CRISPR-Cas13a检测在肺结核诊断中的价值

目的:评价应用CRISPR-Cas13a检测临床样本对肺结核的诊断价值。方法:采用回顾性研究方法，收集首都医科大学附属北京胸科医院2022年9月至2022年12月收治住院的102例经GeneXpert MTB/RIF检测(简称“Xpert检测”)确诊的肺结核患者的支气管肺泡灌洗液标本，作为结核病组；收集同期收治入院的100例非结核病患者(包括肺癌，细菌性肺炎，支气管扩张，慢性阻塞性肺疾病)的支气管肺泡灌洗液标本，作为非结核病组。所有患者的支气管肺泡灌洗液标本均进行涂片抗酸杆菌染色镜检、培养、Xpert检测及CRISPR-Cas13a检测。以Xpert检测结果为参照，评价CRISPR-Cas13a检测支气管肺泡灌洗液对肺结核的诊断价值。结果:结核病组102份标本中，CRISPR-Cas13a检测阳性为99份(97.1%),涂片阳性40份(39.2%),培养阳性68份(66.7%)。CRISPR-Cas13a检测阳性率明显高于涂片和培养法，差异有统计学意义(涂片：χ²=58.141,P<0.001;培养：χ²=30.250,P<0.0...     

肺泡灌洗液宏基因组二代测序对疑似肺结核的诊断价值

目的 探讨肺泡灌洗液宏基因组二代测序(mNGS)对肺结核的诊断价值.方法 选择2020年5月22日至2021年2月20日长沙市中心医院收治的行痰液及肺泡灌洗液(BALF)结核分枝杆菌(MTB)抗酸染色涂片法、MTB培养法和BALF TB-DNA、Xpert MTB/RIF(简称Xpert)和mNGS检测的疑似肺结核患者...     

Xpert MTB/RIF对结核性胸膜炎的诊断价值研究

目的探讨Xpert MTB/RIF对胸水中结核分枝杆菌的检出情况,评价其在结核性胸膜炎早期诊断中的应用价值。方法对102例结核性胸膜炎患者和50例恶性胸水患者的胸水进行Xpert MTB/RIF检测,同时行胸水抗酸染色及结核分枝杆菌快速培养和药敏试验(BACTECT MGIT 960),比较Xpert MTB/RIF与抗酸染色、结核分枝杆菌快速培养在敏感性及特异性上的差异,评价Xpert MTB/RIF在结核性胸膜炎诊断中的应用价值。结果 102例结核性胸水标本中,4例抗酸染色阳性,阳性率为3.92%(4/102);18例BACTECT MGIT 960培养阳性,阳性率为17.65%(18/102);24例Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌阳性,阳性率为23.53%(24/102),其中,3例存在利福平耐药突变基因,耐药突变率为12.50%(3/24)。Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌的阳性率高于抗酸染色法,差异有统计学意义(P0.05),与结核分枝杆菌快速培养阳性率及利福平药敏结果差异无统计学意义(P0.05)。50例恶性胸水标本抗酸染色及结核分枝杆菌快速培养均为阴性,特异性均为100%,1例Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌阳性,特异性为98.00%,其特异性与抗酸染色及结核分枝杆菌快速培养差异无统计学意义(P0.05)。结论 Xpert MTB/RIF系统在结核性胸膜炎的快速诊断中具有较高的诊断能力,是一种省时、敏感性和特异性均高的结核分枝杆菌检测方法。     

利用Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌及利福平耐药性的研究

目的初步评价Xpert结核分枝杆菌/利福平(Mycobacterium tuberculosis/Rifampicin,MTB/RIF)技术对不同类型临床标本进行结核分枝杆菌及其耐药性的检测中的应用价值。方法对627例结核病患者标本分别采用Xpert MTB/RIF、涂片及培养法检测,对结果进行比较。结果 (1)经统计学分析,总体Xpert MTB/RIF法阳性率41.78%(287/627)高于涂片法阳性率24.56%(154/627),差异有统计学意义(χ~2=261.87,P0.01);Xpert MTB/RIF法阳性率高于培养法阳性率26.63%(167/627),差异有统计学意义(χ~2=249.72,P0.01);涂片法与培养法间差异无统计学意义(χ~2=20.71,P0.05)。(2)Xpert MTB/RIF和比例法药敏试验检测RFP的耐药率分别为21.43%(33/154)、20.78%(32/154),二者间差异无统计学意义(χ~2=20.02,P0.05);二种方法所得结果一致率96.75%(149/154)。结论 Xpert MTB/RIF法具有快速、简单、敏感度高、便于操作、对生物安全要求不高等优点,能同时检测出结核分枝杆菌和是否对利福平耐药,具有广泛的应用前景。     

微量支气管肺泡灌洗在菌阴肺结核诊断中的应用

目的　探讨微量支气管肺泡灌洗对菌阴肺结核的诊断价值。方法　对 18例临床高度怀疑肺结核的痰菌阴性患者行灌洗液为 4 0 ml的微量支气管肺泡灌洗 ,并对回收液涂片做抗酸杆菌检查、普通细菌培养、细胞学检查及术后痰涂片检查抗酸杆菌。并于术后 1周至 1月复查胸片。结果　微量支气管肺泡灌洗液 (BAL F)检查抗酸杆菌阳性率为 5 0 % ,联合术后痰涂片检查抗酸杆菌阳性率为 71.4 % ,与术前相比 ,差异有显著性 (P<0 .0 1)。术后无 1例出现并发症。结论　微量支气管肺泡灌洗对菌阴肺结核的诊断是一种安全实用的检查方法。     

灌洗液Xpert MTB/RIF检测在涂片阴性及无痰疑似肺结核患者中的应用分析

目的 探讨灌洗液Xpert MTB/RIF检测在涂片阴性及无痰疑似肺结核患者中的诊断效能.方法 选取河南省胸科医院结核科2020年1月1日至2020年6月30日期间收治的疑似肺结核患者98例为研究对象,留取气管镜灌洗液行抗酸染色、Xpert MTB/RIF检测、分枝杆菌液体培养,以灌洗液分枝杆菌液体培养结果、病理诊断结...     

支气管肺泡灌洗液XpertMTB/RIF检测在HIV感染者肺结核诊断中的应用价值

目的评估支气管肺泡灌洗液(BALF)结核分枝杆菌rpoB基因和突变检测(XpertMTB/RIF),在诊断艾滋病病毒(HIV)感染合并肺结核中的应用价值。方法对499例HIV感染者BALF标本进行XpertMTB/RIF检测,配对标本同时进行结核分枝杆菌快速培养和药敏试验(BACTEC MGIT 960)、抗酸染色涂片法、实时荧光定量法(PCR-荧光法)检测;同时采用结核分枝杆菌抗原特异性γ-干扰素酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测患者对应外周血标本,比较各种检测方法的阳性率、灵敏度和特异性。结果 BACTEC MGIT 960培养、XpertMTB/RIF、抗酸染色涂片法、PCR-荧光法及ELISPOT检测的阳性率分别为20.4%、13.4%、5.0%、6.6%、22.4%,5种检测方法阳性率差异有统计学意义(χ2=101.03,P0.001)。以传统BACTEC MGIT 960培养阳性并经过菌种鉴定为结核分枝杆菌的79例标本为金标准:XpertMTB/RIF、抗酸染色涂片法、PCR-荧光法、ELISPOT的灵敏度依次为:77.2%、26.3%、38.0%、60.3%;特异性依次为:98.8%、99.2%、99.5%、85.1%;阳性预测值依次为:92.4%、87.0%、93.8%、44.4%;阴性预测值依次为:95.7%、87.5%、89.2%、91.5%。对XpertMTB/RIF、抗酸染色涂片法、PCR-荧光法及ELISPOT四种方法与BACTEC MGIT 960培养进行一致性检验发现,XpertMTB/RIF与BACTEC MGIT 960培养具有最强一致性(Kappa值为0.814),PCR-荧光法一般(Kappa=0.493),而抗酸染色涂片法和ELISPOT法最差(Kappa值分别为0.356、0.397)。结论与其他4种常见结核诊断方法相比,支气管肺泡灌洗液XpertMTB/RIF检测技术在HIV感染合并肺结核患者的诊断中具有较高的应用价值,是一种快速省时、敏感性和特异性均高的结核分枝杆菌快速检测方法。     

经支气管镜刷检“激惹”后支气管肺泡灌洗液检查对支气管结核的诊断意义

目的探讨经支气管镜刷检“激惹”后支气管肺泡灌洗液检查对支气管结核的诊断意义及护理配合的作用。方法选取确诊支气管结核病例42例,比较支气管镜下刷检前后支气管肺泡灌洗液抗酸杆菌阳性率。结果刷检前支气管肺泡灌洗液中抗酸杆菌阳性率为38．1％,刷检后支气管肺泡灌洗液中阳性率增高至64．3％,两者比较其差异有统计学意义。结论经支气管镜刷检“激惹”后支气管肺泡灌洗液检查是一种安全的检查方法,可以提高支气管结核的诊断率。     

实时荧光定量聚合酶链反应检测支气管肺泡灌洗液中结核分枝杆菌-DNA对肺结核的诊断价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应法（FQ-PCR）检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中结核分枝杆菌-DNA（TB-DNA）对肺结核的诊断价值。方法肺结核52例（菌阳20例,菌阴32例）,肺炎35例,采用FQ—PCR法检测其支气管肺泡灌洗液中TB—DNA水平。结果52例肺结核组的阳性率为65．4％（菌阳19例,菌阴15例）,35例非肺结核组的阳性率为5．7％,经统计学比较,FQ-PCR法检出结核杆菌阳性率显著高于痰涂片抗酸染色和培养法（P均〈0．05）,FQ-PCR法特异性高。结论FQ-PCR法检测BALF中TB-DNA为痰涂片阴性及无痰患者提供良好的诊断依据。     

防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核的诊断价值

目的研究防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)技术对痰菌阴性肺结核患者的诊断价值。方法对96例痰菌阴性肺结核患者进行经支气管镜防污染支气管肺泡灌洗,防污染支气管肺泡灌洗液经过前处理,离心沉渣行涂片荧光染色镜检抗酸杆菌、改良罗氏法分离培养及BACTEC MGIT960快速结核菌培养。结果防污染支气管肺泡灌洗液离心沉渣镜检抗酸杆菌阳性20例(20.8%),改良罗氏培养基分离培养阳性30例(31.3%),BACTEC MGIT960快速培养技术培养阳性59例(61.5%),最终获病原学确诊62例,确诊率为64.6%。结论防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核患者具有重要的诊断价值,对灌洗液进行多种检查可提高检出的阳性率。     

痰结核分枝杆菌DNA检测诊断肺结核的临床意义

目的评估痰结核分枝杆菌DNA检测诊断肺结核的可行性及临床意义。方法回顾性分析2016年5月—12月在我科住院的经痰结核分枝杆菌培养确诊的136例肺结核患者的临床资料,比较痰涂片找抗酸杆菌和痰结核分枝杆菌DNA检测2种方法的检出率。结果 136例确诊的肺结核患者中,痰涂片阳性的有64例(47.06%),痰结核分枝杆菌DNA检测阳性的88例(64.71%),痰结核分枝杆菌DNA检测阳性率明显高于痰涂片找抗酸杆菌(P0.05)。72例痰涂片阴性患者中痰结核分枝杆菌DNA检测阳性29例,占痰涂片阴性肺结核患者比例的40.28%。结论痰结核分枝杆菌DNA检测优于痰涂片找抗酸杆菌,能够辅助涂阳肺结核的诊断,并提高涂阴肺结核的诊断水平,是一种快速、敏感的病原学诊断方法。     

支气管肺泡灌洗液行Xpert MTB/RIF检测对涂阴肺结核的诊断价值

目的评价支气管肺泡灌洗液行Xpert MTB/RIF检测对涂阴肺结核的诊断价值。方法选取从2014年11月至2015年12月徐州市传染病医院收治的3次痰涂片阴性的可疑肺结核患者110例,对所有患者行支气管镜检查进行刷检及收集BALF,进行涂片镜检找抗酸杆菌、结核分枝杆菌培养及Xpert MTB/RIF检测,同时进行诊断。分别以BALF的罗氏培养结果及临床诊断标准作为肺结核诊断的阳性标准,计算Xpert MTB/RIF诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值。结果以BALF培养阳性结果作为判断肺结核的阳性标准,BALF行Xpert MTB/RIF检测对诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为100%、97.4%、97.8%、100%。以临床诊断标准为诊断肺结核的阳性标准,BALF行Xpert MTB/RIF检测对诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为81.9%、97.4%、98.3%、74.0%。以DST结果为金标准,Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度、特异度分别为75.0%、96.0%。结论BALF行Xpert MTB/RIF检测在涂阴肺结核中的敏感度、特异度均较高,且检测快速并能判断是否利福平耐药,对涂阴肺结核的快速诊断及治疗具有较大的应用价值。     

抗酸杆菌液基薄层涂片方法的临床应用研究

目的评价结核分枝杆菌液基薄层涂片法对不同类型标本的染色检查效能。方法对200份住院1周内结核病患者的标本同时进行液基薄层方法与直接涂片法镜检抗酸杆菌,其中包括148份晨痰标本,52份体液标本,比较2种方法的阳性检出率。结果排除16份重复标本,9份未进行分枝杆菌培养的标本,纳入的123份痰标本中,液基薄层法阳性率33.33%,直接涂片法阳性率24.39%,差异有统计学意义(P=0.012);培养阳性病例的痰标本中,液基薄层法阳性率58.82%,直接涂片法阳性率44.12%,差异有统计学意义(P=0.018)。52份体液标本中,液基薄层法阳性率13.46%,直接涂片阳性率1.96%,差异有统计学意义(P=0.041);培养阳性病例的16份体液标本中,液基薄层法阳性比例为7/16,直接涂片法阳性比例为1/16,差异有统计学意义(P=0.040)。结论基于液基薄层方法的抗酸杆菌涂片阳性率高于直接涂片法,对于体液标本阳性率提高显著,有利于临床上快速诊断,但对于痰标本的应用须综合考虑检验时长和检验费用。     

防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核的诊断价值

目的　研究防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)技术对痰菌阴性肺结核患者的诊断价值。方法 对96例痰菌阴性肺结核患者进行经支气管镜防污染支气管肺泡灌洗,防污染支气管肺泡灌洗液经过前处理,离心沉渣行涂片荧光染色镜检抗酸杆菌、改良罗氏法分离培养及BACTEC MGIT960快速结核菌培养。结果 防污染支气管肺泡灌洗液离心沉渣镜检抗酸杆菌阳性20例(20.8%),改良罗氏培养基分离培养阳性30例(31.3%),BACTEC MGIT960快速培养技术培养阳性59例(61.5%),最终获病原学确诊62例,确诊率为64.6%。结论 防污染支气管肺泡灌洗对痰菌阴性肺结核患者具有重要的诊断价值,对灌洗液进行多种检查可提高检出的阳性率。     

不同方法检测痰和肺泡灌洗液中结核杆菌的分析

目的对比分析不同检测方法和不同检测标本在结核杆菌检测结果中的意义。方法选取本科室收治的初次我院就诊并临床诊断符合"肺结核"标准的158例患者的痰液和肺泡灌洗液,对所有的标本均进行两次抗酸染色涂片、两次快速培养检测结核杆菌(1次及1次以上阳性均记为阳性)。结果 1.快速培养法的结核杆菌检出率高于抗酸染色涂片法;2.肺泡灌洗液的结核杆菌阳性率均高于痰液。结论快速培养法是临床工作中确诊结核病的首选方法,肺泡灌洗液能有效提高肺结核的诊断率。     

支气管肺泡灌洗在肺结核病原学诊断上的临床应用

目的对比分析支气管肺泡灌洗与痰液检查在肺结核病原学诊断方面的差异性。方法选择符合条件的病例172例,分别进行痰液涂片及支气管肺泡灌洗液沉渣涂片查找抗酸杆菌,统计分析两种方法差异性。结果痰液检查阳性率31.4%,灌洗液检查阳性率62.8%,在干咳或少痰患者灌洗液检查阳性率更为突出。结论支气管肺泡灌洗液检查较痰液检查在肺结核病原学诊断方面阳性率高,特别是对干咳或无痰患者有较高临床意义,两种方法结合使用可提高病原学诊断阳性率,对临床明确肺结核诊断有较大价值。     

环介导等温扩增法对无痰或痰涂阴肺结核的诊断价值

目的:探讨环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)检测支气管肺泡灌洗液对无痰或涂阴肺结核的诊断价值。方法:采用前瞻性研究方法,纳入2021年4月至2022年4月重庆市巫山县人民医院收治且符合入组标准的无痰/痰涂片阴性疑似肺结核患者作为研究对象,均在支气管镜下刷片行荧光染色显微镜检查(简称“涂片镜检”),并取支气管肺泡灌洗液行LAMP和GeneXpert MTB/RIF(简称“Xpert”)检测结核分枝杆菌复合群DNA。以最终临床诊断为参照标准,分析3种方法在所有疑似肺结核患者中的检测效能。结果:研究共纳入232例患者,以最终临床诊断将患者分为涂阴/无痰肺结核患者(139例)和非结核肺病患者(93例)。LAMP、Xpert和涂片镜检对232例疑似肺结核患者的检测阳性率分别为43.53%(101/232)、43.97%(102/232)和8.19%(19/232)。以最终临床诊断为参照标准,LAMP、Xpert和涂片镜检对无痰/涂阴肺结核的检测敏感度分别为71.94%(100/139)、72.66%(101/139)和13...     

结核病诊断T-SPOT.TB、Gene Xpert MTB/RIF技术应用价值研究北大核心CSCD

目的评估结核分枝杆菌及其利福平耐药株实时荧光定量核酸扩增(Gene Xpert MTB/RIF)和结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在结核病诊断中的价值。方法分析2020年1月-2022年3月济宁市公共卫生医疗中心收治的住院及门诊病患者643病例的抗酸染色镜检、960液体培养、Gene Xpert MTB/RIF检测和结核抗体、T-SPOT.TB检测结果,评价Gene XpertMTB/RIF和T-SPOT.TB检测诊断结核病的特点和价值,以临床诊断为金标准,以检测方法的敏感度、特异度及绘制的ROC曲线等作为评价指标。结果抗酸染色、960快速培养和Gene Xpert MTB/RIF检测结核病的敏感度分别为21.57%、39.21%和59.80%,特异度分别为100.00%、97.22%和100.00%。ROC曲线分析显示,抗酸染色、960结核菌培养和Gene XpertMTB/RIF的AUC分别是0.60、0.70和0.80,差异有统计学意义(P<0.05);95%置信区间范围分别为0.50~0.70,0.61~0.78,0.73~0.87。T-SPOT.TB和结核抗体检测的敏感度分别为84.61%和70.19%,特异度分别为95.83%和79.16%。ROC曲线分析结核抗体与TSPOT检测的AUC分别为0.75和0.90,95%,置信区间范围分别为0.64~0.86和0.84~0.97。T-SPOT.TB和Gene Xpert MTB/RIF的阳性率分别为86.47%和36.60%。结论在结核病诊断中,Gene Xpert MTB/RIF和T-SPOT.TB检测结核病的敏感性高于痰涂片和痰培养检查及结核抗体检测,其中T-SPOT.TB检测的阳性率较高。Gene Xpert MTB/RIF和T-SPOT.TB均可应用于肺结核的临床诊断以提高肺结核的诊治效率。     

不同技术联合检测痰液和胸腔积液对结核性胸膜炎的诊断价值

目的 研究不同技术联合检测痰液和胸腔积液对结核性胸膜炎的诊断价值。方法 收集2014年1月至2017年3月首都医科大学附属北京胸科医院收治的临床诊断为结核性胸膜炎的1955例患者,其中1232例(63.02%)有肺部实质病变,723例(36.98%)无肺部实质病变,通过抗酸杆菌涂片镜检(简称“涂片法”)、改良固体培养法和BACTEC MGIT 960液体培养(简称“培养法”)和Xpert MTB/RIF技术(简称“Xpert法”)单独及联合检测患者痰液和胸腔积液中结核分枝杆菌的阳性检出率,并分析肺部实质病变对结核分枝杆菌检测阳性率的影响。结果 1955例结核性胸膜炎患者同时采用涂片法进行痰液和胸腔积液检测者中有535例(27.37%)患者、353例(18.06%)采用培养法、294例(15.04%)采用Xpert 法,188例(9.62%)患者同时进行了涂片法+培养法+Xpert法检查。涂片法、培养法和Xpert法单独检测胸腔积液结核分枝杆菌的阳性率[3.18%(17/535)、15.30%(54/353)、19.05%(56/294)]明显低于3种方法联合检测痰液+胸腔积液的阳性率[21.87%(117/535)、43.63%(154/353)、47.62%(140/294)](χ ²值分别为85.31、68.16、54.00,P值均<0.01)。在有肺部实质病变的患者中,涂片法、培养法、Xpert法单独检测胸腔积液中结核分枝杆菌的阳性率[3.82% (13/340)、16.30% (37/227)和23.91% (44/184)]明显低于3种方法单独检测痰液的阳性率[30.29% (103/340)、51.10% (116/227)、60.33% (111/184)](χ ²值分别为84.19、61.53、50.04,P值均<0.01)和联合检测痰液+胸腔积液的阳性率[分别为32.06% (109/340)、55.95% (127/227)、67.93% (125/184)](χ ²值分别为92.06、77.32、71.79,P值均<0.01)。以培养为金标准,涂片法、培养法和Xpert法检测痰液+胸腔积液的敏感度[48.36%(59/122)、79.38%(77/97)、80.49%(66/82)]明显高于单独检测胸腔积液的敏感度[8.20%(10/122)、26.80%(26/97)、26.83%(22/82)](χ ²值分别为48.52、53.84、47.47,P值均<0.01);检测痰液+胸腔积液的特异度较单独检测胸腔积液有所下降,其中涂片法检测的差异无统计学意义(χ ²=3.65,P=0.056);而Xpert法和涂片法+Xpert法检测的差异均有统计学意义(χ ²=4.71,P=0.030;χ ²=5.67,P=0.017)。 结论 联合检测痰液和胸腔积液中结核分枝杆菌的阳性检出率高于单独检测,对于疑似结核性胸膜炎的患者,应尽量进行痰液标本的检测,以提高对结核性胸膜炎诊断的参考价值。     

Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌及其耐药性在结核病辅助诊断中的临床价值

目的探讨Xpert MTB/RIF检测方法在结核病辅助诊断中的应用价值。方法收集2013年8月至2014年3月同时对同一份标本进行结核分枝杆菌(MTB)液体培养(以下简称TB培养)和Xpert MTB/RIF实验的149例临床诊断为结核患者的资料,统计结果,并以TB培养为金标准对结果进行分析。结果149份标本中有痰液标本106份,胸水标本43份。Xpert MTB/RIF法检测结核分枝杆菌阳性率为63.8%(95/149),TB培养法检测结核分枝杆菌阳性率为51.0%(76/149),Xpert MTB/RIF检测法对痰液标本检出率为65.1%(69/106),TB培养检测法对痰液标本检出率为67.9%(72/106),Xpert MTB/RIF检测法对胸水标本检出率为60.5%(26/43),TB培养检测法对胸水标本检出率为9.3%(4/43)。结论 Xpert MTB/RIF检测法检测标本中结核分枝杆菌与TB培养法有较高一致性,Xpert MTB/RIF检测法对肺外结核的诊断可能有较高价值,在结核分枝杆菌及其对利福平耐药快速检测方面有比较好的应用前景。