调节性T细胞及Th1/Th2细胞因子在急性白血病中的表达及意义

目的:探讨调节性T细胞（Tregs）及Th1/Th2型细胞因子在急性白血病发病中的作用。方法:采用流式细胞术检测37例急性白血病患者［包括急性髓细胞性白血病（acute myeloid leukemia,AML）24例,急性淋巴细胞白血病（acute lymphocytic leukemia,ALL）13例］及28例健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tregs的比例,酶联免疫吸附法（ELISA）法检测血浆IL-2、IFN-γ、IL-10、IL-4和TGF-β水平。结果:AML和ALL患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tregs比例均高于健康对照组 (P＜0.05);AML及ALL患者血浆IL-4、IL-10和TGF-β水平均较健康对照组升高 (P＜0.05);IFN-γ水平较健康对照组降低 (P＜0.05);IL-2水平与健康对照组比较无明显差异 (P＞0.05)。结论:Tregs与Th1/Th2细胞因子同时参与了急性白血病的发生;急性白血病患者机体Th1/Th2细胞因子失衡,Th2占优势状态,这可能是导致急性白血病细胞免疫逃逸的原因之一;Tregs可能通过影响Th1/Th2细胞因子平衡参与急性白血病的发病。     

Th1／Th2类细胞因子在卵巢癌患者检测的意义

 目的 探讨卵巢癌患者血浆中Th1／Th2类细胞因子的变化及其临床意义。方法 用流式细胞微球芯片捕获技术检测34例卵巢癌患者及14例健康妇女血浆中IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10水平。结果 卵巢癌患者较健康妇女血浆中IL-2、IFN-γ、TNF-α水平明显降低，而IL-4、IL-6、IL-10明显升高（其中IL-10升高无统计学意义），且这种变化随临床期别的升高更加明显。结论 卵巢癌患者外周血中Th1／Th2类细胞因子平衡失调，检测Th1／Th2类细胞因子可作为评价卵巢癌临床进展及预后指标。     

利妥昔单抗治疗前后弥漫大B细胞淋巴瘤患者Th17细胞及相关细胞因子的变化

 【摘要】　  目的　了解弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者接受利妥昔单抗治疗前后Th17细胞及相关细胞因子的变化及其意义。方法　初治患者31例,化疗后患者60例（RCHOP组29例、CHOP组31例）,以20名体检健康者为健康对照组。采用流式细胞术检测各组外周血中Th17细胞比例,酶联免疫吸附法检测外周血相关细胞因子白细胞介素17（IL-17）、IL-21、IL-23、转化生长因子β （TGF-β）的表达水平。结果　初治组和CHOP-完全缓解（CR）组Th17细胞比例、IL-17、IL-21、IL-23水平分别为（0.67±0.21）%、（5.929±1.342）pg／ml、（130.632±17.945）pg／ml、（51.681±9.808）pg／ml和（1.07±0.37）%、（6.526±0.538）pg／ml、（132.119±7.700）pg／ml、（50.245±7.668）pg／ml,均低于对照组的（2.53±0.63）%、（8.435±2.031）pg／ml、（149.265±12.316）pg／ml、（55.303±7.778）pg／ml（P＜0.05）;初治组TGF-β水平为（370.615±98.444）pg／ml,显著高于对照组的（311.895±73.365）pg／ml（P＜0.05）。RCHOP-CR组Th17细胞比例、IL-17、IL-21、IL-23水平分别为（2.38±0.59）%、（7.724±0.780）pg／ml、（148.412±7.355）pg／ml、（55.668±7.532）pg／ml,均高于初治组和CHOP-CR组（P＜0.05）;RCHOP-CR组TGF-β水平为（283.904±59.223）pg／ml,低于CHOP-CR组的（341.481±95.597）pg／ml（P＜0.05）。结论　Th17细胞可能与DLBCL的发生发展呈负相关,IL-23水平降低和TGF-β水平升高可能抑制Th17细胞的分化;利妥昔单抗可提高DLBCL患者Th17细胞比例,且与化疗效果有关。     

非小细胞肺癌患者外周血Th17细胞比例和血清IL-17水平的检测及其临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血Th17细胞比例和自细胞介素-17(IL-17)水平的变化及其与患者临床病理的关系.方法 收集60例原发未治疗的NSCLC患者(NSCLC组)和20例健康志愿者(对照组),采用流式细胞术(FCM)检测Th17细胞比例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-17水平.结果 NSCLC组Th17细胞占CD+3 T细胞比例高于对照组[(1.23±0.41)％比(1.05±0.28)％,t=1.679,P=0.097],鳞状细胞癌患者外周血Th17细胞比例明显高于腺癌患者[(1.31±0.39)％比(1.09±0.41)％,t=2.093,P=0.041].NSCLC组IL-17水平明显高于健康对照组[(21.11±7.87) pg/ml比(17.64±5.07)pg/ml,t=2.280,P=0.027],鳞状细胞癌患者血清IL-17表达水平明显高于腺癌患者[(23.11±8.73) pg/ml比(18.54±6.38)pg/ml,t=2.203,P=0.032].Th17细胞比例、IL-17的表达水平随临床分期的进展呈下降趋势[F=3.151,P=0.032;F=4.132,P=0.010].结论 NSCLC患者外周血中Th17细胞比例和IL-17的表达与肿瘤病理分型、TNM分期相关,可能在NSCLC的病程中发挥重要作用.     

Th1/Th2类细胞因子检测在卵巢癌中的意义

目的探讨卵巢癌患者血浆中Th1／Th2类细胞因子的变化及其临床意义。方法用流式细胞微球芯片捕获技术检测34例卵巢癌患者及14例健康妇女血浆中IL-2，IFN-γ，TNF-α，IL-4，IL-6，IL-10水平。结果卵巢癌患者较健康妇女血浆中IL-2，IFN-γ，TNF-α水平明显降低，而IL-4，IL-6明显升高，且这种变化随临床期别的升高更加明显。结论卵巢癌患者外周血中Th1／Th2类细胞因子平衡失调，检测Th1／Th2类细胞因子可作为评价卵巢癌临床进展及预后指标。     

三阴性乳腺癌细胞免疫状态和 Th1/Th2细胞因子的变化

目的：探讨三阴性乳腺癌的细胞免疫状态和 Th1/ Th2细胞因子的变化。方法：比较46例三阴性乳腺癌患者和60例非三阴性乳腺癌患者的临床资料,分析三阴性乳腺癌组、非三阴性乳腺癌组和对照组的细胞免疫状态及 Th1/ Th2细胞因子的变化。结果：三阴性乳腺癌和非三阴性乳腺癌两组相比,在发病年龄、月经状况、临床分期、组织学分级情况没有统计学差异（P >0.05）;在淋巴结转移和内脏转移方面有统计学差异（P<0.05）。乳腺癌患者 CD3、CD4、CD19 T 细胞亚群无改变,CD8和 CD69水平有变化,但后两者在三阴性乳腺癌和非三阴性乳腺癌组中没有统计学差异（P >0.05）。乳腺癌患者 IL -2分泌减少,IL -6、IL -10分泌高,存在 Th2漂移。结论：三阴性乳腺癌转移风险高,预后差。乳腺癌存在 Th1/ Th2失衡,但三阴性乳腺癌和非三阴性乳腺癌相比,并没有明显的 Th2优势,说明三阴性乳腺癌发病机制具有更为复杂的生物学因素。     

人骨髓来源的间充质干细胞体外对外周血Th17细胞的调节作用

目的 探讨人骨髓来源的间充质干细胞(BMSC)在体外对外周血Th17细胞及IL-17的调节作用.方法 用淋巴细胞分离液以密度梯度离心法分离3例急性髓系白血病(AML)、3例急性淋巴细胞白血病(ALL)、1名健康人BMSC及健康人外周血单个核细胞(PBMC)并传代培养;酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中的IL-17;流式细胞术检测共培养的健康人外周血中Th17细胞所占百分比.结果 AML患者BMSC与健康人PBMC共培养后,上清中IL-17表达水平为(292.32±37.25) pg/ml,与健康人BMSC与PBMC共培养上清中的IL-17水平[(169.64±17.47)pg/ml]相比,差异有统计学意义(P＜ 0.01);ALL患者的BMSC与PBMC共培养后,上清中的IL-17表达水平为(159.89±23.71)pg/ml,与健康人BMSC与PBMC共培养上清的差异无统计学意义(P＞0.05).健康人、ALL和AML患者BMSC与健康人PBMC共培养体系中Th17细胞的百分比分别为(10.13±2.19)％、(13.77±4.04)％、(21.53±5.05)％,AML患者与健康人间差异有统计学意义(P＜0.01),ALL患者与健康人间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 AML患者BMSC促进外周血CD4+T细胞分化产生Th17细胞,AML患者BMSC可能在免疫抑制调节中发挥作用.     

JAK-STAT信号通路与骨髓增生异常综合征Th17/Treg细胞免疫失调相关性的研究

目的:研究骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome,MDS）患者外周血中Th17与Treg细胞比例及其相关细胞因子白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达及意义。方法:采用流式细胞术对健康对照组、初诊MDS患者、初诊急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者的外周血Th17细胞和Treg细胞进行检测,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测上述三组患者外周血IL-2、IL-6与TGF-β1分泌水平,应用RT-PCR和Western blot实验检测STAT3、STAT5 mRNA与蛋白表达水平。结果:与健康对照组相比,初诊MDS患者和AML患者外周血中Treg细胞比例增高（P＜0.05）,但MDS患者组与AML患者组之间没有明显差异（P＞0.05）,三组受试者之间Th17细胞比例无明显差异（P＞0.05）;与健康对照组相比,初诊MDS患者组IL-2表达明显升高（P＜0.05）,初诊AML患者组TGF-β1和IL-2表达均显著增加（P＜0.05）;而MDS患者组与AML患者组相比,TGF-β1、IL-6、IL-2表达水平均无明显差异（P＞0.05）;与健康对照组相比,初诊AML患者组、MDS患者组外周血中STAT5 mRNA与蛋白表达均明显增加（P＜0.05）,但两者之间无差异（P＞0.05）。结论:IL-2/STAT5信号通路可能调节初始Th细胞向Treg细胞转化的关键点,也支持Treg细胞数量增高与MDS的病情进展及其向白血病转化可能有关的论断。     

宫颈癌患者血清Th1、Th2细胞因子表达水平及意义

目的 探讨宫颈癌患者血清Th1、Th2细胞因子表达水平及意义.方法 选取宫颈癌患者94例(观察组),同时选取健康女性90例作为对照组,检测两组患者干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-4和IL-6.结果 观察组IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平分别为(52.13±9.55)pg/ml、(38.70±8.96)pg/ml、(27.61±6.22)pg/ml和(32.16±7.81)pg/ml,均高于对照组(P﹤0.05);Ⅲ~Ⅳ期患者IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平高于Ⅰ期和Ⅱ期患者(P﹤0.05),Ⅱ期患者IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平高于Ⅰ期患者(P﹤0.05);不同分化程度患者IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平比较差异无统计学意义(P﹥0.05),有无淋巴结转移患者IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平比较差异无统计学意义(P﹥0.05).结论 宫颈癌患者Th1/Th2细胞因子动态平衡紊乱,可能在肿瘤的发生发展中有一定作用.     

胸腺瘤合并重症肌无力患者Th17细胞检测及其临床意义

  目的  研究胸腺瘤合并重症肌无力患者Th17细胞检测及其临床意义。  方法  选取2015年10月至2017年10月天津医科大学总医院收治的78例胸腺瘤患者及15例正常对照患者,流式细胞术检测患者术前Th17细胞比例,检测外周血IL-17、IL-21及AchRAb水平,分析Th17及相应细胞因子的相关性,预测胸腺瘤合并重症肌无力的独立危险因素。  结果  MG组Th17为（10.33±1.28）%,Con组为（7.33±0.58）%、Tm组为（7.67±2.18）%,后两组与MG组相比,差异具有统计学意义（P < 0.001）;MG组患者IL-17为（18.05±7.23）pg/mL、IL-21为（180.67±16.17）pg/mL、AchR-Ab为（37.29±7.48）pmol/L,Con组IL-17为（7.45±3.46）pg/mL、IL-21为（84.33±5.13）pg/ mL、AchR-Ab为（15.23±3.32）pmol/L,Tm组IL-17为（8.22±1.67）pg/mL、IL-21为（93.00±7.21）pg/mL、AchR-Ab为（16.87±4.89）pmol/ L,后两组与MG组相比,上述指标差异均具有统计学意义（P < 0.001）;MG组患者Th17含量与IL-17（r=0.830,P < 0.001）、IL-21（r=0.734,P < 0.001）、AchR-Ab（r=0.809,P < 0.001）呈正相关;IL-17、IL-21与AchR-Ab是预测胸腺瘤合并MG的独立危险因素（P < 0.001）。  结论  Th17细胞参与了胸腺瘤合并MG的疾病发生发展过程,其通过分泌IL-21促进自身细胞增殖,并通过分泌IL-17对MG进行调控。      

急性髓系高白细胞白血病患者外周血白细胞介素-1β的表达及意义

 目的　检测白细胞介素-1β（IL-1β）在急性髓系白血病（AML）高白细胞患者外周血中的表达,探讨其在细胞淤滞及向组织浸润中的作用。方法　用酶联免疫吸附法（ELISA）测定83例初治AML患者（其中16例为高白细胞白血病患者）血清中IL-1β的含量,比较高白细胞组与非高白细胞组以及浸润组与非浸润组的差别。以40名健康献血员为对照。结果　AML组血清中IL-1β的含量[（88.23±36.30）pg／ml]高于健康对照组[（29.56±15.53）pg／ml],差异有统计学意义（P＜0.01）;AML高白细胞组血清中IL-1β含量显著高于非高白细胞组[（136.67±65.68）pg／ml比（69.85±48.35）pg／ml]。IL-1β与外周血白细胞呈直线相关关系（r＝0.74,P＜0.01）。浸润组与非浸润组血清中IL-1β水平为：（111.31±57.35）pg／ml比（79.68±43.42）pg／ml,差异有统计学意义。结论　AML患者血清IL-1β水平与其外周血白细胞数量有关,在一定程度上可反映疾病的病情,可能参与了白血病细胞组织浸润的机制。     

宫颈癌患者HPV感染状况及外周血Th1/Th2细胞因子变化研究

目的 探讨宫颈癌患者人乳头瘤病毒(HPV)感染状况及外周血Th1/Th2细胞因子变化,分析其在宫颈癌发生及发展中所起的可能机制,为宫颈癌的临床防治提供参考.方法 选取80例宫颈癌患者为研究对象(宫颈癌组),选取同期门诊体检的健康女性80例为对照(对照组),采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测宫颈HPV-DNA,...     

利妥昔单抗对弥漫大B细胞淋巴瘤患者Th17细胞及相关细胞因子影响的体外实验

目的 探讨利妥昔单抗对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者Th17细胞及相关细胞因子体外的影响及其意义.方法 DLBCL初治患者(DLBCL组)20例和健康对照者(健康对照组)20名,每个对象分别采集4份外周血标本,分离外周血单个核细胞(PBMC),按照培养条件的不同分成4个亚组:空白组(A亚组)、加入利妥昔单抗组(B亚组)、加入利妥昔单抗和血清组(C亚组)和极化组(D亚组)[加白细胞介素6(IL-6)和转化生长因子(TGF-β)].培养后分别采用流式细胞术检测各亚组外周血PBMC中Th17细胞比例,酶联免疫吸附法(ELISA)检测上述培养液中白细胞介素17(IL-17)的表达水平.结果 健康对照组中,D亚组的Th17细胞比例和IL-17水平分别为(17.12±4.90)％、(45.735±10.012)pg/ml,均高于A、B、C亚组(P＜0.05),A、B、C亚组之间比较差异均无统计学意义(P＞0.05).DLBCL组A亚组的Th17细胞比例及IL-17水平为(0.69±0.24)％、(6.012±1.312)pg/ml,均低于健康对照组A亚组的(2.43±0.61)％、(8.217± 1.681)pg/ml(P＜ 0.05);在与利妥昔单抗一起体外培养后,DLBCL组中B、C和D亚组的Th17细胞比例分别为(2.34±0.48)％、(2.31±0.53)％和(16.92±4.81)％,IL-17水平分别为(7.944±1.538) pg/ml、(7.957±1.533) pg/ml和(44.417±9.881) pg/ml,均高于A亚组,且D亚组明显高于B、C亚组(P＜0.05).B、C亚组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 体外实验证实,DLBCL患者外周血PBMC中Th17细胞比例低于健康人,利妥昔单抗作用于DLBCL患者外周血PBMC后可升高Th17细胞比例.     

维吾尔族宫颈癌患者 Th1／Th2型细胞因子表达水平及临床意义

目的：评估宫颈癌及癌前病变患者免疫水平，进一步探讨维吾尔族宫颈癌患者血浆中Th1／Th2型细胞因子表达水平及临床意义。方法本研究收集宫颈癌、癌前病变（ CIN Ⅲ）患者及对照组外周血标本，使用ELISA法检测血浆中Th1型细胞因子IL－2、IFN－γ及Th2型细胞因子IL－4、IL－10的表达水平，绘制ROC曲线分析四种细胞因子在宫颈癌辅助诊断中的价值。结果与对照组相比，宫颈癌和癌前病变组Th1型细胞因子IL－2、IFN－γ表达量显著降低（P＜0．05），Th2型细胞因子IL－4、IL－10表达量显著升高（P＜0．05）；在宫颈癌组中，IL－10表达量随肿瘤分期逐渐升高（P＜0．05）；维吾尔族宫颈癌患者血浆IL－2表达量较汉族患者显著降低（ P＜0．05）；在区分宫颈癌组与对照组中，IL－2、IFN－γ、IL－4和IL－10的AUC分别为0．979、0．766、0．736和0．903。结论宫颈癌患者细胞免疫水平低下，体内发生Th1／Th2漂移，提示这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸的机制之一，Th1／Th2型细胞因子的检测对宫颈癌的辅助诊断具有一定参考价值，此外IL－2表达量的下调可能在维吾尔族宫颈癌发生发展过程中起到重要作用。     

Th17 cells and interleukin‐17 increase with poor prognosis in patients with acute myeloid leukemia

Although Th17 cells play crucial roles in the pathogenesis of many autoimmune and inflammatory disorders, their roles in malignancies are currently under debate. The role and mechanism of Th17 cells in patients with acute myeloid leukemia (AML) remain poorly understood. Here we demonstrated that the frequency of Th17 cells was significantly increased in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and bone marrow mononuclear cells from AML patients compared with healthy donors. Plasma levels of interleukin (IL)‐17, IL‐22, IL‐23, IL‐1β, IL‐6, and transforming growth factor (TGF)‐β1 were significantly increased in blood and bone marrow in AML patients compared with healthy donors. The in vitro experiments demonstrated that IL‐1β, IL‐6, IL‐23, but not TGF‐β1 promoted the generation and differentiation of Th17 cells from naive CD4⁺ T cells in humans. IL‐17A, a signature cytokine secreted by Th17 cells, induced the proliferation of IL‐17 receptor (IL‐17R)‐positive AML cells via IL‐17R, in which activation of PI3K/Akt and Jak/Stat3 signaling pathway may play important roles. In addition, combination of IL‐17A and IL‐22 significantly reduced the generation of Th1 cells and the production of interferon (IFN)‐γ from healthy donor or AML patient peripheral blood mononuclear cells. Patients with high Th17 cell frequency had poor prognosis, whereas patients with high Th1 cell frequency had prolonged survival. Combined analysis of Th1 and Th17 cell frequencies improved the ability to predict patient outcomes. In conclusion, Th17 cells play a crucial role in the pathogenesis of AML and may be an important therapeutic target and prognostic predictor.     

高危型人乳头状瘤病毒载量和Th1/Th2不均衡表达预测宫颈癌变进程的研究

目的 比较高危型人乳头状瘤病毒载量(HR-HPV DNA)、Th1和Th2型细胞因子在不同宫颈局部微环境的表达差异, 探讨其预测宫颈癌变的可能性和意义。方法 将339例HR-HPV持续感染者分为宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌两组, 以HPV阴性且细胞学检查为正常宫颈的40例作为对照, 采用PCR荧光法和双抗体夹心ELISA法分别检测宫颈分泌物HPV-DNA以及Th1型细胞因子:白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)和Th2型细胞因子IL-4、IL-6、IL-10的表达水平, 以TNF-ɑ/IL-10比值作为衡量Th1/Th2免疫平衡的指标, 对数据资料进行单因素方差分析和多因素Logistic回归分析, 筛选宫颈癌预测指标。结果 单因素方差分析显示, HR-HPV DNA、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-ɑ、TNF-ɑ/IL-10在CIN和宫颈癌组均存在统计学差异(P＜0.05), 可以作为预测宫颈癌变的危险因素, 而多因素Logistic回归分析显示, 仅IL-10、IFN-γ、TNF-ɑ、TNF-ɑ/IL-10是宫颈癌发生的影响因素, 回归模型拟合优度检验Nagelkerke R²=0.982, 对CIN的预判率为99.5%, 宫颈癌的预判率为100.0%, 总的正判率为99.7%, 提示拟合效果好, 预测准确度高。结论 CINⅠ和CINⅡ有Th细胞因子的异常表达, 但不影响Th1/Th2平衡, CINⅢ阶段Th1/Th2失衡, Th2优势表达促进宫颈癌发生, 基于预测宫颈癌变的回归模型, 局部免疫失衡造成的宫颈免疫抑制微环境是HR-HPV持续感染和宫颈癌变的关键环节, 与HR-HPV DNA无关。