WWOX基因与肿瘤的相关性研究进展

正目前临床认为肿瘤属于基因性疾病,原癌基因激活、抑癌基因功能丧失以及一些修饰基因功能改变,共同导致肿瘤发生、发展,其中抑癌基因失活被认为是非常重要致癌因素。WWOX是新近发现的一个抑癌基因,定位于人常染色体普通脆性位点FRA16D(16q23-32q24.1)处。近年有研究证实,染色体脆性位点抑癌基因在致癌环境中暴露,极易引起DNA损伤致基因失活,促进肿瘤发生、发展[1]。诸多实验表明,     

PCR检测原发性肝细胞癌WWOX基因表达及意义

目的检测染色体普通型脆性位点FRA16D(16q23.3-q24.1)上WWOX(WW domain containing oxidoreductase)基因在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及意义。方法用RT-PCR、荧光定量PCR方法分别对40例原发性肝细胞癌癌组织(以下简称肝癌组织)、癌旁组织中WWOX基因的Δ6-8变异情况及其mRNA表达差异进行检测。结果WWOX mRNA在肝癌组织的表达(0.318±0.0559)显著低于癌旁组织(1.0),P<0.05;而且在肝癌组织中Δ6-8变异体的出现频率为20%(8/40),显著高于癌旁组织2.5%(1/40),P<0.05。结论WWOX基因的低表达、变异可能在肝癌的发生发展中起重要作用,并有可能作为肝癌的早期诊断指标之一。     

脆性组氨酸三联体基因与头颈部肿瘤

1996年，Ohta等利用外显子捕获法(exon trapping experiment)从上皮癌细胞系3p14．2区域克隆出一个候选的抑癌基因，该基因包含染色体脆性部位FRA3B，并含有编码组氨酸三联体的功能区，故命名为脆性组氨酸三联体基因(fragile histidine triad，FHIT)，它是第一个将染色体脆性位点与肿瘤相联系的分子学证据。随后的研究发现，FHIT基因在人类许多肿瘤组织或细胞系中呈现高频率的异常，与肿瘤的发生发展有关，提示可能为一抑癌基因，成为近年来肿瘤发生及肿瘤特异性基因研究的焦点。     

FHIT基因与肿瘤的研究进展

1996年Ohta等利用外显子捕捉法在人类染色体3P14．2处确定了1个新的基因。该基因编码的蛋白质与具有组氨酸三联体结构的HIT（histidinetriad）蛋白高度同源，又因为该基因跨越脆性位点，故命名为脆性组氨酸三联体（FHIT）。近年来大量研究表明，FHIT基因在人类许多恶性肿瘤组织以及多种恶性肿瘤细胞系中存在异常。FHIT转录产物异常及FHIT蛋白表达缺失或减少已在多种原发肿瘤及肿瘤细胞株中得到证实，尤其在和环境致癌因素密切相关的肿瘤，如胃癌、肺癌、食管癌、宫颈癌、肝癌等病变早期即可有FHIT基因异常。     

FHIT基因与宫颈癌

宫颈癌是发展中国家妇女死亡的主要原因之一，其中高危HPV感染在宫颈癌发生中起重要作用，但一般认为高危HPV感染常伴有抑癌基因的失活或癌基因的活化才可引起宫颈癌变。FHIT是近年发现的抑癌基因，该基因跨越FRA3B脆性位点，FRA3B脆性位点是HPV16整合部位之一，故宫颈癌中FHIT失活与HPV感染的关系成为研究的热点，下面就FHIT在宫颈癌中研究状况及其与HPV感染的关系作一综述。     

染色体脆性位点以及全新普通型脆性位点基因FATS的研究进展

染色体脆性位点(fragile site)是正常基因组中位点特异的不稳定区域,包括88个普通型脆性位点(common fragile site,CFS)和39个稀有型脆性位点(rare fragile site),稀有型脆性位点与肿瘤的关系并不明确,普通型脆性位点与多种肿瘤基因组变异位点相一致,它们与肿瘤的发生发展密切相关,但至今多数普通型脆性位点的分子基础仍不清楚。FATS(fragile-site associated tumor suppressor)是最新发现的普通型脆性位点基因,是具有重要生物学功能的肿瘤分子标记物。本文对染色体脆性位点以及全新普通型脆性位点基因FATS的研究进展进行综述。     

肿瘤抑制基因WWOX转染MDA-MB-231细胞系的实验研究

目的探讨肿瘤抑制基因WWOX与乳腺癌疾病相关性,为进一步研究WWOX基因的作用机制及功能奠定基础。方法构建真核表达载体pcDNA4．0／Myc—His-WWOX,并转染至MDA．MB．231细胞中,采用RT-PCR及Westernblot方法,检测WWOXmRNA及融合蛋白在MDA-MB-231细胞中的表达。结果测序结果显示,RT-PCR法获得的WWOX序列与GenBank中报道的一致。真核表达载体pcDNA4．0／Myc．His—WWOX转染MDA—MB-231细胞48h后,从RT-PCR及Westernblot结果中观察到WWOX基因的有效转录。结论成功构建了肿瘤抑制基因WWOX真核表达载体pcDNA4．0／Myc．His—WWOX,为进一步研究WWOX在乳腺癌发生和进展中的作用及其靶向基因治疗奠定了实验基础。     

肿瘤抑制基因P16与恶性血液病的研究现状

P16基因是一多肿瘤抑制基因,已定位于人类染色体9P21,编码的核磷酸蛋白P16能调节周期素D/cDK4,防止细胞增生。已发现在大多数恶性血液病及恶性肿瘤中有P16基因的缺失或突变。说明P16基因的失活与肿瘤的发生、发展及恶化有着极为密切的关系。     

WWOX蛋白和ErbB2蛋白以及Ki67在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的 探讨WWOX基因蛋白、ErbB2蛋白以及Ki67在非小细胞肺癌组织中的表达及其与细胞增殖之间的关系.方法 用免疫组化方法 检测81例非小细胞肺癌患者(50例鳞癌,31例腺癌)的肺癌组织以及其中20例患者癌旁正常组织中wwOX基因蛋白、ErbB2蛋白的表达,并分析其与各临床病理指标及其与细胞增殖之间的关系.结果 WWOX基因在72.8%(59/81)的非小细胞肺癌中失表达或表达减少,而在相邻正常肺组织中有80.0%(16/20)正常表达(失表达率20.0%).WWOX基因的表达与组织类型、细胞分化程度、淋巴结转移密切相关(X2=5.44,P=0.019;X2=4.740,P=0.029;X2=4.51,P=0.034),在鳞癌和低分化癌中WWOX基因失表达率或表达减少率较高.肺癌中ErbB2的过度表达与肺癌的临床分期、淋巴结转移相关(X2=6.90,P=0.009;X2=5.68,P=0.017),WWOX蛋白阳性表达与ErbB2负相关(r=-0.239,P<0.05).细胞增殖指数越高,WWOX基因表达越少,二者呈负相关(r=-0.252,P<0.05).结论 WWOX蛋白表达的缺失在肺癌的发生中有一定的作用且与肿瘤的恶性侵袭有关.WWOX蛋白的低表达与ErbB2的过表达可以协同判断非小细胞肺癌的预后较差.     

RASSF1基因与肿瘤的关系

RASSF1基因位于染色体3p21．3，其转录本RASSF1A已被确认为一种候选肿瘤抑制基因，在多种实体肿瘤中表达异常，参与细胞周期和细胞凋亡的调控，并抑制细胞生长，但作用机理尚未阐明。     

P16基因与人类血液系统肿瘤

P16基因是新近发现的一种肿瘤抑制基因,位于人类染色体9P21上,其表达产物P16蛋白系细胞周期依赖激酶4抑制剂(CDK4I)。现已表明,在人类多种组织类型的肿瘤中存在P16基因的缺失和突变,在人类血液系统恶性肿瘤中,尤以急性淋巴细胞白血病中P16基因的纯合子缺失常见。     

WWOX蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的通过WWOX蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）癌灶与癌旁正常组织中表达的比较,探讨WWOX蛋白在NSCLC发生、发展中的作用。方法用免疫组化elivision法检N51例NSCLC组织标本中WWOX蛋白的表达,与20例癌旁正常组织标本作对照,并分析WWOX蛋白与NSCLC患者年龄、性别、组织分化程度、病理类型、吸烟及淋巴结转移等关系。结果WWOX蛋白在NSCLC组织中表达的阳性率25．49％（13／51）,癌旁正常组织中表达的阳性率85．0％（17／20）,二者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。WWOX蛋白阳性率与NSCLC组织分化程度、病理类型、吸烟、有无淋巴结转移有相关关系,而与患者的年龄、性别及肿瘤TNM分期无相关性。结论WWOX蛋自在NSCLC组织中表达明显低于癌旁正常组织,WWOX蛋白的表达与NSCLC的多种重要临床病理预后因素相关,有望成为判断NSCLC临床发展的分子标记。     

鼻咽癌患者组织中WWOX和MDR1基因的表达

目的探讨WWOX基因和MDR1基因在鼻咽癌患者中的表达及WWOX基因下调的机制。方法采用荧光相对定量RT-PCR法检测89例鼻咽癌患者(实验组)和61例慢性鼻炎患者(对照组)鼻咽部组织中MDR1和WWOX mRNA表达水平,并用甲基化特异性PCR(MSP)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析WWOX mRNA表达下调的机制。结果与对照组比较,实验组WWOX mRNA表达水平明显降低,MDR1 mRNA表达水平明显升高(P0.01)。实验组临床分期Ⅲ~Ⅳ期患者较Ⅰ~Ⅱ期患者,低分化患者较高分化患者的WWOX mRNA表达量均明显降低(P均0.01)。实验组低分化者较高分化者MDR1 mRNA表达量明显升高(P0.01)。实验组WWOX基因启动子甲基化程度明显高于对照组(t=7.002,P0.01),且WWOX mRNA与启动子甲基化程度呈负相关(r=-0.594,P0.01)。与对照组比较,实验组WWOX基因D16S504、16S3096、D16S3029微卫星位点杂合性缺失状态(LOH)明显升高(P0.01)。WWOX mRNA与该基因LOH呈负相关(r=-0.364,P=0.013)。结论启动子甲基化是鼻咽癌患者WWOX抑癌基因表达下调的原因。MDR1基因的上调表达与鼻咽癌的组织学分化关系密切。     

FHIT基因与肝癌的关系

脆性组氨酸三体(FHrr)基因是将脆性位点与肿瘤基因的变异联系起来的抑癌基因。FHIT基因在许多肿瘤中出现突变和表达缺失。转染FHIT基因能够抑制很多肿瘤细胞增殖，诱导其发生凋亡，对肿瘤细胞的恶性表型具有一定程度的逆转作用。虽然在肝细胞中也有因FHIT基因可变性剪接导致其外显子缺失以及FHIT蛋白表达异常的现象，但是在肝癌中出现的概率更高。在肝癌和肝硬化组织中均发现有FHIT基因外显子5—7和外显子5—8的缺失现象，但在正常肝组织未发现。在多种因素诱导的大鼠肝癌发生和发展过程中也发现有明显的FHIT基因异常。     

牙龈鳞癌中WWOX基因的表达及其临床意义

目的：研究WWOX基因在牙龈鳞癌组织中的表达及意义。方法：应用免疫组化SP法检测70例牙龈鳞癌组织中WWOX基因的表达，并与临床病理指标结合进行分析。结果：牙龈鳞癌组织中ww0X基因的阳性率为27．14％。WWOX基因的表达与牙龈鳞癌的病理分级、淋巴结转移有相关性（P〈0．05），与临床分期明显相关（P〈0．05）。WWOX基因在牙龈鳞癌中的表达呈负相关性。结论：WWOX基因参与牙龈鳞癌的发生发展过程，可作为评估牙龈鳞癌生物学行为的一项指标，用于识别高危转移和不良预后者及为判断其生物学特性提供可靠的指标。     

5-Aza-2＇-deoxycytidine对肺癌A549细胞WWOX基因甲基化状态及其生物学行为的影响

【目的】探讨5-Aza-2＇-deoxycytidine（5-Aza-CdR）对肺癌 A549细胞 WWOX基因甲基化状态及其生物学行为的影响。【方法】将培养肺癌 A549细胞分为两组,一组加入5-Aza-CdR培养（观察组）,一组未处理（对照组）,采用甲基化特异性聚合酶连反应（MSP）检测两组 WWOX 基因甲基化状况;Western blot 法检测细胞WWOX蛋白的表达;MTT比色法检测细胞的增殖;流式细胞仪检测 A549细胞凋亡;然后将 A549细胞皮下注射到小鼠腋下,比较两组体内成瘤率及大小。【结果】对照组细胞出现完全甲基化,而观察组 A549细胞未出现甲基化;与对照组相比,观察组A549细胞WWOX蛋白表达、凋亡率明显上升,细胞增殖的A值显著降低,其差异均有统计学意义（P＜0．05）;观察组成瘤率及肿瘤的大小均低于对照组（P＜0．05）。【结论】5-Aza-CdR做为一种常用的甲基化抑制剂,抑制 WWOX基因启动子的甲基化,上调 WWOX基因的表达,抑制细胞的增殖,促进细胞的凋亡,从而抑制体内成瘤能力。     

P16基因与人类血液系统肿瘤

Ｐ１６基因是新近发现的一种肿瘤抑制基因，位于人类染色体９Ｐ２１上，其表达产物Ｐ１６蛋白系细胞周期领事激酶４抑制剂。现已表明，在人类多种组织类型的肿瘤中存在Ｐ１６基因的缺失和突变，在人类血液系统恶性肿瘤中，尤以急性淋巴细胞白血病中Ｐ１６基因的纯合子缺失常见。     

MAGE—D1的研究进展

MAGE—D1基因编码的蛋白可以在多种肿瘤组织和正常组织中均有表达。本文就MAGE—D1基因的结构、定位、作用机制以及组织表达谱进行综述。     

RASSF1基因与肿瘤的关系

RASSF1基因位于染色体3p21.3,其转录本RASSF1A已被确认为一种候选肿瘤抑制基因,在多种实体肿瘤中表达异常,参与细胞周期和细胞凋亡的调控,并抑制细胞生长,但作用机理尚未阐明。     

RT-PCR检测急性白血病患者FHIT基因表达

急性白血病(AL)是造血干细胞恶性克隆性疾病,其形成与进展由多种基因参与。脆性组氨酸三联基因(fragile histi-dine triad,FHIT)是活跃的第一脆性位点的抑癌基因,在多种肿瘤中的表达均降低[1],但在AL中的报道少见。本研究旨在用RT-PCR检测AL患者FHIT mRNA表达。