采用梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长265 nm,柱温35℃。结果:鸢尾黄素-7-O-木糖葡萄糖苷、鸢尾苷、鸢尾苷元的线性范围分别为0.14~1.40(r=0.999 4),0.20~2.02(r=0.999 3),0.10~1.04μg(r=0.999 1);平均回收率(n=6)分别为99.5%(RSD 1.8%),99.6%(RSD 1.7%),99.8%(RSD 1.9%)。结论:该方法简便、准确,重复性好,为野葛花药材的质量控制提供了实验依据。     

黄芩黄素对由柴胡皂苷诱导的C6大鼠神经胶质瘤细胞PGE_2释放的拮抗作用

一些中药方剂中同时使用柴胡和黄芩这两味药。柴胡皂苷是从柴胡中分离提取而得,黄芩黄素是黄芩中的一种黄酮类化合物。本研究观察了柴胡皂苷对C6大鼠神经胶质瘤细胞PGE_2释放的影响以及柴胡皂苷b_1与黄芩黄素间的相互作用。     

黄芩苷纳米胶束的制备、表征及其对MCF-7细胞抑制作用的研究

目的制备黄芩苷(baicalin,BCN)聚乙二醇维生素E琥珀酸酯(TPGS)纳米胶束(BCN-TPGS-PMs)以改善其溶解性和体外抗肿瘤效果。方法采用薄膜水化法制备BCN-TPGS-PMs;透射电子显微镜观察纳米胶束形态;粒度测定仪考察其粒径和Zeta电位;超速离心法考察制剂的包封率及载药量;动态膜透析法考察体外释药特性;四甲基偶氮唑盐(MTT)法考察其对人乳腺癌细胞(MCF-7)的抑制作用。结果所制备的BCN-TPGS-PMs平均粒径为(11.91±0.14)nm;载药量和包封率分别为(5.42±0.04)%和(95.83±7.34)%;在体外p H 7.4、6.5的磷酸盐缓冲液(PBS)中24 h内分别释放28.53%和35.06%;表明所制备胶束粒径较小且均一,体外释放具有一定缓释性。同时体外细胞毒性实验表明BCN-TPGS-PMs较BCN能够显著地抑制MCF-7细胞的增殖(P0.05)。结论所制备的BCN-TPGS-PMs粒径小,载药量高,稳定性好,能显著提高BCN的体外抗肿瘤效果。     

黄芩苷壳寡糖纳米粒的制备及其对MCF-7乳腺癌细胞的抑制作用研究

目的 制备负载黄芩苷的壳寡糖纳米粒，优化制备工艺，研究其对MCF-7乳腺癌细胞的抑制作用。方法 以黄芩苷为模型药物，采用离子凝胶法制备黄芩苷壳寡糖纳米粒。以包封率为指标，采用单因素考察壳寡糖溶液pH值、黄芩苷加入量、搅拌时间、壳寡糖加入量、三聚磷酸钠加入量等因素的影响，设计L₁₈(3⁵)正交试验进一步优化黄芩苷壳寡糖纳米粒的制备工艺；采用CCK8法对载药壳寡糖纳米粒在体外乳腺癌细胞株MCF-7的细胞抑制作用进行评价。结果 最佳制备工艺条件为：壳寡糖溶液pH值为4.5,黄芩苷加入量为1.4 mg,壳寡糖加入量为140 mg,三聚磷酸钠加入量为4 mg,搅拌时间为10 min。黄芩苷壳寡糖纳米粒包封率(82.87±1.54)%,载药量(6.01±0.24)%,平均粒径(63.2±2.7)nm, Zeta电位(+19.6±0.6)mV。透射电镜下纳米粒呈球形或类球形，形态较为完整，分布均匀。体外细胞抑制实验表明对MCF-7细胞的增殖抑制，黄芩苷壳寡糖纳米粒较黄芩苷高；且随着时间的延长和浓度的增加，两者的抑制率差异越来越显著(P<0.05)。结...