总姜黄素在大鼠体内的药动学研究

【目的】建立大鼠灌胃总姜黄素溶液后血浆中姜黄素的高效液相色谱（HPLC）测定方法，进行大鼠体内药动学研究。【方法】大鼠灌胃总姜黄素溶液后，不同时间眼底静脉丛取血，制备血浆，血浆样品经液-液萃取以后，以大黄素为内标，进行HPLC检测。色谱条件Hypersil C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-2．0％醋酸水溶液（46：54），检测波长为UV420nm。【结果】姜黄素的线性范围为2-300mg／L，最低定量限为2mg／L，日内、日间峰面积（RSD）分别≤5．08％和≤7．93％。【结论】此法灵敏、快速、准确，可用于大鼠血浆中姜黄素浓度的测定和临床前药代动力学研究。     

莪术中姜黄素在大鼠体内的药动学研究

目的研究莪术中姜黄素在大鼠体内的药动学。方法采用高效液相色谱法测定姜黄素的血药浓度。色谱柱:L ichrospher-5-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温:25℃;流动相:乙腈-5%醋酸水(45∶55);体积流量:1 mL/m in;检测波长:420 nm。结果姜黄素在6.5~104μg/mL与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 5)。平均回收率为98.5%,RSD为2.41%(n=5)。采用药动学计算程序处理,姜黄素的药动学参数:ka为0.53/h、ke为0.10/h、t1/2ka为1.32 h、t1/2k为6.89 h、tpeak为3.89 h、Cm ax为93.15 ng/mL、AUC为1 369.38 ng/mL。结论本法稳定、简单、可靠,可用于姜黄素的血药浓度分析及其药动学研究。     

对乙酰氨基酚在大鼠体内药动学研究

目的应用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定大鼠血浆中对乙酰氨基酚浓度,研究单剂量口服不同剂量对乙酰氨基酚片在大鼠体内的药代动力学。方法3组SD大鼠分别按体重单剂量口服对乙酰氨基酚片300 mg/kg、600 mg/kg、1 200 mg/kg后,采用RP-HPLC测定血浆中药物的浓度,绘制血药浓度-时间曲线,计算其药代动力学参数。结果3个剂量组的对乙酰氨基酚药-时曲线均符合口服吸收的一级动力学二室模型,主要药代动力学参数：Tmax分别为（0.78±0.17）h、（1.07±0.12）h、（1.19±0.12）h;Cmax分别为（158.99±26.08）μg/ml、（226.26±20.38）μg/ml、（402.95±86.46）μg/ml;T1/2kα分别为（0.24±0.09）h、（0.39±0.11）h、（0.43±0.14）h;T1/2ke分别为（3.78±0.33）h、（3.66±0.32）h、（4.33±0.47）h;AUC0→24分别为（718.71±143.03）μg·h^-1·ml^-1（1 578.53±246.76）μg·h^-1·ml^-1（3 734.67±665.58）μg·h^-1·ml^-1AUC0→∞分别为（757.16±155.29）μg·h^-1·ml^-1（1 594.61±247.11）μg·h^-1·ml^-1（3 847.99±692.03）μg·h^-1·ml^-1结论所建立RP-HPLC法能够准确地测定对乙酰氨基酚血药浓度,能满足药代动力学的研究需求;低剂量组和中剂量组的药代动力学过程基本相似,但高剂量组则与上述两组则有所不同,这可能与其剂量过高有关。     

不同溶媒对姜黄素在大鼠体内药动学的影响

目的 考察不同溶媒对姜黄素在大鼠体内药动学的影响.方法 SD大鼠随机分成2组,分别按剂量200 mg/kg灌胃给予姜黄素水混悬液和姜黄素PEG-400混合溶剂(PEG 400-吐温80-纯水,体积比5:1:4)溶液,采用LC-MS/MS法测定血浆中姜黄素的血药浓度,采用DAS2.0软件对数据进行分析.结果 LC-MS/MS测定时,姜黄素血药浓度在1～1000 ng/mL范围内线性关系良好,提取回收率为92.76％～109.75％;灌胃姜黄素水混悬液和姜黄素PEG-400混合溶剂在大鼠体内的Tmax、Cmax等药动学参数之间的差异无统计学意义;在姜黄素水混悬液组出现重吸收峰,致其AUC显著高于姜黄素PEG-400混合溶剂组(提高93％,P<0.05).结论 LC-MS/MS测定姜黄素血药浓度方法灵敏、重复性良好;2种溶媒不影响大鼠灌胃姜黄素的Tmax、Cmax;相比PEG-400混合溶剂组,水混悬液组大鼠体内姜黄素吸收明显增多.     

去甲氧基姜黄素羟丙基-β-环糊精磷脂复合物在大鼠体内药动学研究

目的 比较去甲氧基姜黄素羟丙基-β-环糊精磷脂复合物、去甲氧基姜黄素羟丙基-β-环糊精包合物、去甲氧基姜黄素磷脂复合物、去甲氧基姜黄素原料药在大鼠体内的药代学性质,探讨去甲氧基姜黄素羟丙基-β-环糊精磷脂复合物作为药物载体的优势。 方法 50 mg/mL(以去甲氧基姜黄素原料药计)剂量SD大鼠口服灌胃给药制剂及游离药物后,不同时间点于大鼠眼底静脉丛取血。采用高效液相法(HPLC)测定血浆中去甲氧基姜黄素的浓度。结果 去甲氧基姜黄素羟丙基-β-环糊精磷脂复合物的AUC 0-∞ (μg/L*h)为(1424.87±258.62),较原料药去甲氧基姜黄素(370.58±2.76 ),去甲氧基姜黄素磷脂复合物(716.17±123.18),去甲氧基姜黄素羟丙基-β-环糊精包合物(1009.35±138.64),均有有所提高,分别为其3.84、1.98、1.41倍。结论 去甲氧基姜黄素羟丙基-β-环糊精磷脂复合物较单一的磷脂复合物或羟丙基-β-环糊精包合物更能促进药物的吸收,有利于提高药物的生物利用度。     

小鼠血浆中姜黄素的含量测定及药动学研究

目的 建立血浆中姜黄素含量测定的HPLC,并研究姜黄素静注后在小鼠体内的药动学行为.方法 血浆样品用乙腈沉淀蛋白后,采用Lichrospher-C18分析柱(4.6 mm&#215;250 mm,5 μm),柱温:30 ℃;流动相:甲醇-5%醋酸溶液(85:15);流速:0.5 mL&#183;min-1;检测波长:420 nm.结果 本法可将姜黄素与其他内源性干扰成分成功分离.在0.25～10.0 mg&#183;L-1内,测定方法具有良好的线性关系;萃取回收率为64.91%,加样回收率为93.10%;日内、日间精密度RSD均小于10%.小鼠静注姜黄素后药动学行为符合三室模型,主要药动学参数为:t1/2pi 0.42 min,t1/2α 16.2 min,t1/2β 73.82 h,CL 1.22 L&#183;h-1.结论 所建立的姜黄素体内血药浓度测定方法可行,姜黄素静注后在小鼠体内分布消除迅速.     

姜黄素脂质体在大鼠体内药代动力学研究

目的研究姜黄素脂质体口服液在大鼠体内的药代动力学行为。并与游离姜黄素溶液进行比较,评价姜黄素脂质体药代动力学特征。方法大鼠灌胃给药,摘眼球取血,HPLC测定血药浓度;采用3P87药代软件模拟房室模型并计算药代动力学参数。结果当姜黄素的给药量1次接近300 mg/kg时,其药代动力学过程为非线性动力学过程。结论姜黄素脂质体口服液比姜黄素混悬液入血速度明显加快,有利于机体的吸收,并且消除减慢,血液中浓度高,在组织中分布广。     

毛兰素注射液在大鼠体内药动学研究

目的 阐明毛兰素注射液在SD大鼠体内药动学规律。方法 SD大鼠分别单次和隔天、每隔一个半衰期一次多剂量静脉注射毛兰素注射液。采用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)测定大鼠静脉注射后不同时间大鼠血浆中毛兰素的血药浓度。结果 大鼠单次静脉注射25,50,100 mg·kg^-1毛兰素注射液的主要药动学参数为：T_1/2β分别为3.66,3.75,3.89 h; AUC_0-12分别为1 453.0,3 041.6,6 731.6 ng·mL^-1·h;AUC_0-∞分别为1 462.0,3 077.3,6 788.7 ng·mL^-1·h;Vd分别为11.67,10.37,3.38 L·kg^-1;CL分别为0.049,0.089,0.024 L·kg^-1·h^-1;MRT分别为0.18,0.28,0.21 h;50 mg·kg^-1剂量的毛兰素注射液隔日给药5次其药动学参数与单次给药相近;而50 mg·kg^-1剂量的毛兰素注射液每隔一个半衰期一次给药5次的T_1/2β为5.43 h,AUC_(S0)(0-t)为9 800.8 ng·mL^-1·h。结论 毛兰素注射液在大鼠体内的动力学过程与剂量相关,毛兰素注射液单剂量给药的体内药动学符合开放型二房室模型,T_1/2β与给药剂量与关,表明毛兰素在大鼠体内的消除过程符合一级动力学规律。隔日多剂量给药的消除过程亦符合一级动力学规律;而每隔一个半衰期一次多剂量给予50 mg·kg^-1剂量的毛兰素其在大鼠体内则呈非线性消除。     

口服姜黄素脂质体制备及其大鼠体内药动学考察

目的制备卡波姆包衣姜黄素脂质体,并考察其在大鼠体内的药物动力学。方法采用薄膜分散法制备姜黄素脂质体,通过孵育法对姜黄素脂质体进行卡波姆包衣。采用微柱离心法测定姜黄素脂质体包衣前后包封率的变化。姜黄素脂质体大鼠口服给药后,以高效液相色谱（HPLC）法测定大鼠血浆中的药物浓度。结果脂质体包衣后包封率略有下降,姜黄素脂质体大鼠口服给药后药物动力学呈双室模型特征,相对生物利用度F（%）为281%,是普通脂质体的2.22倍。结论姜黄素脂质体经卡波姆包衣可明显提高姜黄素的口服生物利用度,药物峰浓度显著增加。     

杜鹃素在大鼠体内的药动学研究

目的 研究杜鹃素在正常大鼠体内的药动学特征。方法 杜鹃素单剂量ig给予大鼠后,采用HPLC法测定给药后不同时间点大鼠血浆中的杜鹃素,通过DAS软件程序模拟计算,得出杜鹃素在大鼠体内相应的药动学参数。结果 杜鹃素在大鼠体内的药动学模型符合二室模型,主要药动学参数为：t_1/2α＝（0.33±0.10）h,t_1/2β＝（15.22±8.98）h,CL/F＝（14.89±3.45）L/(h?kg),C_max＝（1.61±0.14）mg/L,T_max＝（0.25±0.01）h,MRT_(0-t)＝（2.35±0.08）h,AUC_(0-t)＝（3.06±0.16）mg?h/L。结论 本研究建立的HPLC方法专属性强,简便、准确,可用于杜鹃素在大鼠体内的药动学研究;大鼠ig给予杜鹃素后,其在血浆中分布较快,半衰期较短。     

HPLC法测定姜黄素明胶微球中姜黄素的含量

目的:建立测定姜黄素明胶微球含量的有效方法.方法:采用药效液相色谱法测定姜黄素含量,色谱柱为SinochromODS-APC18柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相为乙腈-5%冰醋酸(55:45);流速为1 ml/min;检测波长为425 nm.结果:本方法测定姜黄素专属性强,药物在0.5～32μg/ml浓...     

咖啡因的大鼠在体肠吸收动力学研究

目的:探讨咖啡因在大鼠各肠段的吸收动力学特征.方法:采用大鼠在体小肠回流装置,在浅麻醉状态下,主要从吸收部位、药物浓度、pH值等3方面对咖啡因的肠段吸收特性进行研究.以UV法和HPLC法分别测定酚红和咖啡因的含量.结果:咖啡因在小肠的吸收速率常数(Ka)在药物浓度为2.5、5、10、25 mg/L 时分别为0.252、0.247、0.304、0.232 h-1;在pH值为7.8、6.8、5.4时分别为0.267、0.274、0.247 h-1 ;在十二指肠、空肠、回肠和结肠时分别为0.112 0、0.099 6、0.095 5、0.069 5 h-1.结论:一定范围的药物浓度对咖啡因Ka无影响;在pH7.8～5.4范围内,药物的Ka无显著变化;药物在十二指肠、空肠和回肠的吸收较好,在结肠的吸收较差;咖啡因在肠道的吸收呈一级动力学过程,吸收机制为被动扩散.     

姜黄素对人肝细胞氧化应激及胰岛素抵抗的影响

目的 采用葡萄糖氧化酶(GO)制备人肝细胞(LO2)氧化应激及胰岛素抵抗模型,观察姜黄素对LO2中氧化应激水平及胰岛素抵抗的影响.方法 将人肝细胞LO2分成对照组、模型组、干预组.对照组正常培养,未给予GO和姜黄素干预,模型组先加入不含姜黄素的细胞培养液培养12 h,然后加入100 mU/ml GO干预2 h,制备细胞氧化应激模型;干预组加入含30 μmol/L姜黄素的培养液干预12 h,然后给予100 mU/ml GO干预2 h.免疫荧光法观察LO2细胞Nrf2核转位情况,分光光度法检测细胞丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平,速率法检测细胞培养液AST和ALT的水平,流式细胞术检测细胞内ROS水平的变化.葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)检测上清液中葡萄糖的含量.结果 ①模型组MDA、AST、ALT、ROS阳性细胞荧光强度较对照组显著升高(P<0.01),干预组MDA、AST、ALT、ROS阳性细胞荧光强度较模型组显著降低(P<0.01);模型组GSH较对照组显著降低(P<0.01),干预组GSH较模型组显著升高(P<0.01).②姜黄素能够诱导Nrf2的核转位,12 h作用优于6 h.③模型组葡萄糖水平较对照组显著增高(P<0.01),干预组葡萄糖水平较模型组显著降低(P<0.01).结论 姜黄素能够降低细胞内活性氧的水平,减轻细胞氧化应激损伤,进而改善肝细胞胰岛素抵抗.     

姜黄素对卵巢癌微血管内皮细胞生长及乙酰肝素酶表达的影响

目的 探讨姜黄素对卵巢癌微血管内皮细胞体外生长及乙酰肝素酶表达的影响.方法 体外培养卵巢癌微血管内皮细胞,分为正常对照组和姜黄素组(浓度分别为2、10、50、250μg/ml),观察时间为加入姜黄素共孵育后24、48、72 h.MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期变化,免疫荧光法和RT-PCR法检测内皮细胞乙酰肝素酶表达,生化法检测细胞上清液丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氧酶(LDH)活力.结果 姜黄素组细胞生长抑制率增加,有显著的剂量依赖效应(P<0.01).姜黄素组增殖指数显著下降(P<0.01),乙酰肝素酶mRNA水平和蛋白水平显著下降(P<0.01),细胞培养上清液MDA水平及LDH活力显著升高(P<0.01).结论 姜黄素(2～250μg/ml)能显著抑制人卵巢癌微血管内皮细胞增殖活性,降低乙酰肝素酶mRNA转录和蛋白表达.     

姜黄素抗肾纤维化的分子生物学机制实验研究

目的 探讨姜黄素抗肾纤维化的分子生物学机制,为临床治疗提供可靠的实验依据.方法 以人肾小管上皮细胞(HKC)为研究对象,采用不同浓度的姜黄素(0、0.780、1.563、3.125、6.250、12.500、25.000、50.000和100.000 μmol/L)刺激HKC 72 h,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,并应用MTT比色法检测姜黄素对HKC生长的影响;应用不同浓度TGF-β1(0、1、5、10 ng/mL)单独或联合姜黄素(6.250、12.500、25.000、50.000 μmol/L和100.000 μmol/L)共同刺激HKC细胞72 h,观察细胞形态变化,应用逆转录PCR(RT-PCR)检测TGF-β1、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)和Ⅰ型胶原基因表达变化.结果 HKC贴壁生长,呈铺路石样外观.姜黄素刺激对细胞形态无影响;TGF-β1刺激能明显促进细胞由上皮样形态向纤维样细胞形态转化,且发生形态转变的细胞数量和TGF-β1基因表达呈TGF-β1浓度依赖性增加(P＜0.05,P＜0.01);MTT结果显示:姜黄素在3.125～25.000 tmol/L浓度范围内,能显著促进HKC增殖(P＜0.05,P＜0.01);姜黄素能对抗TGF-β1诱导的细胞形态转变,以12.500～50.000 μmol/L的姜黄素作用最明显,同时,下调TGF-βi基因和蛋白的表达,相反上调BMP-7基因和蛋白表达,并伴随着Ⅰ型胶原基因和蛋白的表达下降(P＜0.05,P＜0.01).结论 姜黄素能促进HKC增殖并维持其表型,能对抗TGF-β1诱导的HKC向梭形细胞转化,抑制细胞上皮TGF-β1和Ⅰ型胶原的表达,而促进BMP-7表达.     

姜黄素对过氧化氢诱导的大鼠心肌细胞MCP-1表达的影响

目的:观察姜黄素(curcumine)对过氧化氢诱导的大鼠心肌细胞MCP-1表达的影响,探讨姜黄素在心肌细胞氧化应激中作用的可能机制。方法:以H2O2处理心肌细胞,构建心肌氧化损伤模型。并用姜黄素及H2O2共孵育心肌细胞,采用免疫印迹(Western blot)检测干预后不同时间MCP-1蛋白表达。结果:在干预后4、8、12、24、48h,H2O2组心肌细胞表达的MCP-1明显高于空白对照组(P<0.05),加入姜黄素共孵育后,各个时间点MCP-1的表达都明显下降(P<0.05)。结论:H2O2能诱导心肌细胞MCP-1蛋白表达,而姜黄素对H2O2诱导的心肌细胞MCP-1表达具有抑制作用,可能是其抗氧化应激的机制之一。     

高效液相色谱法同时测定中毒患者血清中5种精神活性物质的浓度

目的建立可同时测定人血清中利培酮、9-羟利培酮、氯氮平、去甲氯氮平和瑞波西汀5种药物浓度的高效液相色谱-紫外检测法,并将该方法用于临床急性精神药物中毒患者的血液样本分析。方法以乙醚为溶剂进行一步液液萃取,待测物与内标帕罗西汀在Inertsil ODS-3柱,乙腈∶甲醇∶正丁胺∶冰醋酸∶去离子水(20∶2.87∶1.07∶1∶34.29)条件下可以基线分离。线性范围100～1 600 ng/mL,最低检测限25μg/L(S/N=10)。结果本方法批内精密度为3.1%～15.6%,批间精密度为5.7%～18.4%;批内准确度为0.1%～8.7%,批间准确度为0.3%～13.3%。常见精神科药物不干扰待测药物和内标。结论本方法简单、特异性好,可应用于急诊患者药物中毒检测。     

不同工艺大黄提取物在大鼠体内的药动学研究

目的以大黄酸为指标,进行大黄不同提取物的药动学研究,对大黄工艺优化提供科学依据。方法于大鼠ig大黄不同提取物后不同时间点取血浆,采用LC-M S法建立大黄酸血药浓度的测定方法,经3P 87软件计算得药动学参数。结果大鼠血浆中大黄酸在2.0~30μg/mL线性关系良好,ig大黄酸体内药时过程可用二室开放模型描述。结论以AUC为指标,SFE-CO2萃取 树脂精制产物工艺组最佳,SFE-CO2萃取组次之。     

Comparison of liquid-liquid extraction-thin layer chromatography with solid-phase extraction-high-performance thin layer chromatography in detection of urinary morphine

Liquid-liquid extraction-thin layer chromatography (LLE-TLC) has been a common and routine combined method for detection of drugs in biological materials.Solid-phase extraction (SPE) is gradually replacing the traditional LLE method.High performance thin layer chromatography (HPTLC) has several advantages over TLC.The present work studied the higher efficiency of a new SPE-HPTLC method over that of a routine LLE-TLC method,in extraction and detection of urinary morphine.Fifty-eight urine samples,primarily i...