鞣花酸缓解糖尿病小鼠肾损伤的抗氧化机制研究

摘 要 目的：考察鞣花酸对糖尿病小鼠肾脏的保护作用及其机制。方法: 40只雄性ICR小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、厄贝沙坦组（20 mg·kg^-1）和鞣花酸组（100 mg·kg^-1）,每组10只。其中模型对照组、厄贝沙坦组和鞣花酸组采用单次腹腔注射链脲霉素（180 mg·kg^-1）的方法建立糖尿病小鼠模型。注射3周后厄贝沙坦组和鞣花酸组进行给药干预,正常对照组和模型对照组给予生理盐水,灌胃给药,1次/d,连续4周。观察小鼠一般状态、血糖及体质量,肾组织行HE和PAS染色观察肾脏病理形态,测定尿微量白蛋白、血清和尿样中尿素氮、肌酐、血清和肾脏组织中MDA和T SOD,并计算肾脏指数。结果: 模型对照组较正常对照组血糖、24 h尿微量白蛋白、肾脏指数、血肌酐、血尿素氮、MDA明显升高（P<0.01）,体质量、尿肌酐、尿素氮、T SOD明显降低（P<0.01）。与模型对照组相比,鞣花酸组和厄贝沙坦组小鼠的状态明显好转,系膜增生明显缓解,24 h微量白蛋白明显下降（P<0.01）,血肌酐明显下降（P<0.05或P<0.01）,尿肌酐和T SOD明显升高（P<0.05或P<0.01）,MDA明显降低（P<0.01）。结论:鞣花酸对糖尿病小鼠的肾损伤具有一定的缓解作用,可能与抗氧化机制有关。     

正交设计石榴鞣花酸凝胶剂处方配比的研究

目的 采用正交设计法对石榴中鞣花酸凝胶处方配比进行优化。方法 采用正交分析法,以丙二醇、卡波姆-940以及凝胶pH水平作为影响因素,评估指标为凝胶剂鞣花酸均匀性、外观形状、涂展性以及离心性,通过筛选选出最优配比。结果 1.5%的卡波姆-940、15%的丙二醇以及控制凝胶pH在4.0～5.0范围内其各项指标达到最优。结论 经过正交设计优化后的凝胶剂其工艺方法简单且稳定可靠,具有生产可行性。     

藏药石榴莲花散中鞣花酸和胡椒碱含量测定方法研究

目的:建立藏药石榴莲花散中鞣花酸和胡椒碱含量测定方法,以完善其质量标准。方法:采用高效液相色谱法测定制剂中石榴子和诃子的鞣花酸含量,采用ODS-2 HYPERSIL C₁₈色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸(15∶85)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温30℃;采用高效液相色谱法测定制剂中荜茇的胡椒碱含量,采用ODS-2 HYPERSIL C₁₈色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(40∶60)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,检测波长343 nm,柱温30℃。结果:鞣花酸进样量在5.065～25.325μg范围内呈良好线性关系(r=0.9999),平均回收率为97.5%,RSD=1.5%(n=6);胡椒碱进样量在10.414～52.071μg范围内呈良好线性关系(r=1.0000),平均回收率为99.6%,RSD=0.6%(n=6)。结论:该方法可准确测定石榴莲花散中鞣花酸和胡椒碱的含量,有助于提高石榴莲花散的质...     

仙鹤草根芽中新鞣花酸甙的结构研究

继前报从仙鹤草(Agrimonia pilosa Ledeb)根芽中分得(R)-(-)-仙鹤草酚B、伪绵马素、仙鹤草内酯-6-O-β-D-葡萄吡喃糖甙、反式对羟基肉桂酸酯、(2S,3S)-(-)-花旗松素-3-O-β-D-葡萄吡喃糖甙等后,又从其根芽中分得晶ⅩⅢ～ⅩⅥ。经理化性质,波谱数据,化学降解以及衍生物制备,将其中的一个新化合物确定为鞣花酸-4-O-β-D-木吡喃糖甙(ⅩⅤ),另外三个已知化合物分别鉴定为仙鹤草内酯(ⅩⅢ),委     

石榴叶提取物中鞣花酸在大鼠体内药物动力学研究

目的通过大鼠口服石榴叶提取物,研究其中活性成分鞣花酸的药动学特征。方法采用反相HPLC法,紫外检测,应用药动学软件3p87拟合大鼠体内鞣花酸的药动学模型。结果鞣花酸在大鼠体内呈二室模型分布,主要药动学参数为:α=1.07h-1,β=0.12h-1,Ka=5.67h-1,t1/2α=0.65h;t1/2β=5.94h;t1/2Ka=0.12h;K21=0.36h-1;K10=0.35h-1;K12=0.48h-1;AUC=0.85g·h·L-1。结论鞣花酸药动学特征为口服血药浓度低,大部分经胃吸收,达峰时间短,快速吸收、快速分布消除。石榴叶中鞣花酸的吸收大于鞣花酸单体的吸收。     

具有抗癌作用鞣花酸的合成

用没食子酸和过硫酸钾作用合成了鞣花酸,它具有抗癌、抗氧化、抗突变活性.     

HPLC法测定猴枣中鞣花酸的含量

目的： 建立猴枣药材中鞣花酸含量测定方法,并对猴枣不同部位中鞣花酸的含量进行测定。方法：采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）;流动相为0.1%甲酸水-乙腈（83:17）等度洗脱;流速1.0 mL?min-1;检测波长254 nm;柱温：室温。结果： 鞣花酸的质量浓度与峰面积在测定范围内均呈良好的线性关系,其标准曲线及线性范围为 Y =76.566X+89.62（0.0495 ~989.4 μg?mL-1,r=0.9998）;平均加样回收率为99.4%,RSD为1.2%。3批猴枣及其不同部位样品鞣花酸含量结果：平均含量为65.0%,其外层的鞣花酸平均含量最高,为91.0%,而中层、种仁鞣花酸平均含量较少,分别为4.3%、0.6%。结论 该方法简单,准确,重复性好,具有良好的稳定性,可用于猴枣药材质量分析和控制。     

白陶土与鞣花酸检测APTT的差异性分析

目的通过用白陶土与鞣花酸两种不同激活剂检测活化部分凝血活酶时间(APTT),并对其结果进行差异性分析。方法通过对100例临床患者抽取静脉血液分离血浆,用白陶土作为激活剂的ACL Top700和以鞣花酸作为激活剂的Sysmex CA7000两台全自动血凝分析仪上进行APTT指标的检测。并对结果进行配对t检验和相关性回归统计学分析。结果白陶土试剂检测的APTT值与鞣花酸试剂相比有统计学意义(P<0.05),且白陶土试剂检测值低于鞣花酸。结论当实验室同时使用两种激活剂检测APTT指标时,应建立自己的APTT参考值范围。     

糖尿病眼组织病理改变

由于近几年糖尿病的治疗有所改进,病人的健康得到改善,生命也随之延长,但也增加了眼部组织的并发症的发病率。据统计资料报道,凡糖尿病发病15年以上者,约有60％的患者有糖尿病性视网膜病变,目前糖尿病仍是致盲原因之一。以下按眼解剖部位阐述糖尿病眼组织病理改变的临床观察。     

高效毛细管电泳法测定石榴皮中鞣花酸的含量

目的:建立以高效毛细管电泳法测定石榴皮提取物中鞣花酸含量的方法。方法:毛细管柱为未涂层毛细管,缓冲液为30mmol/L氨基丁三醇-30mmol/L磷酸二氢钾(20∶9),分离电压为20kV,检测波长为254nm,柱温为25℃,进样条件为25mbar、5·0s。结果:鞣花酸检测浓度在0·0398~0·3184mg/ml范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0·9993);平均加样回收率为97·42%(RSD=1·84%)。结论:本方法准确、可靠,可用于石榴皮药材的质量控制。     

高效液相色谱法测定地锦草中鞣花酸的含量

目的建立地锦草中鞣花酸含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱：OdyssilC18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：甲醇-0.1%磷酸（40：60）;流速：1.0 mL·min^-1;检测波长：254 nm;柱温：30℃。结果鞣花酸进样量在0.032～0.476μg与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均加样回收率为97.3%,RSD为1.4%。结论该方法简便准确,重现性好,可作为地锦草中鞣花酸的含量测定方法。     

鞣花酸对变异链球菌的体外抑菌作用及机制研究

目的:研究鞣花酸对变异链球菌的体外抑菌作用及可能机制,为其防治龋病的应用提供实验依据。方法:以复方氯己定含漱液为阳性对照、5%二甲基亚砜(DMSO)溶液为阴性对照,采用打孔法抑菌试验测定抑菌圈直径考察50、25、12.5、6.25、3.125、1.562 5 mg/mL鞣花酸对变异链球菌的抑菌效果,并采用微量稀释法测定其对变异链球菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。以5%DMSO溶液为阴性对照,采用结晶紫染色法测定1/8MIC、1/4MIC、1/2MIC、MIC鞣花酸对变异链球菌生物膜形成的影响,并在荧光染色后通过激光扫描共聚焦显微镜观察1/2MIC鞣花酸作用后生物膜的结构变化;分别采用苯酚硫酸法和还原型辅酶Ⅰ氧化法考察1/8MIC、1/4MIC、1/2MIC、MIC鞣花酸对变异链球菌细胞外多糖(EPS)的抑制率和细胞外基质中乳酸脱氢酶(LDH)活力的影响。结果:12.5～50 mg/mL鞣花酸对变异链球菌产生了直径均大于15 mm的抑菌圈,50 mg/mL鞣花酸作用下抑菌圈直径与复方氯己定含漱液相当。鞣花酸对变异链球菌的MIC、MBC分别为12.5、25 mg/mL。...     

鞣花酸对血管内皮生长因子介导的新生血管过程的抑制作用及机制研究

目的:鞣花酸(Ellagic Acid,EA)是存在于多种水果及中草药中的一种多酚类成分,大量研究已经显示其具有显著的抗氧化和潜在的抗肿瘤作用。新生血管作用,是肿瘤发生早期、发展过程中的一个重要因素,对EA在血管内皮生长因子(VEGF)介导的新生血管过程中的作用及可能机制进行探讨。方法:使用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为研究对象,体外培养过程中给予EA10uM,24小时处理,通过细胞增殖实验,刮伤愈合实验,管道形成实验观察EA对于内皮细胞体外增殖,迁移是否具有作用;通过免疫印记实验(western blot)检测EA处理后内皮细胞中磷酸化的2型血管内皮生长因子受体(p-VEGFR2)的蛋白表达量变化。结果:细胞增殖实验中,对照组矫正后570nm吸光度为0.49±0.08,EA处理组为0.27±0.02,差异具有统计学意义(P<0.001);刮伤愈合分析,对照组12小时愈合率为(98.40±2.30)%,EA处理组为(50.61±3.94)%,差异具有统计学意义(P<0.001);管道形成实验中,EA处理组相比对照组管腔形成数量及完整性明显较差;western blot中,EA处理组的细胞中p-VEGFR2含量明显低于对照组,但VEGFR2总量组间无显著差异。结论:EA能够在体外明显抑制血管内皮细胞的增殖、迁移,其作用机制可能为拮抗VEGF介导的VEGFR2的磷酸化过程。     

高效液相色谱内标法测定人血浆中鞣花酸含量

目的:建立内标法测定人血浆中鞣花酸的浓度。方法:选用水杨酸为内标,色谱柱为伊力特SinoChrom ODS柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液(25∶75);检测波长238nm;流速1ml/min。结果:该方法的线性范围为0.5~10μg/ml,R2=0.9998,鞣花酸保留时间3.9min,平均回收率为99.94±1.22%(n=15),精密度实验RSD≤3.5%。鞣花酸的最低定量浓度为0.5μg/ml,进样量在10~200ng范围内线性关系良好。结论:该方法灵敏较高、专属性较强,可用于临床血药浓度监测和人体药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定野鸦椿药材中鞣花酸含量

目的 建立测定野鸦椿药材中鞣花的含量高效液相色谱法.方法 色谱柱为Waters symmetry C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1％磷酸(36:64),流速1 mL/min,柱温为40℃,检测波长为254 nm.结果 鞣花酸进样量在0.129～ 2.06 μg范围内与峰面积呈良好线性关系(r =0.9994),平均加样回收率为100.57％,RSD为2.43％(n=6).结论 该方法线性关系、精密度和准确度良好,专属性强,可作为野鸦椿药材中鞣花酸的质量控制方法.     

九牛造提取物与鞣花酸单体在大鼠体内药动学比较研究

目的 考察大鼠灌胃九牛造提取物与鞣花酸单体后体内鞣花酸的药动学特征及差异。方法 SD大鼠分别灌胃九牛造提取物3 g·kg^-1与鞣花酸单体205.5 mg·kg^-1（含等量鞣花酸）后,在不同时间点采集血浆,通过HPLC测定鞣花酸的血药浓度,应用DAS 2.0软件拟合大鼠体内鞣花酸的药动学模型,计算药动学参数。结果 大鼠灌胃九牛造提取物后,拟合得到以下药动学参数：t_max=0.25 h;C_max=（1.32±0.30） mg·L^-1;AUC_（0-t）=（2.55±0.54） mg·h·L^-1;AUC_（0-∞）=（3.30±0.53） mg·h·L^-1;t_1/2β=（69.32±2.37） h;大鼠灌胃给予鞣花酸单体后,t_max=0.50 h;C_max=（0.40±0.09） mg·L^-1;AUC_（0-t）=（1.30±0.25） mg·h·L^-1;AUC_（0-∞）=（1.81±0.23） mg·h·L^-1;t_1/2β=（8.16±1.18） h。前者较后者达峰时间提前一半,达峰浓度和血药浓度-时间曲线下面积分别提高约3.30和1.46倍,末端消除半衰期延长约8.49倍。结论 鞣花酸化合物在提取物和单体2种不同给药情况下,药动学行为存在明显差异。大鼠灌胃九牛造提取物后,与口服鞣花酸单体相比,鞣花酸化合物的生物利用度明显提高。     

鞣花酸体外抗真菌活性及对小鼠白色念珠菌感染模型的治疗作用研究

目的研究鞣花酸体内外抗真菌作用,确定其抗真菌谱,评价其对小鼠白色念珠菌感染的治疗作用。方法根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的《酵母菌的液基稀释法抗真菌药物敏感性试验方案》(M27-A),测定鞣花酸对临床常见念珠菌的MIC值,确定其抗真菌谱,筛选出对其敏感的真菌菌株;采用小鼠腹腔注射白色念珠菌造成系统性真菌感染模型,以小鼠存活率、血清SOD和MDA含量、肝脏组织病理学为评价指标,观察鞣花酸的体内抗真菌作用。结果鞣花酸体外对念珠菌中白色念珠菌(C.albicans)最敏感,平均MIC为25.0 mg·L~(-1);与模型组比较,鞣花酸体内可明显改善造模小鼠的一般症状,使动物体重明显增加(P<0.05),高剂量组丙二醛(MDA)含量降低(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)活力增加(P<0.01),肝脏组织病理学有明显改善。结论鞣花酸有明显的体内外抗真菌活性,具有一定开发利用价值。     

新疆不同产地石榴花中总鞣质、没食子酸和鞣花酸的含量测定

目的测定新疆不同产地石榴花中总鞣质、没食子酸和鞣花酸的含量。方法采用紫外-可见分光光度法测定总鞣质的含量,HPLC法测定没食子酸和鞣花酸的含量。结果不同产地石榴花中总鞣质(38.44～113.98 mg·g~(-1))、没食子酸(2.39～3.81 mg·g~(-1))和鞣花酸(2.37～5.34 mg·g~(-1))含量差别均较大,和田皮山县石榴花中3种成分含量相对较高。结论该方法准确、专属性强,可用于石榴花药材的质量控制。     

鞣花酸壳聚糖-海藻酸钠微球的制备工艺

目的:优化鞣花酸壳聚糖-海藻酸钠微球的最佳制备工艺。方法:采用一步法,以壳聚糖-海藻酸钠作为载体材料制备鞣花酸微球,并以微球载药量和包封率为考察指标,通过单因素筛选及正交设计优化出鞣花酸壳聚糖-海藻酸钠微球的制备工艺。用溶出仪在900 ml释放介质(pH 6.86)和120 r·min^-1转速条件下测定释放度。结果:优化工艺为海藻酸钠与药物比为3:1,氯化钙质量分数为2%,海藻酸钠质量分数为2%,壳聚糖质量分数为0.1%,温度为60℃,pH为5,所得鞣花酸平均粒径为(980±100)μm,平均载药量为27.22%,平均包封率为97.73%,48 h释放度为74.22%。结论:本制备工艺稳定,操作简便,重现性好,可用于鞣花酸壳聚糖-海藻酸钠微球的制备。     

HPLC测定赤胫散中的3,3’-二甲基鞣花酸和3,3’,4’-三甲基鞣花酸

目的采用HPLC测定赤胫散中的3,3’-二甲基鞣花酸和3,3’,4’-三甲基鞣花酸。方法色谱柱为Dikma-C18柱,流动相为甲醇-乙腈-0.1%磷酸(17∶33∶50),流速1 m L·min-1,检测波长248 nm,柱温30℃。结果 3,3’-二甲基鞣花酸0.198~0.990μg(r=0.9991)、3,3’,4’-三甲基鞣花酸0.098~0.491μg(r=0.9990)与峰面积的线性关系良好,回收率分别为102.40%、98.41%,RSD分别为2.25%、1.87%(n=6)。结论所用方法简便、快捷、准确,可用于赤胫散药材的质量控制。