脂肪细胞凋亡的研究进展

凋亡是机体生长发育，细胞分化和病理状态中细胞自主性死亡的过程。细胞凋亡的主要特征是细胞皱缩、核固缩、膜泡状化、凋亡小体形成以及DNA片段化。由于脂肪细胞中充满大量脂滴以及极小的核浆比值，可阻止凋亡的特征性的胞浆的改变(皱缩及凋亡小体形成)，使凋亡的特征性改变不明显，再加上脂肪密度小，易漂浮在液面，操作不易洗涤和分离，用一般的方法很难检测到脂肪细胞凋亡，故脂肪细胞凋亡的研究起步较晚。现将近年来脂肪细胞凋亡的研究进展综述如下。     

Bcl-2、Bax基因表达改变与禁食诱导的脂肪细胞凋亡研究

目的：研究禁食对大鼠体重及外周脂肪湿重的影响,探讨禁食减脂减重与脂肪细胞凋亡的关系。方法：禁食48h,用DNA提取物凝胶电泳证实脂肪细胞凋亡的存在,逆转录（RT）－PCR探讨Bcl-2与Bax基因的表达。结果：（１）禁食能明显降低大鼠体重,组间比较具有显著的统计学意义（P＜0．001）（2）禁食能减少外周脂肪组织湿重,但统计学意义不显著（P＞0．05）;（3）DNA提取物凝胶电泳结果证实脂肪细胞发生了凋亡;（4）外周脂肪组织中Bcl-2基因表达减少,Bax表达增加（5）生殖器周脂肪组织对细胞凋亡的敏感性高于腹膜后。结论：降低Bcl-2与Bax的比值,诱导脂肪细胞凋亡可能是禁食减脂减重的重要机制。     

神经肽Y-Y5受体反义基因治疗诱导大鼠脂肪细胞凋亡研究

目的：探讨神经肽Y-Y5受体反义基因治疗后正常SD大鼠减肥减重效应与外周白色脂肪细胞体积，数目变化的关系，方法：侧脑室插管，注射针对Y5受体编码起始区的反义，正义，错义寡聚脱氧核糖核酸及生理盐水，采用MPLAS-500多媒体彩色病理图分析系统计算平均脂肪细胞面积，基因组DNA提取物凝胶电泳检测脂肪细胞凋亡。RT-PCR分析凋亡相关基因Bcl-2,Bax表达的改变。结果：（1）Y5受体反义基因治疗后大鼠进食量与体重显降低，外周白色脂肪组织湿重与平均脂肪细胞面积明显减少；（2）脂肪组织基因组DNA提取物凝胶电泳出现凋亡特征性梯状条带；（3）凋亡相关基因Bcl-2表达下调，Bax表达上调。结论：平均脂肪细胞面积减小，脂肪细胞凋亡增加可能是Y5受体反义基因治疗减肥减重的重要原因。     

平目汤含药血清对人Graves眼病眼眶脂肪细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究平目汤含药血清对前脂肪细胞及成熟脂肪细胞的作用,探讨其治疗Graves眼病的机制。方法:采用组织块法将人Graves眼病眼眶前脂肪细胞原代培养并传代,选用间接免疫荧光技术鉴定;用平目汤药液灌胃SD大鼠制备平目汤含药血清,并配成低(5%)、中(10%)、高(20%)三个剂量组;油红O染色观察前脂肪细胞的诱导分化作用;MTT法检测平目汤对前脂肪细胞增殖的影响;流式细胞术检测平目汤对成熟脂肪细胞凋亡率的影响。结果:(1)通过组织块法成功培养出梭形细胞,间接免疫荧光检测为前脂肪细胞。(2)成功诱导前脂肪细胞分化,油红O染色证实为成熟脂肪细胞。(3)平目汤各组均可显著抑制前脂肪细胞的分化,与空白对照组及地塞米松组比较差异明显。(4)平目汤各组均可下调前脂肪细胞增殖活性,以平目汤中剂量组、干预96 h效果最佳,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。(5)平目汤各组成熟脂肪细胞凋亡率明显高于空白对照组(P0.05),以平目汤中剂量组效果最佳。结论:平目汤含药血清可抑制人Graves眼病眼眶前脂肪细胞增殖、促进眼眶成熟脂肪细胞凋亡、减少眼眶脂肪细胞的数量,从而减少眼眶脂肪容积、改善Graves突眼症状。     

针刺对单纯性肥胖大鼠脂肪组织中Bcl-2的表达及脂肪细胞凋亡的影响

目的通过观察针刺对单纯性肥胖大鼠脂肪组织中Bcl-2的表达及脂肪细胞凋亡的影响,探讨针刺减肥机制,为临床应用针刺减肥提供理论和实验依据。方法采用自制高脂饲料制备单纯性肥胖大鼠模型,将造模成功的20只大鼠随机分为肥胖组和针刺组,每组10只;采用普通饲料喂养的10只大鼠作为对照组。用SP免疫组织化学法测定脂肪组织Bcl-2的表达以及末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP缺口末端标记法检测脂肪细胞凋亡指数的变化。结果肥胖组大鼠脂肪细胞凋亡指数显著低于对照组,针刺组大鼠脂肪细胞凋亡指数较肥胖组和对照组显著升高,差别均有统计学意义(P<0.01)。肥胖组大鼠脂肪组织Bcl-2阳性水平表达率显著高于对照组,针刺组大鼠脂肪组织Bcl-2阳性水平表达率较肥胖组和对照组显著降低,差别均有统计学意义(P<0.01)。针刺单纯性肥胖大鼠时脂肪组织Bcl-2蛋白表达与脂肪细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.88,F=8.49,P<0.01)。结论针刺单纯性肥胖大鼠时脂肪组织中的Bcl-2水平表达降低,脂肪细胞凋亡增加,可能是针刺减肥的细胞分子重要机制。     

SMAF1基因的异位过表达对脂肪细胞3T3-L1增殖和凋亡的影响

目的观察一脂肪细胞特异性表达的新基因小脂肪细胞因子1（SMAF1）在小鼠脂肪前体细胞3T3-L1中的异位表达对脂肪细胞增殖和凋亡的影响。方法构建小鼠SMAF1真核表达载体并稳定转染3T3-L1脂肪前体细胞以获得永久异位表达SMAF1基因的细胞株,使用Westernblot证实SMAFl基因的表达。体外培养SMAF13T3-L1脂肪细胞,以MTT法检测SMAF13T3-L1脂肪细胞的增殖;用流式细胞仪对SMAFl3T3-L1脂肪细胞进行凋亡分析。结果与对照相比,SMAF13T3-L1脂肪细胞增殖明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;而SMAF13T3-L1脂肪细胞凋亡分析结果与对照无显著性差异。结论SMAFl基因在3T3-L1中的异位性表达,对3T3L1前体脂肪细胞生长增殖有显著的抑制作用,而对细胞凋亡无影响,提示SMAF1在脂肪细胞增殖分化中发挥一定的作用。     

黄芪改善高脂饲养大鼠胰岛素敏感性的机制研究

目的 :探讨黄芪改善高脂饲养大鼠胰岛素敏感性的机制。方法 :2 4只 SD大鼠随机分为正常对照组、高脂对照组、高脂黄芪干预组 ,每组各 8只 ,分别予以标准饲料和高脂饲料 ,干预组同时灌服黄芪。 7周后采用葡萄糖 -胰岛素耐量试验测量大鼠胰岛素敏感性值 (K) ,并观察不同部位脂肪组织质量的变化及其与 K值的关系。应用 TU NEL 法观察腹腔脂肪细胞凋亡的变化。结果 :7周后 ,高脂干预组大鼠经黄芪治疗后与正常对照组相比 K值减小 (P<0 .0 1 ) ,腹腔脂肪组织质量及脂肪细胞凋亡数未见明显差异 ,但与高脂对照组相比 K值明显增大 (P<0 .0 1 ) ,腹腔脂肪组织质量明显减少 (P<0 .0 1 ) ,脂肪细胞凋亡增加 (P<0 .0 1 )。 结论 :胰岛素抵抗与脂肪组织分布关系密切 ;黄芪改善高脂饲养大鼠胰岛素敏感性的机制可能是通过调控脂肪细胞凋亡 ,影响脂肪细胞的分布 ,从而改善胰岛素抵抗     

脂肪前体细胞凋亡及其影响因素

脂肪前体细胞数量的多少直接影响脂肪细胞的数量,因而也与肥胖程度密切相关。脂肪前体细胞的凋亡受多种基因、因子及其他多方面因素的影响,是目前的研究热点,为肥胖和许多疾病的研究奠定了基础。     

局部注射维生素C对皮下脂肪组织形态的影响

目的:探讨局部应用维生素C对皮下脂肪组织的影响。方法:选用纯系SD大鼠24只,随机分为3组,每组8只。选择双侧腹股沟脂肪垫为观察对象,随机选择一侧注射维生素C作为试验侧,另一侧注射生理盐水作为对照侧,按注射量进行分组:A组(注射1.5 g/L维生素C)、B组(注射3.0 g/L维生素C)、C组(注射6.0 g/L维生素C)。注射后21 d局部取材进行组织学观察,采用TUNEL免疫组化法观察脂肪细胞凋亡的情况。结果:B组、C组试验侧的皮下脂肪组织均较对照侧变薄,脂肪细胞体积变小,数目减少,脂肪细胞的凋亡数目均增加,C组的变化较B组明显。A组实验侧与对照侧比较未见明显的组织学改变。结论:局部注射一定浓度的维生素C可促进脂肪细胞脂质分解,数目减少,诱发脂肪细胞的凋亡,进而使得脂肪组织萎缩。     

大黄酸对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响

目的 研究大黄酸(rhein,Rh)对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术测定RH对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响.采用油红O染色提取法,检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化;采用形态学观察,检测前体脂肪细胞充脂率、充脂程度及形态变化.结果 RH在5～160 μmol&#183;L-1内,对前体脂肪细胞增殖与分化的抑制作用呈剂量和时间依赖性变化,并可在一定程度上诱发脂肪细胞凋亡.结论 Rh可抑制前体脂肪细胞的增殖与分化,具有潜在的减肥降脂作用.     

表达谱基因芯片筛选前体脂肪细胞分化相关基因的研究

目的:运用基因芯片技术研究前体脂肪细胞分化相关基因表达谱的变化。方法:体外培养前体脂肪细胞(3T3-L1),诱导分化为成熟脂肪细胞。提取脂肪细胞总RNA,纯化mRNA后逆转录制备目标序列,应用含有45038种小鼠基因cDNA的表达谱芯片Mouse430_2进行差异表达谱分析。结果:在前体脂肪细胞分化的基因表达谱中差异表达基因共有640条,其中表达水平显著变化的有38条(表达水平改变5倍以上),上调基因24条,下调基因14条。差异表达基因中有细胞凋亡相关基因、原癌基因和抑癌基因、细胞信号和传递蛋白基因等多种基因。这些基因可能与脂肪细胞分化相关疾病的发病机制有关。结论:采用基因芯片技术筛选脂肪细胞分化相关基因,可能为脂肪细胞分化相关疾病病因和发病机制的研究提供新思路。     

脂肪细胞谷氨酰胺合成酶抑制结肠癌细胞的肝、肺转移

目的 探讨脂肪细胞谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)对结肠癌细胞迁移及转移的调控作用.方法 分别用野生型(WT)小鼠和脂肪细胞GS转基因(TgGS)小鼠的脂肪细胞条件培养基处理结肠癌MC38及CT26细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力;通过尾静脉注射结肠癌MC38细胞建立肿瘤血行转移小鼠模型,病理切片观察肝、肺组织的转移情况.结果 CCK-8检测发现脂肪细胞条件培养基对结肠癌MC38及CT26细胞的增殖无明显影响(P＞0.05);流式细胞仪检测发现脂肪细胞条件培养基对结肠癌MC38及CT26细胞的凋亡无明显影响(P＞0.05);划痕实验和Transwell实验结果显示TgGS小鼠脂肪细胞条件培养基可以抑制结肠癌MC38及CT26细胞的迁移能力(P＜0.05);尾静脉注射结肠癌MC38细胞后,与WT小鼠比较,TgGS小鼠肺转移瘤的大小及数量明显减少(P＜0.01),且TgGS小鼠较WT小鼠更不易发生肝转移(P＜0.0l).结论 脂肪细胞GS可以抑制结肠癌细胞的迁移及转移.     

他汀类药物对骨代谢影响的研究进展

他汀类药物作为降低胆固醇的主要药物,具有稳定动脉斑块、抗炎和抗氧化作用,临床应用广泛。近年来,许多基础及临床研究表明,他汀类药物可通过抑制甲羟戊酸途径,促进骨形态发生蛋白-2基因表达;阻止脂肪细胞生成,同时使骨髓基质干细胞向成骨细胞分化;调节核因子(NF)-κB通路,抑制NF-κB受体激活剂所诱导的破骨细胞形成等多种作用机制影响骨代谢,从而使他汀类药物成为骨质疏松症药物治疗的研究热点。     

Lack of mutations in LMNA,its promoter region,and the cellular retinoic acid binding protein II (CRABP II) in HIV associated lipodystrophy

Familial partial lipodystrophy (FPL) and lipodystrophy observed in HIV-1 infected patients receiving highly active antiretroviral therapy (HAART) share multiple clinical and metabolic features. Recently, missense mutations of LMNA encoding lamin A/C have been described in FPL providing evidence for a pivotal role of lamin A/C in the regulation of adipocytes. Moreover, the cellular retinoic acid binding protein (CRABP) has been suggested to be involved in HAART associated lipodystrophy. In this study, we excluded mutations within the complete coding region and the promoter of LMNA and the CRABP II gene in HIV-1 infected patients with lipodystrophy and also any correlation of the nucleotide polymorphism at codon 566 in exon 10 of LMNA with metabolic abnormalities. Protease inhibitors including indinavir have been shown to reduce adipocyte cell differentiation and increase apoptosis of adipocytes in vitro. Indinavir leads to altered retinoic acid signaling most likely by an activation of the RAR/RXR heterodimer, perhaps by displacing all-trans-retinoic acid from CRABP. Since LMNA is regulated by a retinoic acid responsive element (L-RARE) in the promoter region, we propose that indinavir impairs retinoic acid homeostasis and/or interact via the L-RARE within the LMNA promoter. This results in altered LMNA expression and subsequent impaired adipocyte differentiation, lipodystrophic body habitus, and metabolic disturbances in HIV infected patients receiving HAART.     

高温有氧运动对高脂饲养大鼠脂肪细胞分化相关调控基因表达的影响

目的:通过高温环境下有氧运动引起高脂饲养大鼠血液生化指标含量变化及其对内脏白色脂肪组织TNF-α、Leptin、PPARγ、visfatin基因表达的影响,探讨脂肪细胞分化及高温有氧运动减肥的分子机制.方法:高脂饲养大鼠建模8周后,随机分成非运动对照组、23℃常温有氧运动组、35℃高温有氧运动组,每天45mm连续8周中...