欧前胡素对顺铂的骨肉瘤细胞抗肿瘤作用的增效作用

目的 研究欧前胡素是否能提高人骨肉瘤细胞(human osteosarcoma cells,HOS细胞)对顺铂的敏感性。方法 HOS细胞用欧前胡素和顺铂处理,MTT法检测体外细胞活力,Western blot检测Bcl-2 蛋白家族成员(Mcl-1、Bcl-2、Bcl-xl、Bad和Bax)的表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平和线粒体膜电位的变化情况。构建Mcl-1真核表达载体,MTT法检测Mcl-1表达载体转染对欧前胡素联合顺铂治疗骨肉瘤疗效的影响。结果 欧前胡素在体外可显著提高顺铂对骨肉瘤细胞系HOS的杀伤活性。欧前胡素可显著降低HOS细胞Mcl-1的表达,而顺铂对Mcl-1的表达水平无影响。相比于欧前胡素或顺铂单治疗组,两者联合可显著诱导HOS细胞发生凋亡并降低其线粒体膜电位。体外转染Mcl-1真核表达载体显著降低顺铂联合欧前胡素对HOS细胞的杀伤活性。结论 欧前胡素通过靶向于Mcl-1增强顺铂对骨肉瘤细胞的杀伤活性。     

忍冬叶中木犀草素及木犀草苷含量的动态变化

建立了高效液相色谱法同时测定忍冬叶中的木犀草素(1)和木犀草苷(2),并考察两者含量随采摘时间的动态变化.采用依利特Hypersil ODS C18柱,以乙腈-0.5％冰乙酸为流动相,梯度洗脱,检测波长350 nm.l和2在2.5～80 μg/ml和5.25～168 μg/ml浓度范围内线性良好,平均回收率为100.1％和99.9％,RSD为0.89％和1.06％.测定了不同月份采摘的忍冬叶中的1和2,结果显示1、2含量分别在11月(0.75 mg/g)和6月(6.05 mg/g)达到最高.     

木犀草素对K562细胞caspase-3活化的影响

目的:探讨木犀草素对K562细胞增殖和凋亡的影响.方法:采用MTT法检测K562细胞的增殖,流式细胞术和Hoechst33258/PI荧光染色分析K562细胞的凋亡,比色法测定caspase-3的相对活性,半定量RT-PCR检测caspase-3 mRNA水平的改变,Western-blot分析caspase-3酶原的变化.结果:木犀草素处理细胞24 h后的IC50值为(104.6±13.5)μmol·L-1.浓度为10,20,40μmol·L-1木犀草素处理细胞24 h后均可诱导K562细胞发生凋亡,各处理组的细胞凋亡率均明显高于对照组(P＜0.01).随着浓度及时间的增加,各个木犀草素处理组K562细胞的caspase-3活性升高(P＜0.01),其作用具浓度及时间依赖性.而随着木犀草素浓度的增加,K562细胞中caspase-3的mRNA水平逐渐增加,caspase-3酶原的蛋白水平逐渐减少.结论:木犀草素可通过诱导K562细胞凋亡而抑制其增殖,其诱导K562细胞凋亡可能与激活caspase-3有关.     

木犀草素对膀胱肿瘤T24细胞的影响

目的研究木犀草素对膀胱肿瘤T24细胞体外增殖的抑制和诱导凋亡作用。方法不同浓度木犀草素作用于指数生长期膀胱肿瘤T24细胞后应用MTS比色法检测细胞增殖的抑制作用。通过DNA凝胶电泳检测细胞的凋亡情况。结果浓度为0.01～0.04mg/mL的木犀草素对体外培养的膀胱肿瘤T24细胞有明显的抑制作用。DNA凝胶电泳结果显示:空白对照组没有出现DNA"梯带";其他4组(除木犀草素0.004mg/mL组)均出现不同程度的DNA"梯带",显示出细胞凋亡的特征。结论木犀草素在浓度为0.01～0.04mg/mL时对膀胱肿瘤T24细胞有通过诱导细胞凋亡的方式抑制细胞生长的作用,可能具有治疗膀胱肿瘤的临床价值。     

木犀草素抑制PKM2继而促进自噬诱导肝癌细胞凋亡

目的：探究木犀草素对人肝癌HepG2细胞中PKM2表达的影响,继而挖掘木犀草素诱导肝癌细胞凋亡的机制。方法：通过数据库比较肝癌的癌旁组织和肿瘤组织中的PKM2表达差异,收集肝癌患者标本,检测癌和癌旁组织中PKM2 mRNA和蛋白的表达差异。木犀草素刺激肝癌细胞HepG2,用CCK8、流式凋亡及Western blot方法检测木犀草素对肝癌生存率和凋亡的影响,以及木犀草素作用于肝癌细胞后PKM2的变化。在肝癌细胞系中敲减或过表达PKM2,用木犀草素刺激肝癌细胞,探究PKM2对木犀草素诱导肝癌细胞增殖和凋亡的影响,同时检测自噬相关分子,探究PKM2及木犀草素对自噬的影响。结果：与癌旁组织相比,肿瘤组织中PKM2表达量升高;木犀草素以浓度依赖性和时间依赖性抑制HepG2细胞增殖,诱导细胞凋亡,并且随着木犀草素浓度的增高PKM2的表达逐渐降低;敲减PKM2可以显著抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡,而过表达PKM2可以削弱木犀草素对肝癌细胞的凋亡作用。木犀草素可以促进肝癌细胞自噬,敲减PKM2后可以抑制木犀草素诱导的自噬。结论：木犀草素可以通过抑制PKM2表达,诱导肝癌细胞发生自噬,促进细胞凋亡。     

木犀草素抗炎机制的研究进展

木犀草素是一种天然黄酮类物质,具有多种药理活性。由于木犀草素具有较强的抗炎作用,因此许多富含木犀草素的植物已被用于治疗多种与炎症相关的疾病。本文就木犀草素的抗炎作用机制的有关研究予以综述。     

木犀草素对脂多糖诱导下小鼠急性肺损伤的保护作用及其机制研究

目的探讨木犀草素(luteolin)对脂多糖(1ipopolysaccharid,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用,以及可能的作用机制。方法 96只小鼠随机分为正常组、模型组、木犀草素低剂量组、木犀草素中剂量组、木犀草素高剂量组及地塞米松组,每组8只。以小鼠气道穿刺滴入LPS制备小鼠ALI模型,呼吸机检测气道吸气阻力(Ri)、气道呼气阻力(Re)和动态肺顺应性(Cdyn)的变化,ELISA法测定肺泡灌洗液(BALF)中IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度,制作HE病理切片以及Western blot法检测肺组织中NF-κB p65、IκB-α和PIκB-α的表达情况。结果木犀草素能明显抑制Ri、Re增长和Cdyn降低,抑制BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α的释放(P<0.05),减轻了肺部病变,抑制了NF-κB p65和PIκB-α的活化。结论木犀草素对LPS诱导的小鼠急性肺损伤具有保护作用,其作用机制与抑制NF-κB信号传导通路表达有关。     

木犀草素对博莱霉素引起的大鼠肺纤维化模型的治疗作用

目的:研究木犀草素对大鼠肺纤维化的治疗作用。方法:观察不同剂量的木犀草素对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化肺组织的肺重量指数、丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(HYP)含量及组织学变化的影响。结果:木犀草素在20,40和80mg·kg~(-1)剂量下连续灌胃给药21d,对模型大鼠的上述指标有不同程度的抑制作用,对其组织形态也有明显改善,且呈剂量效应关系。结论:木犀草素对大鼠肺纤维化模型具有较好的治疗效果。     

木犀草素逆转宫颈癌细胞对阿霉素耐药性的机制研究

目的 探讨木犀草素（Lut）逆转宫颈癌对阿霉素（Dox）耐药性的效应及其机制。方法 建立Dox耐药的宫颈癌HeLa/Dox细胞株,利用Dox、Lut单独或联合作用于细胞,分为control组、Dox组、Lut组、Dox＋Lut组,检测各组细胞存活率及凋亡率。构建小鼠移植瘤模型,经腹腔注射3 mg·kg^-1 Dox和/或5 mg·kg^-1 Lut,检测小鼠肿瘤生长情况及肿瘤中相关蛋白的表达。结果 （1） CCK-8检测结果显示,Dox+Lut组细胞的生长活性明显受到抑制,存活率显著低于Dox组和Lut组（P<0.01）。细胞克隆形成实验显示出与CCK-8实验相似的细胞生长趋势。流式细胞术检测结果显示,Dox单药对HeLa/Dox细胞的凋亡无明显促进作用,而Lut单药可显著诱导HeLa/Dox细胞凋亡。（2） Dox单药对HeLa/Dox细胞迁移的影响较小（P<0.05）,而Lut单药处理的HeLa/Dox细胞迁移数目明显减少,Dox与Lut联合应用对HeLa/Dox细胞迁移能力的抑制作用最强（P<0.01）。（3）与对照组相比,Dox组、Lut组、Dox+Lut组HeLa/Dox细胞中PI3K、Cleaved caspase-3蛋白表达均显著上调,p-Akt、p-mTOR、p70S6K蛋白表达显著下调（P<0.05）,且Dox+Lut组蛋白表达水平变化最为显著。（4）对照组、Dox组、Lut组、Dox+Lut组小鼠肿瘤体积分别为（1265.8±123.3）mm³、（456.4±68.7）mm³、（479.9±57.2）mm³、（108.1±14.0）mm³,差异具有统计学意义（P＜0.05）。联合应用Dox和Lut后,肿瘤组织中PI3K和Cleaved caspase-3的表达显著上调（P<0.01）,而p70S6K和Ki-67的表达显著下调（P<0.01）。结论 Lut可通过调节PI3K/Akt信号通路的活性逆转宫颈癌细胞对阿霉素的耐药性,从而抑制肿瘤细胞的增殖和转移,并促进其凋亡。     

HPLC法测定降香药材中木犀草素的含量

目的:建立降香药材中木犀草素的含量测定方法.方法:用高效液相色谱法测定了木犀草素的含量,色谱柱:Zorbax eclipse XDB C18(4.6 mm×150 mm);流动相:甲醇-0.49白磷酸溶液(43∶57);流速∶1.0 mL·min-1,检测波长:353 nm.结果:平均回收率98.9%(RSD=2.0%),线性关系r=0.999 7,进样量在0.042 5～0.34 μg内线性关系良好.重复性RSD=1.6%,精密度RSD=1.5%.结论:该方法稳定、可靠,可作为其质量控制方法.     

水溶性木犀草素衍生物的半合成

目的:探索水溶性木犀草素衍生物的半合成方法。方法:试图以木犀草素成酚钠后和卤代物进行亲核取代反应,分别在木犀草素7-位引入羧甲基,然后制成了钠盐,达到增加水溶性。结果:通过新的合成路线合成了鲜见报道的化合物。结论:在保留黄酮类化合物生物活性部位的前提下,在木犀草素7-位引入羧甲基,可以制备水溶性羧甲基木犀草素钠盐。     

鹿茸草中木犀草素含量测定

目的：建立高效液相色谱法测定鹿茸草中木犀草素的含量方法。方法：采用Agilent XDB C18（5μm,250×4.6mm）色谱柱,以甲醇-0.1%磷酸（55：45）为流动相,检测波长350nm,流速1.0mL.min-1。结果：在25.02～150.12μg.mL-1质量浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率为103.1%,RSD为1.27%（n=6）。结论：所建立的含量测定方法简便可行,重复性良好,可用于鹿茸草药材的质量监控。     

木犀草素及其葡萄糖苷的半合成

以橙皮苷为原料，经３步合成了黄酮类化合物木犀草素（１），总收率３５％。本法原料易得，工艺简单，各步收率较好。同时以１通过新化合物木犀草素－７－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷四乙酸酯，合成了木犀草素－７－β－葡萄糖苷。     

木犀草素β-环糊精包合物稳定性的探讨

目的：研究木犀草素β-环糊精包合物的稳定性。方法：室温(避光)、光照(光强2000—3000LX)、湿热(温度38℃、相对湿度75％并避光)三种条件下进行加速试验。结果：包合物的稳定性较好。结论：木犀草素β-环糊精包合物使木犀草素的稳定性大大提高．     

抑制MEK对内质网应激诱导乳腺癌细胞凋亡的增敏作用

目的探讨抑制MEK/ERK信号通路对人乳腺癌细胞内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激途径细胞凋亡的影响,以期为乳腺癌化疗提供新的靶点。方法不同浓度(0、1.5、3、6、9、12μmol.L-1)衣霉素(tunicamycin,TM)处理乳腺癌细胞SK-BR-3,48h后溴化丙啶(propidium iodide,PI)染色检测细胞凋亡率;TM(3μmol.L-1)处理SK-BR-3细胞不同时间(0、6、12、24、36h),Western blot检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78,GRP78)、ERK1/2、pERK1/2的表达;MEK抑制剂U0126(20μmol.L-1)预处理1h后再给予TM(3μmol.L-1)同上处理,检测上述指标,比较U0126作用前后上述指标的变化。结果SK-BR-3细胞对TM诱导的细胞凋亡率<20%,且TM上调GRP78的表达;TM没有诱导ERK1/2的进一步激活;U0126明显增加TM诱导的细胞凋亡率(78%),同时下调GRP78的表达和阻断TM对GRP78的上调作用。结论MEK/ERK信号通路的抑制增强人乳腺癌细胞SK-BR-3对ER应激途径细胞凋亡的敏感性,抑制非折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)的诱导。     

木犀草素自乳化制剂处方研究

目的 研究木犀草素自乳化制剂,探求其最佳处方配比.方法 通过溶解度实验、正交筛选和假三角相图的绘制,以形成自乳化区域的大小、溶出度和所得乳滴粒径的大小为指标,对木犀草素自乳化制剂中的油相、乳化剂及助乳化剂的组成、用量进行筛选,找出最佳处方配比.结果 在木犀草素自乳化制剂处方中,以橄榄油为油相,聚山梨酯80为乳化剂.甘油为助乳化剂时,可以获得较好的乳化效果.结论 木犀草素自乳化制剂的最佳处方比例为m(木犀草素):m(橄榄油):m(聚山梨酯80):m(甘油)=1:0.66:0.24:0.30.     

水苦荬中木犀草素含量测定

采用高效液相色普法建立蒙药材水苦荬中木犀草素含量测定方法。在shim-pack C18柱和Phenomenex C18柱上以（甲醇-乙腈）-0.8%磷酸溶液（35∶65）为流动相,检测波长为350nm。结果：木犀草素在40.54～608.1μg范围内呈良好的线性关系,r=1,平均回收率97.99%,RSD均为0.99%（n=5）。本法简单、结果准确、可作为该药材的质量控制方法。     

木犀草素对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的研究木犀草素对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法制备实验性糖尿病模型,将大鼠分成4组,分别为木樨草素高剂量组、中剂量组、低剂量组、模型组与正常组,实验进行到第12周,处死大鼠,测定血清FBG、FINS、Cr、BUN及肾脏Ox-LDL,并计算ISI。结果木犀草素具有降糖、改善胰岛素抵抗、改善肾功能、降低肾脏组织Ox-LDL的作用。结论木犀草素对实验性糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用,其机制可能与改善胰岛素抵抗与减少肾脏组织Ox-LDL有一定的关系。     

木犀草素对模型小鼠癌性恶病质的改善作用

目的:研究木犀草素对模型小鼠癌性恶病质的改善作用。方法:皮下接种小鼠结肠腺癌细胞Colon26于雄性BALB/C小鼠,以复制小鼠癌性恶病质模型。将40只BALB/C小鼠随机均分为正常对照(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组与木犀草素高、低剂量(100、50 mg/kg)组,ig给药,每天1次,连续7 d。处死小鼠称定小鼠净质量、干质量、腓肠肌质量、附睾脂肪质量、全身脂肪质量和肿瘤质量;采用自动生化分析仪检测小鼠血液甘油三酯(TG)、非酯化脂肪酸(NEFA)、总胆固醇(TC)和葡萄糖含量;采用荧光法测定小鼠腓肠肌中蛋白酶和钙激活蛋白酶活性;采用酶联免疫(ELISA)法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)与白细胞介素6(IL-6)的水平。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠净质量、干质量、腓肠肌质量、附睾脂肪质量、全身脂肪质量减少,肿瘤质量增加;TG、NEFA、TC含量增加,葡萄糖含量减少;小鼠腓肠肌中泛素蛋白酶和钙激活蛋白酶活性增强;小鼠血液IL-6含量增加,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与模型组比较,木犀草素高、低剂量组小鼠净质量、干质量、腓肠肌质量、附睾脂肪质量增加;TC、TG、NEFA含量减少,葡萄糖含量增加;小鼠腓肠肌中泛素蛋白酶和钙激活蛋白酶活性减弱;小鼠血液IL-6含量减少;木犀草素高剂量组小鼠全身脂肪质量增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:木犀草素可改善模型小鼠癌性恶病质症状,其机制可能与抑制蛋白酶、钙激活蛋白酶活性和降低细胞因子的水平有关。     

天花粉蛋白对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗增敏作用

目的 观察天花粉(TCS)联合顺铂对宫颈癌HeLa细胞的化学治疗(化疗)增敏作用,并探讨其作用机制。方法 细胞计数检测试剂盒(CCK8)法检测TCS、顺铂单独或联合用药对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响;CompuSyn软件分析TCS联合顺铂的联合用药指数(CI值);细胞划痕实验与Transwell法检测药物对细胞迁移的影响;流式细胞术检测药物对细胞凋亡的影响;蛋白印迹法检测药物对HeLa细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果 TCS与顺铂均能抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,TCS+顺铂抑制作用更强,TCS对顺铂增敏指数为3.04;不同浓度TCS联合顺铂作用HeLa细胞48 h后,CI值均<1,且具有浓度依赖性(P<0.05);细胞划痕实验与Transwell法实验中,TCS+顺铂较TCS或顺铂单独给药能更明显抑制HeLa细胞迁移(P<0.05);流式细胞术中,与TCS或顺铂单独给药相比,TCS+顺铂可增加HeLa细胞凋亡比例(P<0.05);蛋白印迹实验中,与TCS或顺铂相比,TCS+顺铂可上调促凋亡蛋白Bax、c-PARP表达,下调凋亡抑制蛋白Bcl-2表达(P<...