微小RNA-155-5p靶向尾型同源盒基因1抑制人胰腺癌细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化

目的观察尾型同源盒基因1(CDX1)对胰腺癌(PC)细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化(EMT)的作用, 探讨微小RNA-155-5p(miR-155-5p)/CDX1轴调控PC细胞迁移、侵袭和EMT的分子机制。方法选取2020年1月至2023年1月在临沂市人民医院肝胆外科行PC切除术的30例PC患者的癌组织为研究对象, 采用免疫组织化学染色、免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PC癌和癌旁组织CDX1的表达水平。通过细胞计数试剂(CCK-8)、划痕实验、Matrigel侵袭实验检测细胞迁移、侵袭能力;采用免疫印迹和RT-qPCR检测EMT相关基因E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平, 采用荧光素酶报告基因实验检测miR-155-5p与CDX1启动子区的结合情况。组间差异采用t检验或方差分析(ANOVA)。结果 PC组织中CDX1蛋白和RNA表达水平(7.15±1.72、9.17±2.83)明显高于癌旁组织(1.00±0.28、1.00±0.38), 差异有统计学意义(t=11.290、13...     

结肠腺癌细胞微小RNA-21-5p和B细胞慢性淋巴细胞白血病/淋巴瘤7表达的关系及其临床意义

目的探讨微小RNA(miR)-21-5p/B细胞慢性淋巴细胞白血病/淋巴瘤7(BCL7A)轴在对结肠腺癌细胞系体外增殖和迁移的作用。方法通过生物信息学公共数据库GEPIA2和Starbase 2.0官网分析miR-21-5p和BCL7A在结肠腺癌中的表达特点, 以及两者的相互关系。并开展体外细胞学研究, 采用48孔板体外培养结肠腺癌细胞系Caco-2细胞, 设立miR-21-5p模拟物组(miR-21-5p mimics)、mimics阴性对照组(mimics NC)、miR-21-5p抑制剂组(miR-21-5p inhibitor)、inhibitor阴性对照组(inhibitor NC)、miR-21-5p inhibitor+sh-BCL7A组, 每组3个样本, 均采用慢病毒转染实验过表达或敲减相应基因。基因干扰成功后, 采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)用于检测Caco-2细胞的BCL7A表达水平, 噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力, 划痕实验实验来评估细胞迁移率。结果生物信息学分析结果显示, 结肠腺癌组织miR-21-5p表达水平为17.6±3.8, 高于癌...     

环状RNA Ras同源家族成员T1靶向调控微小RNA-204-5p对人类乳腺癌细胞株7增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

目的探讨环状RNA Ras同源家族成员T1(circ-RHOT1)及微小RNA-204-5p (miR-204-5p)在乳腺癌中的表达及其对人类乳腺癌细胞株7(MCF-7)细胞增殖、克隆形成、侵袭、迁移、凋亡及上皮-间充质转化过程的影响。方法定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测circRHOT1及miR-204-5P在乳腺癌细胞系(人源性)MCF-7以及正常乳腺上皮细胞(人源性)MCF-10A中的表达;双荧光素酶实验及qRT-PCR证明circRHOT1和mirR-20-5p的关系。采用噻唑蓝(MTT)实验, 克隆形成实验, 流式细胞实验, transwell侵袭实验, 划痕实验, 检测各组细胞的增殖、克隆形成、侵袭、迁移及凋亡能力。蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞上皮间质标志物表皮钙黏蛋白(E-cadlherin)、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达。采用t检验或单因素方差分析进行统计分析。结果 circRHOT1在乳腺癌细胞系MCF-7中的表达量显著高于乳腺正常上皮细胞MCF-10A(4.77±0.11比1.00±...     

微小RNA-21促进胰腺癌细胞侵袭的研究

目的探索微小RNA-21(miR-21)对胰腺癌MiaPaCa-2细胞侵袭能力的影响和机制。方法选取人类胰腺癌MiaPaCa-2细胞, 采用简单随机法分为四组:正常组、miR-21过度表达组、空白对照组和miR-21抑制组。通过慢病毒载体感染MiaPaCa-2细胞, 调节miR-21的表达, 反转录聚合酶链反应(RT-PCR)验证miR-21的表达;体外侵袭实验(Transwell)检测其侵袭能力;流式细胞蛋白检测和RT-PCR检测上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白和基因的表达, 包括E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、N-钙黏附蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)。两样本间的比较采用t检验。结果 miR-21组中miR-21的表达(1.99±0.17)和MiaPaCa-2细胞侵袭能力(128.00±5.66)高于正常组(0.87±0.12、36.50±0.71), 差异有统计学意义(t=9.406、39.315, P<0.01), 反之miR-21i组中miR-21的表达(0.50±0...     

微小RNA-129-5p通过成纤维细胞生长因子2调节老年性骨质疏松性骨折中骨分化和骨稳态的功能研究

目的探讨破骨细胞分化过程中微小RNA(miR)-129-5p的失调以及miR-129-5p在破骨细胞分化中的确切作用机制。方法首先建立核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导鼠源单核巨噬细胞(RAW264.7)分化的破骨细胞, 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-129-5p在破骨细胞分化前后的表达差异。然后用miR-129-5p模拟物处理RANKL诱导的RAW264.7细胞, 验证miR-129-5p对破骨细胞分化的影响。细胞计数试剂盒(CCK-8)实验用于检测破骨细胞的增殖活性, 抗酒石酸酸性磷酸酶染色确定破骨细胞数目, 蛋白质印迹法检测破骨相关标志物的蛋白表达。最后, 通过RT-qPCR或蛋白质印迹法分析miR-129-5p对成纤维细胞生长因子2(FGF2)表达的影响。组间统计学差异采用T-Test法检验。结果 miR-129-5p在RANKL组的表达水平低于对照组(0.405±0.007比0.984±0.031, t=24.070, P<0.01)。在功能上, 上调miR-129-5p可以抑制破骨细胞的分化, CCK-8实验结果显示, miR-12...     

三阴性乳腺癌中linc00921通过靶向调控微小RNA-9-5p对细胞侵袭能力的影响

目的观察三阴性乳腺癌细胞中长链非编码RNA linc00921靶向调控微小RNA(miR)-9-5p对细胞侵袭能力的影响。方法收集2019年4月至2020年4月期间河北医科大学第四医院乳腺外科三阴性乳腺癌及癌旁标本共30例作为研究对象, 利用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析linc00921与miR-9-5p表达的相关性;将MDA-MB-231细胞分为linc00921过表达组和对照组, 利用细胞侵袭实验观察其对细胞侵袭能力的影响;利用实时荧光定量PCR检测linc00921对miR-9-5p表达的影响;采用生物信息学分析及双荧光素酶报告基因验证linc00921与miR-9-5p的关系;将细胞分为miR-9-5p mimics+ linc00921组和miR-NC+linc00921组, 观察linc00921影响细胞的侵袭能力是否与miR-9-5p有关。两组间比较采用t检验。结果过表达linc00921组侵袭细胞数[(154.50±12.06)个]低于对照组细胞[(400.50±6.36)个, t=61.500, P<0.05];生物信息学分析及双荧光素酶报告基因验证结...     

miR-485-5p靶向EGFR对卵巢癌顺铂耐药细胞系的影响

目的探讨miR-485-5p对顺铂耐药卵巢癌细胞的影响及其机制。方法 RT-qPCR检测人正常卵巢上皮细胞株(IOSE-80)及卵巢癌细胞株(A2780、SKOV3、OVCAR3、OVCA433)中miR-485-5p的表达。构建顺铂(DDP)耐药卵巢癌细胞并检测miR-485-5p与EGFR的表达。CCK8法检测各组细胞增殖能力, 流式细胞术测定细胞凋亡。结果相对于IOSE-80细胞, 各卵巢癌细胞株中miR-485-5p的表达显著下降, EGFR表达上升(均P<0.05)。SKOV3/DDP细胞株(0.17±0.02)中miR-485-5p表达较SKOV3细胞(0.32±0.04)进一步下降(t=5.81,P=0.004)。而SKOV3/DDP细胞中EGFR表达则较SKVO3进一步上升(P<0.05)。SKOV3/DDP细胞转染miR-485-5p mimic能抑制细胞增殖活力、诱导细胞凋亡, 转染miR-485-5p inhibitor则相反(均P<0.05)。SKOV3/DDP细胞转染EGFR能促进细胞增殖并抑制细胞凋亡, 该作用被miR-485-5p mim...     

微小RNA-9-5p通过靶向作用于亮氨酸拉链肿瘤抑制因子2对三阴性乳腺癌细胞侵袭能力的影响

目的观察三阴性乳腺癌(TNBC)细胞中微小RNA(miRNA, miR)-9-5p对亮氨酸拉链肿瘤抑制因子2(LZTS2)的调控作用, 及其对三阴性乳腺癌细胞侵袭能力的影响。方法收集30例2019年4月至2020年4月期间河北医科大学第四医院乳腺外科三阴性乳腺癌及癌旁标本。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测三阴性乳腺癌组织中miR-9-5p及LZTS2基因的表达水平;将MDA-MB-231细胞分为阴性对照组及miR-9-5p模拟物组, 采用双荧光素酶报告基因实验分析LZTS2是否为miR-9-5p靶基因;再将MDA-MB-231细胞分为阴性对照组及miR-9-5p抑制剂组, 采用蛋白印迹实验检测miR-9-5p对LZTS2蛋白表达的影响;采用细胞侵袭实验检测miR-9-5p抑制剂对细胞侵袭能力的影响;随后, 将MDA-MB-231细胞分为miRNA阴性对照+空载体组及miR-9-5p模拟物+LZTS2组, 利用细胞侵袭实验分析miR-9-5p对细胞侵袭能力的影响是否与LZTS2表达有关, 两组间比较采用t检验。结果实时荧光定量PCR结果表明miR-9-5p在三阴性乳腺癌组织...     

微小RNA-214-5p靶向SUZ12对宫颈肿瘤细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨微小RNA(miR)-214-5p靶向SUZ12对宫颈癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法选取2020年6月到2022年6月商丘市第一人民医院收治的宫颈癌组织和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析miR-214-5p表达水平。人宫颈癌细胞株CaSki随机分为对照组和miR-214-5p组。分别采用对照慢病毒和miR-214-5p慢病毒感染建立稳定细胞株。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和BrdU实验分析两组细胞的增殖活性;采用划痕实验分析细胞的迁移能力;采用Transwell分析两组细胞的侵袭能力。通过数据库和双荧光素酶报告基因分析miR-214-5p的靶基因。采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析靶蛋白的表达水平。组间计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织中miR-214-5p表达水平(1.37±0.13)明显高于宫颈癌组织(0.56±0.14), 差异有统计学意义(t=32.110, P<0.05)。对照组细胞miR-214-5p表达水平(1.16±0.08)明显低于miR-214-5p组细胞(2.79±0.18), 差异有统计学意义(...     

微小RNA-146-5p靶向Notch2对非小细胞肺癌增殖、凋亡和侵袭的影响

目的探讨微小RNA(miRNA, miR)-146-5p靶向Notch2对非小细胞肺癌增殖、凋亡和侵袭的影响。方法选取南阳医学高等专科学校第一附属医院2018年5月至2022年5月收治的58例非小细胞肺癌和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤和癌旁组织miR-146-5p表达水平。采用慢病毒建立miR-146-5p过表达非小细胞肺癌A549细胞系, 分别为miRNA对照组和miR-146-5p组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和体外移植瘤实验分析肿瘤细胞增殖能力, 采用流式细胞术分析细胞凋亡水平;采用Transwell分析细胞侵袭能力;生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-146-5p靶基因。蛋白质免疫印迹分析靶基因的表达水平。组间数据比较采用t检验。结果癌旁组织中miR-146-5p表达水平(1.09±0.16)明显高于非小细胞肺癌组织表达水平(0.48±0.12), 差异有统计学意义(t=23.940, P<0.05)。miRNA对照组细胞miR-146-5p表达水平(0.96±0.41)明显低于miR-146-5p组细胞(2.69±0.2...     

微小RNA-1910-3p调控三方基序包含蛋白37影响非小细胞肺癌细胞生物学行为

目的探讨微小RNA-1910-3p(miR-1910-3p)调控三方基序包含蛋白37(TRIM37)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞生物学行为的影响。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法评估人非小细胞肺癌细胞(A549细胞系)和人正常肺上皮细胞(BEAS-2B细胞系)中miR-1910-3p的表达水平。采用生物信息学分析、RT-qPCR、蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-1910-3p对TRIM37的靶向调控关系。A549细胞分别转染阴性对照模拟物(NC组)、miR-1910-3p模拟物(miRNA-mimic组)、miR-1910-3p抑制剂(miRNA-inhibitor组), 细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验检测各组细胞增殖能力、膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)实验检测各组细胞凋亡率、Transwell小室和细胞划痕实验分别检测各组细胞侵袭率和迁移率。两组间比较采用独立样本t检验。结果 RT-qPCR结果显示, A549细胞组中miR-1910-3p表达水平高于BEAS-2B细胞组(1.566±0.019比1...     

外泌体微小RNA-183-5p诱导淋巴管生成促进肺腺癌转移

目的探讨外泌体微小RNA(miR)-183-5p在肺腺癌(LUAD)中作用。方法通过定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)验证LUAD患者外周血miR-183-5p的表达, 通过5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)增殖、侵袭试验和淋巴管形成试验探讨其在LUAD中的作用。利用生物信息学预测和荧光素酶报告基因实验, 确定miR-183-5p的靶基因。采用t检验或单因素方差分析进行统计分析。结果 miR-183-5p在LUAD患者血浆表达高于健康组(2.746±1.111比1.346±0.474, t=8.195, P<0.05), 且在淋巴结(LN)转移中表达高于LN阴性者(3.503±1.304比2.320±0.706, t=4.174, P<0.05), 在LUAD血浆外泌体中表达也高于健康组(2.071±0.931比0.830±0.633, t=6.039, P<0.05)。EdU增殖实验表明miR-183-5p mimic及其对照组和miR-183-5p inhibitor及其对照组个数分别为83.000±4.000、55.670±5.508、25.330±5....     

含三方基序54调控胰腺癌增殖、侵袭和转移的机制

目的探讨含三方基序54(TRIM54)在胰腺癌中的调控机制。方法胰腺癌细胞株(ASPC-1、BXPC-3、MIA-PaCa-2、PANC-1、SW1990)和正常胰腺上皮导管细胞(HPDE)株购自美国模式培养物集存库(ATCC)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测TRIM54在人胰腺导管上皮细胞(HPDE)和胰腺导管腺癌(PDAC)细胞中的表达。通过转染质粒(shRNA)敲低TRIM54的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞的增殖能力。Transwell和细胞划痕实验检测细胞侵袭迁移能力的变化。两组之间的比较采用独立样本t检验, 多组样本之间的比较采用方差分析。结果通过RT-PCR检测, HPDE中TRIM54信使RNA(mRNA)表达水平明显低于胰腺癌细胞(ASPC-1、BXPC-3、MIA-PaCa-2、PANC-1、SW1990)(1.00±0.02比2.05±0.04比1.37±0.03比1.62±0.02比3.18±0.10比3.59±0.07, F=1 042.04, P<0.05)。Western b...     

微小RNA-486-5p通过调控缺氧诱导因子-1α/人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶A信号通路影响结肠癌的发生发展

目的探讨微小RNA-486-5p(miR-486-5p)通过调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶A(Akt)信号通路影响结肠癌的发生发展。方法脂质体Lipofectamine? 3000将miR-486-5p模拟物NC(对照), miR-486-5p模拟物转入SW480结肠癌细胞中, 细胞购自上海细胞库。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-486-5p表达, 噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力, 流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期, Transwell实验检测细胞侵袭, 蛋白质印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关蛋白X(bax)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p27、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、HIF-1α、PTEN、PI3K及磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达。组间比较采用t检验进行分析。结果 miR-486-5p模拟物组细胞miR-486-5p表达量(1.87±0.09比1.00±0.10, t=5.589...     

miR-1249-5p对前列腺癌PC-3细胞增殖、转移和细胞周期的影响

目的探讨miR-1249-5p对前列腺癌PC-3细胞增殖、转移和细胞周期的影响。方法采用OncoMir肿瘤数据库(OMCD)分析miR-1249-5p表达水平与前列腺癌患者总生存期的关系。将人前列腺癌细胞株PC-3分为两组:miR-1249-5p组和阴性对照组。以Lipofectamine 2000为介导,将miR-1249-5p拟似物脂质体复合物或阴性miRNA脂质体复合物转染入对数生长期的PC-3细胞。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测两组PC-3细胞miR-1249-5p的表达水平,采用集落形成实验检测两组PC-3细胞增殖能力的变化,采用Transwell实验检测两组PC-3细胞侵袭变化,采用流式细胞仪检测两组PC-3细胞周期变化。通过miRNA预测软件miRGator预测miR-1249-5p的靶基因。RT-qPCR和Western blotting法分别检测miR-1249-5p的靶基因表达。计量资料以均数±标准差(x±s)表示,两组间比较采用t检验。结果与miR-1249-5p低表达的前列腺癌患者相比,miR-1249-5p表达水平较高的前列腺癌患者总生存期较长,差异具有统计学意义(P<0.01)。miR-1249-5p组miR-1249-5p表达水平(10.74±1.19)明显高于阴性对照组(1.56±0.27),差异具有统计学意义(P<0.01)。miR-1249-5p组集落形成数[(35.86±6.94)个/孔]明显少于阴性对照组[(88.94±11.66)个/孔],差异具有统计学意义(P<0.01)。miR-1249-5p组穿膜细胞数[(25.01±6.83)个/高倍视野]明显少于阴性对照组[(82.76±8.35)个/高倍视野],差异具有统计学意义(P<0.01)。miR-1249-5p组处于G_(0)~G_(1)期的细胞比例[(50.79±6.61)%]明显高于阴性对照组[(27.09±2.30)%],差异具有统计学意义(P<0.01),PC-3细胞被抑制在G_(0)~G_(1)期。神经前体细胞表达发育调控蛋白9(NEDD9)可能是miR-1249-5p的靶基因。与阴性对照组比较,miR-1249-5p组NEDD9基因表达水平显著低于阴性对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论miR-1249-5p可以抑制前列腺癌PC-3细胞增殖、转移和细胞周期,其可能通过负调控原癌基因NEDD9表达实现。     

微小RNA-499-5p靶向CYLD对肿瘤细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨微小RNA(miRNA, miR)-499-5p靶向CYLD对肿瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法选取2020年5月至2022年5月我院收治的宫颈癌组织和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析miR-499-5p表达水平。采用对照miRNA和miR-499-5p抑制剂转染宫颈癌细胞Hela, 命名为对照miRNA组和miR-499-5p KD组, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-Ethynyl-2′-deoxyuridine, EdU)染色法分析肿瘤细胞增殖能力;采用划痕和Transwell分析两组细胞的迁移能力。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-499-5p靶基因。采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析两组细胞增殖、侵袭和靶蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果宫颈癌组织中miR-499-5p表达水平(1.78±0.21)明显高于癌旁组织(1.07±0.14), 差异有统计学意义(t=22.920, P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值水平(2.23±0.15)明显高于mi...     

微小RNA-6791-5p靶向磷酸呋喃酸性簇分选蛋白2抑制结直肠癌增殖、迁移和侵袭

目的探讨微小RNA(miR)-6791-5p对人结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭功能的影响及其分子机制。方法采集培养人结直肠癌细胞系RKO、SW480、DLD1、HCT116以及人正常结肠上皮细胞NCM460。通过反转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-6791-5p在各细胞系中的表达水平(表达倍数为0.52±0.04、0.83±0.06、0.60±0.12、0.68±0.07), 并构建miR-6791-5p模拟物(miR-6791-5p mimic)及其阴性对照Negative control, 并将其转染至RKO细胞。使用RT-qPCR检测miR-6791-5p和PACS2 mRNA的表达水平(表达倍数为0.468±0.032)。利用蛋白质印迹法(Western blot)检测PACS2蛋白的表达水平[RKO:(51.590±6.018)%]。使用两样本t检验进行统计分析, 结果以均数±标准差(±s)表示, 以P<0.05为差异有统计学意义。结果 miR-6791-5p在人结直肠癌细胞系表达水平显著低于人结肠上皮细胞, 其中RKO和DLD1下调最明显(RKO...     

胃癌上皮-间充质转化过程中微小RNA-579-3p/含锌指和BTB域4通路的作用及其机制

目的探讨微小RNA-579-3p(miR-579-3p)/含锌指和BTB域4(ZBTB4)通路在胃癌上皮-间充质转化(EMT)中的作用机制。方法生物信息学筛选胃癌与癌旁组织差异表达的微小RNA(miRNA);实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测50例患者胃癌和癌旁癌旁组织中miR-579-3p、ZBTB4表达;检测胃上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株HGC27、AGS、MKN45中miR-579-3p的表达, 分析miR-579-3p与临床病理特征的关系。生物信息学分析miR-579-3p靶基因。双荧光素酶报告基因验证miR-579-3p与ZBTB4的调控关系。应用miR-579-3p抑制物(inhibitor)干扰HGC27细胞株miR-579-3p表达, 细胞计数试剂盒(CCK-8)法、划痕实验、Transwell小室实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力;RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测mRNA和蛋白表达水平。采用t检验、χ2检验分析数据。结果生物信息学筛选后RT-qPCR检测结果发现miR-579-3p在胃癌组织中表达显著高于癌旁组织(3.259...     

Argonaute 2和微小RNA-145-5p对肝癌细胞增殖和转移的影响

目的探讨Ago2和微小RNA(miRNA, miR)-145-5p对肝癌细胞增殖和转移的影响。方法选取2018年6月至2022年12月商丘市第一人民医院收治的98例肝癌患者肿瘤组织和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质免疫印迹分析miR-145-5p和Ago2表达水平。采用慢病毒在人肝癌细胞系HepG2建立miR-145-5p过表达细胞系, 分别为miRNA对照组和miR-145-5p组, 采用蛋白质印迹法(Western blot)分析Ago2表达水平;采用慢病毒构建Ago2敲降细胞系, 为对照组和Ago2组, 采用荧光定量PCR分析miR-145-5p表达水平。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析不同细胞的增殖能力;采用划痕实验和Transwell实验分析不同细胞的迁移和侵袭能力;分析Ago2和miR-145-5p表达的关系。组间比较采用t检验。结果肝癌组织中Ago2蛋白表达水平(1.99±0.18)高于癌旁组织(1.20±0.12), 差异有统计学意义(t=25.260, P<0.05)。肝癌组织中miR-145-5p表达水平(0.64±0.1...     

微小RNA-422a靶向叉头框蛋白Q1抑制人结直肠癌生长和侵袭能力的研究

目的研究人结直肠癌中微小RNA(miR)-422a的异常表达与肿瘤生物学特征之间的关系, 探讨miR-422a对人结直肠癌细胞系HCT15生长和侵袭能力的调控机制。方法收集2017年8月至2018年1月在武汉大学中南医院实施结直肠癌手术切除标本65例, 收取结直肠癌组织及癌旁组织。采用实时定量反转录聚合酶链反应法(RT-qPCR)检测组织中miR-422a及叉头框蛋白Q1(FoxQ1)的mRNA表达水平, 蛋白质印迹法(Western blot)分析检测组织中FoxQ1的蛋白表达强度。分析miR-422a与结直肠癌肿瘤生物学特征和FoxQ1 mRNA表达水平的相关性。RT-qPCR检测miR-422a在结直肠癌细胞中的表达, 并使用miR-422a模拟物转染人结直肠癌HCT15细胞。采用双荧光素酶活性实验验证miR-422a对FoxQ1的靶向作用。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖情况, Transwell小室法检测细胞侵袭, Western blot法检测FoxQ1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达。结果结直肠癌组织miR-422a的表...