PINK1介导缺氧损伤时星形胶质细胞对神经元的保护作用

目的探究星形胶质细胞内PTEN诱导假定激酶1(PINK1)缺失对缺血时神经保护作用的影响及其作用机制。方法离体培养原代星形胶质细胞,使用小干扰RNA(si RNA)沉默PINK1表达,氧糖剥夺(OGD)建立细胞缺氧模型,分为4组:PINK1沉默组(si RNA+转染剂)、空质粒组(空质粒+转染剂)、转染剂组(只加转染剂)和对照组(星形胶质细胞),各组均与神经元共培养;另设立神经元单独培养组。免疫荧光染色观察神经元凋亡情况。定量PCR及ELISA检测星形胶质细胞促红细胞生成素(EPO)及血管内皮生长因子(VEGF)表达量;Western blot检测星形胶质细胞内缺血诱导因子(HIF)及核因子κB(NF-κB)通路相关蛋白水平。结果 OGD损伤后神经元凋亡率较高,与星形胶质细胞共培养后神经元凋亡率显著降低(P0.05)。PINK1基因沉默后共培养神经元凋亡增加,星形胶质细胞EPO及VEGF分泌量减少、胞内EPO及VEGF转录水平降低(P0.05);HIF-1、HIF-2与NF-κB通路活化水平均显著降低(P0.05)。结论星形胶质细胞对OGD损伤神经元有保护作用,其作用通过EPO及VEGF实现;PINK1基因沉默后星形胶质细胞对缺血神经元保护作用减弱,可能与NF-κB通路活化水平降低、HIF激活受损进而下调EPO和VEGF表达量有关。     

CNS中抗原递呈细胞调节T细胞对CNS抗原的应答

在中枢神经系统(CNS)炎症或损伤时,T细胞对CNS抗原的应答启动于外周免疫系统,而作用于CNS.CNS中小胶质细胞、星形胶质细胞和血管周围巨噬细胞可作为抗原递呈细胞,通过对Th1和Th2细胞的再刺激,分泌可溶性因子调节Th1和Th2细胞应答,以及与T细胞间相互作用,调控Th1细胞和Th2细胞间的平衡,从而促进或抑制T细胞应答,影响CNS炎症损伤的结局.     

银杏内酯B对培养星形胶质细胞的抗缺血作用及其机制

目的 探讨银杏内酯B(Ginkgolide B,Gin B)对缺血中的星形胶质细胞的作用及其机制.方法 以新生小鼠纯化的星形胶质细胞,通过缺血(1%O2)或经Gin B预处理,观察细胞形态,活力的变化;利用Western blot分析bystin与磷酸化Bad蛋白(phosphorylated-Bad,p-Bad)表达的变化.结果 星形胶质细胞在缺血0.5h或3h后,变成有反应性特征的星形胶质细胞,活性增高,bystin、p-Bad表达均增加;缺血24h后,细胞变稀疏,胞体变小,突起减少;活性降低;bystin、p-Bad表达明显减少甚至消失;经过Gin B(120 tmol/L)预处理后再进行缺血24h,细胞形态较直接缺血明显改善,细胞活性与bystin、p-Bad的表达量均增加.结论 Gin B对缺血星形胶质细胞具有保护作用,其作用机制与刺激bystin生成以及增加p-Bad表达有关.     

CNS中抗原递呈细胞调节T细胞对CNS抗原的应答

在中枢神经系统 (CNS)炎症或损伤时 ,T细胞对CNS抗原的应答启动于外周免疫系统 ,而作用于CNS。CNS中小胶质细胞、星形胶质细胞和血管周围巨噬细胞可作为抗原递呈细胞 ,通过对Th1和Th2细胞的再刺激 ,分泌可溶性因子调节Th1和Th2细胞应答 ,以及与T细胞间相互作用 ,调控Th1细胞和Th2细胞间的平衡 ,从而促进或抑制T细胞应答 ,影响CNS炎症损伤的结局     

NF-κB与脑缺血

核转录因子NF-κB(Nuclear factor kappa-B)于1986年被发现，因其能与免疫球蛋白-i链基因上的增强子结合，故得此名。起初人们认为NF-κB仅在B细胞中表达，后来发现几乎所有类型细胞中都有其存在．在神经系统中，NF-κB广泛分布于神经细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞。在静息状态下，NF-κB与其抑制因子IκB(Inhibitor of nuclear factorkappaB)结合成复合物存在于细胞浆中，     

星形胶质细胞体外表达NGF的实验研究

目的研究星形胶质细胞对神经生长因子(NGF)的表达及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对星形胶质细胞表达NGF的影响.方法用间接ELISA法测定传代培养的星形胶质细胞的NGF分泌量及经不同浓度TNF-α作用24、48、72h后的NGF分泌量.结果传代培养的星形胶质细胞能够分泌NGF,不同浓度的TNF-α作用不同时间后均不同程度地促进星形胶质细胞分泌NGF.结论星形胶质细胞能够表达NGF,而TNF-α可不同程度地促进星形胶质细胞对NGF的表达.     

反应性星形胶质细胞增生在脑缺血中的作用

星形胶质细胞(AST)是中枢神经系统主要的细胞.当CNS受到损伤时,AST从静止状态下活化,形成反应性星形胶质细胞增生,如损伤严重将形成胶质疤.本文就星形胶质细胞的生理作用,反应性胶质细胞增生的定义、机制、作用以及在脑缺血中的治疗做一综述.     

星形胶质细胞在多发性硬化发病中的作用机制

星形胶质细胞是中枢神经系统中数量最多的胶质细胞,其生理功能为支持和营养神经元,参与免疫调节和神经递质代谢,支持血-脑脊液屏障,调节神经细胞内、外离子浓度等。星形胶质细胞在多发性硬化(multiple sclerosis,MS)中反应性增生,此现象称为星形胶质细胞活化。活化的星形胶质细胞一方面产生一些具有神经损伤的细胞因子,另一方面能分泌有利于神经系统恢复的因子来促进神经生长和修复。因而星形胶质细胞在MS中具有双重角色。在MS发病机制中明确星形胶质细胞在不同发病阶段的作用倾向,可能为MS的治疗提供新的治疗策略。     

多发性硬化星形胶质细胞免疫调节作用研究进展

星形胶质细胞(astrocyte,AST)在多环节参与多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的发生发展.AST通过表达Toll样受体及dsRNA依赖的蛋白激酶介导中枢神经系统(CNS)固有免疫,并且通过表达组织相容性复合物Ⅱ类分子(major histocompatibility antibody,MHCⅡ),分泌细胞因子参与CNS获得性免疫反应.体内外研究均表明AST表达MHCⅡ类分子受多种因素调控.MHCⅡ反式激活因子(classⅡMHC transacti-vator,CITTA)在AST表达MHCⅡ类分子的信号通路中起重要作用.     

核转录因子κB涉及水通道蛋白-4抗体阳性血清对星形胶质细胞的毒性作用

目的探讨核转录因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)在水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)抗体诱导的星形胶质细胞损伤中的作用。方法纯化培养新生SD大鼠大脑皮质星形胶质细胞,按随机数字表法分为对照组、吡咯醛二硫氨基甲酸(PDTC)组、AQP4抗体阳性血清组(AQP4抗体组)和AQP4抗体+PDTC组,其中对照组加入10%(体积分数)健康人血清,PDTC组给予10μmol/L PDTC预处理1h后加入等量健康人血清;抗体组加入AQP4抗体阳性血清;AQP4抗体+PDTC组先用PDTC预处理1h后再加入AQP4抗体阳性血清。细胞培养12h后采用免疫细胞化学荧光法观察各组NF-κB p65入核情况,MTS比色法检测细胞存活度,免疫印迹法检测细胞内p65蛋白、磷酸化p65(p-p65)蛋白的表达。结果 AQP4抗体组可见明显NF-κB p65入核,其余三组均未见明显入核;AQP4抗体+PDTC组细胞存活度高于AQP4抗体组(吸光度值分别为0.4380±0.005、0.3897±0.045,F=133.355,P0.05);各组间NF-κB p65蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P0.05);AQP4抗体+PDTC组p-p65蛋白表达水平较AQP4抗体组明显减少(分别为0.7027±0.020,0.8197±0.027,F=10.794,P0.05)。结论 AQP4抗体阳性血清可能通过激活NF-κB途径促进星形胶质细胞损伤,抑制NF-κB活性对星形胶质细胞具有保护作用。     

星形胶质细胞激活与创伤性颅脑损伤研究进展

神经胶质细胞作为中枢神经系统中分布最为广泛的一类细胞,对神经元具有支持、保护、营养、形成髓鞘和修复等多种功能。星形胶质细胞作为神经胶质细胞中的一种,已有大量研究证实其在创伤性脑损伤和神经退行性病变中具有重要作用。文中结合相关文献综述介绍创伤性颅脑损伤后星形胶质细胞激活的病理过程及其中潜在的细胞及分子机制     

疏血通对凝血酶诱导培养的星形胶质细胞损伤的保护作用

目的探讨疏血通对凝血酶诱导培养的星形胶质细胞损伤的保护作用。方法采用体外培养星形胶质细胞的方法,对新生Wistar大鼠大脑星形胶质细胞进行培养并纯化,用不同浓度的疏血通作用后,然后根据需要加入凝血酶干预。用免疫细胞化学染色和逆转录多聚酶链反应(RTPCR)检测培养星形胶质细胞NFκB蛋白和基因的表达;用化学反应法测定培养细胞上清液中乳酸脱氢酶活性(LDH);MTT法观察细胞生长活性的影响;流式细胞仪分析细胞周期和凋亡的变化。结果疏血通下调凝血酶作用下的体外培养星形胶质细胞上NFκB的表达;使细胞生长活性明显增加;减轻细胞G2/M期的阻滞,凋亡比例下降。结论疏血通减轻凝血酶诱导培养星形胶质细胞的损伤,可能通过其抗细胞凋亡作用。     

星形胶质细胞与癫痫

星形胶质细胞是中枢神经系统的主要支持成分,参与多种生理、病理功能。星形胶质细胞具有对各种神经损害产生强烈反应的特性。在病理条件下,星形胶质细胞内多种细胞因子表达增加．对疾病的神经损害具有重要影响。近年来,星形胶质细胞在癫痫发生、发展中的作用日益受到重视。１星形胶质细胞解剖、生理星形胶质细胞起源于外胚层,分布于中枢神经系统的各个部分。星形胶质细胞发出突起附着在毛细血管壁上或脑和脊髓表面形成胶质界膜,将中枢神经系统与中胚层组织分开。在中枢神经系统内部,胶质细胞充填于神经元胞体及其突起之间,并将突触结…     

再程序化星形胶质细胞的制备及体外定向分化为神经元的研究

目的探讨再程序化星形胶质细胞制备并在体外诱导其分化为神经元。方法在体外培养大鼠脑皮质来源星形胶质细胞(astrocyte),随后将提纯、鉴定过的第三代星形胶质细胞接种于12孔培养皿中,并分为A、B、C 3组。其中A组为带有绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体介导neurogenin2(Ngn2)基因转染的星形胶质细胞,制备再程序化星形胶质细胞;B组为带有GFP基因的空载体病毒转染的星形胶质细胞;C组为未进行慢病毒介导基因转染的星形胶质细胞;转基因1周后加入含细胞生长因子诱导培养基诱导分化15 d,光镜下观察各组细胞形态变化以及定向神经元分化的差异。结果 A组星形胶质细胞转基因后再诱导15 d,很大部分细胞形态呈神经元样改变,胞体呈梭形或椭圆形,有多个突起伸出且突起较长,表达神经元核蛋白(Neu N)、神经丝蛋白(NF)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的比例大大提高,相比B组及C组,差异有统计学意义(均P0.05);而B组与C组神经元分化比例的差异无统计学意义(P0.05)。结论慢病毒介导Ngn2基因体外转染星形胶质细胞可制备出再程序化星形胶质细胞,诱导后具有更强的向神经元定向分化能力。     

ephrinA3在脂多糖诱导的星形胶质细胞中的表达变化

目的 探讨ephrinA3在脂多糖诱导的大鼠大脑皮质星形胶质细胞中的表达变化.方法 提取新生大鼠大脑皮质星形胶质细胞并纯化培养,随机分为对照组和实验组,脂多糖10mg/L干预后,实验组又分为30min组、6h组、24h组、48h组和72h组,采用倒置相差显微镜观察星形胶质细胞形态学变化,MTT法检测细胞活力,AO/EB荧光染色检测细胞凋亡和坏死情况,CY3免疫荧光及Western blot方法测定不同时间点ephrinA3的表达变化.结果 在脂多糖作用的不同时间中,与对照组相比,作用24h、48h、72h的细胞存活率显著升高,凋亡率显著下降,ephrinA3表达显著升高.结论 ephrinA3在脂多糖诱导的大鼠大脑皮质星形胶质细胞中的表达增高,持续至少72h,其在中枢神经系统损伤后星形胶质细胞增殖方面起重要调控作用.     

星形胶质细胞在多发性硬化中的作用(综述)

抗髓磷脂T细胞和抗原提呈胶质细胞间的相互作用是导致多发性硬化(multiplesclerosis,MS)炎性损伤免疫瀑布式反应中关键的一步。星形胶质细胞作为在中枢神经系统中数量最多的胶质细胞,在MS的发生、发展、维持中起到怎样的作用呢?在本综述中,就星形胶质细胞作为脑内的主要的抗原提呈细胞,其在EAE的免疫过程中起到的作用做一综述。从而论证使用药物抑制星形胶质细胞的抗原递呈等免疫过程将是治疗MS的一种可能的方法。     

低渗对体外培养星形胶质细胞增殖的影响

目的观察低渗环境对体外培养星形胶质细胞增殖和细胞周期的影响。方法采用原代培养的大鼠皮层星形胶质细胞,实验分为对照组和低渗组;低渗1h后恢复正常全培养基,在不同时间点(0、12、24、48h),应用流式细胞技术以及免疫细胞荧光三标法(B rdu/GFAP/DAPI)检测各实验组星形胶质细胞增殖及细胞周期分布的情况。结果我们发现低渗干预星形胶质细胞1h并恢复正常培养基后12、24、48h,对照组和低渗组的B rdu阳性率和细胞周期分布无显著性差异(P>0.05)。结论低渗干预1h对星形胶质细胞的增殖速率及细胞周期的进展无显著影响。     

β淀粉样蛋白诱导神经元坏死和调亡中的诱导型一氧化氮合酶和NFκB信号通路

β淀粉样蛋白(Aβ)通过核因子κB(NFκB)信号通路机制,促使诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达,最终导致神经元凋亡或坏死.在小胶质细胞和星形胶质细胞的协同作用下,产生了与iNOS表达相关的Aβ刺激的炎症反应、NFκB信号通路的活化,iNOS的表达,导致神经元过氧化亚硝酸盐损伤和阿尔茨海默病(AD)中神经的退行性损伤.微胶质细胞的CD36接受Aβ刺激后,与Src家族蛋白激酶成员Lyn结合.Lyn和Src家族另一成员Fyn一起,启动MAPK通路的信号应答,产生MCP-1和ROS等炎症因子.同时,Syk家族蛋白也参加了Aβ刺激促炎因子产生的信号传递.NFκB接受Aβ刺激后以独立于Src、S水的信号通道起作用.Aβ刺激微胶质细胞分泌的炎症因子诱导神经元细胞中iNOS的过量表达,产生过量过氧化亚硝酸盐,致使神经元损伤.     

雌激素受体α免疫阳性星形胶质细胞在阿尔茨海默病病人海马中分布的改变

目的:观察雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)免疫阳性星形胶质细胞在阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)病人组和老年对照组海马中的分布变化.方法:采用免疫荧光细胞化学双标方法和激光共聚焦扫描显微镜.结果:ERα免疫阳性星形胶质细胞主要分布在齿状回的门和海马的分子层、放射层及始层.GFAP(glial fibrillary acidic protein)免疫阳性细胞、ERα胞核染色的和ERα胞质染色的星形胶质细胞(number/mm2)在AD组的CA1均显著增加(P分别小于0.001,0.05,0.05),但其ERα核着色或质着色的星形胶质细胞占GFAP免疫阳性星形胶质细胞的百分数,在对照组(2.56%,n=13;16.68%,n=13)和AD病人组(2.15%,n=13;26.00%,n=13)之间无显著差异(P＞0.05).结论:这些结果表明,在AD的发病过程中雌激素可能通过ERα介导对海马星形胶质细胞的作用.     

远隔缺血后适应通过调节反应性星形胶质细胞的可塑性改善小鼠缺血后脑组织的恢复

目的星形胶质细胞的可塑性改变可以在脑缺血急性期引起脑水肿,在缺血恢复期改变胶质瘢痕的形成。本实验研究远隔缺血后适应(RIPC)在脑缺血再灌注损伤中对星形胶质细胞可塑性调节。方法脑缺血被诱导通过C57小鼠大脑中动脉短暂性的阻断1 h,在再灌注即刻给予RIPC。结果 RIPC能降低小鼠脑缺血再灌注3 d、14 d大脑半球的水肿、梗死面积,减少脑萎缩,提高神经功能恢复和生存率。而且RIPC能调节星形胶质细胞亚型的比例,在小鼠脑缺血再灌注3 d和14 d,RIPC能降低缺血侧纤维型星形胶质细胞(GFAP)及增加原浆型星形胶质细胞(GS)的表达,并且能够下调GFAPα的水平和上调GFAPδ/GFAPα的比例来调节GFAP的亚型。结论RIPC治疗能调节反应性星形胶质细胞的可塑性,提高缺血后神经功能的恢复。