氯喹联合顺铂对结肠癌HCT116细胞的增殖和凋亡的影响

目的探讨氯喹(CQ)联合顺铂(DDP)对人结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法将HCT116细胞分组为16组:空白对照组(不加药物)、5个浓度(5,10,20,40,80μmol·L^-1)氯喹-1组至氯喹-5组,5个浓度(2,4,8,16,32μmol·L^-1)顺铂-1组至顺铂-5组和5个浓度(20μmol·L^-1氯喹+2,4,8,16,32μmol·L^-1顺铂)联合-1组至联合-5组,各组均培养24 h。用噻唑蓝法检测细胞的存活率,用PI单染流式细胞术检测细胞的凋亡情况,用蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)等凋亡相关蛋白的表达水平(灰度值)。结果空白对照组、氯喹-1组至氯喹-5组、顺铂-1组至顺铂-5组和联合-1组至联合-5组于24 h的细胞存活率分别为(100.00±1.05)%,(99.65±1.98)%,(97.43±0.72)%,(83.88±0.51)%,(69.65±3.33)%,(51.87±0.49)%,(98.55±1.50)%,(92.33±0.50)%,(81.66±4.29)%,(70.41±0.50)%,(48.34±1.50)%,(78.61±4.37)%,(59.01±3.52)%,(37.23±0.57)%,(32.88±3.96)%和(21.09±2.57)%。空白对照组、氯喹-3组、顺铂-3组和联合-3组的细胞凋亡率分别为(1.63%±0.50%),(15.97%±1.40%),(24.83%±2.12%)和(47.23±4.29)%;这4组的Bcl-2相对表达量分别为1.11±0.01,0.92±0.03和0.73±0.08,0.46±0.07;这4组的Bax蛋白相对表达量分别为0.18±0.01,0.27±0.03,0.46±0.09和0.58±0.04。氯喹联合顺铂能显著减少抗凋亡Bcl-2蛋白的表达,并上调促凋亡Bax蛋白的表达。联合组与单用组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05);各给药组与空白对照组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论氯喹可以增强顺铂对HCT116细胞的增殖抑制作用,同时可以增强顺铂诱导结肠癌细胞的凋亡,其机制可能与下调Bcl-2和上调Bax有关联。     

重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响及其联合5-氟尿嘧啶(5-FU)和洛铂的抗肿瘤效果。方法 采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;分别观察PP-22联合5-FU和洛铂对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;碘化丙锭单染流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blot法检测PP-22作用后细胞凋亡相关蛋白的表达。结果 重楼单体PP-22能显著抑制SW620细胞的生长,作用呈剂量-效应关系;随着PP-22浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与细胞对照组和DMSO组相比有显著差异;PP-22联合不同浓度的5-FU和洛铂作用于SW620细胞48 h,可提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性;不同浓度PP-22作用于SW620细胞后,细胞周期阻滞于S期;PP-22作用后存在Caspase-3和Caspase-9蛋白的活化和降解,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL减少,促凋亡蛋白Bax的表达增加。结论 PP-22能显著抑制人结肠癌SW620细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性。     

氯喹对AHNP肝损伤Toll样受体2/4表达的影响及作用机制研究

目的探讨氯喹对急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）肝损伤中促炎因子及Toll样受体2/4（TLR2/4）mRNA表达作用机制的影响。方法采用逆行胆碱牛黄胆酸钠（TAC）逆性建立AHNP肝损伤动脉模型,将36只健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组（NC组）、胰腺炎组（SAP组）以及氯喹治疗组（治疗组）,每组12只。采用RT-PCR法测定各组大鼠不同时间点肝损伤TLR2/4 mRNA表达情况。结果 SAP组同一时间点肝腹水、胰腺病理组织评分及肝病理组织评分均高于NC组,NO水平低于NC组,差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗组血清淀粉酶、ALT、AST、TNF-α水平显著低于SAP组,NO高于SAP组（P〈0.05）。SAP组3 h TLR2、TLR4水平、肝腹水、胰腺病理组织评分、肝病理组织评分显著高于治疗组,且在12 h达到最高峰。结论 AHNP肝损伤的发生及进展可能与TLR2/4 mRNA表达上调有关,氯喹可显著抑制AHNP肝组织中TLR2/4 mRNA的表达,减轻肝损伤。     

银杏叶提取物对结肠癌SW480细胞增殖的影响

目的研究银杏叶提取物（EGB）对SW480结肠癌细胞生长增殖的影响。方法体外培养人结肠癌SW480细胞后,给予不同浓度（100,200,300,400,500 mg·L^-1）银杏叶提取物干预后,采用CCK-8检测人结肠癌SW480细胞的增殖抑制率,选择最佳作用浓度;随后,在此作用浓度下观察EGB作用不同时间对人结肠癌SW480细胞增殖抑制率的影响,并通过Western blot检测人结肠癌SW480细胞内Ki67和PCNA的表达情况。结果银杏叶提取物可抑制结肠癌SW480细胞的增殖,且随着作用浓度增加和作用时间的延长其抑制作用逐渐增强;300 mg·L^-1银杏叶提取物对结肠癌SW480细胞增殖的抑制效果最明显。银杏叶提取物干预的结肠癌SW480细胞内Ki67和PCNA的表达均明显下调。结论银杏叶提取物可呈浓度和时间依赖性地抑制结肠癌SW480细胞的增殖。     

槲寄生凝集素对人结肠癌HT-29细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究槲寄生凝集素对人结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响。方法：采用MTT法观察槲寄生凝集素对体外培养的人结肠癌HT-29细胞增殖的影响,运用基因组DNA电泳观察凋亡特征性“梯状”条带及原位末端标记法检测槲寄生凝集素诱导HT-29细胞凋亡。结果：槲寄生凝集素对体外培养的人结肠癌HT-29细胞抑制作用表现出时间和剂量依赖性。基因组DNA琼脂糖凝胶电泳显示槲寄生凝集素作用于HT-29细胞后出现凋亡细胞特有的DNA阶梯状条带。原位末端标记法检测显示槲寄生凝集素可明显诱导HT-29细胞的凋亡。结论：槲寄生凝集素可抑制人结肠癌HT-29细胞生长并诱导其凋亡。     

结肠癌TLR4信号促进免疫逃逸

目的研究结肠癌Toll样受体4(TLR4)信号对机体免疫功能的影响。方法用流式细胞术检测结肠癌细胞TLR4的表达、RT-PCR检测TLR4活化对肿瘤细胞和树突状细胞(DC)的影响。结果结肠癌细胞表面存在TLR4的表达。肿瘤TLR4信号促进了结肠癌细胞分泌TNF-α和趋化因子20(CCL20)表达(P<0.05)。肿瘤TLR4信号明显增加了DC免疫抑制因子白细胞介素10和吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO)的表达(P<0.05)。结论结肠癌TLR4信号抑制了机体的免疫功能,从而促进了肿瘤的免疫逃逸。     

RGDS四肽对人结肠癌细胞SW480凋亡的影响

探讨精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸(Arg-Gly-Asp-Ser RGDS)4肽诱导人结肠癌细胞SW480凋亡的作用.采用DAPI染色、DNA琼脂糖凝胶电泳以及流式细胞技术分析RGDS对人结肠癌细胞SW480凋亡的影响.结果表明,与对照组相比,RGDS处理细胞后,形态学观察显示DAPI染色的细胞核染色质凝聚、细胞溶解形成凋亡小体;DNA琼脂糖凝胶电泳出现典型的DNA梯状带(DNA ladder);流式细胞分析可见凋亡峰,凋亡率约是对照组的4.5倍.因此,RGDS具有诱导人结肠癌细胞SW480凋亡的作用.     

小白菊内酯通过下调NOX4抑制结肠癌SW480细胞增殖和侵袭

目的:探讨小白菊内酯对人结肠癌细胞SW480增殖及侵袭的影响,并探讨其抗肿瘤的可能作用机制。方法:以不同浓度(5,10,15μmol·L^-1)小白菊内酯作用于体外培养的人结肠癌SW480细胞,以环磷酰胺(30μmol·L^-1)作为阳性对照。采用CCK8法以及平板克隆法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移及侵袭;免疫印迹法(Western blotting)检测NOX4蛋白以及增殖相关蛋白[β-连环蛋白(β-catenin)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、侵袭相关蛋白金属基质蛋白酶2(MMP-2)、金属基质蛋白酶9(MMP-9)蛋白]表达情况。结果:随着小白菊内酯浓度的增加,对SW480细胞增殖抑制率明显升高,与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05);同一浓度作用下,随作用时间的延长,增殖抑制率显著升高(P<0.05),小白菊内酯10,15μmol·L^-1浓度组与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,小白菊内酯组克隆细胞形成数、侵袭、迁移细胞数、增殖相关蛋白β-catenin、Cyclin D1、侵袭迁移关蛋白MMP-2、MMP-9以及NOX4蛋白水平显著下降(P<0.05),且小白菊内酯各组间呈浓度依赖(P<0.05);与阳性对照组相比,小白菊内酯10,15μmol·L^-1浓度组以上各指标差异有统计学意义(P<0.05)。结论:小白菊内酯可能通过下调NOX4表达,抑制结肠癌细胞SW480细胞增殖、侵袭能力。     

山柰酚对人结肠癌SW48细胞增殖的抑制作用

目的为开发黄酮醇类抗肿瘤新药提供依据。方法采用噻唑蓝还原法检测山柰酚对SW48细胞生长的抑制作用,采用流式细胞仪分析山柰酚对细胞凋亡的诱导作用,采用免疫印记法分析山柰酚对凋亡通路相关蛋白表达的影响。结果山柰酚抑制SW48细胞的生长,上调了p53的蛋白表达量和磷酸化程度,改变了Bcl-2与Bax的蛋白含量比例。结论山柰酚通过诱导细胞周期阻滞和p53介导的线粒体凋亡通路抑制人结肠癌SW48细胞增殖。     

川芎嗪对人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

目的 探讨川芎嗪（TMP）对人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 以DMSO（空白对照组）、不同浓度（50、100、200 μg·mL^-1）的TMP和奥沙利铂（L-OHP,25 μg·mL^-1）干预对数生长期人结直肠癌SW480细胞48 h。采用MTT法和EdU插入实验检测各组SW480细胞增殖率,细胞克隆实验观察SW480细胞克隆形成能力,流式细胞术、Western blotting检测细胞周期、凋亡和蛋白表达。结果 与空白对照组比较,经50、100、200 μg·mL^-1的TMP或25 μg·mL^-1的L-OHP干预可明显降低SW480细胞增殖率,提高细胞凋亡率;经100、200 μg·mL^-1的TMP或25 μg·mL^-1的L-OHP干预可明显抑制细胞克隆形成能力,阻滞细胞周期于G₀/G₁期,提高PTEN、Cleaved Caspase-3、Bax、P27表达量和Bax/Bcl-2比值,降低p-Akt、cyclin D1、Bcl-2表达量和Akt磷酸化率,差异均具有统计学意义（P<0.05）。与L-OHP 25 μg·mL^-1组比较,经TMP 200 μg·mL^-1干预能够明显降低SW480细胞增殖率、提高凋亡率,提高PTEN、Bax、P27表达量和Bax/Bcl-2比值,降低p-Akt、cyclin D1表达量和Akt磷酸化率,差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 TMP可能通过上调PTEN抑制PI3K/Akt通路,进而抑制SW480细胞增殖并促进其凋亡。     

红景天苷通过AKT/mTOR信号通路对结肠癌细胞SW480增殖、凋亡和裸鼠移植瘤生长的影响

目的 探究红景天苷(salidroside, SAL)对结肠癌细胞SW480增殖、凋亡和裸鼠移植瘤生长的影响。方法 采用0、25、50、100μmol·L^-1剂量红景天苷处理SW480细胞,将细胞随机分为4组：SAL 0μmol·L^-1组、SAL 25μmol·L^-1组、SAL 50μmol·L^-1组和SAL 100μmol·L^-1组。克隆形成实验检测细胞克隆形成率;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测Ki67、PCNA、Caspase-3、Caspase-9、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达水平。建立结肠癌裸鼠移植瘤模型,裸鼠随机分为2组：Control组和Salidroside 50 mg·kg^-1组,检测裸鼠肿瘤重量,TUNEL染色检测裸鼠肿瘤细胞凋亡率,免疫组化染色检测Ki67、Caspase-3阳性细胞数。结果 体外实验中,与SAL 0μmol·L^-1组相比较,SAL...     

槲皮素通过抑制己糖激酶的表达促进结肠癌SW480细胞凋亡

目的观察槲皮素对SW480细胞增殖和凋亡的影响并探讨其机制。方法采用流式细胞检测技术检测槲皮素诱导人结肠癌SW480细胞的凋亡能力;应用免疫细胞化学技术检测细胞中己糖激酶蛋白的表达。结果槲皮素以浓度依赖性的方式诱导结肠癌SW480细胞的凋亡并下调己糖激酶蛋白的表达。结论槲皮素通过抑制己糖激酶的表达来促进结肠癌SW480细胞凋亡。     

Temporin-PE肽对结肠癌LoVo细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的 在细胞水平上初步探讨Temporin-PE肽抗结肠癌作用.方法 分别用50、100、150、200μg/ml Temporin-PE肽处理的人结肠癌LoVo细胞株作为实验组,以等体积DMEM-H(无血清)处理的LoVo细胞作为对照组.通过CCK-8法和细胞克隆形成实验检测不同浓度Temporin-PE肽对LoVo...     

木香内酯对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨木香内酯（micheliolide,MCL）对结肠癌细胞增殖和凋亡的作用及潜在机制。方法 通过腹腔注射致癌剂氧化偶氮甲烷（azoxymethane,AOM）和饮用致炎剂葡聚糖硫酸钠（dextran sodium sulfate,DSS）构建AOM/DSS小鼠结肠癌模型,分别给予尾静脉注射2.5 mg·kg^-1顺铂、MCL 0,10,20,50 mg·kg^-1,连续30 d记录小鼠存活率。取肿瘤组织,称肿瘤质量。免疫组化检验小鼠肿瘤组织Ki67和胱天蛋白酶3（caspase-3）蛋白表达水平,Western blotting检测小鼠肿瘤组织PTEN蛋白表达量;结肠癌细胞系SW620分别用含10 µmol·L^-1顺铂、MCL 0,2.5,5,10 µmol·L^-1培养基培养,或转染siPTEN后在MCL 0和10 µmol·L^-1培养基培养。BrdU细胞增殖试验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞增殖抗原（Ki67、PCNA）、细胞凋亡相关蛋白（cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax）及PTEN蛋白表达量。结果 与模型组相比,MCL增加小鼠生存率,减轻肿瘤质量,增加抑瘤率,上调PTEN蛋白表达,减少Ki67阳性细胞,增加caspase-3阳性细胞（P<0.05或P<0.01）;与对照组相比,MCL降低结肠癌细胞BrdU阳性细胞百分比,下调Ki67和PCNA的表达量,增加细胞凋亡率,下调Bcl-2的表达量,上调Bax、cleaved caspase-3和PTEN的表达（P<0.05或P<0.01）;抑制PTEN表达能逆转MCL对SW620细胞增殖和凋亡的作用（P<0.01）。结论 MCL抑制结直肠癌细胞增殖并诱导细胞凋亡,这与上调PTEN表达有关。     

阿司匹林对结肠癌细胞株SW480生长增殖及癌胚抗原含量的影响

目的：观察阿司匹林对结肠癌细胞株SW480生长增殖及癌胚抗原含量的影响。方法：结肠癌细胞株SW480常规培养于含有10％小牛血清的RPMI1640培养液中，在37℃，5%CO2中贴壁培养。分别给予阿司匹林0、2．5mmol/L、5．0mmol/L、10．0mmol/L,于加药后2、4、6天微粒子捕捉免疫法测定癌胚抗原（CEA）；四甲基谷氮唑蓝实验（MTT）法测定SW480生长抑制率。结果：阿司匹林能减少CEA的生成，对SW480的生长抑制作用呈浓度依赖关系。在观察的药物浓度和时间范围内，共抑制最高达78．72％。结论：阿司匹林能抑制结肠癌细胞株SW480生长；CEA可能是监测结肠癌发生、发展、预后的有效指标。     

RO3306对人结肠癌细胞HT29增殖及凋亡的影响

目的观察RO3306对人结肠癌细胞HT29增殖及凋亡的影响。方法选用苔盼蓝染色细胞计数法、细胞集落形成法检测RO3306对人结肠癌细胞HT29细胞增殖影响;采用流式细胞术检测RO3306对HT29细胞周期及凋亡指数的影响。结果苔盼蓝染色和集落形成法结果均显示,RO3306作用HT29细胞后,细胞的生长抑制率随着药物浓度的增加、作用时间的延长而逐渐增高;流式细胞仪检测结果显示,RO3306在0.2mg/L,2mg/L浓度下作用48h对HT2凋亡指数呈现随浓度的提高而逐步上升的趋势,当药物浓度增加到20mg/L,HT29的凋亡指数显著上升,其细胞周期有明显阻滞,随着作用时间的推移出现了更明显的S期阻滞。结论 RO3306具有时间和浓度依赖性地抑制大肠癌HT29细胞的增殖,阻滞其细胞周期、诱导其凋亡。     

雷公藤内酯醇联合奥沙利铂抗人结肠癌细胞SW480增殖的体外研究

目的观察雷公藤内酯醇（Triptolide,TPL）和奥沙利铂（Oxaliplatin,L-OHP）单用及联合应用对人结肠癌细胞SW480体外增殖的影响,初步探讨其作用机理。方法 MTT法检测L-OHP和TPL单用和联合对人结肠癌细胞株SW480增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期改变。结果 TPL和L-OHP联合应用对SW480细胞的增殖有协同抑制作用。流式细胞仪检测发现细胞阻滞于S期,G2/M期细胞减少及出现凋亡峰;结论实验证实TPL和L-OHP联合应用能协同抑制SW480细胞增殖,其作用机理有可能是通过阻滞细胞周期引起的。     

奥曲肽与氟尿嘧啶联合对人结肠癌细胞SW480增殖抑制作用的研究

目的:研究奥曲肽单用及其与5-氟尿嘧啶(5-FU)联合对人结肠癌细胞SW480的增殖抑制作用。方法:采用MTT比色法测定不同浓度(10-7～10-10mol.L-1)奥曲肽单用及其与5-FU(12.5、25、50μg.mL-1)联合作用SW480后的吸光度值后计算抑制率。结果:奥曲肽各浓度中,以10-10mol.L-1抑制率最高,10-12mol.L-1以下对细胞增殖无抑制作用;奥曲肽与5-FU联合使用对细胞增殖的抑制率明显高于单用组(P<0.01)。结论:奥曲肽能抑制人结肠癌细胞SW480的增殖,并与5-FU有协同作用。     

青蒿琥酯对结肠癌细胞增殖、凋亡及β-catenin表达的影响

目的　探讨青蒿琥酯对结肠癌细胞增殖、凋亡及β-catenin 表达的影响。方法　取对数生长期的结肠癌HT-29 细胞,用12.5 μg/mL、25 μg/mL、50 μg/mL的青蒿琥酯分别培养24 h、48 h 和72 h。MTT 检测细胞增殖;AnnexinV/PI 双染检测细胞凋亡率;流式细胞术检测细胞周期分布;Western blot 检测β-catenin 蛋白表达。结果　MTT 结果显示,青蒿琥酯能明显抑制结肠癌HT-29 细胞增殖,与对照组（0 μg/mL）相比,差异具有统计学意义（P<0.01）;AnnexinV/PI 检测结果表明,细胞的凋亡率随着青蒿琥酯浓度的增高而逐渐增高,明显高于对照组（P<0.05）;流式细胞仪检测细胞周期变化的结果显示,HT-29 细胞G0/G1 期比例与青蒿琥酯浓度呈反比（P<0.05）,G2/M 及S 期比例逐渐增加（P<0.05）。Western blot 检测结果证实,青蒿琥酯处理细胞后β-catenin 表达随药物浓度升高而降低（P<0.05）。结论　青蒿琥酯可抑制结肠癌细胞增殖,促进细胞凋亡,下调β-catenin 的表达,有望成为临床治疗肿瘤的新型药物。     

黄芩素对人胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响

摘 要 目的：探讨黄芩素对人胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法: 人胰腺癌细胞株BxPC 3和PANC 1经不同浓度（0,50,75,100 μmol·L-1）的黄芩素处理后,通过CCK 8检测、划痕愈合实验、细胞迁移、侵袭实验、显微镜观察、Real time qPCR 检测增殖和凋亡相关基因的影响等方法,观察黄芩素在胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭以及凋亡、基因表达的影响。结果: 与空白对照组比较,黄芩素能够显著抑制胰腺癌细胞BxPC 3和PANC 1的增殖,并且随着浓度的加大,对BxPC 3和PANC 1增殖的抑制作用在加强（P＜0.01）;且黄芩素对两种胰腺癌细胞系的作用效果与临床常用抗癌药吉西他滨（2 μmol·L-1）的作用效果相似。黄芩素能显著抑制胰腺癌细胞的迁移和侵袭,诱导癌细胞的凋亡,诱导胰腺癌细胞自噬;经过黄芩素处理的癌细胞,细胞周期相关基因和抗凋亡基因（cyclinD1、cyclinE、cyclinA和Bcl 2）表达水平下降,而细胞凋亡相关基因（caspase 3和Bax）的表达水平上调明显。结论: 黄芩素能有效抑制胰腺癌细胞BxPC 3和PANC 1的增殖、迁移和侵袭,并且可以通过凋亡和自噬诱导细胞死亡。