SIRT1在内毒素性脑损伤小鼠线粒体功能障碍中的作用

目的评价海马沉默信息因子1(SIRT1)在内毒素性脑损伤小鼠线粒体功能障碍中的作用。方法清洁级雄性C57BL/6小鼠80只, 6～8周龄, 采用随机数字表法分为4组(n=20):对照组(C组)、内毒素性脑损伤组(LPS组)、内毒素性脑损伤+SIRT1抑制剂组(LPS+E组)和内毒素性脑损伤+SIRT1激动剂(LPS+S组)。静脉注射LPS 10 mg/kg制备小鼠内毒素性脑损伤模型。于注射LPS前72 h时, LPS+E组腹腔注射SIRT1抑制剂EX527 10 mg/kg, 其余3组腹腔注射等容量DMSO;于注射LPS前30 min时LPS+S组腹腔注射SIRT1激动剂SRT1720 100 mg/kg, 其余3组腹腔注射等容量DMSO。注射LPS 24 h时行新物体识别实验, 安乐处死小鼠, 取海马组织行尼氏染色, 光镜下观察病理学结果, 并计数海马CA1区正常神经元;采用分光光度法测定海马ATP含量和线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的活性, Jc-1染色法检测线粒体膜电位(MMP), 透射电镜观察神经元线粒体超微结构。结果与C组比较, LPS组、LPS+S组和LPS+E组新物体识...     

SIRT1/FoxO1信号通路在三叶苷减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用

目的评价沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框蛋白O1(FoxO1)信号通路在三叶苷减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠80只, 6～8周龄, 体质量230～280 g, 采用随机数字表法分为4组(n=20):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(CIR组)、三叶苷+脑缺血再灌注组(T组)和三叶苷+脑缺血再灌注+SIRT1/FoxO1信号通路抑制剂EX527组(E组)。采用大脑中动脉栓塞法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。T组和E组大鼠于缺血前3 d时开始灌胃给予三叶苷15 mg/kg, 2次/d, 连续3 d;E组大鼠每次灌胃前腹腔注射EX527 5 mg/kg。于再灌注24 h时采用改良Longa评分评估神经功能, 随后处死大鼠取全脑组织, 采用TTC染色确定脑梗死体积, 流式细胞术检测海马神经元凋亡率和ROS水平, Western blot法检测SIRT1及乙酰化FOXO1(Ac-FOXO1)表达, ELISA法检测SOD和MDA含量, HE染色后光镜下观察海马CA1区病理学结果。结果与S组比较, CIR组Longa评分、脑梗死体积、海马神经元凋亡率、RO...     

氯沙坦对脓毒症小鼠急性肾损伤的影响及其与线粒体融合-分裂的关系

目的评价氯沙坦对脓毒症小鼠急性肾损伤的影响及其与线粒体融合-分裂的关系。方法 SPF级雄性C57BL/6J小鼠128只, 6～8周龄, 体质量20～25 g, 采用随机数字表法分为4组(n=32):假手术组(Sham组)、假手术+氯沙坦组(Sham+LOS组)、脓毒症相关性急性肾损伤组(SA-AKI组)及脓毒症相关性急性肾损伤+氯沙坦组(SA-AKI+LOS组)。采用盲肠结扎穿孔法建立小鼠脓毒症模型。Sham+LOS组及SA-AKI+LOS组分别于假手术或造模前3 d开始, 腹腔注射氯沙坦5 mg/kg, 1次/d, 连续3 d;Sham组及SA-AKI组腹腔注射等量溶剂。随机取20只小鼠, 观察术后7 d生存情况。于假手术或造模后24 h, 采用比色法测定血清BUN及Cr浓度, 采用ELISA法测定血清TNF-α、IL-6和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)浓度;取肾组织, HE染色后光镜下观察病理学结果, 并行肾小管损伤评分, 采用荧光素酶法测定ATP含量, 采用JC-1法测定线粒体膜电位(MMP)水平, 采用Western blot法检测动力相关蛋白1(Drp1)及线粒体融合蛋白2...     

吸入高浓度氢气对脓毒症小鼠急性肾损伤及线粒体动力学的影响

目的评价吸入高浓度氢气对脓毒症小鼠急性肾损伤(AKI)及线粒体动力学的影响。方法雄性C57BL/6J小鼠128只, 6～8周龄, 体质量20～25 g, 采用随机数字表法分为4组(n=32):假手术组(Sham组)、假手术+氢气组(Sham+H组)、脓毒症AKI组(S-AKI)和脓毒症AKI+氢气组(S-AKI+H组)。采用盲肠结扎穿孔法建立小鼠脓毒症模型。Sham+H组和S-AKI+H组于假手术或造模后1和6 h时分别吸入67%氢气+33%氧气1 h。取20只小鼠观察造模后7 d的生存情况。于造模后24 h时, 取血标本, 采用比色法测定血清BUN和Cr浓度;取肾组织, HE染色后进行肾小管损伤评分, 采用ELISA法测定肾组织TNF-α、IL-1β和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的含量, 采用分光光度法测定SOD和过氧化氢酶(CAT)的活性, 采用Western blot法测定动力相关蛋白1(Drp1)和线粒体融合蛋白2(Mfn2)的表达水平。结果与Sham组比较, S-AKI组生存率降低, 血清BUN和Cr浓度、肾小管损伤评分、肾组织TNF-α、IL-1β和HMGB1含量升高,...     

SIRT1在电针减轻大鼠脑卒中后中枢性痛中的作用：与NLRP3的关系

目的评价沉默信息调节因子1(SIRT1)在电针减轻大鼠脑卒中后中枢性痛(CPSP)中的作用及其与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的关系。方法 SPF级健康雄性SD大鼠50只, 6周龄, 体重180～220 g, 采用随机数字表法分为5组(n=10):假手术组(Sham组)、CPSP组、CPSP+假电针组(SEA组)、CPSP+电针组(EA组)和CPSP+电针+ SIRT1抑制剂EX527组(EX527组)。除Sham组外, 其余大鼠采用丘脑腹后外侧核内注射Ⅳ型胶原酶制备CPSP模型。于模型制备成功后24 h时EA组电针(2/15 Hz, 30 min/d, 持续5 d)刺激大鼠内关、人中和三阴交穴;SEA组电针刺激内关、人中和三阴交穴旁开5 mm处, 其他处理同EA组;EX527组于电针刺激前30 min腹腔注射SIRT1抑制剂EX527 5 mg/kg, 其他处理同EA组。于模型制备前1 d(T0)和模型制备后1、3和5 d(T1～3)时测定热缩足潜伏期(TWL)和机械缩足反应阈(MWT), 随后处死大鼠取脑组织, 采用Western blot法检测SIRT1、NLR...     

姜黄素减轻脓毒症小鼠急性肺损伤时SIRT1与铁死亡的关系

目的评价姜黄素减轻脓毒症小鼠急性肺损伤(ALI)时沉默信息调节因子1(SIRT1)与铁死亡的关系。方法 SPF级雄性C57BL/6J小鼠152只, 8周龄, 体质量23～27 g, 采用随机数字表法分为4组(n=38):假手术组(C组)、脓毒症组(S组)、姜黄素组(Cur组)和姜黄素+SIRT1抑制剂EX527组(CE组)。Cur组每日姜黄素200 mg/kg灌胃;CE组每日姜黄素200 mg/kg灌胃, 并腹腔注射EX527 5 mg/kg;C组和S组给予等量溶剂二甲基亚砜。各组连续给药5 d后采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症模型。每组随机取20只小鼠观察造模后7 d生存情况。造模后24 h时, 收集支气管肺泡灌洗液(BALF), 采用ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-18浓度;取肺组织, 计算湿重/干重比值(W/D比值), HE染色后行肺损伤评分, 采用比色法检测肺组织还原型谷胱甘肽(GSH)、MDA和铁含量, Western blot法检测肺组织SIRT1、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、酯酰辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)的表达。结果与C组相比, S...     

硫化氢通过调控NLRP3炎症复合体对抗对比剂诱导的急性肾损伤

目的探讨对比剂诱导的急性肾损伤(contrast-induced acute kidney injury, CIAKI)中内源性硫化氢水平是否发生变化, 补充硫化氢是否可下调Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3, NLRP3)炎症复合体从而保护肾小管上皮细胞对抗对比剂所致的肾损伤。方法 24只体重180～220 g清洁级健康雄性Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为对照组、CIAKI组(碘普罗胺2.9 g/kg)及CIAKI+NaHS组(NaHS 4 mg/kg处理3 d后予碘普罗胺2.9 g/kg)组, 每组8只。对肾组织进行全转录组测序及生物信息学分析, HE、PAS染色观察肾组织病理改变, TUNEL法检测肾小管上皮细胞损伤情况, 免疫荧光染色检测肾组织炎症复合体NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain, ASC)、caspase-1的表达。在人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)中探讨硫...     

SIRT1/PGC-1α在高糖状态下线粒体氧化应激损伤致足细胞凋亡中的作用

目的:探讨SIRT1/PGC-1α通路在高糖状态下线粒体氧化应激损伤至足细胞凋亡中的作用。方法:采用高糖高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型，将造模成功的大鼠分为糖尿病模型组和白藜芦醇治疗组。在给药10周末，测定各组大鼠肾质量指数、肾功能和24 h尿蛋白(UTP)变化，电镜及光镜下观察肾脏病理改变，硫代巴比妥酸法检测肾脏MDA含量，WST-1法检测SOD活性，大鼠肾组织SIRT1、PGC-1α、Caspase3及Synaptopodin蛋白表达水平用Western blot法和IHC法检测，大鼠肾组织ROS、Bcl-2、Caspase9、Desmin蛋白水平用IHC法检测。结果:与正常组比较，模型组大鼠UTP明显上升(P<0.05),SOD表达减少，MDA,ROS明显增多(P<0.05),SIRT1,PGC-1α的蛋白表达水平明显下降(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平下降，Caspase9、Caspase3表达升高(P<0.05),Desmin蛋白表达增多，Synaptopodin蛋白表达减少(P<0.05);与模型组比较，白藜...     

糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时SIRT1与NLRP3炎症小体的关系

目的评价糖尿病大鼠心肌缺血再灌注时沉默信息调节因子1(SIRT1)与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的关系。方法 SPF级健康雄性SD大鼠,6～8周龄,体重200～220 g,腹腔注射腹腔注射1%链脲佐菌素-柠檬酸盐缓冲液60 mg/kg制备1型糖尿病模型,造模成功后继续饲养8周。取1型糖尿病大鼠42只,采用随机数字表法分为4组:糖尿病假手术组(DS组,n=6)、糖尿病心肌缺血再灌注组(DIR组,n=12)、糖尿病心肌缺血再灌注+SIRT1激动剂SRT1720组(DIR+SR组,n=12)和糖尿病心肌缺血再灌注+SIRT1抑制剂EX-527组(DIR+EX组,n=12)。取非糖尿病大鼠18只,采用随机数字表法分为2组:非糖尿病假手术组(NS组,n=6)和非糖尿病心肌缺血再灌注组(NIR组,n=12)。采用结扎左冠状动脉前降支30 min后再灌注120 min的方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。再灌注结束即刻采集颈动脉血样,采用ELISA法检测血清cTnI、CK-MB和LDH水平,然后处死大鼠,取心肌组织,采用TTC法检测心肌梗死体积,计算心肌梗死体积百分比;HE染色法...     

电针对内毒素血症大鼠急性肾损伤时HO-1/PINK1/Parkin信号通路的影响

目的评价电针对内毒素血症大鼠急性肾损伤时血红素氧合酶-1(HO-1)/PTEN假定激酶1(PINK1)/Parkin信号通路的影响。方法 SPF级健康雄性SD大鼠24只, 6～8周龄, 体质量180～220 g。采用随机数字表法分为4组(n=6):对照组(C组)、内毒素血症组(E组)、穴位电针+内毒素血症组(EE组)和非穴位电针+内毒素血症组(NE组)。采用腹腔注射LPS 10 mg/kg的方法制备大鼠内毒素血症模型, C组注射等体积生理盐水;E组腹腔注射LPS 10 mg/kg;EE组于造模前5 d开始电针刺激, 1次/d, 选择双侧足三里及肾俞穴, 疏密波, 频率2/15 Hz, 刺激强度以大鼠出现轻微肌颤为宜, 30 min/次, 留针至注射后6 h。NE组刺激穴位旁开0.5 cm处。LPS注射后6 h时麻醉大鼠股静脉取血样, 采用生化分析仪法检测血清Cr和BUN的浓度;ELISA法检测血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子1(KIM-1)、IL-6和TNF-α的浓度。随后处死大鼠取肾组织HE染色并进行肾损伤评分, 采用Western blot法检测HO-1...     

TRPM2-CnA-Drp1通路在丙泊酚减轻小鼠肝缺血再灌注致肾损伤中的作用

目的评价瞬时受体电位M2(TRPM2)-钙调磷酸酶A(CnA)-线粒体动力相关蛋白1(Drp1)通路在丙泊酚减轻小鼠肝缺血再灌注致肾损伤中的作用。方法 SPF级雄性C57BL6小鼠24只,8周龄,体重20～23 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(S组)、肝缺血再灌注组(IR组)、丙泊酚组(P组)和TRPM2激动剂腺苷二磷酸核糖(ADPR)+丙泊酚组(AP组)。采用夹闭肝左、中叶门静脉和肝动脉60 min恢复灌注的方法制备肝缺血再灌注损伤模型。P组于造模前1 h时腹腔注射生理盐水0.2 ml,造模前30 min时腹腔注射1%异丙酚30 mg/kg;AP组于造模前1 h时腹腔注射ADPR 10 mg/kg(溶于0.2 ml生理盐水中),造模前30 min腹腔注射1%异丙酚30 mg/kg;S组和IR组分别于造模前1 h和30 min时腹腔注射等体积生理盐水。于再灌注6 h时摘眼球采血检测血清BUN、Cr、ALT和AST水平,然后处死小鼠取肾组织,透射电镜下观察线粒体超微结构,并计算线粒体长径,采用Western blot法检测TRPM2、CnA、磷酸化Drp1(p-Drp1...     

SIRT1/Nrf2信号通路在睡眠剥夺致大鼠认知功能障碍中的作用

目的评价沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路在睡眠剥夺致大鼠认知功能障碍中的作用。方法成年雄性SD大鼠36只,54～56周龄,体重600～750 g,按照随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、睡眠剥夺组(SD)和睡眠剥夺+SIRT1激动剂Srt1720组(SD+Srt组)。采用改良平台水环境睡眠剥夺法建立大鼠睡眠剥夺模型。SD+Srt组造模前24 h时开始每隔12 h腹腔注射Srt1720 10 mg/kg,C组和SD组腹腔注射等容量0.9%生理盐水。睡眠剥夺结束后,行水迷宫实验评估认知功能,然后处死大鼠,取海马组织,采用HE染色法检测CA1区神经细胞变性率,TUNEL法检测CA1区细胞凋亡率,免疫组化法检测CA1区SIRT1和Nrf2表达,微板法检测ROS和SOD含量。结果与C组比较,SD组和SD+Srt组第2～4天时逃避潜伏期延长,平台象限停留时间缩短,穿越平台次数减少,海马CA1区细胞凋亡率和细胞变性率升高,SIRT1和Nrf2表达下调,海马ROS含量升高,SOD含量降低(P<0.05);与SD组比较,SD+Srt组第3和4...     

丹参对梗阻性黄疸肾脏线粒体保护作用的实验研究

目的探讨氧自由基在梗阻性黄疸引发肾脏损害中的作用及丹参对肾脏线粒体的保护作用。方法将54只Wister大鼠随机分为假手术对照组(A组),胆总管结扎组(B组),胆总管结扎+丹参治疗组(C组)。采用胆总管结扎法(CBDL)建立大鼠梗阻性黄疸模型,C组应用丹参注射液5ml/(kg·d)腹腔注射治疗21d。3组大鼠分别于术后第7天(d7)、14天(d14)、21天(d21)处死,检测血清胆红素(BIL)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)以及肾脏线粒体脂质过氧化产物丙二醛(MDA)和线粒体膜胆固醇含量的变化,观察肾脏及线粒体病理组织学改变,并作比较。结果B组及C组大鼠肾脏线粒体膜胆固醇及MDA含量高于对照组(P<0.05),但C组增高的程度低于B组(P<0.05),并且病理改变也较轻。结论氧自由基所引发的脂质过氧化作用是阻黄引起肾脏损害的重要原因之一,丹参可降低脂质过氧化作用对肾脏线粒体的损害作用,对梗阻性黄疸时的肾脏损害具有保护作用。     

甘草酸二铵对严重烫伤大鼠肝损伤的影响及其机制

目的探讨甘草酸二铵对严重烫伤大鼠肝损伤的影响及其机制。方法采用实验研究方法。取54只7～9周龄雌性SD大鼠, 按随机数字表法分为背部模拟致伤的假伤组及背部造成30%体表总面积Ⅲ度烫伤的单纯烫伤组及烫伤+甘草酸二铵组, 每组18只。假伤组伤后不行特殊处理;单纯烫伤组及烫伤+甘草酸二铵组大鼠进行补液抗休克, 烫伤+甘草酸二铵组大鼠分别于伤后1、25、49 h经腹腔注射50 mg/kg甘草酸二铵溶液。取3组大鼠, 伤后24、48、72 h, 采用全自动生化检测分析仪检测血清肝功能损伤相关指标天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白、白蛋白含量, 采用酶联免疫吸附测定法检测血清鸟氨酸氨甲酰基转移酶(OCT)含量;行苏木精-伊红染色观察伤后72 h肝组织病理学变化;采用实时荧光定量反转录PCR法检测伤后24、48、72 h肝组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、转录激活因子4(ATF4)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)的mRNA表达。采用蛋白质印迹法检测假伤组伤后72 h及烫伤2组伤后24、...     

急性胰腺炎大鼠肾脏中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1mRNA的表达及意义

目的 探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(poly ADP-ribose polymerase-1,PARP-1)mRNA在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠肾脏中的表达及意义.方法 48只Wistar大鼠按随机数字表法分为SAP组和假手术组(SO)组,分别于造模术后1、3、6及12 h测定血清肌酐,观察胰腺和肾脏组织病理变化,并以RT-PCR法检测PARP-1 mRNA在肾脏中的表达水平.结果 SAP组大鼠术后血清肌酐逐渐升高,于3、6及12 h明显高于SO组(P＜0.05).SAP组大鼠术后胰腺出现腺体破坏、腺泡坏死、出血、炎性细胞浸润等病理损害,且呈进行性加重;SO组各时相胰腺组织基本正常.SAP组大鼠术后出现肾小管上皮细胞变性、坏死、肾小球瘀血、缺血等改变,并随时间延长逐渐加重,其损伤程度在3、6及12 h明显较SO组严重(P＜0.05).SO组大鼠肾脏组织仅表达少量PARP-1 mRNA,而SAP组大鼠随病程延长肾脏组织中PARP-1 mRNA表达逐渐增加,自3 h时起明显高于SO组(P＜0.01).结论 在SAP发病过程中,PARP-1 mRNA的表达在肾脏组织中逐渐增加,PARP-1可能参与了SAP相关肾损伤过程.     

氢气对脓毒症相关性脑病小鼠海马线粒体动力学的影响

目的评价氢气对脓毒症相关性脑病小鼠海马线粒体动力学的影响。方法清洁级健康雄性C57小鼠224只,体重20～25 g,6～8周龄,采用随机数字表法分为4组(n=56):假手术组(Sham组)、假手术+氢气组(Sham+H2组)、脓毒症相关性脑病组(SAE组)和脓毒症相关性脑病+氢气组(SAE+H2组)。采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症相关性脑病模型。Sham+H2组和SAE+H2组小鼠分别于术后1和6 h时吸入2%氢气1 h。记录术后7 d生存情况。术后24 h时处死小鼠,光镜下观察海马组织CA1区病理学结果;采用荧光分光光度法检测海马组织线粒体膜电位(MMP),采用荧光素-荧光酶发光法检测线粒体ATP含量。分别于术后6、12和24 h时处死小鼠,采用Western blot法测定海马组织线粒体动力相关蛋白1(Drp1)和线粒体融合蛋白2(Mfn2)的表达。结果与Sham组比较,SAE组和SAE+H2组术后7 d生存率下降,海马组织MMP和线粒体ATP含量降低,Drp1表达上调,Mfn2表达下调(P<0.05),海马CA1区病理学损伤明显,Sham+H2组上述指标差异无统计学意义(P&...     

沉默信息调节因子1在缺血预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)在缺血预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠48只,体重200 ～ 250 g,12周龄,采用随机数字表法,将其分为4组(n=12):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IPC组)和缺血预处理+SIRT1抑制剂组(IPC+ ex527组).采用结扎左冠状动脉前降支30 min再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型,IPC组和IPC+ ex527组进行缺血预处理(缺血5 min,再灌注5 min,重复3个循环,共30 min),IPC+ ex527组分别于缺血前15 min及再灌注前1 min静脉注射ex527 1 μg/kg.分别于缺血前和再灌注120 min时采集股动脉血样,测定血清TNF-α和IL-6的浓度,处死大鼠,取心肌组织,测定乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、SIRT1表达和NF-κB p65乙酰化水平.结果 与S组比较,I/R组和IPC+ ex527组再灌注120 min时血清TNF-α、IL-6浓度、心肌组织LDH、CK-MB活性和NF-κB p65乙酰化水平升高,心肌组织SIRT1表达下调(P＜0.05);与I/R组比较,IPC组血清TNF-α、IL-6浓度、心肌组织LDH、CK-MB活性、NF-κB p65乙酰化水平降低,心肌组织SIRT1表达上调(P＜0.05),IPC+ ex527组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与IPC组比较,IPC+ ex527组血清TNF-α、IL-6浓度、心肌组织LDH、CK-MB活性、NF-κB p65乙酰化水平升高,心肌组织SIRT1表达下调(P＜0.05).结论 SIRT1参与了缺血预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

银杏内酯对急性肾损伤大鼠的保护作用及机制研究

目的探讨银杏内酯对急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)大鼠的保护作用及对肾组织中腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)及沉默信息调节因子(silent information regulator 1,SIRT1)通路的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组(Control组)、AKI组和银杏内酯低(2.5 mg/kg)、中(5 mg/kg)、高(7.5 mg/kg)剂量组,每组10只。除Control组经皮下注射生理盐水外,其余各组大鼠均经皮下注射庆大霉素80 mg/kg,6 d,1次/d,建立AKI模型后,Control组、AKI组经腹腔给予生理盐水,银杏内酯各剂量组经腹腔给予相应剂量药物,1次/d,共给药14 d。末次给药1 h后,收集各组大鼠血液、尿液后处死大鼠,取肾组织标本,用酶联免疫吸附法检测肾功能指标血清肌酐(Scr)、血清尿素氮(BUN)、血清炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及尿液中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤因子1(KIM-1)含量;用苏木精-伊红染色(HE)检测各组大鼠肾组织病理变化;以试剂盒检测肾组织氧化应激反应物超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;凝胶电泳迁移率转变分析法检测肾脏组织NF-κB活性;蛋白免疫印迹法检测肾组织pAMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达情况。结果与Control组相比,AKI组大鼠可见肾小管上皮细胞崩解脱落、空泡变性等病理损伤,Scr、BUN、NGAL、KIM-1含量、肾组织TNF-α、IL-6、MDA含量及NF-κB活性均明显升高(P0.05),肾组织SOD活性、pAMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达量明显下降(P0.05)。与AKI组相比,银杏内酯高、中、低剂量组肾小管病理损伤减轻,Scr、BUN、NGAL、KIM-1、TNF-α、IL-6、MDA含量及NF-κB活性均明显降低(P0.05),SOD活性、pAMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达量明显升高(P0.05)。与银杏内酯低剂量组比较,中、高剂量组肾小管病理损伤减轻,Scr、BUN、NGAL、KIM-1、TNF-α、IL-6、MDA含量及NF-κB活性均明显降低(P0.05),SOD活性、pAMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达量明显升高(P0.05)。结论银杏内酯可能通过激活AMPK/SIRT1通路,减轻肾脏氧化应激和炎性损伤,改善AKI大鼠病理损伤。     

复方天葡片对高+Gz应激致大鼠肾损伤的保护作用

目的:观察模拟高正加速度(+Gz)暴露对大鼠肾脏损伤、中药复方天葡片对肾脏损伤的保护作用。方法:雄性SD大鼠随机分为空白对照、高+Gz应激、复方天葡片治疗组(n=12),提前给予复方天葡片(3.0 g/kg)14 d后进行+10Gz持续5 min,增长率为1 G/s的暴露。检测血常规,血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平,血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,观察肾组织ATP酶活性及电镜下肾脏超微病理改变。结果:高+Gz应激后大鼠白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白含量及血细胞比容升高(P<0.05),Scr、BUN水平显著升高(P<0.01),血清SOD活性显著减低(P<0.05),肾组织ATP酶活性显著降低,电镜下肾组织内细胞核周围线粒体数量与空白对照组相比无显著变化。给予复方天葡片干预后大鼠上述肾脏损伤及氧化应激指标改善,电镜下肾组织细胞核周围线粒体数量增加。结论:高+Gz暴露应激可导致大鼠抗氧化能力减弱,肾脏功能受损和超微结构变化。复方天葡片可改善肾组织有氧代谢,减少氧化产物的生成,促进肾内线粒体新生,有利大鼠高+Gz应激引起肾损伤修复。