Parthenolide对急性单核细胞白血病细胞株THP-1增殖与凋亡影响的观察

目的:探讨Parthenolide(PN)对急性单核细胞白血病细胞株THP-1的细胞增殖作用及其可能的作用机制。方法:CCK-8法检测不同浓度处理的THP-1细胞的半数抑制浓度(IC50);以6μmol/L的PN作用于THP-1细胞,设正常细胞对照及DMSO溶剂对照,以RT-PCR检测各组细胞核因子κB(NF-κB)p65因子和阻遏物IκB的mRNA表达,以蛋白质印迹法检测p65和IκB全蛋白的表达及p65核蛋白的表达。结果:PN对THP-1细胞有增殖抑制作用,PN作用12h的IC50为8～10μmol/L,24h的IC50为6～8μmol/L;1～10μmol/LPN的抑制率随浓度的增加而加大,存在剂量-效应关系,最大抑制率12h为(69.56±2.52)%,24h为(68.20±2.04)%。6μmol/LPN作用于细胞24h,与两对照组相比,p65mRNA及总蛋白的表达差异无统计学意义,但核蛋白表达明显下降,P<0.05;IκBmRNA及总蛋白的表达均有明显上调,P<0.05。结论:PN可通过上调细胞IκB表达,阻滞p65由细胞质向细胞核转运,从而下调NF-κB通路活性,而抑制THP-1细胞的增殖。     

miRNA-126-3p调控人单核细胞白血病THP-1细胞的增殖和周期变化

目的探讨miRNA-126-3p(miR-126-3p)对人单核细胞白血病THP-1细胞增殖和周期的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-126-3p在THP-1细胞和从2022年5月至2023年1月山西省肿瘤医院收集的4名健康体检者外周血分离的单核细胞中的表达情况。构建过表达miR-126-3p载体, 转染THP-1细胞(过表达miR-126-3p组), 以转染空载体的THP-1细胞为对照。采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力, 采用流式细胞术检测细胞周期。应用TargetScan软件预测miR-126-3p靶基因为RGS3, 通过双荧光素酶报告基因实验进行验证。采用蛋白质印迹法检测过表达miR-126-3p组THP-1细胞RGS3蛋白表达水平。结果 PCR检测结果显示, 与健康人外周血分离的单核细胞相比, THP-1细胞miR-126-3p表达水平低(P<0.05)。与对照组比较, 过表达miR-126-3p组THP-1细胞在培养48 h和72 h后增殖能力均低(均P<0.05), 且细胞G1期阻滞[G1期细胞比例:(58.2±2.8)%比(44....     

邻苯二甲酸正丁酯对急性白血病原代细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨邻苯二甲酸正丁酯(DBP)对急性白血病患者骨髓原代白血病细胞增殖与凋亡的影响.方法应用体外液体悬浮培养观察细胞增殖;应用DNA片段凝胶电泳方法观察细胞凋亡;组间差异用t检验.结果DBP50μg/ml和200μg/ml处理24小时,对急性白血病原代细胞增殖抑制率分别为24.24%和36.33%,来自急性髓系白血病的原代细胞较急性淋巴细胞性白血病原代细胞对DBP抑制作用更敏感.DBP诱导白血病原代细胞凋亡,在DNA片段凝胶电泳时显示典型的细胞凋亡表现.结论 DBP可能通过抑制急性白血病细胞增殖和诱导其凋亡来发挥净化白血病骨髓的作用.     

干扰组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1基因对急性白血病HL-60和SHI-1细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨shRNA干扰组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1（LSD1）基因对急性白血病（AL）细胞增殖与凋亡的影响。方法构建慢病毒载体介导LSD1干扰的AL稳定细胞株HL-60和SHI-1,采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）和Western blot方法检测两细胞株LSD1抑制效果,通过四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖,采用流式细胞术检测细胞凋亡。结果 LSD1干扰后,HL-60和SHI-1细胞株的LSD1 mRNA和蛋白表达水平（mRNA：0.242±0.023、0.207±0.006,蛋白：0.256±0.015、0.486±0.042）较未经转染处理的空白对照组（mRNA：1.021±0.178、1.039±0.395,蛋白：0.552±0.026、0.754±0.060）和空载体阴性对照组（shNC组）（mRNA：0.935±0.136、1.016±0.203,蛋白：0.500±0.026、0.750±0.049）均下调（P＜0.05）,且细胞增殖水平（吸光度值分别为0.712±0.010、0.549±0.007）低于空白对照组（吸光度值分别为0.823±0.010、0.625±0.005）和shNC组（吸光度值分别为0.818±0.019、0.621±0.003）（P＜0.05）,而细胞凋亡率[（32.80±1.35）%、（23.49±1.40）%]高于空白对照组[（8.08±0.62）%、（7.28±1.17）%]和shNC组[（8.00±0.32）%、（7.19±0.65）%]（P＜0.05）。结论慢病毒载体介导的shRNA干扰LSD1使AL细胞株HL-60和SHI-1增殖受抑制,凋亡增加。 LSD1有可能成为AL的生物分子标志和治疗新靶点。     

科罗索酸对白血病K562细胞增殖和凋亡的影响

目的:探究科罗索酸（corosolic acid）对白血病K562细胞增殖和凋亡的影响。方法:使用不同浓度的科罗索酸处理K562细胞,CCK-8法检测对细胞增殖的影响,流式细胞术检测对细胞周期和凋亡的影响,分光光度法检测对Caspase-3/7,-8,-9活性的影响。结果:科罗索酸能显著抑制白血病K562细胞的增殖,并且这种抑制作用随着科罗索酸浓度升高和培养时间延长而显著增强。科罗索酸处理后的K562细胞中,处于G0/G1期的细胞比率明显升高（P＜0.05）,S期和G2/M期的细胞明显减少（P＜0.05）,凋亡细胞明显增多（P＜0.05）,Caspase-3/7,-8和-9的活性明显增强。结论:科罗索酸能抑制白血病K562细胞的增殖,促进其凋亡,这一效应可能与Caspase活性的增强有关。     

PTD4-GFP-Apoptin 融合蛋白对白血病细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究 PTD4-GFP-Apoptin 融合蛋白对不同类型白血病细胞的增殖抑制及诱导凋亡效应。方法用基因工程技术构建含有 PTD4-GFP-Apoptin 目的基因的重组载体,表达 PTD4-GFP-Apoptin融合蛋白,用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测其对白血病细胞增殖的影响,用流式细胞术（FCM）检测其对白血病细胞凋亡的影响。结果 PTD4-GFP-Apoptin 对不同类型的白血病细胞都有不同程度的增殖抑制效应,且抑制效应与作用的时间和浓度呈正相关;PTD4-GFP-Apoptin 对急性髓系白血病细胞株HL-60有诱导凋亡作用,其凋亡率与 PBS 对照组细胞相比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 PTD4能够携带大分子蛋白质穿过细胞膜,PTD4-GFP-Apoptin 在体外对多种白血病细胞有抑制增殖的作用;Apoptin 可诱导白血病细胞凋亡,而正常细胞不受影响,可能成为临床治疗白血病的新型药物。     

膀胱小细胞癌并发急性单核细胞白血病1例

1病案摘要 患者男性，83岁，因“无痛性全程血尿10月余”入院。入院后B超示膀胱实性低回声区，考虑膀胱癌，血常规示中度贫血，血细胞三系均下降，给予输浓缩红细胞、血浆各400ml及益血生胶囊口服，情况无改善，考虑与血尿有关。行膀胱镜下活检，术中所见：膀胱肿物呈菜花样突起，大小约1．5cm×1．5cm，位于膀胱顶部，周边呈浸润性生长。拟择期行手术治疗，继续给予输浓缩红细胞、血浆，血细胞三系有所上升，排除手术禁忌症，在腰麻-硬膜外联合麻醉（CSEA）下行膀胱部分切除术，术后给予吡柔比星10mg灌注5min。术后病理检查，肿物镜下示：平滑肌层内见大片的肿瘤细胞浸润，肿瘤细胞呈短梭形，大部分区域呈弥漫性分布，隐约可见巢片状、漩涡状及菊形团排列方式（均不典型），     

上调miRNA-145对肺癌细胞系A549增殖和凋亡的影响

目的探讨miRNA-145对肺癌细胞系A549增殖和凋亡能力的影响。方法采用实对荧光定量聚分酶链反应检测A549细胞中miRNA-145的表达,并将miRNA-145表达量上调(实验组)与空白对照组和阴性对照组比较,采用CCK8法检测并对比A549细胞增殖的改变。采用流式细胞仪检测并对比A549细胞周期以及凋亡的改变。结果 RT-PCR结果表明,侵染了miRNA-145过表达载体的A549细胞中miRNA-145水平明显高于阴性对照组及空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01);上调A549细胞中miRNA-145的表达量,可使A549细胞出现S期阻滞,凋亡增加、增殖减缓(P<0.05)。结论过表达miRNA-145能够抑制A549细胞的增殖并诱导A549细胞的凋亡,有可能为肺癌分子靶向治疗调控效应靶点作进一步探索研究。     

急性单核细胞白血病合并胃癌1例报告

白血病合并实体瘤多由治疗相关性放疗、化疗引起，而两种肿瘤同时发生较为罕见。本院血液科2003年收治1例急性单核细胞白血病同时合并胃癌患者，现报告如下。     

雷帕霉素对去甲氧柔红霉素诱导急性髓系白血病THP-1细胞凋亡的影响

目的:探讨雷帕霉素（Rapa）对去甲氧柔红霉素（IDA）诱导急性髓系白血病THP-1细胞凋亡的影响及其分子机制。方法:分别用10、20、40、80 nmol/L Rapa处理THP-1细胞1 h,另设未经Rapa处理的细胞。采用蛋白质印迹法检测THP-1细胞自噬标志物LC3蛋白的转换情况（LC3Ⅱ/LC3Ⅰ）,采用流式细胞术检测细胞凋亡,确定Rapa处理浓度。用不同浓度IDA作用THP-1细胞24 h,采用CCK-8法检测IDA对THP-1细胞的增殖抑制率,计算半数抑制浓度（ IC50）。以低于 IC50的IDA作用Rapa处理或未处理的THP-1细胞24 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡情况,实时荧光定量聚合酶链反应检测自噬相关基因Beclin-1、LC3和p62的表达变化,蛋白质印迹法检测自噬标志物LC3蛋白的转换情况。 结果:20 nmol/L Rapa处理的THP-1细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ高于未处理的细胞（ P=0.002 4）;80 nmol/L Rapa处理的细胞凋亡率高于未处理的细胞（ P=0.007 3）。根据蛋白质印迹法和流式细胞术检测结果,选取20 nmol/L Rapa作为预处理浓度。IDA对THP-1细胞作用24 h的 IC50为59.874 nmol/L。50 nmol/L IDA作用24 h后,Rapa预处理的THP-1细胞增殖抑制率[（69.67±5.03）%比（41.67±3.51）%]和细胞凋亡率[（74.35±4.83）%比（41.25±5.24）%]均高于未预处理的细胞（均 P<0.05）;Rapa预处理的THP-1细胞Beclin-1、LC3 mRNA表达水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ均高于未预处理的细胞,p62 mRNA表达水平低于未预处理的细胞（均 P<0.05）。 结论:Rapa能增强较低剂量IDA诱导的THP-1细胞凋亡,此效应可能是通过其引起THP-1细胞过度自噬实现的。     

Notch1基因表达对急性T淋巴细胞白血病SupT1细胞增殖、凋亡的影响及其机制

目的探讨Notch信号通路与急性T淋巴细胞白血病发生、发展的关系。方法利用携带Notch1特异性和非特异性shRNA的慢病毒载体包装成的病毒颗粒感染急性T淋巴细胞白血病SupT1细胞,采用CCK．8法检测细胞抑制率;采用流式细胞术检测细胞凋亡率（AnnexinV＋／7-AAD一和AnnexinV＋／7-AAD＋）;采用实时荧光定量PCR法检测Notch1受体基因及下游靶基因的表达水平。结果Notch1干扰组、空白对照组和空载体组96h的细胞增殖抑制率分别为0．902±0．013、0、0．486±0．084,干扰组较空白对照组、空载体组升高（均P〈0．05）;三组细胞早期凋亡率分别为（15．27±0．31）％、（5．57±0．25）％、（5．80±0．20）％,干扰组较空白对照组、空载体组升高（均P〈0．05）;而各组细胞晚期凋亡率无明显变化（均P〉0．05）。干扰组细胞中Notch1受体基因及其下游靶基因Hes1、c-myc、NF-κB在48、72、96h的mRNA相对表达量均较空白对照组及空载体组降低（均P〈0．05）。结论特异性Notch1-shRNA可有效下调Notch1mRNA的表达,并降低其下游靶基因的表达水平。Notch1表达下调可以抑制急性T淋巴细胞白血病SupT1细胞增殖,促进supT1细胞的早期凋亡。     

和厚朴酚对人急性白血病细胞株U937细胞增殖及凋亡的影响

 目的 探讨和厚朴酚在体外对人急性白血病细胞株U937细胞增殖及凋亡的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测和厚朴酚对细胞增殖的影响,Annexin V/PI双染检测细胞凋亡,RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Caspase 3、Caspase 8 和 Caspase 9基因的表达。结果 5 μg/ml的和厚朴酚作用48 h对U937细胞增殖即可表现抑制作用,10 μg/ml的和厚朴酚作用48 h对细胞的增殖抑制率高达50%以上,作用120 h可完全抑制细胞增殖。经10 μg/ml和厚朴酚处理的U937细胞凋亡率达到26.8% (P＜0.01)。10 μg/ml的和厚朴酚处理U937细胞后48 h,Bcl-2基因表达降低（对照组：0.33±0.02,实验组：0.14±0.01,P＜0.01）,Bax基因表达升高（对照组：0.1±0.01,实验组：0.87±0.08,P＜0.01）。Caspase 3（对照组：0.48±0.01,实验组：0.87±0.06,P＜0.01）、Caspase 8（对照组：0.23±0.02,实验组：0.41±0.07,P＜0.01）和Caspase 9（对照组：0.44±0.05,实验组：0.76±0.06,P＜0.01）基因表达均升高。Caspase 3活性为0.325±0.089,较对照组有显著地升高(P＜0.01.结论 和厚朴酚能明显抑制人急性白血病细胞株U937细胞增殖并引起细胞凋亡。其机制在于上调凋亡促进基因Bax的表达,下调凋亡抑制基因Bcl 2的表达,并且内源性和外源性途径均参与了凋亡过程。     

雷公藤甲素对急性髓系白血病伴FMS样酪氨酸激酶3内部串联重复细胞株MV411增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的 探讨雷公藤甲素(TP)对急性髓系白血病伴FMS样酪氨酸激酶3内部串联重复(FLT3-ITD)的细胞株MV411增殖和凋亡的影响,及其对PI3K-Akt-mTOR通路的作用.方法 四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度TP作用24、48、72 h时MV411细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测48、72 h的细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测PI3K-Akt-mTOR通路相关基因FLT3、PTEN、PI3K、Akt、mTOR mRNA的表达.结果0、5、10、20、40、80 nmol/L TP作用24、48、72 h,MV411细胞增殖受到抑制,呈现时间-剂量依赖性.0、10、20 nmol/L TP作用48 h后,MV411细胞平均早期凋亡率分别为(3.30±0.20)%、(17.10±0.36)%、(35.67±0.61)%,作用72 h后分别为(7.37±0.32)%、(49.33±0.40)%、(68.92±0.11)%,同一时间各浓度组间差异均有统计学意义(均P=0.000).TP能明显降低FLT3、PI3K、Akt、mTOR mRNA的表达,升高PTEN mRNA的表达.结论TP可能通过影响PI3K-Akt-mTOR通路相关基因的表达发挥抑制MV411细胞增殖、诱导其凋亡的作用.     

粒细胞集落刺激因子影响白血病细胞增生的研究

 目的 探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对急性白血病（AL）细胞增生的影响。方法 急性髓系白血病（AML）患者30例,急性淋巴细胞白血病（ALL）患者20例,正常对照20例。化疗前留取骨髓5 ml,制备其单个核细胞（MNC）悬液,并分别加入不同浓度G-CSF培养24 h后用流式细胞仪（FCM）检测其DNA倍体的量。同时检测MNC的G-CSF受体（G-CSFR）表达率。结果 骨髓MNC培养24 h后各浓度的DNA倍体量在AML随着G-CSF浓度的增加有线性上升趋势,在ALL和正常对照呈直线。骨髓MNC G-CSFR表达率AML（68.59±13.99）%;ALL（1.90±0.93）%;正常对照（70.50±10.80）%。结论 G-CSF 可促进AML细胞增生,对ALL和正常粒细胞增生无促进作用。G-CSFR于恶性及正常粒细胞表达,淋巴细胞不表达。     

雷公藤红素体外抑制人类急性髓系白血病细胞的实验研究

 目的　研究雷公藤红素体外对人类急性髓系白血病（AML）细胞的体外抑制作用。方法　应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和流式细胞术（FCM）等方法研究雷公藤红素对人类AML细胞的影响。结果　MTT实验显示,与空白组比较,培养不同时间后不同浓度组雷公藤红素的细胞增殖抑制率均明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）。FCM检测结果显示,1 μmol／L以上浓度雷公藤红素作用不同时间,AML细胞均可出现凋亡现象,凋亡率明显高于不加药物的对照组（P＜0.01）。结论　雷公藤红素对AML有明显的抑制作用,其作用可能与其诱导细胞凋亡有关。     

骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病细胞遗传学特征研究

 【摘要】　目的　分析骨髓增生异常综合征（MDS）和急性粒-单核细胞白血病[急性髓系白血病（AML）-M4]、急性单核细胞白血病（AML-M5）患者的细胞遗传学特征。方法　采用骨髓细胞短期培养法,结合R显带技术对100例AML-M4、46例AML-M5与115例MDS患者进行细胞遗传学特征分析。结果　有26 %（26／100）AML-M4患者发生了克隆性细胞遗传学异常,常见的异常为+8、t（8;21）、-7;有26 %（12／46）AML-M5患者发生了克隆性细胞遗传学异常,常见的异常为+11;39 %（45／115）MDS患者发生了细胞遗传学异常,常见的异常为+8、亚二倍体、-7。结论　对MDS和AML患者进行细胞遗传学特征的分析对于其诊断具有重要的价值。