组织工程法修复面肌的动物实验研究

目的　探讨组织工程化的成肌细胞修复面肌缺损的可能性。方法　获取SD新生鼠成肌细胞,经酶消化、纯化、培养传代后与Ⅰ型胶原海绵混合培养形成组织工程块,植入切除面肌的同种成年SD大鼠面部,分别于术后8、16周,检查面神经上颊支的肌电生理情况,并对组织工程块进行形态学观察。结果　组织工程化的成肌细胞在体外培养生长分化良好。在动物体内存活并形成肌纤维,肌块内见血管、神经生长,肌电检测见动作电位。结论　组织工程法可能为缺损面肌的仿真修复提供新的理论、方法。     

大鼠骨髓基质细胞与胶原复合后修复牙槽骨缺损的研究

目的：探寻以大鼠骨髓基质细胞为种子细胞和胶原复合物为支架材料,构建组织工程骨的原理和方法修复齿槽骨缺损。方法：将SD大鼠骨髓基质细胞（Bone Marrows Stromal Cell,BMSc）进行体外培养并利用矿化液诱导为成骨样细胞,加入胶原（collagen）培养1d后,植入大鼠下颌骨缺损处,2周和4周后处死,取其下颌骨切片,观察成骨效应。结果：术后2周实验侧缺损区可见骨小梁形成,而对照侧无明显骨修复,4周后实验侧新骨形成量逐渐增加,而对照侧只有一些纤维组织修复。HE染色和mallory三色法染色结果也表明实验侧有新骨形成且逐渐增多。结论：应用胶原加体外诱导的成骨样细胞复合体移植可修复大鼠自体的牙槽骨缺损,为组织工程化骨在颌面外科及修复科领域的临床应用奠定了基础。     

组织工程化骨修复大鼠下颌骨缺损的实验研究

目的：探讨以陶瓷化骨为支架材料的组织工程化骨修复下颌骨缺损的效果和实用价值。方法：选用30只SD大鼠，手术获取大鼠一侧胫骨和股骨，冲洗骨髓腔得到骨髓，培养骨髓基质细胞并通过含诱导成分的诱导液将其诱导为成骨样细胞。将自体成骨样细胞种植在煅烧骨基质材料上，然后将该复合体移植到SD大鼠下颌骨的一侧全层骨缺损区，另一侧移植单纯基质材料作为对照。将30只SD大鼠分别于术后2、4、8周处死，标本行大体组织学检查，HE染色和mallory三色法染色检查。结果：术后2周实验侧缺损区可见骨小梁形成，标本行大体组织学检查，HE染色和mallory三色法染色检查。结果：术后2周实验侧缺损区可见骨小梁形成，而对照侧无明显骨修复，2、4、8周后实验侧新骨形成量逐渐增加，而对照侧只有一些纤维组织修复。HE染色和mallory三色法染色结果也表明实验侧有新骨形成且逐渐增多。结论：应用陶瓷化骨加体外诱导的成骨样细胞复合体移植可修复大鼠自体的下颌骨缺损，为组织工程化骨在口腔颌面外科和口腔修复科领域的临床应用奠定了基础。     

大鼠牙胚同种异体异位移植的组织学观察

目的:观察牙胚在同种异体大鼠体内不同部位的发育情况,为进一步组织工程化牙齿的构建探寻合适的体内生长环境。方法:将封闭群SD仔鼠第一磨牙牙胚分别植入SD成年大鼠肾被膜下、肠系膜内、腹膜外间隙、腹腔内和口腔黏膜下,3周取材,HE染色,观察移植牙胚的发育情况。结果:牙胚在肾被膜下和肠系膜内生长良好,釉质和牙髓牙本质复合体继续发育,牙本质小管结构清晰可见;腹膜外间隙和腹腔内牙胚均未进一步发育,且牙髓腔内和移植物周边淋巴细胞浸润明显;口腔黏膜下未回收到移植物。结论:封闭群SD大鼠肾被膜下和肠系膜内环境有利于同种异体牙胚的生长,可为组织工程化牙齿的体内构建提供新的发育环境。     

EGF及胰岛素对SD大鼠成肌细胞增殖作用的研究

目的:进行表皮生长因子(epithelium growth factor, EGF)、胰岛素(insulin)对体外培养SD大鼠骨骼肌成肌细胞增殖影响的研究。方法：切取新生SD大鼠四肢骨骼肌，经酶消化、纯化后进行体外培养，分别绘制不同条件下成肌细胞的生长曲线，评价其体外增殖能力。结果：在体外培养条件下EGF及胰岛素有明显的促进成肌细胞增殖的作用。结论：EGF、胰岛素能促进成肌细胞的体外增殖，可为组织工程化人工面肌构建的研究提供足够、增殖力强的种子细胞。     

SD大鼠成肌细胞冻存复苏后体外培养的实验研究

目的：探讨成肌细胞冷冻复苏后，体外培养条件下的生物学特征。方法：将原代、2、4、6代成肌细胞液氮冻存，4周后复苏并进行体外培养，并与未冻存的相应各代次传代成肌细胞进行体外增殖特征比较；同时对传代和复苏成肌细胞的第2代细胞融合率进行了观察。结果：复苏后成肌细胞倍增时间、平顶期较对照组长；但成肌细胞形态、特性未见明显变化；复苏后成肌细胞融合率与传代细胞一致。结论：成肌细胞冻存后可以作为组织工程化面肌修复所需的种子细胞来源用于实验研究。     

壳聚糖聚电解质复合物再生纤维软骨的实验研究

目的:探讨壳聚糖电介质复合物与髁突软骨细胞体内形成纤维软骨情况,以期为工程化软骨再生修复颞下颌关节软骨缺损奠定基础。方法:合成磷酸化壳聚糖电解质复合物(chitosan-polyelectrolyte complex,CS-PEC)制备三维凝胶支架,并与髁突软骨细胞复合培养后植入裸鼠体内,分别于4、8周取出新生物,通过组织学和免疫组化观察新生物的生物学特性。结果:软骨细胞在CS-PEC支架中形态铺展良好。植入体内4周后,支架保持原有结构,可见肥大样软骨细胞出现,免疫组化染色显示中央新软骨形成区Ⅱ胶原为阳性。8周后,支架降解,见新生软骨形成,阿新兰染色显示软骨基质形成,免疫组化染色显示软骨形成区Ⅱ胶原为阳性,周围纤维样细胞中Ⅰ胶原阳性;对照组无新生软骨形成,软骨特异性标志Ⅱ胶原及软骨基质特染均为阴性。结论:CS-PEC复合材料有望成为软骨再生的支架载体。     

α-磷酸三钙/胶原复合体与自体骨骨修复能力比较

目的:探讨α-磷酸三钙/胶原复合体修复大鼠头盖骨骨缺损能力。方法:选用8周龄SD大鼠28只,随机分为自体骨组(n=12)、α-磷酸三钙/胶原复合材料组(n=12)与空白组(n=4)。自体骨组和材料组于术后4、6、8周3个时间点各处死大鼠4只;空白组大鼠在8周全部处死。分别进行mirco-CT扫描分析,HE、TRAP和ALP染色,比较各组修复骨缺损效果。结果:8周时α-磷酸三钙/胶原复合物和自体骨的骨体积分数分别为(69.7±3.95)%和(42.475±4.38)%(P<0.05);随着时间延长,α-磷酸三钙/胶原复合材料逐渐被吸收,同时骨缺损亦逐渐修复;自体骨缺损部在6周后出现大量破骨细胞,大面积移植骨与新生骨被吸收,而α-磷酸三钙/胶原复合体修复骨缺损中较少发现破骨细胞。结论:α-磷酸三钙/胶原复合体具有较好骨缺损修复能力,且材料易于吸收。     

骨髓间充质干细胞复合多孔纳米羟磷灰石/聚酰胺6整复大鼠颅骨缺损的实验研究

目的初步探讨纳米羟磷灰石/聚酰胺6（n-HA/PA6）多孔材料对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖及分化的影响,以及BMSCs作为种子细胞、多孔n-HA/PA6作为支架材料构建组织工程化骨修复大鼠颅骨极限骨缺损的可行性及整复效果。方法矿化诱导的第3代BMSCs与n-HA/PA6多孔材料复合培养,MTT检测细胞增殖,ALP染色检测骨向分化。将BMSCs与n-HA/PA6复合物植入大鼠颅骨8 mm骨缺损处,4、8、16周时,应用组织学、扫描电镜观察植入物与骨组织交界处的成骨修复情况,并与单纯n-HA/PA6植入组修复效果进行比较。结果与n-HA/PA6复合培养的BMSCs生长良好,细胞增殖未受影响,ALP染色阳性。BMSCs复合n-HA/PA6植入4周时,有较多新骨长入支架孔穴;8周时,材料和宿主骨融为一体,接近正常骨;16周时,材料和天然骨形成骨性结合。单纯n-HA/PA6组植入4周时,新骨形成较少;8周时,新骨明显增加,但骨钙化程度较低;16周时,2组无明显差异。结论多孔n-HA/PA6支架材料对种子细胞BMSCs的增殖和骨向分化无影响;BMSCs作为种子细胞、n-HA/PA6多孔复合体作为支架材料构建组织工程化骨能够加速界面骨愈合,有效修复颅骨缺损,具有潜在的骨组织工程应用前景。     

大鼠牙胚细胞团块培养法构建组织工程化牙齿

目的探索采用大鼠牙胚细胞团块培养法在体内构建组织工程化牙齿的可行性。方法体外培养SD仔鼠磨牙牙胚细胞,并将牙胚细胞团置于离心管内孵育48h后植入近交系SD大鼠肾被膜下,2周取材,苏木精-伊红染色,观察移植物中的组织新生情况。结果牙胚细胞团块在肾被膜下生长良好,形成典型的牙髓牙本质复合体样组织和少量釉质样结构,牙本质小管样结构清晰可见,内侧可见长柱状的成牙本质细胞有序排列,牙髓样组织中可见少量血管样结构。结论以牙胚细胞为种子细胞,用团块培养法在大鼠肾被膜下成功地构建出组织工程化牙冠样结构。     

柠檬精油对牙周致病菌抑制作用及其安全性初步研究

目的:探讨柠檬精油对牙周致病菌的体外抗菌活性及对细胞增殖的影响。方法:采用微量液体稀释法测定柠檬精油对Pg、Fn、Aa、Pi的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)及最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC);以较低浓度的MIC为标准稀释LEO作为实验组,采用MTT法测定柠檬精油对HUVECs的毒性作用,明确抑菌浓度下LEO的安全性。结果:柠檬精油对牙周主要致病菌均有抑菌作用,Pg、Fn、Aa、Pi的MIC分别是9.0 g/L、4.5 g/L、4.5 g/L、9.0 g/L,Aa、Fn的 MBC是9.0 g/L,Pg、Pi的MBC未测得。1/2MIC、1/20MIC浓度的LEO能够抑制人脐静脉内皮细胞的生长,而低于1/200MIC浓度的LEO则对人脐静脉内皮细胞的生长没有影响,其中1/200MIC浓度的LEO作用明显优于0.02%的CHX。结论:体外环境中,柠檬精油对牙周致病菌Pg、Fn、Aa、Pi具有抗菌活性,低浓度应用对机体相对安全。     

Oral cancer: molecular technologies for risk assessment and diagnosis

Purpose: The effective biomarkers related to diagnosis, metastasis, drug resistance and irradiation sensitivity of oral cancers will help the pathologist and oncologist to determine the molecular taxonomy diagnosis and design the individualization treatment for the patients with oral cancers.     

Computer-assisted planning for maxillofacial prosthodontic rehabilitation

Computerized tomography (CT) planning and the use of CT derived surgical templates for implant placement have shown promise for restoring function within months after surgical reconstruction of acquired post-oncologic defects.     

Stimulated whole saliva components in children with Down syndrome

The authors report on the components of stimulated whole saliva from children with Down syndrome—including pH, flow rate, sialic acid and protein concentrations, and amylase and peroxidase activity. Saliva samples were collected from 35 children aged 6–10 years. Of the participants, 17 had Down syndrome and 18 did not. To stimulate saliva production, the children chewed a piece of parafilm for 10 minutes before the sample was collected. Soon after collecting the saliva sample, the authors measured pH using a portable pH-meter. Sialic acid levels were determined with a thiobarbituric acid assay. Protein content was determined with Folin's phenol reagent. Amylase was assayed and the authors measured the maltose produced by the breakdown of starch and peroxidase using ortho-dianisidine.
No statistically significant difference was observed in levels of sialic acid (free and total) between the two groups. Protein concentration was about 36% higher in the group with Down syndrome. However, the salivary flow rate, pH, and amylase and peroxidase activities were lower among the children with Down syndrome.     

Effect of Pingyangmycin on human venous malformation endothelial cells

Purpose: Venous malformations are common vascular anomalies with a propensity of the head and neck. Intralesional injection of Pingyangmycin (PYM, bleomycin A5 hydrochloride) is a widely used sclerotherapy method for the treatment of venous malformation.     

牙髓再生的研究现状

目前,根管治疗术在临床上已得到了广泛的应用并成功的保存了患牙,但其仍有许多术后并发症。随着组织工程技术在口腔领域的应用,构建一种组织工程化牙髓进行牙髓-牙本质复合体的再生治疗成为可能。近年来国内外已有很多关于牙髓再生的研究,并且已经取得了一定成果。本文将对目前国内外牙髓再生的研究进展现状作一综述。     

替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节特征的锥形束CT研究

目的:采用锥形束CT(CBCT)研究替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节的影像学特征,探讨Ⅲ类功能状态下,颞下颌关节的生长、改建机制。方法:从就诊于昆明医科大学附属口腔医院正畸科的患者中选取符合纳入标准的替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者及骨性Ⅰ类错牙合患者各20名,使用NNT viewer 5.3图像处理软件进行三维重建及线距和角度的测量,并进行统计学分析。结果:替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者组和替牙期骨性Ⅰ类错牙合患者组对比结果为:矢状面双侧关节前间隙偏小、双侧关节上间隙偏小、双侧关节结节斜度偏小;冠状面双侧关节内间隙偏小,双侧关节上间隙偏小,双侧关节外间隙偏小,右侧髁状突角度偏小;横截面右侧髁状突前后径偏小。结论:替牙期骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节发育不充分,呈现髁状突,关节窝深度,关节结节斜度;冠状面关节内、外间隙均较小的特征。骨性Ⅲ类错牙合患者髁状突在关节窝中处于前置近关节窝顶位置。骨性Ⅲ类错牙合患者颞下颌关节影像学特征与其功能状态相适应。     

Ghlorhexidine as a root canal medicament for treating inflammatory lesions in the periodontal space

Abstract— The purpose of the present study was to investigate the therapeutic effect of intra-canal application of chlorhexidine on inflammatory root resorption. Dental pulps from monkey incisors were infected and resealed prior to extraction of the teeth. Root dentin was mechanically exposed and the teeth were replanted under aseptic conditions. After 4 weeks, the experimental teeth were dressed with chlorhexidine gel and resealed. Animals were sacrificed 4 weeks later, and their jaws prepared for histologic examination. Results showed that both marginal and apical periodontal inflammation and resorption were reduced in the chlorhexidine-treated teeth. It was concluded that the use of intra-canal chlorhexidine may be a useful adjunct in the treatment of inflammatory root resorption, but further human trials need to be undertaken before its clinical use can be recommended.     

小鼠牙髓干细胞同种异体移植后体内免疫反应初探

目的:初步探究小鼠牙髓干细胞同种异体移植后的全身免疫反应。方法:牙髓干细胞分离获得自C57BL/6 小鼠牙髓组织,培养至第3 代,与纳米羟基磷灰石(n-HA)复合培养形成复合物,扫描电镜观察其生长黏附情况。40只4周龄的C57BL/6 小鼠随机分成两组。实验组将复合物移植入上背部皮下,对照组将纳米羟基磷灰石植入上背部皮下,术后均使用外科方法严密缝合创口。两组动物术后均观察4周、6周处死,分离脾脏,制成脾淋巴细胞悬液,流式细胞仪测定CD4⁺、CD8⁺的值。结果:牙髓干细胞在体外与纳米羟基磷灰石结合良好;免疫组化染色实验组4周、6周均可见牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)阳性表达;实验组与对照组相比,术后4周、6周CD4⁺/CD8⁺值均无明显差异。结论:牙髓干细胞同种异体移植后,尚不能够引起机体的免疫排斥反应,其在体内仍具有低免疫原性,有望成为组织工程同种异体种子细胞来源。