基于微透析采样技术分析羟基喜树碱磁性脂质体在大鼠体内的药代动力学

目的:探究羟基喜树碱(HCPT)磁性脂质体在大鼠体内药代动力学特征,为该药物的制剂开发提供参考。方法:建立微透析样品中开环HCPT(C-HCPT),闭环HCPT(L-HCPT)的HPLC,SD大鼠尾静脉注射HCPT磁性脂质体和HCPT注射液,腹腔注射HCPT注射液(剂量以HCPT计均为10 mg·kg-1),于给药后采用微透析技术定时采样。微透析样品经各样本自身体内回收率校正,利用DAS 2.1.1软件计算相关药物动力学参数。结果:HCPT磁性脂质体尾静脉给药组,HCPT注射液尾静脉给药组和HCPT注射液腹腔给药组的药峰浓度(Cmax)分别为(2.789±0.158),(4.537±0.092),(0.340±0.066)mg·L-1,达峰时间(tmax)分别为(24±0),(6±0.127),(24±0.127)min,平均滞留时间(MRT0-∞)分别为(72.255±4.668),(20.325±4.288),(112.630±29.969)min,药时曲线下面积(AUC0-∞)分别为(216.870±3.271),(150.668±7.306),(34.883±10.245)mg·L-1·min;与HCPT注射液尾静脉给药组相比,HCPT磁性脂质体尾静脉给药组的tmax,MRT0-∞较大,差异有统计学意义;与HCPT注射液腹腔给药组相比,HCPT磁性脂质体尾静脉给药组的Cmax,AUC0-∞较大,差异有统计学意义。结论:HCPT磁性脂质体尾静脉注射能显著提高药物血药浓度、生物利用度及其在体内的滞留时间;且脂质体可保护HCPT活性必需基团内酯环不被破坏,从而保证HCPT的抗肿瘤活性。     

肺靶向羟基喜树碱脂质体的制备及体外释药性质研究

 目的研究肺靶向羟基喜树碱阳离子脂质体的制备方法并考察其体外释药性质。方法采用薄膜-冻融法制备羟基喜树碱脂质体;用D-甘露糖修饰脂质体并添加适量十八胺调节脂质体表面电荷;用葡聚糖凝胶柱-高效液相色谱法测定包封率;用正交实验优选处方;用透析法考察药物体外释放性质。结果制得的脂质体平均粒径为2.286μm,表面电荷为+21.5 mV,包封率大于65%,稳定性好。药物体外释药符合Higuchi方程。结论采用薄膜-冻融法,用D-甘露糖修饰并添加十八胺可制得具有较高包封率及稳定性的羟基喜树碱脂质体,有助于提高羟基喜树碱的肺靶向性。     

羟基喜树碱微透析回收率的体外研究

目的:建立羟基喜树碱微透析探针回收率的测定方法,考察影响回收率的因素,为体内微透析研究提供依据。方法:采用浓度差法(增量法、减量法)测定羟基喜树碱探针回收率,考察流速、浓度、温度对回收率的影响,并考察回收率的稳定性。结果:增量法和减量法测得的回收率一致;回收率与探针周围媒介浓度无关,稳定性良好,随温度升高而升高。结论:微透析技术可用于羟基喜树碱药动学研究,反透析法可用于羟基喜树碱体内微透析回收率的体内测定。     

羟基喜树碱半固体脂质纳米粒制备工艺研究

目的 制备羟基喜树碱的半固体脂质纳米粒(HCPT-SSLN).方法在单因素考察的基础上,通过正交设计优选处方和制备工艺,并对优化条件下制备的HCPT-SSLN纳米溶液进行质量评价.结果制备的HCPT-SSLN平均粒径为130.5 nm,多分散系数为0.18,载药量为2.51%,包封率为79.19%,ξ电位为-33.1mV;纳米溶液4℃下放置6个月,纳米粒外观、粒径及包封率无明显变化.结论所制备的HCPT-SSLN包封率和载药量较高,粒径分布均匀,稳定性良好,为羟基喜树碱的临床应用提供了更广阔的前景.     

载10-羟基喜树碱超声微泡的制备、表征及其体外超声成像特性

目的制备载10-羟基喜树碱缓释超声微泡,并考察其体外释药特性和体外超声成像特性。方法以高分子多聚物聚乳酸为材料,以W/O/W型乳化溶剂挥发法制备载羟基喜树碱超声微泡。结果扫描电子显微镜观察载10-羟基喜树碱超声微泡具有明显的球状结构;粒度分布在0.45⁵.12μm之间;采用荧光分光光度法测定其载药量和包封率分别为(4.10±1.29)%和(67.44±2.55)%;体外释放可持续48 h,累积释放率达到60%;此外,体外超声成像显示微泡具有良好的反射超声信号能力。结论载羟基喜树碱超声微泡可以作为造影剂进行药代动力学的研究。     

羟基喜树碱注射液与注射用羟基喜树碱含量与有关物质的比较

 目的考查国内不同企业羟基喜树碱制剂的产品质量。方法用高效液相色谱UV检测法和蒸发光散射检测法(ELSD)对来源于国内5个企业7个批次的羟基喜树碱制剂进行含量和有关物质的比较。结果羟基喜树碱注射液B厂和C厂的产品中杂质喜树碱的含量大于3％,注射用羟基喜树碱中仅D厂，杂质喜树碱含量大于3%;其它各厂的产品中，杂质喜树碱含量均小于1％。结论羟基喜树碱制剂质量的好坏、稳定与否与其制剂是粉针剂还是注射液没有直接的必然的联系；不管是哪一种制剂，只要生产企业能够提高质量意识，严把质量关，都能够得到高质量的产品。     

肝癌细胞膜嵌合的TPP修饰载羟基喜树碱脂质体的制备及抗肿瘤作用

目的 制备肝癌细胞膜嵌合的TPP修饰HCPT脂质体（HCPT@T/HM-L）,将HCPT高效递送到肝癌细胞线粒体,充分发挥药物在靶细胞器的药效作用。方法 采用薄膜水化法制备HCPT@T/HM-L,以挤压法将肝癌细胞膜嵌合在脂质体膜上,测定粒径、ζ电位、电镜进行表征;然后检测体外释放、溶血;以香豆素6为荧光探针,探索其胞内转运、线粒体靶向效果;最后从肿瘤细胞和荷瘤小鼠模型上,系统性评价肝癌细胞膜嵌合的HCPT@T/HM-L抗肿瘤效果。结果 HCPT@T/HM-L在电镜下呈现为规则圆球、具有“核-壳”状结构,粒径大约为（162.7±5.8）nm,ζ电位为（12.4±1.8）m V;HCPT@T/HML能促进载药系统的细胞摄取和靶向进入线粒体;细胞药效结果显示,HCPT@T/HM-L能很大程度上抑制肝癌细胞的生长,降低线粒体膜电位、升高细胞内ROS和Caspase-3水平,降低抗凋亡蛋白Bcl-2,提高促凋亡蛋白Bax表达,从而增强药物促进肝癌细胞的大量凋亡;荷瘤小鼠结果显示,HCPT@T/HM-L能明显抑制皮下瘤的生长,促使肿瘤细胞线粒体出现严重的功能障碍,从而促进肿瘤细胞的大量凋亡;细胞...     

羟基喜树碱PEG-PHDCA纳米粒的制备及表征

目的制备羟基喜树碱聚乙二醇化聚十六烷基氰基丙烯酸酯(PEG-PHDCA)纳米粒,并进行表征。方法酯化、缩聚法制备PEG-PHDCA,凝胶渗透色谱法(GPC)测定新合成材料的相对分子质量,纳米沉淀法制备纳米粒,测定其粒径、载药量、包封率,透析法考察其体外释药特性。结果所得纳米粒相对分子质量为2 300~2 700,能较好地包埋喜树碱,平均粒径为(86.5±7.2)nm,Zeta电位为(-16.34±2.4)m V,包封率和载药量分别为(90.23±1.13)%和(3.17±0.15)%。载药体系能实现药物良好的体外缓释。结论 PEG-PHDCA适合作为纳米制剂的载体。羟基喜树碱PEG-PHDCA纳米粒能提高药物的水溶性,并可实现其体外缓释。     

天然喜树碱和10-羟基喜树碱柱层析分离工艺研究

目的:利用硅胶柱层的方法分离喜树碱和10-羟基喜树碱.方法:采用常规的硅胶柱层析梯度脱洗的方法,通过比较不同种类硅胶、不同洗脱液、不同硅胶量与上样品量之比,确定最佳的分离效果.结果:以甲醇:三氯甲烷=0.3:100为喜树碱的最佳洗脱液,甲醇:三氯甲烷=1.3:100为10-羟基喜树碱的最佳洗脱液,硅脱容量40g加样量1.0g为最佳的层析柱分离条件,以500～800目的柱层析硅胶的分离效果最好,可以得到纯度高的喜树碱和10-羟基喜树碱,适用于工业化大生产.结论:利用硅胶柱层析的方法,以极性渐增的一系列混合溶剂作为梯度洗脱剂,可以很好的分离喜树碱和10-羟基喜树碱.     

HPLC测定羟基喜树碱及其注射液的含量

 目的：采用高效液相色谱法测定羟基喜树碱及其注射液的含量。方法：用YWG-C₁₈色谱柱，甲醇-水（60∶40）为流动相，以倍他米松为内标，检测波长为246nm。结果：以峰面积计算，羟基喜树碱在1．8μg·ml^－1～9．0μg·ml^－1浓度范围内呈良好线性（r＝0．9998），平均回收率为100．7％，RSD为1．4％。结论：本法专属性强，操作方便，结果准确。     

大鼠静脉注射羟喜树碱脂质体的胆汁排泄研究

 目的研究羟喜树碱不同制剂经大鼠静脉注射给药后的胆汁排泄特征。方法大鼠分别静脉给予羟喜树碱脂质体和羟喜树碱注射液,24 h内收集胆汁并采用HPLC进行测定。结果大鼠静脉注射羟喜树碱脂质体和羟喜树碱注射液24 h累积胆汁排泄量基本一致,羟喜树碱脂质体组平均排泄11%,羟喜树碱注射液组平均排泄13%。结论脂质体不改变羟喜树碱的胆汁排泄途径。     

采用溶剂分散和挤压器联动装置制备脂质体的方法研究

 目的考察溶剂分散和挤压器联动装置制备脂质体药物制剂的工艺条件、可行性和适用范围。方法联动装置应用了溶剂分散法制备脂质体的原理,通过高压泵将溶于有机相的磷脂和脂溶性药物与水溶液在溶液混合器中高压快速混合使之形成多相多层脂质体,在高压下将脂质体连续通过挤压器,一步形成最终产品。结果新装置将高压泵、溶液混合器、脂质体粒径整合控制设备和高压超滤透析柱组成联动线,使得从投料到获得脂质体成品的整个过程一步完成,减少了不必要的中间过程。应用该装置制备的脂质体的质量可控性好,非常适合脂溶性药物脂质体制剂的大规模制备。同时用该装置制备的脂质体可以形成有效的pH梯度,适合于弱碱性药物的载药。结论实验证明,这种联动装置可应用于脂质体的工业化生产,其制备工艺简便、可控性好、实用性强。     

脂质体冻干因素研究概况

对制备冻干脂质体过程中的影响因素方面研究进行了文献整理和分析。以冻干脂质体为主题词,在中国学术文献总库(CNKI)中收集冻干脂质体制备方面的文献,根据其相关性引用了35篇文献,对冻干脂质体制备过程中的影响因素进行了归纳和总结。结果显示冻干脂质体制备过程中冻干保护剂及用量、预冻方式及速度、冻干真空度、干燥时间、水化介质等因素影响冻干脂质体质量。综上制备冻干脂质体过程中必须考虑好各种因素才能制备出包封率高、稳定性好、粒径变化小的药物脂质体。应用冻干技术可防止药物氧化、延长药物脂质体保质期,为脂质体药物的推广应用奠定了基础。     

羟基喜树碱微粉的制备及抗肿瘤活性

 目的 制备羟基喜树碱微粉（nHCPT）并考察其毒性和抗肿瘤活性。方法 本实验采用超临界流体抗溶剂法制备nHCPT,扫描电子显微镜（SEM）观察形态、原子力显微镜（AFM）检测其粒径。红外光谱（FTIR）和高效液相色谱确认nHCPT化学性质。气相色谱法测定nHCPT中残留DMSO含量。以HCPT和拓朴替原（TPT）为阳性对照,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测nHCPT对PC-3、MCF-7和HCT-8细胞的生长抑制作用。显微操作系统观察HCT-8细胞对于nHCPT吸收。采用S180实体瘤模型,考察了nHCPT的抗肿瘤活性和对器官的毒性。结果 超临界处理后的nHCPT以无定型形态存在,粒径为（150±40）nm,形态为不规则球状结构,化学性质没有改变。nHCPT中残留DMSO含量符合ICH要求。样品在4 ℃、避光干燥条件下储存一个月后性质稳定。nHCPT对3种细胞株的抑制率略优于HCPT和TPT, nHCPT的细胞膜渗透能力较HCPT明显增强。nHCPT的体内抑瘤活性较HCPT明显提高,与TPT抑瘤活性相近,且对器官毒副作用明显低于TPT和HCPT。结论 nHCPT具有独特的优越性,可以作为进一步新制剂开发的原料药。     

加替沙星阳离子脂质体的制备及性质测定

 目的制备加替沙星阳离子脂质体并测定其粒径、Zeta电位、包封率。方法采用薄膜分散法制备加替沙星阳离子脂质体,正交实验筛选处方,葡聚糖凝胶法测定其包封率,COULTERLS粒径分析仪测定粒径,COULTER DELSA 440SXξ电位仪测定Zeta电位,采用改良的Fraze扩散池和离体角膜测定加替沙星阳离子脂质体的体外释放,并比较普通滴眼剂、中性脂质体和阳离子脂质体角膜透过系数。结果采用薄膜分散法制备的加替沙星阳离子脂质体外观良好,包封率为69.5%,平均粒径为163nm,Zeta电位为44.7mV,阳离子脂质体的角膜透过系数分别是普通滴眼剂和中性脂质体的5.44和1.19倍。结论自制的加替沙星阳离子脂质体包封率较高,粒径较小,粒度分布较窄,脂质体囊泡荷正电,离体角膜透过性良好,较可能成为一种理想的眼用制剂。     

莪术油复合磷脂脂质体的制备工艺

目的:采用复合磷脂脂质体技术制备莪术油脂质体并研究其最佳制备工艺及处方。方法:采用高效液相色谱法和分光光度法分别测定复合磷脂脂质体中莪术醇和莪术油的含量。采用乙醇注入法制备莪术油复合磷脂脂质体,并以脂质体中药物含量为考察指标,采用正交试验优选了莪术油复合磷脂脂质体的最优处方与工艺。结果:以优化的工艺和处方制备的莪术油复合磷脂脂质体,包封率稳定,药物含量高。结论:该脂质体制备方法准确可靠,工艺可行,质量稳定可控。     

自组装法制备新型结构磁性脂质体

 目的 设计新型结构磁性脂质体,并通过自组装法制备。方法 采用共沉淀法制备Fe₃O₄磁性纳米粒子,采用薄膜分散法制备多柔比星脂质体,测定Fe₃O₄粒子和多柔比星脂质体的Zeta电位,根据电荷性质选择适当的聚电解质,依次将聚电解质和Fe₃O₄粒子组装到多柔比星脂质体表面,得到磁性脂质体,并采用透射电镜（TEM）观察其形貌。 结果 Fe₃O₄粒子和多柔比星脂质体的Zeta电位分别为-22.0、-22.6 mV,自组装过程中选择阳离子聚电解质PDADMAC作为中间层,磁性脂质体的TEM照片显示,其具有较规则的球形轮廓,表面均匀吸附有大量的Fe₃O₄磁性粒子使得脂质体表面略显粗糙,证实了新型结构磁性脂质体的成功构建。 结论 采用静电自组装法可以制备新型结构磁性脂质体。
     

丹参素脂质体的制备研究

目的:研究丹参素脂质体的处方、制备工艺.方法:以脂质体的包封率为指标评价,采用正交设计对制备工艺进行优化,用反相蒸发超声法制得丹参素脂质体.结果:成功制得丹参素脂质体,其平均粒径为75.4 nm,丹参素脂质体的平均包封率为55.23%.结论:丹参素脂质体制备方法简单可行.     

pH敏感前体阳离子脂质体的制备及瘤内分布研究

 目的 以羟喜树碱作为模型药物研究pH敏感前体阳离子脂质体用于包载抗癌药物的制备工艺并考察其pH敏感性及荷瘤鼠体内药动学特性。方法 采用薄膜分散法制备羟喜树碱阳离子脂质体;用羧甲基壳聚糖物理修饰阳离子脂质体;分离游离药物后测定包封率;用激光粒度分析仪测定Zeta电位、粒径大小;采用鸡红细胞溶血实验分析其pH敏感性并考察不同时刻药物在荷瘤小鼠血浆及瘤内浓度。结果 平均包封率为(78.5±0.9)％(n=3);Zeta电位为-31.3 mV,平均粒径为96 nm。溶血实验显示pH敏感前体阳离子脂质体与红细胞膜融合作用有明显的pH值敏感性,荷瘤小鼠体内实验显示pH敏感前体阳离子脂质体瘤内分布较高。结论 本方法制备的pH敏感前体阳离子脂质体作用机制独特,瘤内浓度高,有望成为靶向肿瘤药物的传递系统。