视网膜节细胞与视交叉上核AVP神经元联系的研究Ⅱ.假狂犬病毒顺行追踪与免疫荧光双重标记

为进一步揭示视网膜节细胞与视交叉上校精氨酸血管加压素神经元间有无直接的联系，本文将假狂犬病毒注入大鼠眼球内通过顺行追踪结合免疫荧光双重标记法观察到：（1）视交叉上核神经元被病毒感染的时间始于病毒注入后56h，并随存活时间的延长而增多；（2）呈绿色荧光的病毒感染神经元见于双侧视交叉上核，注射对侧优于同侧，主要位于视交叉上核的腹外侧部和嘴侧份，个别散在于二者之外;（3）视交叉上核内个别病毒感染的神经元可同时呈精氨酸血管加压素的红色荧光，此类双标神经元系病毒由视网膜节细胞顺行运输并跨突触传给视交叉上核的精氨酸血管加压素神经元所致。表明视网膜节细胞与视交叉上核的精氨酸血管加压素神经元间有直接的突触性联系。这一结果为视交叉上核节律机制和精氨酸血管加压素神经元的机能调控提供了进一步研究的线索。     

大鼠视交叉上核与室旁核的联系──病毒跨神经元顺行追踪研究

本实验采用假狂犬病毒（猪疱疹病毒）作为跨神经元追踪示踪物，对下丘脑视交叉上核与下丘脑室旁核的联系进行了研究．实验大鼠于摘除双侧颈上交感神经节后，向单侧眼球内注入假狂犬病毒，术后动物分别存活48、56、72及96h．结果显示：56h组仅在视交叉上核内有极少数的细胞被病毒感染；72h组机交叉上核内被病毒标记的细胞增多，定劳核内也出现了被病毒感染的神经元，主要集中在背内侧帽区；96h组在室旁核内被病毒感染的神经元增加，除背内侧帽区外，其它亚孩也出现了被病毒感染的神经元；各实验组的亚室旁带未见有被病毒标记的神经元．以上表明视交叉上核的传出纤维直接投射到室旁核，两核团神经无间可能存在有直接的突触联系．     

视网膜节细胞与视交叉上核AVP神经元的联系 Ⅰ.CB-HRP顺行追踪与免疫组化双重标记(英文)

本文运用CB－HRP顺行追踪与免疫组化双重标记技术研究视网膜节细胞与视交叉上核内AVP神经元间的联系，结果：（1）AVP神经元主要聚集在视交叉上核背内侧，散在分布于腹内侧和背内腹外交界区域；（2）HRP标记的节细胞轴突除主要投射到腹外侧外，还少量投射到背内侧AVP神经元间；（3）标记终末形成的膨体有些与AVP神经元的突起（树突）密切接触，还有个别贴附在AVP神经元胞体上．提示：视网膜节细胞轴突终末与视交叉上核内AVP神经无间可能有突触联系．为昼夜节律机制的研究提供了一个全新认识的形态学资料。     

视网膜节细胞投射到视交叉上核AVP神经元的研究—假狂犬病毒跨 …

用９只成年ＳＤ大鼠向单侧眼球玻璃体内注入假狂犬病毒３－４μｌ,存活７２ｈ或９６ｈ后灌注,取材,Ｅｐｏｎ８１２包埋,行免疫电镜胶体金标记。结果：（１）两个时间组视交叉上核内精氨酸血管加压素神经元被胶体金标记;（２）假狂犬病毒感染的视交叉上核神经元以含病毒颗粒为特征;（３）视交叉上核内少量神经元既含病毒颗粒又被精氨酸血管加压素胶体金标记。     

视网膜节细胞投射到视交叉上核AVP神经元的研究——假狂犬病毒跨神经元追踪结合胶体金免疫电镜双重标记法

用９ 只成年ＳＤ 大鼠向单侧眼球玻璃体内注入假狂犬病毒３～４ μｌ,存活７２ ｈ 或９６ ｈ 后灌注、取材、Ｅｐｏｎ ８１２ 包埋,行免疫电镜胶体金标记。结果：（１）两个时间组视交叉上核内精氨酸血管加压素神经元被胶体金标记;（２）假狂犬病毒感染的视交叉上核神经元以含病毒颗粒为特征;（３）视交叉上核内少量神经元既含病毒颗粒又被精氨酸血管加压素胶体金标记。本研究结果首次证实视网膜节细胞与视交叉上核内的少数精氨酸血管加压素神经元之间有直接的突触联系,提示此类精氨酸血管加压素神经元可能直接接受来自视网膜的光信息。     

豚鼠中脑中缝背核和中缝正中核5—羟色胺能神经元向视交叉上核的直…

实验借助ＨＲＰ逆行定位和免疫细胞化学定性相结合的双合的双重标记技术，探讨豚鼠中脑中缝背核和中缝正中核向正丘脑视交叉上核的直接投射。结果首次确定了（１）中缝背核／中缝正中核内５－羟色胺和非５－羟色胺能神经元对式叉上核的直接投射和分布特点；（２）投射神经元主要集中集中背核；（３）中缝背核对视交叉上核的投射神经元几乎均为５－羟色胺能，而缝中中５－色胺和非５－羟色胺能投射神经元的各占半数。     

大鼠视交叉上核内VIP、AVP及SOM样神经元的相互关系──免疫组化双重反应法研究

视交叉上核具有生物钟功能已为很多实验研究所证实，但其功能机制尚在探索之中。本实验采用双重免疫组织化学反应技术对大鼠视交叉上核内ＶＩＰ、ＡＶＰ及ＳＯＭ样三大神经元群之间的相互联系进行了观察．结果表明：（１）ＶＩＰ样扣结广泛分布于ＡＶＰ样神经元周围，数量最多、密度最大；而ＳＯＭ样扣结贴附于ＶＩＰ及ＡＶＰ样神经元的数量次之；（２）ＡＶＰ样扣结与ＶＩＰ样神经元之间，ＶＩＰ样扣结与ＳＯＭ样神经元之间也形成联系．上述发现为视交叉上核功能机制的研究提供了进一步的形态学依据．     

双侧眼球摘除对大鼠视交叉上核的影响──免疫组化及光电镜体视学研究

采用双侧眼球摘除大鼠模型，术后存活不同时间，用免疫组化法探讨视交叉上核内ＶＩＰ和ＡＶＰ免疫反应强度和面积的变化；对变化明显的２１ｄ组进一步用光镜和电镜体现学方法进行形态学研究。＜１＞免疫组化研究：ＶＩＤ免疫染色，２１ｄ组免疫反应强度和面积均比对照组降低（Ｐ＜０．０５），２ｄ和７ｄ组免疫反应强度和面积与对照组相比无显著差异。ＡＶＰ免疫染色，三个时间实验组免疫反应强度和面积均与对照组无明显差异。＜２＞体视学研究：实验组ＶＩＰ样神经元胞体体积、胞核体积、核仁平均直径均明显缩小，粗面内质网和高尔基复合体表面积密度明显下降。以上所见提示摘除眼球２ｌｄ时，视交叉上核内直接接受光信息的ＶＩＰ样神经元的免疫活性下降是因阻断光传入所造成的。光传入的阻断和视神经纤维的溃变使视交叉上核中ＶＩＰ样神经元的结构呈现功能性改变，推测这些变化将引起该神经元肽类物质含量的下降。     

大鼠下丘脑到脊髓的直接纤维投射——WGA-HRP法研究

实验用28只170～285g SD大鼠。将WGA-HRP/HRP混合液注入颈、胸、腰及骶髓的一侧灰质。在下丘脑看到大量非均一性标记细胞。呈双侧分布,同侧较多;随着注射部位从头端向尾端移动,标记数量明显地递减。标记细胞以室旁核、下丘脑外侧区最为密集;视交叉后区、穹窿周核及未定带次之;下丘脑内侧区、室周核、背部下丘脑和后部下丘脑只有散在标记细胞;弓状核和视前区只有个别标记细胞。与文献相比,本实验表明,室旁核内的脊髓投射神经元并不局限于小细胞区,大细胞区也有较多分布;视上核和视交叉上核可能不直接投射到脊髓。     

树Qu、大鼠、豚鼠视交叉上核加压素免疫阳性神经元分布的差异性比较

目的：观察加压素免疫阳性（VP－IR）神经元在树Qu下丘脑视交叉上核中的分布并与其在大鼠豚鼠视交叉上核中的分布进行比较，探讨VP－IR神经元分布的种属差异性。方法：树Qu、大鼠、豚鼠内固定后恒冷箱冰冻连续切片，免疫组织化学PAP法染色。结果：三种动物的视交叉上核形状不同，VP－IR神经元在三种动物视交叉上核中的分布位置、数量和密度不同，此外，在豚鼠两侧视交叉上核间以及第三脑室底部与视交叉正中背侧之间，还观察到一些散在分布的VP－IR神经元，而树Qu和大鼠相应区域却未见有VP－IR神经元分布。结论：VP－IR神经元在视交叉上核中的分布有较大的种属差异性。     

大鼠视交叉上核内VIP,AVP及SOM样神经元的相互关系——免疫组化…

视交叉上核具有生物钟功能已为很多实验研究所证实，但其功能机制尚在探索之中，本实验采用双重免疫组织化学反应技术对大鼠视交叉上核内ＶＩＰ，ＡＶＰ及ＳＯＭ样三大神经元群之间的相互联系进行了观察。结果表明：（１）ＶＩＰ样扣结广泛分布于ＡＶＰ样神经元周围，数量最多，密度最大，而ＳＯＭ样扣结贴附于ＶＩＰ及ＡＶＰ样神经元的数量次之；（２）ＡＶＰ样扣结与ＶＩＰ样神经元之间，ＶＩＰ样扣结与ＳＯＭ样神经元之间也形成联     

大鼠松果体的中枢神经支配──病毒跨神经元顺行追踪研究

大量研究证明，松果体（Pi）的功能同它的神经支配密切相关，因此，研究Pi的神经支配就十分必要。但长期以来对此存在着异议，一些学者认为Pi的神经支配仅来源于双侧颈上交感神经节（SCG），另一些又提出Pi的神经支配不仅来源于SCG，而且也接受来自脑或其它地方的纤维投射。本研究用假狂犬病毒（PRV）作顺行跨神经元追踪，进一步探讨Pi的神经支配。17只雄性SD大鼠在单侧眼球内注入3一PRV（Bartha株、5X10’PFU／ml）前施行双侧SCG摘除术，术后分别存活56、72和96hr。PRV标记的神经元用免疫组化ABC法显示。结果；（1）56hr组仅在视交叉上核（SCN）内在极少数神经元被PRV标记；（2）72hr组除SCN外，在丘脑下部前区、下丘脑室旁核（PVN）、缰核（Hb）和外侧膝状体（LGH）出现了PRV标记的神经元。与此同时，在松果体的被膜内和松果体细胞之间也呈现出PRV标记的神经纤维；（3）随着动物存活时！和延长，96hr组在上述提及区域内被PRV标记的神经元和神经纤维数量增多。以上结果表明松果体接受了来自视网膜节细胞（RGC）的光信息。结合其他学者的报道，我们推测从视网膜及下丘脑投射到松果体的神经通路可能有以下几条：①RGC～LGH～Pi。＠PGC～Hb～Pi，＠SCN～PVN—Pi，＠SCN～LGH～Pi和⑤SCN～Hb－Pi。不论从哪     

树Qu下丘脑视交叉上核传入联系的研究

用ＨＲＰ逆行追踪技术，探讨了“灵长类原宗”树Ｑｕ下丘脑视交叉上核的传入联系。证明向单侧视交叉上核微电泳ＨＲＰ后，至少在２３个脑区出现标记细胞，而且大多出现在注射同侧，发现了过去未见报道过的新的标记区：（１）扣带前回皮质，（２）伏隔核；（３）丘脑连结核；（４）视交外侧区；（５）下丘脑外侧区，（６）无名质。     

摘除双侧眼球对大鼠视交叉上核节律性的影响

成年Ｗｉｓｔａｒ雌鼠５７只，随机分为实验组３０只，行双眼摘除术。对照组２７只。术后４周将各组动物体重相近的每３只列为一个配伍组，分别在０９：００～１０：００、１７：００～１８：００、２３：００～２４：００三个时间处死。将含有视交叉上核的脑组织经固定、恒冷箱切片后，用免疫组化ＡＢＣ法染色显示视交叉上核内含ＶＩＰ或ＡＶＰ的神经元，微机图像分析仪上测量光镜下这两种神经元的相对切面面积及平均免疫反应强度。结果：（１）对照组不同时间处死的动物ＶＩＰ能神经元切面面积以２３：００～２４：００最大，０９：００～１０：００次之，１７：００～１８：００最小，呈昼夜节律变化，ＡＶＰ能神经元也以２３：００～２４：００最大，但在０９：００～１０：００和１７：００～１８：００间差异无显著性；（２）摘除双眼后各时间组间ＶＩＰ能神经元和ＡＶＰ能神经元切面面积均不再显示显著性差异。提示实验组动物视交叉上核的这两种神经元功能活动的昼夜节律已发生改变；（３）实验组和对照组动物的ＶＩＰ能神经元和ＡＶＰ能神经元平均免疫反应强度在所测的三个时间中，均未见明显差异。     

摘除松果腺对大鼠视交叉上核节律性的影响

成年Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠２０只，实验组１０只，行松果腺摘除术；对照组１０只。术后３０ｄ将实验组、对照组动物各半数在０９：００～１０：００和１６：００～１７：００分别处死。用免疫组化ＡＢＣ法显示视交叉上核内含ＶＩＰ的神经元；微机图像分析仪上测量其光镜下的切面面积及平均免疫反应强度。结果：（１）对照组不同时间处死的动物ＶＩＰ样神经元切面面积０９：００～１０：００大于１６：００～１７：００，呈节律性变化。（２）摘除松果腺后各时间组间ＶＩＰ样神经元切面面积的差异无显著性，提示实验组动物视交叉上核的ＶＩＰ样神经元功能活动的日周节律已发生改变。（３）对照组和实验组动物的ＶＩＰ样神经元平均免疫反应强度在所测的两个时间中均未见明显差异。     

视网膜节细胞的轴突与视交叉上核内含VP神经元间联系的研究

视网膜节细胞的轴突与视交叉上核内含ＶＰ神经元间联系的研究（华西医科大学组织学研究室，成都６１００４４欧可群，操高原，陈文玉，王蕾，张军，马玉琼）视交叉上核（ｓｕｐｒａｃｈｉａｓｍａｔｉｃｎｕｃｌｅｕｓ，ＳＣＮ）是哺乳动物昼夜节律起搏器，为证实视交叉上...     

大鼠视交叉上核与视上核的纤维联系—病毒跨神经元追踪,免疫组化双重标记法研究

大鼠视交叉上核与视上核的纤维联系—病毒跨神经元追踪，免疫组化双重标记法研究王蕾欧可群陈文玉操高原张军马玉琼（华西医科大学组织学研究室）有文献报道视交叉上核（ＳＣＮ）的传出纤维到达室旁核（ＰＶＮ），但是否有传出纤维投射至视上核（ＳＯＮ），目前尚未见报道...     

精氨酸加压素阳性神经元在大鼠下丘脑的定位

目的:观察大鼠精氨酸加压素(AVP)及其mRNA阳性神经元在下丘脑的分布和形态特征。方法:以尼氏染色作参照,运用免疫组化和原位杂交观察AVP及其mRNA在下丘脑的表达。结果:下丘脑AVP及其mRNA阳性的神经元由吻侧到尾侧依次出现于视上核,视上核和视交叉上核,视上核、视交叉上核和室旁核,视上核和室旁核及视上核、下丘脑前核和室旁核。AVP及其mRNA阳性神经元仅占据视上核背内侧;在第三脑室室管膜膜内或膜下可见AVP阳性神经元的胞体或突起;在不同核团内AVP阳性神经元的形态存在差异。结论:AVP及其mRNA阳性神经元在下丘脑不同核团内具有特异性分布;AVP阳性触液神经元可能是调节脑脊液和脑组织之间AVP含量的桥梁。     

脊髓内去甲肾上腺素能纤维的来源

目的：研究脊髓内去甲肾上腺素(NA)能纤维的来源。方法：选用Wistar大鼠，应用神经递质NA特异性的标志酶——多巴胺β羟化酶(DBH)抗体注入其脊髓单侧，分别于注射后1h-7天灌注大鼠，取出脊髓和脑组织作免疫组化染色。结果：ADBH注入脊髓后48h内依次在腰、胸、颈髓同侧观察到大量DBH阳性纤维，对侧仅少量阳性纤维出现：注射后3—4天，双侧上橄榄核、LC、SC、KF核、臂旁核中出现大量阳性神经元，在延髓内仅见大量阳性纤维，未观察到阳性神经元胞体出现；注射后7天，上述阳性神经元和阳性纤维消失。结论：脊髓内的NA能纤维及终末几乎全部来源于脑桥NA能细胞群。     

大鼠视交叉上核内VIP、AVP及SOM样神经元的分布及相互联系—免疫组化多重标记法研究

大鼠视交叉上核内ＶＩＰ、ＡＶＰ及ＳＯＭ样神经元的分布及相互联系──免疫组化多重标记法研究王蕾，欧可群，操高原，陈文玉华西医科大学成都６１００４１视交叉上核（ＳＣＮ）具有生物钟功能已为众多实验所证实，但对其节律发生并保持与外界同步的机制却尚在探索之中。...