单侧肾细胞癌根治性切除术后的肾功能代偿

目的探讨单侧肾细胞癌根治性肾切除术(radical nephrectomy，RN)后留存肾肾功能代偿(renal functional compensation，RFC)的影响因素。方法回顾性分析286例在北京大学人民医院接受RN的肾细胞癌患者的临床资料，记录术前体重指数(body mass index，BMI)、收缩压、吸烟史、慢性疾病史等基础信息和术前血生化、尿常规、影像学等辅助检查结果。所有患者均在术前行^99m锝-二乙三胺五乙酸(^99mtechnetium-diethylenetriamine pentaacetic acid，^99mTc-DTPA)肾动态显像检查。记录手术方式、术后病理结果和术后1~60个月的血肌酐数值。术前、术后估计肾小球滤过率(estimate the glomerular filtration rate，eGFR)由慢性肾脏疾病流行病学合作组(chronic kidney disease epidemiology collaboration，CKD-EPI)公式计算，RFC百分比定义为RN术后留存肾eGFR较术前eGFR变化的百分比。采用单因素和多因素线性回归分析确定影响留存肾RFC的独立预测因素。结果患者中位年龄61岁，65.4%为男性，83.6%的病例为早期肾细胞癌(T1期和T2期)。18.5%的患者术前合并糖尿病，39.5%合并高血压，19.2%既往有吸烟史，27.6%在术前影像学检查中发现健侧肾囊肿。226例患者行腹腔镜RN，60例行开腹RN。肾透明细胞癌是最主要的病理类型，占88.5%，中位肿瘤最大径为4.5 cm(0.7~13.5 cm)。术后1个月时中位RFC百分比为27%，在随后5年内保持稳定。单因素变量分析结果显示年龄、性别、术前血尿酸水平、术前是否存在蛋白尿、是否存在健侧肾囊肿以及术前健侧肾的分肾功能百分比与RN术后留存肾RFC百分比具有相关性(P＜0.05)，其中，术前血尿酸水平和术前健侧肾分肾功能百分比与术后RFC百分比呈极强负相关性。多因素线性回归分析结果显示，年龄(P < 0.001)、术前血尿酸水平(P < 0.001)、术前是否存在蛋白尿(P=0.002)、术前eGFR(P < 0.001)和术前健侧肾分肾功能百分比(P < 0.001)是术后RFC的独立预测因素。结论术前血生化、尿常规和肾动态显像等基本辅助检查对于预测RN术后留存肾的代偿能力意义很大，临床决策时需综合考虑多方面因素对术后基线eGFR的影响。     

非小细胞肺癌细胞外泌体源性FZD10促进体外血管生成

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）细胞外泌体源性FZD10在血管生成中的作用及其机制。方法采用超速离心法分离外泌体，并利用Western blot和RT-qPCR技术分析NSCLC细胞（95D和H1299）、正常人支气管上皮细胞（BEAS-2B）及其外泌体中FZD10的表达；通过转染FZD10-siRNA敲低FZD10表达，用FZD10未敲低和敲低的NSCLC细胞外泌体分别处理HUVEC细胞，利用体外血管生成实验观察其成管能力，采用ELISA和RT-qPCR技术分析血管生成相关因子VEGFA和Ang-1的表达；进一步利用Western blot分析外泌体源性FZD10对信号通路PI3K、Erk1/2和YAP/TAZ激活的影响。结果同BEAS-2B细胞及其外泌体相比较，FZD10在95D和H1299细胞及其外泌体中高表达（P < 0.01）；95D和H1299细胞来源的外泌体可促进HUVEC的微管形成及VEGFA、Ang-1的蛋白分泌、mRNA的表达（P < 0.01），但在95D和H1299细胞敲低FZD10后这些效果受到抑制。FZD10的敲低可抑制PI3K、Erk1/2信号通路的激活，但对YAP/TAZ信号通路的影响不显著。结论NSCLC细胞外泌体源性FZD10可促进体外血管生成，其机制可能与PI3K、Erk1/2信号通路的激活有关。     

高血糖诱导肝星状细胞5-羟色胺降解在2型糖尿病致肝脏炎症和纤维化时的作用

目的探讨5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)在2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)引起肝脏炎症及纤维化时的作用。方法雄性C57BL/6J小鼠，通过高脂饲料喂养结合腹腔注射链脲佐菌素，建立T2DM模型；将已形成高血糖的小鼠继续用高脂饲料喂养9周或同时用5-HT_2A受体(5-HT 2A receptor，5-HT_2AR)拮抗剂盐酸沙格雷酯(sarpogrelate hydrochloride，SH)及5-HT合成抑制剂卡比多巴(carbidopa，CDP)分别或联合给药进行治疗。细胞实验用人肝星状细胞(hepatic stellate cells，HSCs)株LX-2，高浓度葡萄糖刺激或同时用SH、CDP或单胺氧化酶A(monoamine oxidase A，MAO-A)抑制剂氯吉兰(clorgyline，CGL)处理细胞，观察高糖诱导LX-2细胞肌成纤维细胞化时5-HT的作用。用苏木精-伊红(hematoxylin & eosin，HE)及马松(Masson)染色法检测肝组织切片病理变化，免疫组织化学及Western blot分析蛋白表达，ELISA或酶试剂法检测生化指标，荧光探针法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)含量。结果T2DM小鼠肝脏的5-HT_2AR、5-HT合成酶和MAO-A表达上调，且5-HT含量升高。SH和CDP治疗在降低肝脏5-HT含量及下调MAO-A表达的同时，可有效地改善肝脏病变：不仅改善肝功能及肝脂肪变性，还明显抑制肝脏ROS(H₂O₂)含量升高，改善氧化应激，并抑制转化生长因子β1(transforming growth factor β1，TGF-β1)的产生，以及炎症和纤维化的发生，且SH和CDP的作用呈协同效应。LX-2细胞研究表明，高糖可上调5-HT_2AR、5-HT合成酶和MAO-A表达，升高细胞内5-HT含量，使细胞的ROS产生增多及肌成纤维细胞化，从而增加TGF-β1合成及炎症和纤维化因子的产生。通过SH拮抗5-HT_2AR，高糖作用被明显抑制；通过CGL抑制线粒体5-HT降解，高糖作用被强烈抑制。SH还可抑制高糖诱导的5-HT合成酶及MAO-A表达上调。结论高糖诱导HSCs肌成纤维细胞化和TGF-β1产生，从而导致T2DM小鼠肝脏炎症及纤维化损伤，其病理机制可能是诱导了5-HT_2AR表达上调，5-HT合成及降解增加，使线粒体的ROS产生增多，其中，5-HT_2AR的作用是参与了对5-HT合成酶和MAO-A表达的调控。     

高表达miR-3682-3p是肝细胞癌患者的不良预后因素

目的分析miR-3682-3p在HCC中的表达及其与临床参数和预后的相关性。方法生物信息学分析miR-3682-3p在HCC中的表达以及与生存相关性; 实时荧光定量PCR和原位杂交分别检测miR-3682-3p（miR-3682）在18对HCC与癌旁新鲜肝组织以及90对石蜡包埋HCC及其癌旁组织中的表达差异。统计分析miR-3682-3p在HCC中的表达与患者临床参数和预后之间的关系。利用多因素回归分析探讨miR-3682-3p表达作为肝细胞癌预后独立因素的可能性。结果生物信息分析显示，miR- 3682-3p在HCC组织中高表达，且与HCC患者综合生存时间有统计学关联（χ²=8.793，P < 0.001）。实时荧光定量PCR分析18组配对的HCC和癌旁肝组织显示，miR-3682-3p在癌组织中表达明显上调（t=3.073，P=0.007）。原位杂交分析90组配对的HCC和癌旁组织中miR-3682-3p的表达，显示其在癌与癌旁组织的细胞浆中表达，并且在癌组织中表达上调（t=2.659，P=0.009）。miR-3682-3p表达的高低在美国癌症联合委员会（AJCC）第八版分期（χ²=4.272，P=0.039）、HBV表面抗原状态（χ²=5.143，P= 0.023）、复发（χ²=4.593，P=0.032）、肿瘤大小（χ²=4.580，P=0.032）和Edmondson-Steiner分级（χ²=4.068，P=0.044）方面差异存在统计学意义; Kaplan-Meier分析显示，miR-3682-3p表达越高，患者总生存时间（Log rank χ²=4.169，P=0.041）和无病生存时间（Log rank χ²=4.078，P=0.043）越短。多变量分析显示，miR-3682-3p表达是评估HCC患者预后独立因子。结论miR-3682-3p在HCC组织中表达上调，是促进HCC发病和预后不良的重要因子。     

PFN2在胃癌组织中高表达并促进胃癌细胞的增殖和迁移

目的研究PFN2作为胃癌新的预后评价指标及作为胃癌治疗全新靶点的潜力。方法组织层面上，应用免疫组织化学检测100例胃癌组织及其癌旁组织中PFN2蛋白表达水平；根据PFN2表达量，将研究对象分为癌组织中PNF2高表达组（46例）、低表达（48例）组，以及癌旁组织中PFN2高表达组（26例）、低表达（49例）组；采用χ²检验、Spearman相关性以及Kaplan-Meier生存分析法，分析PFN2蛋白表达水平与患者的临床参数之间关系；细胞功能上，敲低MKN-45细胞中PFN2，将其分为controlsiRNA组与PFN2-siRNA组；过表达MKN-45细胞中PFN2，将其分为control-vector组与PFN2-vector组，选取Transwell实验、CCK-8实验检测PFN2对胃癌MKN-45细胞增殖及迁移影响。结果在胃癌组织中PFN2蛋白表达高于癌旁组织（P < 0.01）；PFN2蛋白的表达水平和胃癌病人的M分期显著正相关（P < 0.05）；在胃癌组织中，PFN2表达和VEGFR表达呈正相关关系（P < 0.01）；PFN2蛋白高表达的胃癌患者预后更差（P < 0.01），并且是胃癌预后的独立预测因子（P < 0.05）；MKN-45细胞中高表达PFN2组较低表达组增殖、迁移能力更强（P < 0.001）。结论PFN2蛋白在胃癌组织中高表达，并促进人胃癌MKN-45细胞的增殖、迁移。     

CCBE1在舌鳞癌癌旁组织中的表达与癌周淋巴管增生及患者预后的相关性

目的探究CCBE1在舌鳞癌癌旁组织中的表达与癌周淋巴管增生、颈淋巴结转移及患者预后间是否存在相关性。方法对44例cT_1-2N₀舌鳞癌癌旁组织病理切片标本进行淋巴管密度定量分析, 采用D2-40作为淋巴管内皮标记物标定淋巴管并进行计数。将淋巴管密度低的22例纳入A组, 淋巴管密度相对高的22例纳入B组。同时对两组标本中胶质和钙结合表皮生长因子域1(CCBE1)的表达情况通过免疫组化、免疫荧光和Western blot进行测定。免疫组化检测90例舌鳞状细胞癌病理标本中CCBE1的表达情况, 并完善相关随访资料, 进行统计分析。结果免疫组化及Western blot结果显示A组中CCBE1的高表达率明显低于B组, 差异有统计学意义(P < 0.05)。免疫荧光实验显示CCBE1与D2-40存在"共定位"现象。90例舌鳞癌患者中发生颈淋巴结转移者CCBE1的高表达率较之无淋巴结转移者明显更高(P < 0.05), 死亡组CCBE1的高表达率也明显高于存活组(P < 0.05)。结论CCBE1在舌鳞癌组织中的表达量与癌周淋巴管增生、颈淋巴结转移及患者的5年生存率有关, 可作为判断舌鳞癌患者预后的独立预测因子。     

偶联CD133核酸适体的载紫杉醇PLGA-PEG纳米载体靶向清除CD133阳性肺癌干细胞

目的构建偶联CD133核酸适体载紫杉醇的聚乳酸-乙醇酸-聚乙二醇（PLGA-PEG）纳米载体（N-Pac-CD133）拟清除肺癌干细胞。方法采用乳液/溶剂蒸发的方法制备N-Pac-CD133，同时对N-Pac-CD133进行表征，利用磁珠分离法分离出CD133⁺肺癌干细胞后并对该群体的肺癌干细胞特异性进行检测，同时对肺癌细胞的靶向性和杀伤活性进行检测。小鼠体内接种A549肿瘤后，肿瘤治疗分组：生理盐水，空纳米载体链接CD133核酸适体（N-CD133），紫杉醇，负载紫杉醇的纳米载体（NPac）和N-Pac-CD133，8只/组，5 mg/kg紫杉醇，分别于第10、15和20天进行注射。在第40天时，处死小鼠后，对肿瘤进行摘除并称重，同时测量小鼠的体质量。结果N-Pac-CD133的粒径为100 nm左右，包封率>80%，载药量>8%，在48 h内都显示出持续的药物释放。肺癌细胞的CD133⁺细胞群体表现出肺癌干细胞的特征：更快的肺癌生长速度（30 d，P=0.001）和更高的肿瘤干细胞基因表达：OV6（P < 0.001）、CD133（P=0.001）、OCT3/4（P=0.002）、EpCAM（P=0.04）、NANOG（P=0.005）和CD44（P=0.02）。与非靶向N-Pac和紫杉醇相比，N-Pac-CD133对肺癌干细胞的靶向性（P < 0.001）和细胞毒性作用显著增强。另外，N-PacCD133可显著减少肿瘤球的形成（P < 0.001）。在治疗终点时，取小鼠肿瘤并对肿瘤进行称量，N-Pac-CD133治疗组和其他治疗组相比，肿瘤体质量显著减小（P < 0.001）。结论CD133核酸适体可以促进紫杉醇纳米载体靶向递送至CD133⁺肺癌干细胞并杀伤肺癌干细胞。N-Pac-CD133可能是一种有效的靶向肺癌干细胞的治疗手段。     

代谢综合征与肾透明细胞癌患者预后的相关性

目的探讨肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma，ccRCC)手术后患者中代谢综合征(metabolic syndrome，MetS)与ccRCC预后的相关性。方法选择2009年1月—2014年11月于北京大学人民医院行根治性肾切除术或部分肾切除术患者的病例资料进行回顾性分析，共收集到342例ccRCC患者，记录患者的临床资料和病理资料，以及治疗前的实验室检查结果。将患者分为合并MetS组及未合并MetS组，对两组患者的总生存期(overall survival，OS)、肿瘤特异性生存期(cancer-specific survival，CSS)和无进展生存期(progression-free survival，PFS)进行单变量Cox回归分析与亚组分析。对两组患者以及各亚组的OS、CSS以及PFS使用Kaplan-Meier法绘制生存曲线进行生存分析。结果单变量Cox回归分析发现，MetS是ccRCC术后OS [风险比(hazard ratio，HR)=0.551，95%CI：0.321~0.949，P=0.031]、CSS(HR=0.460，95%CI 0.234~0.905，P=0.025)以及PFS(HR=0.585，95%CI：0.343~0.998，P=0.049)的保护因素。在肿瘤直径≤4 cm的亚组，MetS与术后OS(HR= 0.857，95%CI：0.389~1.890，P=0.702)、CSS(HR=1.129，95%CI：0.364~3.502，P=0.833)以及PFS(HR=1.554，95%CI：0.625~3.864，P=0.343)无明显相关性。在肿瘤直径>4 cm的亚组，MetS是ccRCC术后OS(HR=0.377，95%CI：0.175~0.812，P=0.013)、CSS(HR=0.280，95%CI：0.113~0.690，P=0.006)以及PFS(HR=0.332，95%CI：0.157~0.659，P=0.002)的保护因素；肥胖是术后CSS(HR=0.464，95%CI：0.219~0.981，P=0.044)和PFS(HR=0.445，95%CI：0.238~0.833，P=0.011)的保护因素。Kaplan-Meier生存分析显示，合并MetS较未合并MetS的患者术后远期生存更佳，二者OS(P=0.029)、CSS(P=0.021)以及PFS(P=0.046)差异均具有统计学意义；对肿瘤直径≤4 cm的亚组，合并MetS与未合并MetS的ccRCC患者术后OS(P=0.702)、CSS(P=0.833)以及PFS(P=0.339)差异均无统计学意义；对肿瘤直径> 4 cm的亚组，合并MetS的患者OS(P=0.010)、CSS(P=0.003)以及PFS(P=0.001)均高于未合并MetS的患者。结论MetS是ccRCC患者术后OS、CSS和PFS的保护因素，该现象在肿瘤直径>4 cm亚组中更为显著；MetS的组分中肥胖与ccRCC术后OS以及CSS相关。     

环状RNA circRSF1结合HuR促进辐射诱导的肝星状细胞炎性表型

目的探讨环状RNA circRSF1能否通过结合HuR蛋白并阻遏其功能发挥，进而调控辐射诱导的肝星状细胞（HSC）炎性表型。方法在人HSC细胞株LX2过表达或敲低HuR后给予8 Gy X射线照射。通过qRT-PCR检测炎性因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）的表达，采用Western blot检测IκBα表达和NF-κB磷酸化。采用RNA pull down和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)验证circRSF1与HuR的结合。改变circRSF1和HuR的作用水平后检测炎性因子和IκBα的表达以及NF-κB的磷酸化。结果敲低HuR可明显上调受照的LX2中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达，并减少IκBα表达和促进NF-κB磷酸化，而过表达HuR则相反（P < 0.05）。过表达或敲低circRSF1对HuR的表达无影响。RNA pull down和RIP实验证实了两者存在相互结合。过表达circRSF1减少HuR与IκBα结合并下调IκBα的表达（P < 0.05）。过表达circRSF1联合过表达HuR可部分逆转过表达circRSF1所致的LX2受照后炎性因子表达上调、IκBα表达下调以及NFκB磷酸化增加，而敲低circRSF1联合敲低HuR的效应则相反（P < 0.05）。结论circRSF1通过结合HuR降低IκBα表达，促进NF-κB通路激活，从而促进辐射诱导的HSC炎性表型。     

CDK1、CCNB1和NDC80与乙型肝炎相关肝细胞癌的预后和进展相关：基于生物信息学方法

目的探讨HBV转化为HCC相关的关键基因，并探索相关的分子机制。方法分析基因表达综合（GEO）数据库中{"type":"entrez-geo","attrs":{"text":"GSE55092","term_id":"55092"}}GSE55092、{"type":"entrez-geo","attrs":{"text":"GSE84044","term_id":"84044"}}GSE84044和{"type":"entrez-geo","attrs":{"text":"GSE121248","term_id":"121248"}}GSE121248的mRNA微阵列数据，其中包括119个HBV相关的HCC组织和252个HBV相关的非肿瘤组织。“sva” R包用于去除批间差。进行整合分析，获取HBV相关肝癌和HBV组织中的差异表达基因（DEGs），通过基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析对差异表达基因进行功能注释。使用相互作用基因搜索工具（STRING）构建蛋白质-蛋白质相互作用网络，挖掘最重要的模块和关键基因。cBioportal用于分析hub基因的相关性。利用Kaplan-Meier和Oncomine数据库对TCGA数据库中肝癌基因表达数据进行验证，探讨hub基因与肝癌发生、发展和预后的关系。通过逆转录定量PCR（RT-qPCR）实验验证17对临床肝细胞癌样本与邻近非肿瘤组织中hub基因的表达。结果共获得121个DEGs（P＜0.01），鉴定出3个遗传标记，细胞周期素依赖性激酶1（CDK1）、细胞周期蛋白B1（CCNB1）和核分裂周期蛋白80（NDC80），与细胞周期、嘧啶代谢和DNA复制有关，这3个基因高度相关（P＜0.05）。UALCAN数据库证实这些基因在肝癌组织中高表达并获得相关预后信息。Kaplan-Meier表明，它们与HCC患者的低存活率相关。CDK1、CCNB1和NDC80与肝癌分级相关（P＜0.05），RT-qPCR实验证实CDK1、CCNB1和NDC80的mRNA在肝细胞癌中的表达明显高于癌旁组织。结论CDK1、CCNB1和NDC80基因可作为HBV相关肝细胞癌的预后标志物，在肝癌的基础研究和临床治疗方面有一定的应用价值。     

适用于单细胞RNA测序的半月板细胞提取方法的优化

目的优化半月板细胞提取的方法，缩短细胞提取时间，稳定地获取细胞数量多和细胞活率高的细胞悬液，使获得的细胞悬液悬液适用于单细胞RNA测序。方法比较细胞悬液的细胞数量及细胞活率评价不同细胞提取方法的有效性，细胞提取方法包括传统半月板细胞提取法（短时间消化和长时间消化）和优化提取法；通过分析单细胞RNA测序数据集评价优化提取法获取的细胞悬液的稳定性；通过比较优化提取法获得的单细胞RNA测序数据集与公开的半月板单细胞RNA测序数据集，分析优化提取法的可靠性。结果在3次重复实验中，优化提取法获得细胞数量最多的细胞悬液，细胞数量超过10⁵，且细胞活率最高，平均达80%。通过分析单细胞RNA测序数据发现每个样本中80%以上细胞的线粒体基因含量少于20%。CD34⁺，MCAM+细胞以及COL1A1⁺胞均存在每个单细胞RNA测序数据集中。在比较基于优化提取法单细胞RNA测序数据集与公开的半月板单细胞RNA测序数据集时发现，优化提取法也能捕获COL3A1⁺细胞，COL1A1⁺细胞，MYLK⁺细胞，BMP2⁺细胞，CD93⁺细胞和CDK1⁺细胞。结论优化细胞提取方法能稳定地获得适用于10×Genomics平台的单细胞RNA测序技术的单细胞悬液。     

MYBL2在前列腺癌患者组织中高表达并与不良预后相关

目的探索骨髓母细胞增生症病毒癌基因同源物样2（MYBL2）基因对前列腺癌（PCa）患者临床预后和生物学行为的影响。方法采用qRT-PCR检测MYBL2在45例PCa与癌旁前列腺组织的表达水平，根据MYBL2表达中位数，分为高（23例）低（22例）表达，采用非参数检验、Kaplan-Meier、单因素和多因素Cox法，并分析MYBL2高低表达与PCa的临床病理特征及预后相关性，利用癌症基因组图谱（TCGA）基因芯片数据库PCa数据集进行验证。基因集富集分析（GSEA）MYBL2高低表达可能参与调控的分子通路，CIBERSORT算法研究MYBL2与肿瘤免疫微环境的相关性。最后，体内实验中，通过建立阴性对照组（shCtrl）、敲减MYBL2组（sh-MYBL2）用细胞增殖毒性检测试剂盒（CCK8）和Transwell法检测各组细胞增殖和侵袭能力。qRT-PCR和Western blotting检测肿瘤细胞中MYBL2基因和蛋白的表达。在体内实验中，检测2组荷瘤小鼠瘤重和免疫组织化学方法观察荷瘤组织Ki-67的表达水平。结果两组数据均显示：MYBL2在PCa组织中高表达，与Gleason评分、临床和病理分期正相关（P < 0.01），与年龄无相关性；Kaplan-Meier分析MYBL2高表达与无生化复发生存期显著负相关（P < 0.05），与总生存期无关。Cox回归分析：TCGA数据集中临床和病理分期，我们的数据中临床分期和Gleason评分是PCa无复发生存期的独立预后因素（P < 0.05）。GSEA结果显示高表达MYBL2与免疫、细胞粘附、细胞因子等通路有关。CIBERSORT分析：MYBL2表达与B cells memory和Mast cells resting有关（P < 0.05）。体外研究显示，与shCtrl组相比，shMYBL2组能显著抑制LNCaP、PC-3细胞增殖和侵袭（P < 0.01）。体内研究显示，shMYBL2组PC-3荷瘤小鼠体内肿瘤的平均重和Ki67阳性表达率显著低于shCtrl组（P < 0.01）。结论MYBL2是一种致癌基因，与PCa多个病理指标相关，可以作为潜在的诊疗PCa患者预后的标志物和治疗肿瘤的靶标。     

胸椎旁阻滞可改善肺癌切除术患者的预后

目的探索胸椎旁阻滞(TPVB)对肺癌切除术患者预后的影响。方法选取本中心2017年1月~2018年5月接受单纯全身麻醉(GA)或全身麻醉联合TPVB (TPVB+GA)下肺癌切除术的初治肺癌患者, 并通过对基线特征行倾向性评分匹配, 最终以1:2分别纳入47例TPVB+GA行肺癌切除术的患者和94例GA行肺癌切除术的患者进行回顾性分析, 比较胸椎旁阻滞对肺癌切除术患者5年总生存时间(OS)、无复发生存时间(PFS)、术中阿片类药物用量等的影响。结果生存分析显示TPVB+GA组患者PFS较GA组显著延长(log-rank P=0.034), 其中TPVB+GA组优势比OR 0.45(95% CI, 0.33~0.89);进一步对各临床参数作单因素与多因素Cox回归分析, 再次验证了上述结果, TPVB是肺癌手术患者的独立预后因素(P=0.002, OR=0.33, 95% CI, 0.16~0.66)。Cox回归生存分析还发现术中瑞芬太尼使用剂量较低与肺癌患者预后较好有显著相关(P=0.017, OR=0.47, 95% CI, 0.25~0.87), 卡方检验则表明TPVB明显降低术中瑞芬太尼剂量。结论胸椎旁阻滞可延长肺癌切除术患者无复发生存时间, 改善预后。     

延胡索酸水合酶缺陷型肾细胞癌的临床病理特征及预后

目的探讨延胡索酸水合酶缺陷型肾细胞癌(fumarate hydratase-deficient renal cell carcinoma，FH-RCC)的临床病理特征及预后。方法应用免疫组织化学染色的方法检测北京大学第一医院泌尿外科2013年1月至2019年12月收治的109例60岁及以下不同类型肾细胞癌患者肿瘤组织中延胡索酸水合酶(fumarate hydratase，FH)的表达情况，分析FH-RCC的临床病理特征及预后。结果筛选出11例FH-RCC患者，其中男性7例，女性4例，发病年龄16~53岁(平均36.7岁)。4名女性患者均有子宫肌瘤病史，仅1例患者的一级亲属有肾癌家族史，所有患者均无皮肤平滑肌肿瘤的病史及家族史。肾细胞癌的肿瘤直径2.1~12.0 cm(平均8.83 cm)，9例患者有肾窦或肾周脂肪侵犯，6例有肾静脉或下腔静脉内瘤栓形成，7例有淋巴结转移，4例侵犯肾上腺，1例侵犯脾脏被膜。11例患者中7例(7/49例，14.3%)原诊断为Ⅱ型乳头状肾细胞癌，2例(2/9例，22.2%)原诊断为集合管癌，2例(2/51例，3.9%)原诊断为未分类型肾细胞癌。肿瘤组织病理学大多表现为乳头状、管囊状、实性片状等不同结构的混合，最常见的组织结构为乳头状(9/11例，81.8%)及管状(8/11例，72.7%)结构，3例伴有肉瘤样分化。肿瘤细胞均可见灶状分布大而明显的嗜酸性核仁(WHO/国际泌尿病理协会Ⅲ~Ⅳ级)及核周空晕。免疫组织化学检测显示，癌组织CA9、CD10、CK7染色大多阴性，2例TFE3阳性表达的病例经荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization，FISH)检测，结果显示TFE3基因均未发生易位或扩增。11例患者均获得随访资料，随访时间11~82个月，确诊后患者平均生存期为24个月，其中5例于术后9~31个月(平均19个月)因肿瘤远处转移而死亡，6例存活患者中已有5例发生了远处转移。结论FH-RCC在组织形态学上与多种肾细胞癌有重叠，乳头状及管囊状排列方式的混合存在是FH-RCC最常见的生长方式，癌细胞中灶状出现大而明显的嗜酸性核仁是该类型肾细胞癌的重要组织学特征，FH免疫组织化学染色有助于明确诊断。对于患有平滑肌瘤的年轻女性肾细胞癌患者，需警惕FH-RCC的可能。部分FH-RCC的诊断缺少临床证据，应根据组织病理学特征进一步行基因检测以确诊。     

临床T1期肾细胞癌肾窦侵犯的危险因素

目的总结临床T1(cT1)期肾细胞癌的临床影像学特点，探究影响cT1期肾细胞癌患者发生肾窦侵犯的危险因素。方法回顾性分析2016年1月至2019年8月于北京大学第三医院泌尿外科住院行肾部分切除术或根治性肾切除术，术前诊断为cT1期肾细胞癌的患者，收集患者的临床、影像学和病理学资料。采用卡方检验、Mann-Whitney U检验、多因素Logistic回归，对cT1期肾细胞癌发生肾窦侵犯的相关危险因素进行分析。结果共纳入507例患者，其中男性354例(69.8%)，女性153例(30.2%)，中位年龄59岁，中位体重指数25.5 kg/m²。术前有肉眼血尿者18例(3.6%)，中位肿瘤直径3.5 cm。cT1a期322例(63.5%)，cT1b期185例(36.5%)，中位R.E.N.A.L.评分为8分。肿瘤边界规则者359例(70.8%)，肿瘤边界不规则者148例(29.2%)。所有患者均行手术治疗，包括186例(36.7%)肾部分切除术和321例(63.3%)根治性肾切除术。术后病理提示肾窦侵犯75例(14.8%)，其中cT1a期侵犯肾窦18例，占cT1a期总数的5.6%;cT1b期侵犯肾窦57例，占cT1b期总数的30.8%。单因素分析发现，年龄(P=0.02)、R.E.N.A.L.评分(P < 0.001)、肿瘤边界状态(P < 0.001)是cT1期肾细胞癌发生肾窦侵犯的相关危险因素。多因素Logistic回归显示，R.E.N.A.L.评分(P≤0.020)和肿瘤边界状态(P=0.001)是cT1期肾细胞癌发生肾窦侵犯的独立危险因素。结论对cT1期肾细胞癌，术后接近15%的患者存在肾窦侵犯现象; R.E.N.A.L.高评分和肿瘤边界不规则，均可以提示cT1期肾细胞癌有发生肾窦侵犯的风险。     

Leptin对缺氧状态下大鼠视网膜祖细胞体外增殖和分化的影响

目的探讨Leptin对体外培养的缺氧状态下视网膜祖细胞（RPCs）增殖、分化的影响及细胞中PTEN蛋白表达的变化。方法原代培养大鼠RPCs，不同浓度Leptin作用RPCs细胞，分为：常氧培养组（Control组）、缺氧培养（Hypoxia）+0、0.3、1.0、3.0、10、30 nmol/L Leptin组，分别培养至12、24、48 h，CCK-8法检测细胞增殖活性。将原代培养的RPCs细胞分为：Control组、Hypoxia组、Hypoxia+Leptin组，培养48 h后，转换为分化培养基继续培养6 d，采用免疫荧光染色法对GFAP阳性细胞比例和β- tubulin III阳性细胞比例进行统计分析。Control组、Hypoxia组、Hypoxia+Leptin组细胞培养48 h后，采用Western blot法检测各组RPCs中PTEN蛋白表达水平。结果原代培养的P0代RPCs为圆形悬浮生长，培养2 d后细胞可聚集成神经球。低浓度Leptin（0.3、1.0、3.0 nmol/L）作用RPCs 48 h，细胞增殖活性较Control组及Hypoxia组增强，RPCs细胞增殖活性随Leptin浓度增高呈递增趋势，其中，3.0 nmol/L Leptin作用48 h细胞增殖活性最强（P < 0.05）；高浓度Leptin（10 nmol/L，30 nmol/L）组细胞增殖活性较对照组减弱（P < 0.05）。细胞培养48 h，与Control组及Hypoxia组相比，Hypoxia+Leptin组β-tubulin III阳性细胞比例和GFAP阳性细胞比例均无显著性差异（P>0.05），而PTEN蛋白表达量较对照组显著下调（P < 0.05）。结论低浓度Leptin可促进缺氧状态下大鼠RPCs细胞增殖，抑制细胞中PTEN蛋白表达，对细胞分化无明显影响。     

癌栓粘连血管壁对非转移性肾细胞癌合并下腔静脉癌栓患者手术及预后的影响

目的评估癌栓粘连静脉壁对肾细胞癌伴下腔静脉癌栓患者手术难度和预后的影响。方法对北京大学第三医院泌尿外科于2017年1月至2020年6月收治的94例非转移性肾细胞癌合并下腔静脉癌栓患者进行回顾性队列研究，收集患者的一般情况、临床病理特征、手术及生存信息。按术中发现癌栓粘连静脉壁为标准将患者分为两组，其中64例为癌栓粘连静脉壁组(deep invasive tumor thrombus, DITT)，30例为非粘连组(non-invasive tumor thrombus, NITT)。分别采用卡方检验、t检验和Mann-Whitney U检验进行两组间分类变量和连续变量的单因素比较，绘制Kaplan-Meier曲线并进行多变量Cox回归分析以评估癌栓粘连静脉壁对患者预后的影响。结果与NITT组相比，DITT组患者的手术难度明显增加，主要表现为手术时间更长(362.5 vs. 307.5 min，P=0.010)，手术出血量更多(1 200 vs. 450 mL，P=0.006)，围术期输血量更多(800 vs. 0 mL，P=0.021)，血浆输注量更多(200 vs. 0 mL，P=0.001)，开放手术占比更高(70.3% vs. 36.7%，P=0.002)，术后住院时间更长(9.5 vs. 8.0 d，P=0.036)，且发生术后并发症的比例更高(46.9% vs. 13.8%，P=0.002)。DITT与患者的总生存期更差呈正相关(P=0.022)，即使在多因素分析中，DITT仍是影响肾细胞癌伴下腔静脉癌栓患者术后总生存率的不良预后因素[HR: 4.635 (1.017~21.116)，P=0.047]。结论对于非转移性肾细胞癌合并下腔静脉癌栓的患者而言，癌栓粘连静脉壁会明显增加其手术难度，并与患者的不良预后相关。     

肝细胞癌中促癌miRNA调控网络分析与验证

目的构建肝细胞癌中生存相关的促癌miRNA与其靶基因的调控网络并对关键miRNA-靶基因进行实验验证。方法利用OncomiR和Oncolnc获取肝癌中生存相关的miRNA，并进行表达分析和生存分析；利用miRNet预测miRNA的靶基因，通过GEPIA2、Ualcan分别对靶基因进行生存和表达分析，通过Starbase进行miRNA-靶基因共表达分析，利用Cytoscape软件构建miRNA-靶基因网络，通过Enrichr进行靶基因富集分析，利用String数据库进行蛋白互作网络构建。将NC，hsa-miR-1226-3p的mimic或inhibitor，hsa-miR-221-5p的mimic或inhibitor分别转染HepG2细胞，利用CCK8检测转染后细胞活力的变化情况，另取转染后48 h样品利用Q-PCR检测靶基因表达情况；将NC，hsa-miR-221-5p的mimic或inhibitor分别转染HepG2细胞，48 h后用Werstern blot检测靶基因蛋白表达情况；将NC+p-GCDH-WT质粒，NC+p-GCDH-MUT质粒，hsa-miR-221-5p mimic+pGCDH-WT质粒，hsa-miR-221-5p mimic+p-GCDH-MUT质粒分别转染HepG2细胞，48 h后利用多功能酶标仪检测荧光素酶活性；将NC，hsa-miR-221-5p mimic，pEGFP N1-GCDH质粒，hsa-miR-221-5p mimic+pEGFP N1-GCDH质粒分别转染HepG2细胞，利用CCK8检测转染后细胞活力的变化情况，transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果从OncomiR和Oncolnc数据库中分别得到223个（P < 0.05）和146个（P < 0.05）在肝癌中与生存相关的miRNA，两者交集为131个；结合表达分析和生存分析的结果共鉴定出48个促癌miRNA；miRnet共预测出10 278个靶基因，通过生存和表达分析符合预期的为44个，miRNAmRNA共表达分析后的结果显示27个靶基因符合预期。通过Cytoscape软件构建的miRNA-靶基因网络包含了25个促癌miRNA和27个抑癌基因。富集分析结果显示靶基因集中作用于脂肪酸代谢通路。验证实验显示，转染hsa-miR-1226-3p的mimic和inhibitor，hsa-miR-221-5p的mimic和inhibitor后，其对应的靶基因mRNA或蛋白水平均显著改变（P < 0.05）；hsa-miR- 221-5p mimic和p-GCDH-WT质粒共转可显著降低其荧光素酶的活性（P < 0.05）；pEGFP N1-GCDH质粒和hsa-miR-221-5p mimic共转可显著恢复其对细胞活力，以及细胞迁移、侵袭能力的影响（P < 0.05）。结论通过综合分析鉴定了肝癌中的促癌miRNA并构建了其调控网络；脂肪酸代谢可能是肝细胞癌中促癌miRNA发挥作用的重要的靶标信号通路之一。hsa-miR-221- 5p/GCDH轴是肝癌进展的重要分子机制。     

超声引导下星状神经节阻滞加快胃癌根治术患者术后胃肠功能恢复

目的探究超声引导下星状神经节阻滞（SGB）对腹腔镜下胃癌根治术患者围术期应激反应、胃肠激素和术后胃肠功能恢复的影响。方法择期行腹腔镜胃癌根治术患者60例，性别不限，年龄35~75岁，BMI 18.5~26 kg/m²，ASA分组Ⅱ~Ⅲ级。采用随机数字表法将其分为实验组和对照组，各30例。实验组于麻醉诱导前15 min行超声引导下右侧C₆水平SGB操作，注入0.5%罗哌卡因7 mL。对照组于同一部位注射生理盐水7 mL。选择SGB前（T1）、术毕（T2）、术后第2天（T3）、术后第6天（T4）时间点采集患者外周静脉血样，测定血中胃动素（MOT）、血管活性肠肽（VIP）、皮质醇（Cor）、血糖（Glu）水平；记录术中舒芬太尼使用量；记录术后36、48、60、72、84、96 h肠鸣音恢复率及首次排气时间。结果与对照组相比较，两组舒芬太尼总用量差异无统计学意义；与对照组相比，实验组T2、T3、T4时点Cor水平较低，VIP水平较低，MOT水平较高（P < 0.05）。与对照组相比，实验组T2、T3时点Glu水平较低（P < 0.05）。与对照组相比，实验组术后36、48、60、72、84 h肠鸣音恢复率较高（P < 0.05），术后排气时间缩短（P < 0.05）。结论超声引导下SGB可以减轻腹腔镜下胃癌根治术患者围术期应激水平，促进胃肠激素分泌水平恢复，加快术后胃肠功能快速恢复。     

基于术前CT影像组学列线图可预测Ⅰ~Ⅲ期肾透明性细胞癌术后复发

目的探讨Ⅰ~Ⅲ期肾透明细胞癌术后复发的术前CT影像组学特征并构建列线图，以期为肾癌个体化治疗提供参考。 方法 回顾性收集256例（训练集175例，测试集81例）肾透明细胞癌患者的临床病理及CT资料。利用ITK-SNAP软件和PyRadiomics计算平台对肿瘤的容积图像进行分割和特征提取。训练集中，基于lasso-CV算法进行特征筛选，并计算影像组学评分Rad_score；利用单因素和多因素逻辑回归分析筛选临床病理及CT特征为Clinic因素；构建Rad_score、Clinic、Rad_score+ Clinic列线图，并在测试集中进行验证。评估列线图的辨别度和校准度，应用决策曲线分析评估其临床应用价值。结果6个影像组学特征最终用于计算Rad_score。Clinic因素为KPS评分、血小板、钙化和TNM临床分期。在辨别度方面，Rad_score+ Clinic列线图的效能（训练集AUC 0.84，测试集AUC 0.85）显著高于Rad_score列线图（训练集AUC 0.78，P=0.029；测试集AUC 0.77，P=0.025）和Clinic列线图（训练集AUC 0.77，P=0.014，测试集AUC 0.77，P=0.011）。校准度方面，Rad_score+Clinic列线图拟合优度检验为训练集P=0.065，测试集P=0.628。决策曲线分析显示，加入Rad_score后的Rad_score+Clinic列线图比单纯Clinic列线图应用价值高。结论基于术前CT影像组学特征的列线图预测Ⅰ~Ⅲ期肾透明细胞癌术后复发有较高的效能，可为肾癌个体化治疗提供参考。