探讨RhD阴性表型中个体D基因多态性研究

目的:探讨RhD阴性表型中个体D基因的多态性.方法:随机抽取2014年11月至2015年10月采集的135例无亲缘关系的RhD阴性血液样本作为研究对象.采用抗人球蛋白试验(又称Coombs试验)来检测RhD阴性表型个体,并运用序列特异引物引导的PCR反应(简称PCR-SSP方法)对RhD阴性表型中个体基因结构特点进行分析与统计.结果:135例经Coombs试验检测为阴性表型个体中,检测结果显示为外显子完全缺失有75例,占比55.56%(75/135),外显子部分缺失29例,占比21.48%(29/135),外显子完整31例,占比22.96%(31/135);采用PCR-SSP法进行基因分型,RHD基因完整中RhD(1227A)占比16.30%(22/135),弱D15型占比0.74%(1/135),RHD阳性占比5.19%(7/135);检测RHD基因部分缺失中RHD-CE(2-9)-D占比5.93%(8/135),DVa(Has)占比0.741%(1/135),DVIⅢ占比0.74%(1/135).结论:我国RhD阴性人群的RhD基因基础结构呈现多态性特征,且不同地区的人群有着相同的Rh血型遗背景,今后可以尝试采用血清学与基因分型联合方法检测RhD阴性中的D抗原.     

天津地区RhD阴性围产期妇女RHD基因分型及Rh表型分析

目的 研究天津地区RhD阴性围产期妇女RHD基因分型,并分析不同基因型的RhC、c、E、e分布特征。方法 收集2017年1月至2019年12月在天津市第五中心医院就诊的RhD阴性围产期妇女标本104例,应用血清学方法进行Rh C、c、E、e表型鉴定;使用PCR-SSP法对间接抗人球蛋白试验(IAT)确认为Rh D阴性的样本进行RHD基因分型。结果 104例RhD初筛阴性个体中RhC/E血型分型结果显示,ccee 57例(54.8%),Ccee 29例(27.9%),cc Ee 10例(9.6%),CCee 4例(3.8%),CcEe 3例(2.9%),ccEE 1例(1%);RHD基因分型结果显示,全缺失RHD基因型70例(67.3%),DEL RHD 1227A纯合型13例(12.5%),RHD-CE(2-9)-D型10例(9.6%),弱D15型5例(4.8%),DEL RHD 1227A杂合型2例(1.9%),RhD阳性2例(1.9%),2例(1.9%)不能用此PCR-SSP方法确定其基因型。结论 RhD阴性围产期妇女的RHD基因型分子机制具有丰富的多态性,主要为RHD全缺失型,其...     

中国人群真实RhD阴性个体和RhDel型RHD基因研究

为观察中国人群真实RhD阴性个体和RhD^el型RHD基因存在情况，采用常规盐水法和抗人球蛋白试验筛选RhD阴性捐血者，通过吸收放散试验性确定其中RhD^el和真实RhD阴性，并采用PCR技术检测RHD基因第4内含子，对吸收放散试验结果与基因检测结果不符的样本进一步采用序列特异性引物PCR(PCR-SSP)技术测定RHD基因第3，4，5，6，7，9和10个外显子，观察基因变异。筛选获得104名RhD阴性捐血者，吸收放散试验鉴定25名（24.0％）为RhD^el型，79名（76.0％）为真实RhD阴性；25例RhD^el全部检测到D基因exon4-intro4-exon5区域，79名真实RhD阴性个体中有5名（6.3％）个体（2名Ccdee，2名ccdEe）检测到D基因第4内含子；PCR-SSP结果显示5名个体中，4名存在全部被检测的D基因区域，1名个体（ccdEe）第5外显子检测阴性。结果表明抗人球蛋白试验确认的RhD阴性中国人存在高比率的RhD^el型，且均可检测出RHD基因第4内含子；若排除RhD^el，携带D基因的RhD阴性中国人的比率明显降低，且这些个体并非如经往报道的均为C抗原阳性。     

山东临沂地区RhD阴性无偿献血人群中RHD基因变异体的分析

目的 探讨临沂地区RhD阴性无偿献血人群RHD基因的变异体及其分子背景。方法 2011年采集24875人份全血,获得RhD初筛阴性标本111例,提取DNA后,采用序列特异性引物-多聚酶链反应(SSP PCR),进行以下三步实验：① 检测出缺失RHD基因的RhD阴性、DEL1227G＞A突变以及其他变异体;② 鉴定其他变异体的具体类型;③ 对有突变位点未检出型别的变异体进行测序。结果 临沂地区无偿献血人群中RhD阴性比例为0.45%,在111例RhD初筛阴性标本中,检测到1～10外显子全缺失76例,2～9外显子缺失9例,845G＞A突变3例,3～6外显子缺失3例,1227G＞A 突变18例,RHD(711DELC) 1例,Dva(Hus)1例。结论 临沂地区常规血清学筛查RhD阴性无偿献血人群中RHD基因存在多态性。     

河南省部分RhD(一)献血者RhD基因多态性分析

目的：探讨RhD(-)本省无关供血者中RhD的构成情况。方法：采用PCR－SSP法对80名常规血清学RhD(-)本省供血者RhD基因外显子2、3、4、5、6、7、9、10和内含子4及RhCE内含子4的特异性片段进行扩增。结果：80名RhD(-)供血者中RhD基因完全缺失53例，占66.2%；RhD基因部分缺失7例，占8.7%，其中大部分为3－9外显子缺失；RhD基因完整存在20例，占25％。结论：本省常规血清学RhD(-)无关供血者RhD基因存在高度多态性，提示本省人群RhD（－）特征有多种遗传机制，目前在白种人群中使用的DNA鉴定Rh血型的方法不适合我国人群，临床上应采用适合我国人群的检测方法。     

武威地区无偿献血人群RhD阴性血型调查

目的:调查武威地区无偿献血人群RhD阴性血型。方法:采用IgM型抗D试剂做盐水法初筛试验及IgG+IgM型抗D试剂做间接抗球蛋白试验RhD确认。结果:在44242名无偿献血者中共检出RhD阴性171人,其中A型12915人,A型RhD阴性51人,阴性率为0.39%;B型12587人,B型RhD阴性49人,阴性率为0.39%;O型14476人,O型RhD阴性58人,阴性率为0.40%;AB型4264人,AB型RhD阴性13人,阴性率为0.30%。结论:武威地区无偿献血人群RhD阴性率为0.39%,与我国汉族人群RhD阴性率0.3%-0.4%基本一致,RhD阴性在ABO血型系统的构成比与ABO血型构成比基本符合。武威地区的RhD阴性血液,只要加强管理,合理使用,可基本满足临床需求。     

RhD阴性个体遗传多态性与抗-D同种免疫关系研究

目的：研究血清学RhD阴性个体的基因多态性与抗-D同种免疫的关系,探讨不同基因型个体的个性化输血策略。方法用盐水法及间接抗人球方法（IAT）确定RHD阴性个体,采用序列特异性引物（SSP-PCR）技术分析样本的RHD基因同时进行抗体筛选和抗体鉴定确定产生抗-D的样本。结果在有免疫史的336例入组者样品中,249例（74.1%）个体完全缺失RhD基因,l68例（20.2%）个体携带RHD1227A等位基因,19例（5.6%）携带RHD-CE（2-9）-D融合基因。抗体鉴定产生IgG抗-D的个体68例,63例（92.6%）完全缺失RhD基因,5例（7.4%）携带RHD-CE（2-9）-D融合基因,携带RHD1227A等位基因未检出产生抗-D的个体。结论血清学确定RhD阴性个体的RHD基因型具有丰富的多态性和不同的遗传学背景。真实RhD阴性和部分D个体有D抗原免疫时存在同种免疫风险,作为受血者应输用阴性血。基因型为RHD1227A患者不会产生抗-D,在输血时可输用阳性血。     

RhD阴性孕妇剖宫产一健康RhD阳性胎儿

Rh血型系统通过输血或妊娠可产生免疫性抗体,当遇有相应抗原,可致溶血反应或新生儿溶血病。若误诊误治,可致患者残废或死亡。临床输血时,一般须做ABO血型和Rh血型鉴定,以及(1+1)交叉配血试验。     

长沙地区汉族RhD阴性个体RHD基因多态性研究

目的:研究长沙地区人群Rh阴性个体RHD基因多态性的分布及血清学表型与RH基因型之间的关系。方法:应用PCR-SSP技术检测长沙地区108名Rh阴性献血者的RHD基因和RHCE基因。结果:108例Rh阴性个体中,ccee表型66例、Ccee32例、CCee 7例、CcEe2例、ccEe1例;108例Rh阴性个体中68例RHD基因外显子完全缺失、24例完整、16例部分缺失。吸收放散试验检测出21例RhD放散型。结论:长沙汉族Rh阴性人群的RHD基因结构呈现多态性,常规血清学鉴定的RhD阴性者中存在较高比例的RhD放散型(Del型),且有可能带有完整的RHD基因。携带D基因的吸收放散试验阴性个体中具有C抗原者比例较高,但亦有cc表型存在,有别于文献中认为全属RhC抗原表达者的报告。     

晋城市无偿献血人群RhD阴性血型调查分析

<正>Rh血型系统是继ABO血型发现后临床意义最大的血型系统,其在临床上的重要性仅次于ABO血型系统。目前已发现Rh系统有50多个抗原,与临床密切相关的抗原主要有D、C、c、E、e等5种抗原。由于RhD阴性血型在人群中的分布较低且导致临床上出现输血困难的情况时有发生,临床输血Rh血型不合可引起严重的输血反应和新生儿溶血病,因此为更好地保障RhD阴性血液的正常供应,进一步完善     

RhD阴性无偿献血者抗原表型及抗体筛查情况调查

目的 调查分析廊坊地区RhD阴性无偿献血者抗原表型及抗体筛查情况.方法 选取2015年11月至2020年11月廊坊市中心血站271 247人次无偿献血者中,经初筛检测为RhD阴性的1 358份血液标本,对其进行RhD阴性确认试验、Rh抗原表型、不规则抗体筛查检测.结果 经RhD阴性确认试验检测,1 302份标本为RhD阴性血型,56份为D变异型,其中27份血浆中检出抗-D抗体.结论 为RhD阴性稀有血型献血者进行Rh抗原表型检测和不规则抗体筛查,对保障临床安全用血具有重要的意义.     

304例Rh阴性孕产妇的RhD同种免疫分析

目的 分析304例RhD阴性孕产妇RhD同种免疫发生情况,探讨RhD阴性孕产妇抗D抗体产生的影响因素,建立正确的围产期孕妇RhD新生儿溶血病监测方案。方法 采用标准血清学方法对孕产妇及其丈夫进行ABO及RhD抗原鉴定。对RhD抗原鉴定为阴性的样本,进一步采用间接抗人球蛋白法检测RhD抗原,以排除或确认弱D型或部分D表型。对所有RhD阴性孕产妇及其丈夫进行RhCcEe表型的血清学分型。采用抗人球蛋白法对所有RhD阴性孕产妇标本进行不规则抗体初筛,对初筛阳性者进一步用鉴定细胞做抗体鉴定及抗体效价测定并采用PCR SSP方法确定是否为Del型。结果 3975例孕产妇标本中,304例为RhD阴性,其中29例产生抗D抗体,夫妇ABO血型相合24例（82.76%）,不合5例（17.24%）。本组调查中Rh阴性孕产妇抗D抗体产生的比例为9.54%（29/304）。经分子生物学方法鉴定,29例产生抗D的Rh阴性孕产妇均排除Del表型。 结论 RhD阴性孕产妇RhD同种免疫的发生受多种因素影响,Del型孕产妇产生抗D概率较低。应及时、定期监测RhD阴性围产期孕妇的抗D水平。对已产生抗D抗体的孕妇,密切监测其抗D水平,为临床治疗方案提供依据。     

昆明地区Rh阴性者RhD假基因(RhDψ)和杂交RhD-CE-D基因的检测和医学应用

目的 用PCR基因分型技术分析研究昆明地区常住人口Rh阴性血型的D基因多态性,建立和完善本地区Rh血型的PCR RhD基因检测方法 .方法 收集46例Rh阴性血型样本,首先采用外显子-SSP进行PCR扩增,筛选出5例D基因部分存在型,再采用内含子-SSP进行PCR扩增,扩增产物用于DNA测序.结果 在46例Rh阴性血型样本中,D基因完整缺失者29例(63%);D基因完整存在者12例(26.1%),存在全部外显子;D基因部分存在者5例(10.9%).DNA测序结果 显示,2例仅存在D基因的第10外显子的样本均为RhD-CE(3-9)-D杂合基因,1例存在D基因的第4、6外显子为RhD-CE(2-3,5,7-9)-D杂合基因,是新发现的变异等位基因.结论 (1)昆明地区常住人群存在高频率的RhD-CE(3-9)-D杂合基因.(2)在昆明人群发现一种新型D变异等位基因即RhD-CE(2-3,5,7-9)-D杂合基因.     

表观RhD阴性孕妇产前检查的结果分析

目的:探讨不规则抗体检测(微柱凝胶法)对RhD血型不合所致新生儿溶血病(以下简称HDN)的防治与监测作用.方法:回顾性分析95例接受检测夫妇RhD血型不合的表观RhD阴性孕妇的产前/孕前血型抗体检测结果,采用微柱凝胶血型卡检测受检者ABO血型及Rh血型的D、C、E抗原,RhD初筛阴性者进一步采用间接抗人球蛋白试管法检测D抗原以排除或确认弱D型或部分D表型;用微柱凝胶Coombs卡对受检者进行不规则抗体筛检,初筛阳性者进一步用抗体鉴定细胞做抗体鉴定和抗体效价测定.结果:95例RhD初筛阴性标本经传统试管法的间接抗人球蛋白试验复检,均排除弱D或部分D表型,其中5例受检者产生了IgG抗-D,本组抗-D产生比例为5.5％.结论:不规则抗体检测应用于表观RhD阴性孕妇的产前检查,可为RhD血型不合的HDN的预测、评估提供实验依据.     

RhD阴性血液的临床合理应用及效果分析

目的　探讨RhD阴性血液的临床合理应用及效果。方法　随机调查 15 4例RhD阴性血型病人的临床输血治疗过程 ,根据不同输注成分比较其治疗效果。结果　单纯强调红细胞输注有 85例 ( 5 5 %) ,其用血量大且疗效欠佳 ,甚至引起病人死亡 ;合理输注血液及成分血有 6 9例 ( 4 5 %) ,用血量少但疗效佳。结论　在输注RhD阴性血液时 ,首先要了解D抗原在血细胞表面的分布情况及与血细胞的关系。其次 ,治疗过程中红细胞、血小板、新鲜冰冻血浆等成分须合理搭配 ,才能收到最佳治疗效果。     

吕梁地区献血者RhD阴性血型表现型分布

<正>Rh血型系统的重要性仅次于ABO血型系统,Rh阴性个体经输血或怀孕接触D抗原后,产生的抗D抗体可引起临床上的输血反应和新生儿溶血病。在《临床输血技术规范》中     

昆明地区Rh阴性者RhD假基因（RhD ψ）和杂交RhD-CE-D基因的检测和医学应用

目的用PCR基因分型技术分析研究昆明地区常住人口Rh阴性血型的D基因多态性,建立和完善本地区Rh血型的PCRRhD基因检测方法。方法收集46例Rh阴性血型样本,首先采用外显子-SSP进行PCR扩增,筛选出5例D基因部分存在型,再采用内含子-SSP进行PCR扩增,扩增产物用于DNA测序。结果在46例Rh阴性血型样本中,D基因完整缺失者29例（63％）;D基因完整存在者12例（26．1％）,存在全部外显子;D基因部分存在者5例（10．9％）。DNA测序结果显示,2例仅存在D基因的第10外显子的样本均为RhD—CE（3—9）-D杂合基因,1例存在D基因的第4、6外显子为RhD—CE（2—3,5,7—9）-D杂合基因,是新发现的变异等位基因。结论（1）昆明地区常住人群存在高频率的RhD—CE（3—9）-D杂合基因。（2）在昆明人群发现一种新型D变异等位基因即RhD—CE（2—3,5,7—9）-D杂合基因。     

RhD表型阴性分子机制的研究

我们对76名中国汉族RhD阴性个体的RHD基因全长编码区进行序列分析，初步探讨中国人D阴性的分子背景，报道如下。     

乌鲁木齐地区RhD阴性无偿献血者不规则抗体筛查分析

目的 分析乌鲁木齐地区RhD阴性无偿献血者不规则抗体阳性率,探讨对RhD阴性献血者进行抗体筛查的必要性.方法 采用盐水介质法和抗人球介质法对乌鲁木齐地区3296例无偿献血者的血液标本进行不规则抗体筛查,并对抗体筛查阳性标本鉴定其抗体特异性.结果 共检出53例不规则抗体,阳性率为1.61％,女性不规则抗体阳性率率(1.9...