电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马及血清caspase-12表达的影响

目的观察c-jun氨基末端激酶(JNK)信号转导通路阻断下电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马及血清半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(caspase-12)表达的影响,探讨针刺抗抑郁的作用机制。方法 SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、氟西汀组、模型+二甲基亚砜(DMSO)组、模型+JNK通路阻断剂SP600125(以下简称SP)组、针刺+SP组、氟西汀+SP组,每组9只。除空白组外,其余组均采用慢性应激结合孤养的方法造模。电针干预选取"内关""三阴交"穴,每次20 min,每天1次,治疗21 d;阳性对照药物给予氟西汀5 mg/kg灌胃,治疗21 d。通过旷场实验对大鼠进行行为学评价,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠海马和血清中caspase-12蛋白表达。结果实验前各组大鼠行为学检测均无统计学差异(P0.05)。实验第21天,与空白组相比,模型组的水平穿越格数、竖立次数明显降低(P0.01);与模型组相比,针刺组能提高模型大鼠的水平穿越格数(P0.05)。与空白组比较,模型组大鼠海马caspase-12蛋白表达明显上升(P0.01);与模型组比较,模型+DMSO组、氟西汀组、氟西汀+SP组、模型+SP组、针刺组、针刺+SP组大鼠海马caspase-12蛋白表达均下降(P0.05)。与空白组比较,模型组大鼠血清caspase-12蛋白表达降低;与模型组比较,模型+DMSO组、模型+SP组、氟西汀组、针刺+SP组大鼠血清caspase-12蛋白表达降低,而氟西汀+SP组、针刺组大鼠caspase-12表达升高,但差异均没有统计学意义(P0.05)。结论针刺可能是通过抑制JNK信号转导通路活性,从而降低慢性应激模型大鼠海马caspase-12蛋白表达,减少海马神经元凋亡,从而发挥抗抑郁效应。     

慢性应激对大鼠海马NGF、NT-3表达的影响及应激停止后的变化

目的 探讨慢性应激对大鼠海马神经元NGF、NT-3蛋白表达的影响及其应激停止后的变化. 方法 采用慢性强迫游泳和孤养制作动物模型.运用open-field法观察大鼠行为学的变化,运用免疫组织化学方法观察大鼠海马DG区、CA3区NGF、NT-3的表达. 结果 与对照组相比,实验组1大鼠海马CA3、DG区NGF、NT-3的平均灰度值显著增加[灰度值分别为(187.25±0.87),(169.67±0.94),(183.49±0.21),(157.33±0.39),P＜0.05和P＜0.01],实验组2平均灰度值与对照组2相比同样增加[灰度值分别为(186.31 4±0.68),(170.30±1.22),(187.79 4±1.01),(162.79±0.98),P＜0.05]. 结论 慢性应激使大鼠海马NGF、NT-3表达降低,应激30d后,其表达仍低于对照组.     

手针与电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马p-JNK、c-jun、Caspase-3蛋白表达的影响

目的 探讨手针与电针抗抑郁治疗的作用机制.方法 将50只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常组、模型组、手针组、电针组、帕罗西汀组,除正常组之外,其余组均采用慢性应激结合孤养方法造模.观察手针与电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、c-jun、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响.采用旷场实验进行行为学评价,用Western blot方法检测海马p-JNK、c-jun、Caspase-3蛋白含量.结果 p-JNK蛋白表达,与正常组比较,模型组显著增高(P＜0.01);与模型组比较,手针组显著下降(P＜0.05),电针组有降低趋势,但无显著差异(P＞0.05).c-jun蛋白表达,与正常组比较,模型组增高(P＜0.01);与模型组比较,手针组与电针组均有降低趋势,但无显著差异(P＞0.05).Caspase-3蛋白表达,与正常组比较,模型组显著增加(P＜0.01);与模型组比较,手针组与电针组均显著降低(P＜0.01);与帕罗西汀组比较,手针与电针组均显著降低(P＜0.01).结论 慢性应激抑郁模型大鼠海马c-jun氨基末端激酶(JNK)通路磷酸化及下游促凋亡蛋白表达增加;手针与电针在下调c-jun、Caspase-3表达上无显著差异,但在下调p-JNK表达上,手针优于电针,提示手针与电针抗抑郁治疗可能存在不同的分子机制.     

两种慢性强迫游泳应激抑郁模型的行为学比较

目的 比较两种慢性强迫游泳应激抑郁模型的行为学特点,探讨慢性强迫游泳应激抑郁模型的建立方法,方法 18只SD雄性大鼠随机分为对照组和应激组(S1组和S2组).应激组连续给予14 d、水温分别为(23±0.5)℃和(10±0.5)℃、每天5 min强迫游泳,观察3组大鼠应激7 d和14 d的体质量、摄食、旷场实验和液体消耗实验的变化.结果 S2组在应激7 d后体质量增长率、24 h摄食率低于对照组(P＜0.05);应激14 d后体质量增长率[(12.26±4.04)%]、24 h摄食率((9.49±0.96)%]、摄糖量[(28.63±3.51)g]、糖水偏好[(76.25±2.51)%]、水平得分(12.17±9.00)、垂直得分(3.17±3.60)均低于对照组(P＜0.0S).S1组在应激7 d后出现体质量增长率、24 h摄食率明显下降,在应激14 d后除体质量增长率下降外,24 h摄食率、垂直得分和糖水偏好均高于对照组(P＜0.05).结论 较低水温的慢性强迫游泳应激14 d能诱发大鼠的抑郁行为,可能更适合于建立应激抑郁模型.     

强迫游泳应激强度的改变对大鼠海马中c-fos表达习惯化的影响

目的研究应激强度的改变对重复应激导致的大鼠海马中c-fos表达习惯化的影响.方法采用特异抗体的免疫组织化学方法,在重复强迫温水游泳应激导致的c-fos表达习惯化大鼠模型基础上,观察强迫冰水游泳应激对大鼠海马中c-fos表达的影响.结果重复强迫温水游泳应激导致c-fos表达习惯化后,再给予强迫冰水游泳应激使c-fos表达水平再次升高.结论高强度的应激可以逆转低强度应激所引起的习惯化效应.     

强迫游泳应激对大鼠海马代谢物水平影响的在体研究

目的 探讨质子磁共振波谱(1H-MRS)在体应激所致海马损伤的应用价值.方法 将24只大鼠随机分为对照组(n=6)、单次应激组(n=6)、2周应激组(n=6)和4周应激组(n=6),利用强迫游泳试验(15min/d)建立应激动物模型,根据行为学和血清皮质酮水平评定应激效果,利用1H-MRS测量大鼠双侧海马N-乙酰天冬氨酸/肌酸(NAA/Cr)和胆碱复合物/肌酸(Cho/Cr)比值.结果 2周应激组血清皮质酮[(1001.36±82.84)ng/ml]明显高于对照组[(191.60±116.41)ng/ml]、单次应激组[(359.09±67.08)ng/ml]和4周应激组[(287.03±37.22)ng/ml],P＜0.05.1H-MRS在体检测结果显示2周应激组大鼠左侧海马NAA/Cr值(1.171±0.087)明显低于对照组(1.304±0.088),P＜0.05,但比4周应激组(1.035±0.039)高,P＜0.05,而与单次应激组(1.239±0.127)相比差异无显著性,4周应激组NAA/Cr值明显低于其他3组;右侧检测显示4周应激组NAA/Cr值(1.015±0.049)明显低于其他3组(对照组,2周应激组和4周应激组分别为1.268±0.070,1.271±0.087,1.211±0.088),而其他各组间比较差异无显著性.双侧Cho/Cr值检测结果各组间均差异无显著性.应激强度与海马代谢物水平呈显著负相关,左侧和右侧的相关系数分别为-0.749和-0.804,P＜0.01.结论 强迫游泳应激可以导致大鼠海马神经元生存活力的下降或结构破坏,海马区代谢物水平改变,左、右侧海马对应激的敏感性表现不对称,并以左侧海马更为明显,1H-MRS可无创性地反映海马区代谢物水平的这一改变.     

半胱氨酸蛋白酶-3在缺碘子代大鼠海马中的表达

目的 :探讨半胱氨酸蛋白酶 3(Caspase 3)对缺碘及甲状腺激素 (TH)不足海马神经细胞凋亡的影响 ,并研究缺碘所致学习记忆能力低下可能的机制。方法 :复制碘缺乏子代大鼠 ,免疫组织化学方法检测海马神经细胞Caspase 3表达。结果 :缺碘子代大鼠海马神经细胞Caspase 3较对照组明显增多 (16 12 0± 6 0 6 ,3 6 2 5±1 33) ,P <0 0 1。结论 :缺碘及甲状腺激素不足导致海马神经细胞凋亡增加 ,学习记忆能力低下 ,可能和Caspase 3明显增多有关。     

强迫游泳应激对大鼠海马代谢物水平影响的在体研究

目的探讨质子磁共振波谱(1H-MRS)在体应激所致海马损伤的应用价值。方法将24只大鼠随机分为对照组(n=6)、单次应激组(n=6)、2周应激组(n=6)和4周应激组(n=6),利用强迫游泳试验(15min/d)建立应激动物模型,根据行为学和血清皮质酮水平评定应激效果,利用1H-MRS测量大鼠双侧海马N-乙酰天冬氨酸/肌酸(NAA/Cr)和胆碱复合物/肌酸(Cho/Cr)比值。结果2周应激组血清皮质酮[(1001.36±82.84)ng/ml]明显高于对照组[(191.60±116.41)ng/ml]、单次应激组[(359.09±67.08)ng/ml]和4周应激组[(287.03±37.22)ng/ml],P<0.05。1H-MRS在体检测结果显示2周应激组大鼠左侧海马NAA/Cr值(1.171±0.087)明显低于对照组(1.304±0.088),P<0.05,但比4周应激组(1.035±0.039)高,P<0.05,而与单次应激组(1.239±0.127)相比差异无显著性,4周应激组NAA/Cr值明显低于其他3组;右侧检测显示4周应激组NAA/Cr值(1.015±0.049)明显低于其他3组(对照组,2周应激组和4周应激组分别为1.268±0.070,1.271±0.087,1.211±0.088),而其他各组间比较差异无显著性。双侧Cho/Cr值检测结果各组间均差异无显著性。应激强度与海马代谢物水平呈显著负相关,左侧和右侧的相关系数分别为-0.749和-0.804,P<0.01。结论强迫游泳应激可以导致大鼠海马神经元生存活力的下降或结构破坏,海马区代谢物水平改变,左、右侧海马对应激的敏感性表现不对称,并以左侧海马更为明显,1H-MRS可无创性地反映海马区代谢物水平的这一改变。     

强迫游泳应激强度的改变对大鼠海马中c—fos表达习惯化的影响

目的 研究应激强度的改变对重复应激导致的大鼠海马中c—fos表达习惯化的影响。方法 采用特异抗体的免疫组织化学方法，在重复强迫温水游泳应激导致的c—fos表达习惯化大鼠模型基础上，观察强迫冰水游泳应激对大鼠海马中c—fos表达的影响。结果 重复强迫温水游泳应激导致c—fos表达习惯化后，再给予强迫冰水游泳应激使c—fos表达水平再次升高。结论 高强度的应激可以逆转低强度应激所引起的习惯化效应。     

游泳训练对新生大鼠学习记忆和海马神经发生的影响

目的 观察游泳训练对新生大鼠学习记忆和海马神经发生的影响。方法雄性7日龄新生SD大鼠随机分为对照和游泳训练组。训练组大鼠出生后第11天进行无负重游泳训练3周。Morris水迷宫法检测学习记忆能力,BrdU⁺/NeuN⁺免疫荧光双标染色分析海马神经发生,Western blot检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达。结果对照和游泳训练组大鼠随着训练天数增加,寻找平台潜伏期均明显缩短(均P<0.05);定位航行实验的第二、三和四天,游泳训练组大鼠寻找平台潜伏期较对照组均显著减小(均P<0.05)。游泳训练组大鼠穿越目标次数何时间明显增加(均P<0.05)。与对照相比,游泳训练组大鼠海马齿状回NeuN＋/BrdU＋阳性数量显著增加(P<0.05),BDNF表达显著增加(P<0.05)。结论游泳训练提高了新生大鼠的学习记忆能力,其机制可能与游泳训练显著上调大鼠海马BDNF的表达促进海马神经发生有关。     

电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马突触可塑性蛋白的影响

目的：探讨电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马突触性蛋白表达的影响,明确其治疗机制。方法：48只SD大鼠随机分为4组：对照组、模型组、电针组、氟西汀组,除对照组外,各组均采用慢性不可预见性温和应激（CUMS）建立抑郁动物模型。电针组于每日应激前选取百会、印堂两穴进行电针治疗,每天1次;氟西汀组于造模前通过灌胃给予阳性药氟西汀水溶液,剂量为10 mg/kg,持续21 d。于应激造模后7、14、21 d分别采用旷场测试和强迫游泳实验评价大鼠的抑郁样行为,Golgi染色观察海马突触结构的病理特点,Western blot检测海马突触可塑性相关蛋白SYN、PSD-95、CREB、BDNF的表达。结果：与对照组比,模型组大鼠7 d时强迫游泳不动时间显著增加（P＜0.05）,14 d时旷场自主活动评分显著下降（P＜0.05）,抑郁样行为明显,海马突触结构损伤,突触可塑性蛋白SYN、PSD-95、CREB、BDNF表达均显著下调（P＜0.01）;经电针治疗后,大鼠抑郁样行为得以明显改善（P＜0.01）,树突棘形态及数量趋于正常,SYN、PSD-95、CREB、BDNF表达均明显回升（P＜0.01）。结论：电针能显著改善慢性应激抑郁模型大鼠的抑郁样行为,其机制与改善突触结构,上调突触可塑性蛋白表达有关。     

不同针刺方法对慢性应激抑郁大鼠下丘脑CRH基因表达及血清ACTH、CORT的影响

目的对比观察手针与电针对慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA表达及血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)影响的差异,探讨手针与电针干预治疗抑郁症的机制。方法将SD大鼠随机分为4组:空白组、模型组、手针组、电针组,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测下丘脑CRH mRNA含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清ACTH、CORT含量。结果与空白组相比,模型组大鼠下丘脑CRH mRNA的含量显著升高(P<0.01),血清CORT和ACTH含量显著升高(P<0.01)。与模型组相比,手针组与电针组大鼠下丘脑CRH mRNA的含量均明显降低(P<0.05、P<0.01);手针组与电针组大鼠血清CORT表达有所下降,但无统计学差异(P>0.05);手针组与电针组大鼠血清ACTH表达显著降低(P<0.05、P<0.01)。结论慢性应激抑郁模型大鼠表现出HPA轴功能亢进,手针和电针均可以下调HPA轴功能,拮抗HPA轴功能亢进可能是手针和电针发挥抗抑郁治疗作用的途径之一。     

缬草对慢性应激导致的抑郁大鼠大脑海马5-羟色胺水平、细胞增殖及神经元数量的影响

目的：探讨缬草对慢性应激导致的抑郁大鼠大脑海马5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）水平、细胞增殖及神经元数量的影响。 方法：70只大鼠被分成正常对照组、未用药模型组、阴性对照模型组、阳性对照模型组和低、中、高剂量缬草治疗组，每组10只。除正常对照组外，给予其余6组大鼠4周慢性应激建立抑郁症模型。除未用药模型组大鼠正常饲养外．其余6组大鼠在模型建立后分别灌服5％羧甲基纤维素钠、氟西汀以及低、中、高剂量缬草．灌药周期均为3周。灌药结束后，体内注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷（bromodeoxyuridine，BrdU）标记海马增殖细胞．应用高效液相色谱法检测海马组织5-羟色胺水平，采用形态计量学方法计数海马神经元数量。 结果：与正常对照组比较，低、中剂量缬草治疗组的海马5HT含量增加，并恢复至正常水平。灌服低剂量缬草3周后．抑郁大鼠海马BrdU阳性细胞数目和神经元数量恢复性增加至正常对照组大鼠的水平。 结论：小剂量缬草能够促进抑郁大鼠大脑海马5HT水平及细胞增殖数量恢复至正常状况，同时具有保护海马受损伤神经元的作用。     

氟西汀对慢性温和应激抑郁模型大鼠海马神经干细胞的影响

目的观察氟西汀对慢性温和应激抑郁模型大鼠海马神经干细胞的作用。方法 24只雄性大鼠分为对照组、模型组和氟西汀组,每组8只。采用慢性中等应激制作大鼠抑郁模型,敞箱实验法测定大鼠行为学变化,免疫组织化学技术检测巢蛋白(Nestin)表达以评价大鼠神经干细胞增殖情况。结果模型组大鼠的行为学得分较对照组明显降低,海马齿状回Nestin表达减少,与模型组比较,氟西汀治疗后大鼠的行为学得分升高,Nestin表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论氟西汀能翻转慢性应激对大鼠行为的损害,这可能与其促进神经干细胞增殖有关。     

东莨菪碱对大鼠强迫游泳行为的影响及其作用靶点

目的 阐明东莨菪碱发挥抗抑郁作用的可能脑区和靶点。方法 明确东莨菪碱的抗抑郁样作用：将正常Sprague Dawley （SD）大鼠采用数字表法随机分为东莨菪碱组和0.9%（质量分数）氯化钠注射液对照组,腹腔注射25 μg/kg东莨菪碱或等体积0.9%（质量分数）氯化钠注射液,24 h后进行旷场实验和强迫游泳实验以评价东莨菪碱对大鼠抑郁样行为的影响;明确东莨菪碱发挥抗抑郁效应的脑区：在腹腔注射25 μg/kg东莨菪碱前1 h向大鼠内侧前额叶皮质（medial prefrontal cortex,mPFC）立体定位注射γ-氨基丁酸-A （γ-aminobutyric acid-A,GABA-A）受体激动剂蝇蕈醇（Muscimol）1.25 μg,24 h后观察东莨菪碱的行为学效应是否被阻断;探索东莨菪碱抗抑郁的作用靶点：通过微量给药系统分批次分别向大鼠侧脑室注射毒蕈碱型乙酰胆碱受体2（muscarinic acetylcholine receptor 2,M₂）选择性拮抗剂（methoctramine,MCT）0.5、1和2 μg,对照组均给予2 μL 0.9%（质量分数）氯化钠注射液,24 h后利用旷场实验和强迫游泳测试评价大鼠行为学变化。结果 腹腔注射东莨菪碱24 h后,大鼠强迫游泳不动时间低于对照组（P<0.05）,旷场总路程差异无统计学意义（P>0.05）;向mPFC注射Muscimol可明显增加东莨菪碱组大鼠的不动时间（P<0.01）,旷场总路程差异无统计学意义（P>0.05）;与侧脑室注射0.9%（质量分数）氯化钠注射液相比,0.5 μg MCT不影响大鼠在强迫游泳实验中不动时间（P>0.05）,1 μg MCT可明显降低影响大鼠不动时间（P<0.01）,而2 μg MCT则可明显增加影响大鼠不动时间（P<0.05）。结论 东莨菪碱可能通过阻断mPFC的M₂受体发挥抗抑郁作用。     

慢性强迫游泳抑郁模型大鼠类P300电位的变化

目的探讨大鼠慢性强迫游泳抑郁模型类P300电位改变及其与行为变化的关系。方法将40只SD雄性大鼠均分为4组:强迫游泳7d模型组(S1组)、强迫游泳14d模型组(S2组)和2组对照组(C1组、C2组)。观察大鼠体质量、旷场实验和液体消耗实验等行为学指标。在麻醉状态下采用听觉oddball模式刺激诱发大鼠类P300电位,测定N1、N2、P3潜伏期和P3波幅。对大鼠类P300电位变化和行为学检测指标进行相关性分析。结果模型组大鼠与对照组相比体质量增长率降低(F=253.60,P<0.01),蔗糖水摄入率下降(F=128.38,P<0.01),旷场实验中水平得分(F=124.73,P<0.01)和垂直得分(F=41.09,P<0.01)减少,修饰次数(F=15.04,P<0.01)增加。与对照组比较,S1组和S2组P3潜伏期显著延长[S1组:(469.7±30.69)ms,S2组:(498.9±25.54)ms,C1组:(389.6±49.43)ms,C2组:(378.5±39.77)ms;F=71.534,P<0.01],P3波幅明显降低[S1组:(19.60±10.62)μV,S2组:(16.00±11.98)μ...     

柴胡皂苷对抑郁模型大鼠行为及海马Caspase-3、Caspase-9蛋白表达的影响

目的探讨柴胡皂苷对抑郁模型大鼠行为学及海马Caspase-3、Caspase-9蛋白表达的影响。方法 60只2~3月龄SD大鼠随机分为对照组、模型组、氟西汀组和柴胡皂苷组,每组15只。采用慢性轻度不可预见性应激刺激(CUMS)结合孤养方式复制大鼠抑郁模型。从造模第2天开始,氟西汀组(1.2 mg/kg)及柴胡皂苷组(25 mg/kg)进行灌胃给药,每日1次。于实验21 d,分别进行敞箱实验及糖水消耗量实验检测大鼠行为学改变;采用免疫组化法及RT-PCR法检测大鼠海马区Caspase-3、Caspase-9蛋白及基因的表达水平。结果造模21 d后,与对照组相比,模型组大鼠行为学指标明显降低(P0.05);与模型组比较,氟西汀组与柴胡皂苷组大鼠行为学指标明显改善(P0.05);免疫组化及PCR检测结果显示,海马区Caspase-3、Caspase-9蛋白及基因表达,模型组与对照组比较表达明显增强(P0.05),氟西汀组及柴胡皂苷组与模型组比较表达明显降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论柴胡皂苷可有效改善大鼠抑郁样行为,其机制可能与抑制海马区Caspase-3、Caspase-9蛋白表达有关。     

慢性应激老年抑郁大鼠海马CA3区c—fos和caspase-3蛋白的表达

目的探讨慢性应激老年抑郁大鼠海马CA3区C—fos和caspase-3蛋白的表达，以探讨老年抑郁症的发病机制。方法将20只Wistar老年大鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。实验组大鼠每天强迫游泳20min，并每周给予电刺激和强光照射各1次，经过21天应激制作老年大鼠慢性应激抑郁模型，对照组正常喂养，不给予上述处理。采用特异性抗体标记的免疫组织化学方法，检测实验21天后老年大鼠海马CA3区C—fos和caspase-3蛋白的表达情况，并观察大鼠开场行为和排便情况。结果实验组老年大鼠中央格停留时间延长，水平穿越格数减少，修饰行为减少，排便次数增多，C—fos平均灰度值：实验组166．56±9．73VS对照组149．62±12．91（P=0．000），阳性细胞数：实验组41．12±4．72VS对照组31．12±3．25（P=0．000），caspase-3平均灰度值：实验组202．59±2．64VS对照组179．74±8．24（P=0．000），阳性细胞数：实验组24．73±2．57VS对照组18．86±1．13（P=0．000）。结论慢性应激老年抑郁大鼠海马CA3区C—fos和caspase-3蛋白表达增加，行为表现异常，可能与慢性应激所致细胞凋亡增强、海马区脑组织损伤有关。