黄连解毒汤化学成分及其神经细胞保护作用研究

目的 研究黄连解毒汤的化学成分,并探索该复方及其代表性成分的神经细胞保护作用.方法 运用大孔树脂、硅胶、C18反相硅胶、Sephadex LH-20制备液相等色谱技术对黄连解毒汤进行化学成分的分离;应用UV、MS、NMR等技术对所得化合物的结构进行鉴定;并运用体外神经细胞保护的药理模型,对黄连解毒汤和其中京尼平苷、小檗碱、黄芩苷进行了神经保护作用的筛选.结果 从黄连解毒汤中分离鉴定了19个化合物,分别为小檗碱(1),巴马亭(2),黄芩苷(3),黄芩素(4),汉黄芩素(5),千层纸素A(6),京尼平苷(7),鸡屎藤次苷甲酯(8),京尼平-1-O-β-D龙胆双糖苷(9),6'-O-对香豆酰京尼平龙胆双糖苷(10),黄柏内酯(11),蔗糖(12),D-甘露醇(13),粘毛黄芩素Ⅲ(14),栀子苷(15),羟异栀子苷(16),Jasminosides B(17),藏红花酸(18),5-羟基吡啶-2-甲酸甲酯(19);研究了黄连解毒汤和其中主成分京尼平苷、小檗碱、黄芩苷对PC12细胞和原代神经元细胞的损伤保护作用.结论 化合物15 ～ 19为首次从该复方中分离得到,5-羟基吡啶-2-甲酸甲酯在组成该复方的四种单味药中均未见报道;神经细胞保护实验结果表明黄连解毒汤和其中京尼平苷、小檗碱、黄芩苷单体均具有神经细胞保护作用趋势,但没有统计学显著性.     

黄连解毒汤有效部位对神经细胞内钙超载的作用及机制分析

目的:研究黄连解毒汤有效部位(HLJDTAF)对神经细胞内钙超载的影响及相关机制。方法:低糖低氧损伤胎鼠皮层神经细胞模拟脑缺血,双波长荧光分光光度法测定神经细胞内钙含量,观察HLJDTAF对细胞内钙超载的抑制作用。并分别采用谷氨酸(Glu),KCl,A23187,乙酰甲胆碱(MCh)和咖啡因(CAF)处理神经细胞,以分析药物的作用环节。结果:HLJD-TAF对低糖低氧处理所致神经细胞钙超载有明显的抑制作用(P0.05);对200μmol.L-1谷氨酸,50 mmol.L-1剂量的K+,0.05μmol.L-1钙离子载体A23187处理细胞引起神经细胞内钙超载有明显的抑制作用(P0.05,P0.01);正常外钙情况下和零外钙情况下,HLJDTAF对5 mmol.L-1CAF和Mch诱导神经细胞内钙超载有明显的抑制作用(P0.01,P0.05)。结论:HLJDTAF可显著抑制神经细胞拟缺血损伤后的钙超载,其机制可能是通过多途径抑制缺血缺氧后神经细胞内钙超载,从而拮抗脑缺血损伤。     

黄连解毒汤抗脑缺血作用研究进展

黄连解毒汤由黄连、黄芩、黄柏和栀子组成,是清热解毒的代表方。在临床及动物实验中对缺血性脑损伤具有良好的治疗效果,能够明显延长模型动物的生存时间,改善能量代谢和血流状况,抑制脂质过氧化及炎症反应,还能改善脑缺血所致的认知功能障碍。现将近几年的相关研究进行总结,分析黄连解毒汤的作用机制,以期为临床应用和药理研究提供指导。     

黄连解毒汤对高脂血症小鼠肝脏保护作用的观察

目的 观察黄连解毒汤对高脂饮食导致的载脂蛋白E（apolipoprotein E,ApoE）基因敲除（ApoE－/－）小鼠肝脏损伤的保护作用。方法 野生型小鼠分为野生普食组、野生高脂组,ApoE－/－小鼠分为ApoE－/－普食组、ApoE－/－高脂组、ApoE－/－高脂加中药组,每组5只,分别给予普食和高脂饮食4周。ApoE－/－高脂加中药组同时给予黄连解毒汤5 g/（kg·d）灌胃。检测小鼠血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平,HE染色观察肝脏病理组织变化,流式细胞仪检测肝脏巨噬细胞及其亚型比例和巨噬细胞表面受体CD206、CD36表达水平。结果 ApoE－/－高脂组小鼠肝脏组织呈典型单纯性脂肪肝病理变化,TC、TG、LDL-C升高,巨噬细胞比例增多,巨噬细胞表面受体CD206表达水平降低,与ApoE－/－普食组比较,差异均有统计学意义（P<0.01, P<0.05）;CD206+替代活化型（alternatively activated macrophages,M2型）巨噬细胞比例较野生普食组显著减少（P<0.05）;CD36表达水平无明显变化。黄连解毒汤干预4周后,血脂无明显改善,但肝脏CD206+M2型巨噬细胞比例较ApoE－/－高脂组显著提高（P<0.05）,肝脏脂肪肝病理变化显著减轻。结论 黄连解毒汤的肝脏保护功能可能与M2型巨噬细胞免疫调节、修复损伤组织有关,其免疫调节作用和肝脏保护作用独立于降脂作用。     

黄连解毒汤及配伍成分的降脂及抗动脉粥样硬化作用

目的:对黄连解毒汤在降脂及抗动脉粥样硬化的作用进行综合考查,探讨黄连解毒汤及其配伍成分在降脂及抗动脉粥样硬化研究上应该进一步深化的课题。方法:对近10年来的研究状况进行总体回顾,结合最新研究成果,系统阐述黄连解毒汤在降脂及抗动脉粥样硬化方面的直接和潜在的优势及作用机制。结果:临床和实验研究方面的数据表明,黄连解毒汤不仅能降低肝细胞中胆固醇的浓度,而且能治疗引起冠状动脉粥样硬化的危险因素如高血压等疾病。方中各组成成分也具有直接或间接的降脂和抗动脉粥样硬化的作用。结论:黄连解毒汤具良好的降脂和抗动脉粥样硬化的研究前景,需要用现代科学的研究手段进行深入研究,以期扩大其临床应用范围。     

黄连解毒汤与三黄泻心汤对大鼠胃粘膜保护作用的产生机理

本文运用经牛磺胆酸盐处理后，酸性试液留置于胃内而引起大鼠胃粘膜损害模型，探讨了黄连解毒汤与三黄泻心汤的胃粘膜保护作用的产生机理，这两种药剂抑制胃粘膜损害，抑制因酸性液体留置于胃而经起氢离子及钠离子流量的增大，且均呈量效相关，三黄泻心汤可通过胃粘膜，使^14C标志的由花生四烯酸合成的各种前列腺素总量显著增加，以上结果显示，两种药剂通过强化胃粘膜屏障发挥对胃粘膜保护作用，并推测三黄泻心汤的这种作用是由于胃粘膜的前列腺素合成功能增强。     

黄连解毒汤对荷瘤小鼠免疫调节作用的实验研究

目的：探讨黄连解毒汤对荷瘤小鼠免疫调节作用。方法：选择H22肝癌小鼠模型，通过检测免疫指标，研究黄连解毒汤对正常小鼠和模型小鼠免疫反应的影响。结果：实验组小鼠的自然杀伤细胞（NK）杀伤活性及T细胞分泌白细胞介素-4（IL-4）的能力均有显著增高（P〈0．01，P〈0．001）。结论：黄连解毒汤能增强荷瘤小鼠体内NK细胞的杀伤功能及体液免疫功能。     

黄连解毒汤全方和不同极性部位的活性筛选

目的:研究比较黄连解毒汤全方水提液体系、水提液体系经有机溶剂梯度萃取后不同极性部位中指标性成分的变化,通过药效学筛选,探讨黄连解毒汤改善脑缺血、益智作用的有效部位及其化学组成,为该方的精制分离提供实验依据。方法:黄连解毒汤全方经水煎煮得水提液(部位Ⅰ),水提液浓缩后以石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇梯度萃取,得到石油醚萃取物(部位Ⅱ)、乙酸乙酯萃取物(部位Ⅲ)、水饱和正丁醇萃取物(部位Ⅳ)、残留水层上清液(部位Ⅴ)、残留水层沉淀(部位Ⅵ),以栀子苷、黄芩苷、巴马汀、小檗碱、黄芩素和汉黄芩素6种成分为对照,应用RP-HPLC确定各萃取物中6种指标性成分的含量;选用鼠源肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC-12细胞活性跟踪筛选,MTT法测定黄连解毒汤及各萃取部位对低糖DMEM和氯化钴诱导的PC-12细胞缺糖缺氧损伤的影响。结果:部位Ⅴ中各指标性成分含量较高,且6种指标性成分的比例与部位Ⅰ相似;部位Ⅰ,Ⅴ对PC-12细胞的缺糖缺氧损伤保护作用明显。结论:部位Ⅴ为黄连解毒汤改善脑缺血、益智作用的有效部位。     

黄连解毒汤对脓毒症大鼠的心脏保护作用

目的探讨中成药黄连解毒汤对脓毒症大鼠心脏的保护作用。方法50只大鼠随机分为假手术组、模型组、黄连解毒汤组,采用盲肠结扎穿孔方法复制脓毒症模型,假手术组除不对盲肠进行结扎穿孔外,余同模型组;模型组和黄连解毒汤组分别在造模前后给予生理盐水和黄连解毒汤（1.5mL／100g）灌胃。观察黄连解毒汤对大鼠72h生存时间,血清肿瘤坏死因子（TNF—a）、肌酸激酶（CK）及其同工酶（CK—MB）水平,心肌组织形态学等指标的影响。结果黄连解毒汤组能够显著延长脓毒症大鼠的72h生存时间,降低脓毒症大鼠血清中CK、CK—MB及TNF—a水平,减轻心肌组织的损伤,差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论黄连解毒汤有延长脓毒症大鼠的生存时间、减轻炎症因子对的心脏损伤、保护大鼠心脏功能的作用。     

黄连解毒汤的药理研究近况

黄连解毒汤是中医常用方剂之一,最早载于公元八世纪王焘等《外台秘要》一书中所引崔氏方。本方系由黄连、黄芩、黄柏、栀子四味苦寒药所组成。用于一切实热火毒、三焦热盛之症,有较强的清热解毒功效。近年来在药理研究上不断有新的拓展,兹综述介绍: 一、降压作用高血压发病机制与中枢多巴胺调节机制有关,黄连解毒汤对与多巴胺调节机制有关的高血压的改善有效。荒川和男等曾对甲双吡丙酮和加热应激处理造成高血压的大鼠模型     

黄连解毒汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂药效学对比研究

目的对黄连解毒汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂进行药效学比较,为黄连解毒汤配方颗粒汤剂的临床应用提供理论依据。方法从对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、新鲜鸡蛋清致大鼠足跖肿胀和2,4-二硝基苯酚致大鼠发热三个方面的影响,考察黄连解毒汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂药效的差异。结果传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂均能减轻二甲苯致小鼠耳廓肿胀和新鲜蛋清致大鼠足跖肿胀,且两种汤剂等剂量间的抗炎作用无显著性差异(P0.05)。而不同剂量组的传统饮片汤剂和配方颗粒汤剂对2,4-二硝基苯酚致大鼠发热均有不同程度的解热作用,其中,两者的中、高剂量组优于低剂量组(P0.05),且等剂量的配方颗粒组优于传统饮片组(P0.05)。结论黄连解毒汤配方颗粒汤剂药效相似或优于传统饮片汤剂。     

黄连解毒汤对营养性肥胖大鼠的毒性研究

目的探讨各剂量黄连解毒汤不同给药时长对营养性肥胖大鼠的毒性。方法雄性SD大鼠100只,按体质量随机分为正常对照组、模型对照组、黄连解毒汤高、中、低剂量组,每组20只,每3日测量一次体质量及摄食量。除正常组外,每组均采用三重喂养法复制大鼠模型。给药22天与42天后各处理10只动物,计算脂肪指数,检测血清Alb、TP、TBIL、GGT、ALT、ALP、Cre和CYP450含量。结果黄连解毒汤能有效降低营养性肥胖大鼠的体质量及脂肪指数,升高血清ALT、GGT、TBIL,降低血清Alb、TP及CYP450,以上结果具有统计学意义(P0.05或P0.01)并与摄食量减少无明显相关性。结论黄连解毒汤可能对营养性肥胖大鼠产生肝、肾毒性并抑制代谢活性,临床应用时建议综合考虑其对机体的影响。     

正交试验优选黄连解毒汤的机器煎煮工艺

目的: 优选黄连解毒汤的机器煎煮工艺。 方法: 以黄芩苷、小檗碱和浸出物含量的综合评分为指标,通过单因素试验和正交试验考察浸泡时间、煎煮时间、煎煮温度对黄连解毒汤的机器煎煮工艺的影响,并与传统煎煮工艺进行比较。采用HPLC测定指标成分含量,色谱条件为YMC-Pack ODS-A色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相甲醇-0.2%磷酸水溶液（47∶53）,检测波长250 nm。 结果: 黄连解毒汤的最佳机器煎煮工艺为浸泡时间10 min,煎煮温度105℃,煎煮时间30 min,明显优于传统煎煮工艺。 结论: 优化的机器煎煮工艺稳定可靠,评价指标可控,为中药汤剂的机器煎煮工艺制定提供实验依据。     

黄连解毒汤高效液相色谱指纹图谱研究及指标成分的含量测定

目的:建立黄连解毒汤高效液相色谱指纹图谱及指标成分含量测定的方法,用于黄连解毒汤提取液的质量控制.方法:应用高效液相色谱法-DAD检测器,C18色谱柱系统,采用梯度洗脱方法,建立了黄连解毒汤高效液相色谱指纹图谱.并对指标成分的含量测定方法进行了方法学考察.结果:建立了含有18个色谱峰高效液相色谱图,分离度>1.0,测得...     

黄连解毒汤加减治疗痤疮(血热内蕴型)临床观察

[目的]探讨黄连解毒汤加减方治疗中医血热内蕴型痤疮的疗效。[方法]将入选的90例患者随机分为治疗组(70例),对照组(20例)。分别给予黄连解毒汤加减方、金花消痤丸治疗。两组治疗3周后评定疗效。[结果]两组的总疗效、主要症状疗效,经统计学处理,无显著性差异。[结论]黄连解毒汤加减方可有效治疗血热内蕴型痤疮,且无毒副作用。     

黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠血管VEGF的影响

目的 研究黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠血脂指标、腹主动脉VEGF表达的影响.方法 采用STZ腹腔注射联合高糖高脂饲料喂养Wistar大鼠,建立2型糖尿病模型.治疗6周后,检测血脂指标,采用免疫组织化学法测定腹主动脉VEGF（血管内皮生长因子）的表达.结果 黄连解毒汤组与模型组、二甲双胍组比较,腹主动脉VEGF的表达、血脂指标均明显降低（P〈0.01）.结论 黄连解毒汤组可以下调VEGF的表达,并且明显改善血脂紊乱.     

黄连解毒汤对高脂血症大鼠血脂及氧自由基代谢的影响

目的:探讨黄连解毒汤(Huanglian Jiedu Decoction,HJD)对实验性高脂血症大鼠血脂及氧自由基代谢的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,立普妥组(0.2 mg·kg-1),HJD低、高剂量组(6,12 g·kg-1)。除正常对照组外,其他组大鼠喂饲高脂饲料建立高脂血症模型。连续ig 8周后,测定血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triacylglycerol,TAG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high-densitylipoprotein cholesterol,HDL-C)水平,以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,并观察肝组织病理学改变。结果:与模型组比较,HJD各组能明显降低实验大鼠血清TC,TG,LDL-C,MDA含量,显著提高HDL-C含量和SOD,GSH-Px活性,并能减轻肝细胞脂肪变性。结论:HJD能有效调节高脂血症大鼠血脂代谢,提高机体抗氧化能力,改善肝组织病理损害。     

桂枝茯苓汤合黄连解毒汤治疗不稳定型心绞痛

目的:观察桂枝茯苓汤合黄连解毒汤对不稳定型心绞痛(unstable angina,UA)患者的临床疗效。方法:UA患者72例,随机分为治疗组36例和对照组36例。两组均给予常规治疗,治疗组加用桂枝茯苓汤合黄连解毒汤口服,共3周。观察两组治疗前后临床症状、24 h动态心电图、血脂及血清高敏C-反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)变化。结果:治疗后两组各指标较治疗前均明显改善(P<0.05),治疗组能进一步降低心绞痛发作频率、心肌缺血次数、缺血持续最长时间、心肌缺血总时间及hs-CRP水平(P<0.05);升高高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)(P<0.05)。结论:桂枝茯苓汤合黄连解毒汤对UA有确切疗效。