血清铁死亡标记物与绝经后女性认知障碍的关系

目的 研究血清铁死亡标记物与绝经后女性认知障碍的关系。方法 选取2019年8月至2021年12月就诊的148例女性,其中生育期女性22例,围绝经期女性11例,绝经后女性115例。按照蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment, MoCA)将绝经后女性分为认知障碍组(n=77)和无认知障碍组(n=38),比较两组血清铁死亡标记物有无差异,应用Logistic进行多因素回归分析绝经后女性认知障碍的相关因素。通过受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve, ROC)评估相关因素对绝经后女性认知障碍的诊断价值。结果 与生育期和围绝经期女性相比,绝经后女性MoCA评分明显较低,血清ACSL4、System Xc-、GPX4、GSH、ROS、LPO及MDA水平均明显升高(均P<0.05)。与无认知障碍组相比,认知障碍组绝经后女性受教育年限短、患高血压的比例高,且血清ACSL4、System Xc_-^{、GPX4、GSH、ROS、LPO及MDA水平明显}升高 (均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示教育年限和血清谷胱甘肽(glutathione, GSH)与认知障碍独立相关(P<0.05),ROC曲线分析显示两者联合对预测女性是否患认知障碍具有中度诊断价值(AUC: 0.764, P<0.05)。结论 绝经后女性血清铁死亡标志物ACSL4、System Xc_-^{、GPX4、GSH、ROS、LPO及MDA水平}明显升高,其中GSH与女性认知障碍发生独立相关,与受教育年限联合有望成为绝经后女性认知障碍早期诊断的潜在标志物。     

谷胱甘肽过氧化物酶4在雷公藤内酯酮激活结肠癌细胞铁死亡中的作用

目的探讨谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）在雷公藤内酯酮（TN）激活结肠癌细胞铁死亡中的作用。方法将体外培养结肠癌细胞株HCT116分为5组,即对照组、TN组、铁死亡抑制剂Feroptosis-1（Fer-1）组、阴性载体组、GPX4过表达组。对照组细胞不作任何处理,其余4组细胞均加入15.0nmol/L的TN处理48h,其中Fer-1组用2滋mol/LFer-1预处理2h,阴性载体组、GPX4过表达组细胞分别用阴性慢病毒载体和GPX4过表达载体转染48h。比较5组HCT116死亡细胞比例,细胞内谷胱甘肽（GSH）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）含量以及GPX4蛋白表达水平。结果5组HCT116死亡细胞比例,细胞内GSH、ROS、MDA含量以及GPX4蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与对照组比较,TN组死亡细胞比例及细胞内ROS、MDA含量均明显增加（均P＜0.05）,GSH含量及GPX4蛋白表达水平均明显减少（均P＜0.05）;与TN组比较,Fer-1组死亡细胞比例及细胞内ROS、MDA含量均明显减少（均P＜0.05）,GSH含量及GPX4蛋白表达水平均明显增加（均P＜0.05）;与阴性载体组比较,GPX4过表达组死亡细胞比例及细胞内ROS、MDA含量均明显减少（均P＜0.05）,GSH含量及GPX4蛋白表达水平均明显增加（均P＜0.05）。结论TN通过抑制GPX4激活结肠癌细胞铁死亡,从而抑制癌细胞增殖。     

隐丹参酮可能具有诱导人肝癌HepG2细胞铁死亡的作用

目的 观察隐丹参酮在人肝癌HepG2细胞铁死亡中的作用。方法 体外培养HepG2细胞,采用CCK-8法检测细胞活力并计算半数抑制浓度(IC₅₀),倒置相差显微镜观察细胞形态,DCFH-DA探针检测活性氧(ROS)水平变化,谷胱甘肽(GSH)测定试剂盒检测GSH水平变化,Western blot法检测铁死亡相关蛋白胱氨酸谷氨酸逆转运体轻链蛋白(xCT)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达。以铁死亡抑制剂Ferrostain-1(Fer-1)、铁螯合剂去铁胺(DFO)、ROS清除剂乙酰半胱氨酸(NAC)进行干预,同样检测细胞活力、ROS水平、GSH水平及xCT和GPX4表达。结果 隐丹参酮可显著抑制HepG2细胞活力,并引起HepG2细胞形态学变化和死亡,IC₅₀为93.73 μmol/L。隐丹参酮可显著诱导HepG2细胞ROS累积,降低GSH水平,并下调xCT和GPX4表达。Fer-1、DFO、NAC均可不同程度恢复隐丹参酮引起的HepG2细胞活力下降。Fer-1可抑制隐丹参酮诱导的ROS累积,并恢复GSH水平及xCT和GPX4表达。 结论 隐丹参酮可能通过抑制GPX4和xCT表达使HepG2细胞中ROS累积,导致细胞发生铁死亡。     

铁死亡相关长链非编码RNA在肿瘤中的研究进展

<正>铁死亡(ferroptosis)是一种铁依赖性的、调控细胞脂质过氧化物失衡引起的程序性死亡。不同于细胞凋亡、自噬和坏死等细胞死亡，铁死亡过程以谷胱甘肽(glutathione, GSH)耗尽、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)失活和活性氧(reactive oxygen species, ROS)促进脂质过氧化等特征为主，最终引起细胞内脂质过氧化调节失衡。     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对巨噬细胞中铁死亡相关因子表达水平的影响

目的：探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖（P. g-LPS）对巨噬细胞中铁死亡相关因子表达水平的影响,阐明铁死亡相关因子在牙周炎发病机制中的作用。方法：培养小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞,分为实验组和对照组,实验组加入10 mg·L-1P. g-LPS分别处理6、12和24 h,对照组不做任何处理。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测2组RAW264.7细胞中长链酯酰辅酶A合成酶4 (ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4 (GPX4)和转铁蛋白受体1 (TfR1) mRNA表达水平,2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针法检测2组RAW264.7细胞中活性氧（ROS）水平,硫代巴比妥酸（TBA）法检测2组RAW264.7细胞中丙二醛（MDA）水平,亚铁离子荧光探针（FeRhonox-1）法检测2组RAW264.7细胞中亚铁离子（Fe2+）水平,Western blotting法检测2组RAW264.7细胞中ACSL4、GPX4和TfR1蛋白表达水平。结果：与对照组比较,处理6、12和24 h后,实验组RAW264.7细胞中GPX4 mRNA表达水平降低（P&...     

跨膜蛋白16F对阿尔茨海默病细胞模型铁死亡的调控作用

目的 探讨跨膜蛋白16F (TMEM16F)对β淀粉样蛋白（Aβ25-35）诱导的阿尔茨海默病（AD）细胞模型铁死亡的影响。方法 将SH-SY5Y细胞分为对照组、模型组、siRNA阴性对照组（siRNA-nc组）、siRNA-TMEM16F转染组（siRNA-TMEM16F组）。采用CCK-8检测Aβ25-35对SH-SY5Y细胞存活率的影响,Western blotting检测各组TMEM16F、AD相关指标（Aβ、p-Tau）、铁死亡相关蛋白（ACSL4、GPX4、Fpn1）的表达情况,免疫荧光法检测各组ACSL4表达情况,荧光探针法检测各组活性氧（ROS）水平。结果Aβ25-35≥20μmol/L作用≥12 h时对细胞有显著损伤作用。与对照组相比,模型组中TMEM16F、Aβ、p-Tau、ACSL4以及ROS水平显著增高,而GPX4、Fpn1水平显著降低（P <0.05）;沉默TMEM16F后,Aβ、p-Tau、ACSL4及ROS表达受到抑制,而GPX4、Fpn1表达水平上升（P <0.05）。结论 沉默TMEM16F能够抑制Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞发生...     

基于糖尿病骨质疏松细胞模型探究ELAVL1对破骨细胞铁死亡的调控作用

目的 探究胚胎致死性异常视觉样蛋白1（ELAVL1）是否通过破骨细胞死亡调控糖尿病骨质疏松症（DOP）。方法 选取2021年1月—2023年2月长沙市中心医院就诊的50例DOP患者和50例糖尿病但不伴随骨质疏松的患者作为研究对象,分别作为DOP组和对照组。比较两组患者血清ELAVL1、GPX4、Nrf2、ACSL4水平差异,分析ELAVL1与铁死亡相关基因（GPX4、Nrf2、ACSL4）的相关性。采用50 ng/mL RANKL孵育小鼠骨髓源性巨噬细胞RAW264.7以诱导破骨分化。对DOP组进行亚分组,以患者血清ELAVL1含量的平均值（14.94 ng/mL）为标准,分为ELAVL1低表达组（血清ELAVL1<14.94 ng/mL,28例）及ELAVL1高表达组（血清ELAVL1> 14.94 ng/mL,22例）。将破骨细胞分为对照组、高糖组、高糖+sh-NC组、高糖+sh-ELAVL1组,比较各组ELAVL1、GPX4、核因子红细胞系2相关因子2（Nrf2）、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（ACSL4）、活性氧、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、总铁含量、铁离子（Fe²⁺）表达量、线粒体膜电位。结果 ELAVL1高表达组与ELAVL1低表达组性别构成、年龄、糖尿病病程、BMI比较,差异均无统计学意义（P >0.05）。ELAVL1高表达组T-score值低于ELAVL1低表达组（P <0.05）,血清β-CTX、血清PINP高于ELAVL1低表达组（P <0.05）。DOP组血清GPX4、Nrf2比对照组低（P <0.05）,ACSL4比对照组高（P <0.05）。经Pearson相关性分析结果表明,DOP患者血清ELAVL1表达与ACSL4呈正相关（r =0.689,P <0.05）,与GPX4、Nrf2呈负相关（r =-0.312和-0.447,均P <0.05）,血清ELAVL1与ACSL4呈正相关（r =0.689,P <0.05）,血清ELAVL1与GPX4呈负相关（r =-0.559,P <0.05）,血清ELAVL1与Nrf2呈负相关（r =-0.669,P <0.05）。高糖组GPX4、Nrf2 mRNA较对照组降低（P <0.05）,ELAVL1、ACSL3 mRNA较对照组升高（P <0.05）,高糖+sh-ELAVL1组GPX4、Nrf2 mRNA较高糖+sh-NC组升高（P <0.05）,ELAVL1、ACSL3 mRNA较高糖+sh-NC组降低（P <0.05）。高糖组GPX4、Nrf2蛋白较对照组降低,ELAVL1、ACSL4蛋白较对照组升高（P <0.05）,高糖+sh-ELAVL1组GPX4、Nrf2蛋白较高糖+sh-NC组升高（P <0.05）,ELAVL1、ACSL4蛋白较高糖+sh-NC组降低（P <0.05）。高糖组总铁含量及Fe²⁺表达量较对照组升高（P <0.05）,高糖+sh-ELAVL1组较高糖+sh-NC组降低（P <0.05）。高糖组MDA较对照组高（P <0.05）,GSH较对照组低（P <0.05）,高糖+sh-ELAVL1组MDA较高糖+sh-NC组低,GSH较高糖+sh-NC组高（P <0.05）。结论 高糖条件诱导破骨细胞铁死亡,ELAVL1与DOP铁死亡有关,敲低ELAVL1可抑制高糖诱导的破骨细胞铁死亡。     

妊娠期糖尿病胎盘滋养细胞铁死亡超微结构及铁死亡相关基因ACSL4、GPX4的表达

目的：观察妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus,GDM）孕妇胎盘滋养细胞超微结构,探讨铁死亡在GDM发生发展中的作用。方法：选取2020年9月—2022年12月在常州妇幼保健院分娩的孕妇,孕24~28周行口服葡萄糖耐量试验。以确诊GDM的孕产妇为研究对象,分为通过饮食治疗控制血糖满意组（G1组）、口服二甲双胍控制血糖组（G2组）、胰岛素控制血糖组（G3组）、血糖控制不满意但拒用药组（G4组）各30例,正常健康孕妇为对照组（N组）。通过透射电镜观察各组胎盘滋养细胞超微结构;普鲁士蓝染色检查胎盘铁沉积情况;免疫组化检测胎盘长链脂酰辅酶 A 合成酶 4（acyl-CoA synthetase long chain family member 4,ACSL4）、谷胱甘肽过氧化物酶 4（glutathione peroxidase 4,GPX4）在合体滋养细胞层的定位和表达; Western blot和qRT-PCR分别检测胎盘ACSL4、GPX4蛋白和mRNA转录水平。结果：透射电镜下G1、G2、G3、G4组GDM产妇胎盘均可见不同程度的线粒体形态学改变,其中G1、G2、G3组线粒体改变较轻,G4组见典型的铁死亡萎缩线粒体。普鲁士蓝染色显示5组胎盘均见含铁颗粒,G1、G2、G3、G4组胎盘中含铁颗粒较N组明显增多,G1、G2、G3组胎盘中的含铁颗粒较G4组明显减少。Western blot 结果显示,与 N 组相比,G1、G2、G3、G4 组产妇胎盘中 ACSL4 蛋白表达增加而 GPX4 蛋白表达下降, qRT-PCR结果显示各组间ACSL4、GPX4的mRNA转录水平无显著性差异。结论：GDM孕妇胎盘滋养细胞中存在铁死亡,且与病情严重程度和用药相关。GDM孕妇胎盘中ACSL4、GPX4表达异常,二甲双胍和胰岛素有改善胎盘滋养细胞铁死亡的作用。     

H2S通过调节铁死亡中Xc-/GPX4通路减轻脓毒症心肌损伤

目的 探讨硫化氢供体NaHS能否通过抑制氧化应激,激活铁死亡中Xc-/GPX4信号通路改善脓毒症心肌损伤。方法 脂多糖(LPS)诱导大鼠心肌细胞H9c2形成脓毒症心肌损伤体外模型,分为Control组、LPS组、LPS+NaHS组。采用试剂盒检测心肌细胞活力、Fe²⁺、LDH、CK-MB变化,测定氧化应激指标GSH、MDA水平,荧光探针检测细胞ROS、线粒体膜电位水平变化,Western blot检测铁死亡调控蛋白SLC7A11、GPX4表达水平。结果 与Control组相比,LPS刺激后H9c2细胞活力下降,Fe²⁺浓度升高,GSH、MDA、ROS水平升高,线粒体JC-1单体增多,铁死亡调控蛋白SLC7A11、GPX4的表达水平下降,细胞损伤增加(P<0.05)。与LPS组相比,NaHS可减轻LPS诱导的H9c2细胞损伤和Fe²⁺浓度升高,降低LPS诱导的H9c2细胞氧化应激的水平,增加了铁死亡调控蛋白SLC7A11、GPX4的表达水平(P<0.05)。结论 硫化氢供体NaHS减轻脓毒症心肌损伤的机制可能与...     

亚低温在抑制小鼠脓毒症相关急性肾损伤中铁死亡的作用探究

目的：探讨亚低温是否通过激活核因子-E2相关因子2(Nrf2)抑制小鼠脓毒症相关急性肾损伤（S-AKI）中的铁死亡，从而发挥保护作用。方法：选择15只SPF级C57BL/6小鼠随机分为假手术组（S组）、脓毒症常温组（N组）、脓毒症亚低温组（H组），每组5只。盲肠结扎穿孔术建立小鼠脓毒症模型，分别对3组进行相应处理。苏木精—伊红（HE）染色观察小鼠肾组织损伤情况，酶标仪法测定血清尿素氮（BUN）及肌酐（Cr）水平、肾组织还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量，蛋白免疫印迹法（western blotting）和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定肾组织酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、Nrf2及其下游因子血红素氧合酶1(HO-1)的蛋白及mRNA表达水平。结果：与S组比较，N组和H组肾组织病理有不同程度损伤，BUN、Cr水平升高，GSH含量减少，MDA含量增加，ACSL4蛋白及mRNA表达升高、GPX4蛋白及mRNA表达降低、Nrf2和HO-1蛋白及mRNA表达显著升高（均P<0.05）;H组与N组比较，病理损伤减轻，BUN、...     

铁死亡的分子机制及其对膀胱癌的影响

膀胱癌(bladder cancer,BC)是泌尿系统三大常见恶性肿瘤之一,具有发病率高、易转移、治疗效果不佳、预后较差的特点,严重威胁着全人类的健康。肿瘤细胞表现出强烈的需铁现象,而铁超载会诱导细胞发生铁死亡,即一种由脂质过氧化和细胞膜损伤引起的铁依赖性细胞死亡。因此,铁死亡具有很强的抗肿瘤潜力。铁死亡的分子机制与细胞磷脂代谢异常、铁代谢异常、抗氧化和非抗氧化系统Xc-/谷胱甘肽(glutathione,GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)的失调有关。铁死亡相关分子在BC的发生和发展、转移、耐药及免疫反应等方面发挥着重要的作用,有望成为治疗BC的靶点。     

二甲双胍诱导铁死亡抑制胶质瘤细胞增殖作用机制的研究

目的 探讨二甲双胍通过诱导铁死亡抑制胶质瘤细胞增殖的作用和机制。方法 常规培养正常人神经胶质细胞和胶质瘤细胞,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞脂质过氧化产物[5-、12-和15-羟二十碳四烯酸（HETE）]的变化,Western blot检测细胞铁死亡标志蛋白谷胱甘肽过氧化物酶（GPX4）和链脂肪酸-CoA连接酶（ACSL-4）表达;二甲双胍处理胶质瘤细胞U87,细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞活力改变,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测细胞LDH释放量,5-乙炔基-2’-脱氧尿苷（EdU）染色检测细胞增殖,丙二醛（MDA）试剂盒检测细胞MDA水平,流式细胞术检测细胞活性氧（ROS）水平,Western blot检测细胞铁死亡标志蛋白GPX4和ACSL-4蛋白表达;二甲双胍联合铁死亡抑制剂（ferrostatin-1）处理U87细胞,进一步验证胶质瘤细胞铁死亡机制。结果 与正常胶质细胞比较,胶质瘤细胞脂质过氧化产物5-、12-和15-HETE水平降低,铁死亡标志蛋白GPX4表达增多,ACSL-4蛋白表达减少;二甲双胍处理U87细胞后,铁死亡蛋白G...     

基于铁死亡探讨褪黑素缓解布比卡因脊髓神经毒性的机制

目的：探讨褪黑素（MT）能否通过抑制铁死亡缓解布比卡因脊髓神经毒性。方法：将36只成年雄性SPF级SD大鼠随机分为3组：生理盐水组（N组）、布比卡因组（B组）、褪黑素与布比卡因共处理组（BM组）,各组于0 d、1 d、2 d、3 d测定最大抗伤害效应百分比（%MPE）、BBB评分进行行为学评估,并于给药后3 d取材,取腰膨大处脊髓组织进行HE、尼氏染色观察各组脊髓组织神经元病理损伤情况和神经元存活数量,透射电镜观察线粒体超微结构改变,多重免疫荧光检测活性氧（ROS）表达水平,ELISA检测谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、铁含量,western blotting检测脊髓组织GPX4、4HNE的蛋白表达水平。结果：与N组比较,B组%MPE升高,BBB评分降低,脊髓组织空泡增多,存活神经元数量减少,脊髓组织损伤程度较重,线粒体缩小,双层膜密度增加,线粒体嵴消失或断裂,ROS、MDA、铁含量增多,GSH降低,4HNE蛋白表达升高,GPX4蛋白表达降低（均P<0.05）。与B组比较,BM组%MPE降低,BBB评分升高,脊髓组织损伤较轻,脊髓组织空泡减少,存活神经元增多,线粒体损伤改善...     

肌肽对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠肾脏铁死亡和炎症的影响

目的 探讨肌肽(CAR)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠肾脏铁死亡和炎症的影响。方法 以STZ诱导C57小鼠构建1型糖尿病小鼠模型(STZ模型),以正常C57小鼠作为正常对照。小鼠分为5组(每组6～8只):正常对照(NC)组、肌肽(CAR)组、STZ模型(STZ)组、STZ模型+肌肽(STZ+CAR)组、STZ模型+铁死亡抑制剂(STZ+Fer-1)组。喂养小鼠16周后，收集小鼠血清检测血肌酐(CRE)和尿素氮(BUN)水平，尿液检测小鼠24 h尿白蛋白水平。HE染色、PAS染色观察肾脏病理损伤程度。透射电镜观察肾脏线粒体的形态。PCR检测小鼠肾脏组织炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。免疫荧光法检测小鼠肾脏活性氧(ROS)的表达。Western blot法检测肾脏组织铁死亡指标谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX 4)和长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL 4)蛋白表达水平的改变。对小鼠肾脏组织进行丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和Fe²⁺含量的测定。结果 与NC组相比，STZ组CR...     

中医药干预铁死亡机制的研究进展

铁死亡是近年来发现的一种全新的细胞死亡方式,与正常细胞凋亡和坏死不同,铁死亡具有铁离子的依赖性.铁死亡的发生与细胞内脂质活性氧(reactive oxygen species,ROS)的平衡失调息息相关,其通过介导脂质过氧化(lipid peroxidation,LPO),调节谷胱甘肽(glutathione,GSH)...     

铁死亡在实验性左侧精索静脉曲张大鼠睾丸中的初步探讨

探讨实验性左侧精索静脉曲张（ELV）大鼠睾丸中是否存在铁死亡的细胞死亡方式。方法 24只SPF级SD大鼠,参照Turner法构建大鼠ELV模型,按随机数字表法分成分为假手术A组、假手术B组、手术A组和手术B组,每组6只。假手术A组和手术A组于造模2周后进行取材,假手术B组和手术B组于造模4周后进行取材,分别评估各组左侧精索静脉的曲张情况,同时取出各组左侧睾丸,HE染色观察形态学变化,ELISA法测定活性氧（ROS）、谷胱甘肽过氧化酶4（GPX4）浓度,分光光度法测定还原型谷胱甘肽（GSH）活性,比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶（GSH=PX）活性,Western Blot检测左侧睾丸组织中核转录相关因子2（Nrf2）蛋白的表达。结果 手术A组和手术B组大鼠左侧精索静脉均较术前曲张2倍以上,ELV大鼠模型成功建立。手术A组和手术B组大鼠左侧睾丸组织内发生明显病理损伤,生精小管基膜损伤,各级生精细胞排列紊乱,细胞结构部分破坏,管腔生精细胞脱落,精子数量减少,管腔间隙增大,支持细胞形态欠佳。与相对应的假手术A组、假手术B组相比,手术A组和手术B组大鼠左侧睾丸组织中ROS浓度均明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。但GSH、GSH-PX活性与GPX4浓度均变化不明显,差异无统计学意义（P＞0.05）,Nrf2蛋白相对表达量也无明显变化,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 目前暂不能得出精索静脉曲张睾丸中存在铁死亡的细胞死亡方式,但是也不能否认其存在的可能。     

iPLA2β通过调控铁死亡减轻高糖诱导的人肾小管上皮细胞损伤

目的 探讨钙离子非依赖型磷酸酯酶A2β(iPLA2β)在高糖诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)中的表达,iPLA2β与铁死亡的关系以及iPLA2β对高糖诱导的HK-2细胞损伤的保护机制。方法 用30 mmol/L葡萄糖刺激HK-2细胞,iPLA2β质粒转染构建过表达模型,铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)和铁死亡激活剂erastin作为铁死亡对照组。干预36 h后,试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、铁含量,DCF免疫荧光检测细胞内活性氧(ROS)水平。Western blot法检测铁死亡指标ACSL4、GPX4、LPCAT3、TFR1的表达。结果 高糖刺激可以降低HK-2细胞内iPLA2β的表达,HK-2细胞内ROS、MDA水平升高,GSH、SOD水平降低。Western blot结果显示ACSL4、LPCAT3、TFR1表达增高,GPX4表达降低。Fer-1干预后上述指标改善。过表达iPLA2β后,可降低KIM-1表达,减轻HK-2细胞损伤。进一步研究发现,过表达iPLA2β后可抑制高糖诱导的HK-2细胞的氧化应激和铁死亡。另外,era...     

白藜芦醇对脑出血大鼠铁死亡的影响

目的 探讨白藜芦醇对脑出血(ICH)大鼠铁死亡的影响及可能的作用机制.方法 自体血注射法建立ICH模型.通过观察改良神经功能缺失评分(mNSS评分)评估大鼠神经功能,HE染色观察脑组织病理改变,比色法等检测铁含量、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽含量(GSH)以观察铁死亡情况,Western-Blott法检测GPX4、xCT...     

益生菌抑制铁死亡减轻大鼠体外循环后肝损伤的功能及机制研究

目的探讨益生菌保护体外循环后肝损伤中的功能及机制。方法将30只SD雄性大鼠随机分为4组: 假手术组(Sham)、体外循环组(CPB)、体外循环+益生菌干预组(CPB+PRO)、体外循环+去铁胺组(CPB+DFO),每组5只。术后取肝组织,组织病理学检查肝损伤情况,免疫组化检测GPX4蛋白表达,化学发光法检测还原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)、丙二醛(malonaldehyde, MDA)和铁浓度,Real-time PCR检测铁死亡相关分子PTGS2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2)、P53、GPX4(glutathione peroxidase 4)、FTH1(ferritin heavy chain1)和炎性因子IL-1β、TGF-β1、IL-4、IL-10的mRNA表达水平。结果CPB术后肝损伤明显,GPX4的蛋白和mRNA表达明显减低,GSH耗竭,MDA和铁浓度增加,PTGS2和P53 mRNA水平升高,FTH1 mRNA水平降低,炎性因子IL-1β、TGF-β1、IL-4的mRNA水平升高,IL-10 mRNA水平降低;益生菌干预组大鼠的肝损伤程度明显减轻,并明显逆转CPB诱导的上述铁死亡相关基因的表达变化及炎性因子的水平。结论益生菌可通过抑制铁死亡和抑制炎症反应,改善体外循环后的肝损伤。     

谷胱甘肽过氧化物酶4介导的铁死亡参与阿霉素对乳腺癌细胞抑制作用研究

目的:探讨谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)介导的铁死亡是否参与阿霉素对乳腺癌的抑制过程,并探讨其增加阿霉素敏感性的可能机制。方法:通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)实验和免疫蛋白印迹法(Western Blot),检测正常乳腺细胞MCF10A、HCC1937细胞和乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231细胞中GPX4的表达水平;通过慢病毒转染技术构建稳定敲低GPX4的乳腺癌细胞MCF-7,并通过qRT-PCR和Western Blot实验检测敲低效率;通过CCK8实验检测阿霉素对乳腺癌细胞的细胞毒性;通过谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒、丙二醛(MDA)检测试剂盒、铁离子(Fe²⁺)浓度检测试剂盒检测敲低GPX4后乳腺癌细胞的铁死亡水平。结果:乳腺癌细胞中GPX4的蛋白水平及mRNA水平高于正常乳腺细胞(P<0.05);与对照组细胞相比,敲低GPX4表达的乳腺癌细胞中GSH水平降低(P<0.05),MDA和Fe²⁺水平升高(P<0.05),阿霉素作用后细胞增殖能力下降(P<0.05),而铁死亡抑制剂fe...