lncRNA TP53TG1在结肠癌中的表达及通过mi R-18a/CDC42轴对癌细胞发展的影响

目的:探讨lncRNA TP53TG1通过miR-18a/CDC42轴对SW620细胞发展的影响。方法:分析结肠癌组织、癌旁组织、SW620、NCM460细胞中lncRNA TP53TG1、miR-18a和CDC42的表达。检测下调TP53TG1对细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。采用生物信息学miRanda分析LncRNA TP53TG1作用靶点,检测TP53TG1和miR-18a的相关性。检测下调miR-18a或上调LncRNATP53TG1通过miR-18a对细胞增殖、侵袭和EMT的影响。TargetScan分析miR-18a靶点,检测miR-18a和CDC42之间的关系。分析CDC42 siRNA对细胞增殖、侵袭和EMT的影响。结果:和癌旁正常组织相比,结肠癌组织中lncRNA TP53TG1和CDC42表达上调,miR-18a表达下调;和NCM460细胞相比,SW620细胞中lncRNA TP53TG1和CDC42表达上调,miR-18a表达下调。lncRNA TP53 TG1 siRNA或CDC42 siRNA抑制细胞增殖、侵袭与EMT;lncRNA TP53T...     

阿司匹林预防小鼠结肠癌肝转移的作用及其机制

目的 探讨阿司匹林对结肠癌肝转移模型小鼠结肠癌肝转移的预防作用及其可能作用机制.方法 将20只BALB/c小鼠采用随机数字表法分成对照组和实验组,每组10只.对照组给予生理盐水灌胃0.2 mL/d,实验组给予阿司匹林灌胃30 μg/(g·d).两组小鼠灌胃60 d后使用结肠癌C26细胞采用脾脏种植且切除脾脏的方法建立小鼠结肠癌肝转移模型.模型建立成功后,实验组和对照组小鼠分别予以阿司匹林和生理盐水灌胃直到处死小鼠.建模后观察小鼠肝转移及生存情况.将结肠癌细胞系C26分为两组,对照组不作处理,实验组用10 mmoL/L阿司匹林处理24 h,分别对两组细胞进行划痕实验和Transwell实验,观察阿司匹林对C26细胞侵袭转移的影响;另外通过RT-PCR和Western blot检测两组细胞上皮间质转化(EMT)相关基因的表达.组间比较采用Student-t检验方法.Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存分析采用Log-rank检验.结果 对照组和实验组小鼠肝内转移瘤数目分别为(4.8±1.9)个和(2.6±1.6)个,肝脏荷瘤质量分别为(504±107) mg和(362±67) mg,两组比较,差异均有统计学意义(t=2.840,3.584,P＜0.05).实验组小鼠的1个月生存率为80％,与对照组的40％比较明显提高,差异有统计学意义(x2=4.418,P＜0.05).病理检查结果显示:实验组小鼠肝脏肿瘤细胞的数量和残存肿瘤细胞的异型性与对照组比较均减少.划痕实验结果显示:划痕24 h后,对照组C26细胞发生了明显的迁移,而与对照组比较,实验组未见细胞发生移动.Transwell法检测结果显示:对照组和实验组C26细胞穿膜细胞数分别为(253 ±21)个和(148±13)个,两组比较,差异有统计学意义(t=5.101,P＜0.05).RT-PCR法检测结果显示:对照组和实验组C26细胞中EMT相关基因E-cadherin mRNA相对表达量分别为0.002±0.001和0.005±0.001;波形蛋白分别为1.005±0.286和0.270±0.168,两组比较,差异均有统计学意义(t=-4.606,4.942,P＜0.05).Western blot法检测结果显示:对照组和实验组小鼠肝脏组织C26细胞中EMT相关基因E-cadherin蛋白相对表达量分别为0.473±0.179和1.585 ±0.410;波形蛋白分别为0.787±0.118和0.280 ±0.133,两组比较,差异均有统计学意义(t=-5.542,6.355,P＜0.05).结论 阿司匹林干预结肠癌肝转移模型小鼠,可抑制结肠癌细胞在肝内的种植转移,提高小鼠生存率.其可能作用机制是阿司匹林上调E-cadherin的表达水平,下调波形蛋白的表达水平,抑制了结肠癌细胞EMT的发生,从而减弱了肿瘤细胞的侵袭和转移.     

miR-711靶向下调CD44抑制胃癌干细胞干性特征的研究

目的 探讨miR-711对胃癌干细胞(gastric cancer stem cells,GCSCs)干性特征的影响及对CD44的靶向调控作用.方法 使用TCGA数据库验证miR-711在胃癌组织以及正常胃黏膜组织中的表达水平.选取人胃癌干细胞CSC-G和人胃癌细胞株MKN-45,对CSC-G细胞进行转染,分为miR-...     

Snail介导的EMT在上皮性卵巢癌组织中的作用

目的：检测Snail、E-cadherin及Vimentin在上皮性卵巢癌组织中的表达,探讨Snail介导的上皮间质转化（EMT）在卵巢癌发生、发展及转移中的作用。方法采用免疫组化法分别检测Snail、E-cadherin、Vimentin在48例卵巢浆液性腺癌、卵巢交界性浆液性肿瘤及卵巢浆液性腺瘤中的表达,探讨EMT相关因子表达强度的相关性及与临床病理特征之间的关系。结果（1）Snail、Vimentin在卵巢浆液性腺癌中的表达率为（68.75%/66.67%）,高于卵巢交界性浆液性腺瘤的（41.67%/37.50%）及卵巢浆液性腺瘤的（25.00%/18.75%）,结果均具有显著的统计学差异（P＜0.05）,E-cadherin在卵巢浆液性腺癌中的表达率为27.08%,低于与卵巢交界性浆液性腺瘤的54.17%及卵巢浆液性腺瘤的75.00%,结果均具有统计学差异（P＜0.05）。而卵巢交界性浆液性腺瘤组与卵巢浆液性腺瘤组比较,三种蛋白的表达均无统计学差异（P＞0.05）。（2）Snail、E-cadherin及Vimentin的表达高低与FIGO分期、分化级别、有无淋巴结转移及腹膜种植有关。（3）在卵巢浆液性腺癌中,Snail与Vimentin的表达呈正相关（r=0.477,P＜0.05）,Snail与E-cadherin的表达呈负相关（r=-0.601,P＜0.05）,而E-cadherin与Vimentin表达的相关性不明显（r=-0.206, P＞0.05）。结论在上皮性卵巢癌组织中,Snail、Vimentin表达上调,E-cadherin表达下调,提示Snail介导的EMT可能与卵巢癌的发生、发展及浸润转移有关。     

转化生长因子-β1对体外培养的人毛囊干细胞生物学特性的影响

目的 观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对体外培养的毛囊干细胞(HFSCs)生物学特性的影响.方法 体外分离培养人HFSCs,观察其在10-μg/L TGF-β1条件培养基下的细胞形态变化,噻唑蓝(MTT)比色法于24、48、72 h分别检测加入条件培养基前后细胞增殖能力,细胞接近铺满时划痕,并于0、24、48、72 h后用目镜测微尺测量划痕宽度检测迁移能力,将细胞接种于Transwell小室上层,下层加入含10 μg/L TGF-β1条件培养基,48 h后计数穿透细胞数,免疫荧光化学方法检测加入条件培养基前后角蛋白19、β-整合素、E钙黏蛋白、N钙黏蛋白、波形蛋白的表达.结果在TGF-β1作用下,HFSCs之间的紧密连接消失,细胞由圆形或多角形向梭形细胞转变,MTT结果显示,在TGF-β1作用下HFSCs各时间点A值与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),细胞划痕实验结果显示,TGF-β1能够促进细胞迁移,对照组差异有统计学意义(P<0.01).Transwell穿透实验结果表明,加入TGF-β1后,HFSCs细胞定向迁移穿透基底膜数量与对照组比较显著增多(47.9±8.8比35.8±6.7,P<0.01),免疫荧光结果显示TGF-β1能够降低角蛋白19、β-整合素和E钙黏蛋白表达,而N钙黏蛋白、波形蛋白的表达增加.结论 TGF-β1通过诱导体外培养的HFSCs上皮间质转化而促进其迁移.     

上皮间质转化在前列腺癌中的研究进展

前列腺癌（PCa）是一种最常见的恶性肿瘤,据2010年美国癌症协会估计每年新发病例在各种肿瘤中最多,死亡率仅次于肺癌。未发生远处转移的PCa患者的5年生存率已接近100％,但是,发生转移的PCa患者的预后很差。因此研究肿瘤转移的机制尤其是肿瘤细胞如何从原位脱离就显得非常重要。在本文中,我们将讨论目前最流行的转移机制上皮间质转化的作用及其在PCa转移中的潜在作用。我们也将进一步讨论了间质上皮转化及其在肿瘤转移中的作用,最后是两者的相互作用在肿瘤转移全过程中的作用。     

Neuropilins在肿瘤中的多功能作用机制

神经纤毛蛋白（NRPs）是一种调控胚胎组织发育、体内稳态以及癌症进展的跨膜糖蛋白。这篇综述讨论NRPs在各种癌症中的功能及其潜在机制,重点是NRPs在多功能细胞因子转化生长因子-β1（TGF-β1）信号传导途径、上皮-间质转化（EMT）、癌症干细胞（CSC）特性和药物抵抗调节中的作用,探讨NRPs调节作用如何促进细胞可塑性、肿瘤进展及转移。最后,讨论了NRPs在靶向治疗中的广泛应用前景。     

细胞核Snail因子在胰腺癌上皮-间质转化中的作用

目的：探讨细胞核因子Snail在胰腺癌组织中的表达及与胰腺癌上皮-间质转化（EMT）过程的相关性。 方法：采用免疫组织化学方法检测77例胰腺癌组织（研究组）与13例正常胰腺组织（对照组）中的Snail、Slug、E-cadherin、vimentin的表达。 结果：研究组中胰腺癌患者胰腺组织中Snail、Slug、E-cadherin、vimentin的表达阳性率为70.13%、68.83%、36.36%、72.73%。对照组13例正常胰腺组织中Snail、Slug均不表达,E-cadherin、vimentin的表达阳性率分别为92.31%、7.69%。胰腺癌组织中Snail表达与E-cadherin表达呈负相关（r=-0.225,P=0.025）,与vimentin表达呈正相关（r=0.493,P<0.01）;Slug表达与vimentin表达呈正相关（r=0.358,P=0.001）。Slug的表达与肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期有关、E-cadherin的表达与淋巴结的转移与肿瘤分化程度有关、vimentin的表达与淋巴结转移、肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期有关（均P<0.01）。 结论：Snail的高表达可能通过调控EMT过程在胰腺癌的发展过程中发挥作用,是胰腺癌浸润和转移的重要生物学指标。     

微小RNA-29b在肾小管上皮细胞的表达及调节上皮间质转分化的作用机制

目的研究血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)中微小核糖核酸(miRNA)-29b(miR-29b)表达的影响,以及miR-29b在细胞间质转分化中的作用,为研究肾间质纤维化机制提供新思路。方法体外培养NRK-52E,将不加入AngⅡ的细胞作为对照组,加入AngⅡ的细胞为实验组,按加入不同浓度的AngⅡ(10~(-9)mol/L、10~(-7)mol/L)及AngⅡ刺激时间(12 h、24 h、48 h)的长短又分为实验亚组,同时设立miR-29b mimic转染组及阴性对照组。显微镜下观察对照组与实验组细胞的形态学改变,运用实时荧光定量聚合酶链反应检测rniR-29b表达,蛋白质免疫印迹试验检测Snail、E钙黏附素(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)蛋白表达。两两比较用t检验。结果实验组中AngⅡ刺激12 h后,细胞形态呈梭形改变;随着AngⅡ刺激浓度的增加,α-SMA、Snail蛋白表达显著升高,E-cadherin表达量显著下降,与对照组相比,差异均有统计学意义(P0.05)。实验组中随着AngⅡ刺激时间的延长,细胞α-SMA、Snail和E-cadherin的表达呈时间依赖性,α-SMA、Snail的表达显著增加,E-cadherin表达量显著降低,与对照组相比,P0.05。同时AngⅡ呈浓度和时间依赖性下调NRK-52E细胞中miR-29b表达,与对照组相比,P0.05。此外,miR-29b mimic转染组和阴性对照组相比,α-SMA、Snail蛋白表达显著降低(P0.05),E-cadherin表达量显著升高(P0.05)。结论 AngⅡ可诱导NRK-52E细胞发生间质转分化,且miR-29b可抑制AngⅡ诱导的NRK-52E细胞发生间质转分化。     

骨髓来源间充质干细胞对胃癌细胞侵袭转移的影响及其机制探讨

目的 分析骨髓来源间充质干细胞(BM-MSCs)在胃癌细胞侵袭转移中的作用,并对其调控机制进行探讨.方法 首先将SGC7901和KATO-Ⅲ胃癌细胞分别与BM-MSCs共培养,Transwell实验检测其侵袭能力变化;其次从KATO-Ⅲ胃癌细胞中分选出CD133+和CD133-细胞,并分别与BM-MSCs共培养,比较其侵袭能力变化,并通过Western blotting检测共培养后胃癌细胞p-AKT和上皮间质转化(EMT)相关因子蛋白表达水平的变化及其与CD133表达间的关系;通过对SGC7901过表达CD133,进一步验证CD133在BM-MSCs影响胃癌细胞侵袭转移中的作用.采用SPSS 17.0统计软件进行分析,计数资料以均数±标准差((-x)±s)表示,行独立样本t检验.结果 SGC7901和KATO-Ⅲ细胞与BM-MSCs共培养后,胃癌细胞的侵袭能力均显著增强,与BM-MSCs共培养的KATO-ⅢCD133+细胞侵袭能力增加的趋势较共培养的CD133-细胞更加明显[(259.0±24.0)个比(58.0±5.6)个,P ＜0.001];CD133+细胞共培养后,p-AKT和Snail、N-cadherin的表达量均显著增高(P值分别为0.003 、0.003、0.002),E-cadherin的表达则低于单独培养组(P=0.021);CD133-细胞共培养后,E-cadherin的表达低于单独培养组(P =0.005),而p-AKT和Snail、N-cadherin的表达与单独培养组比较,差异无统计学意义(P值分别为0.744、0.277、0.275);SGC7901过表达CD133后与BM-MSCs共培养,其侵袭能力增加的趋势较共培养的空白载体对照组更加显著[(239.3±24.0)个比(103.3±15.5)个,P＜0.001],CD133过表达组细胞与BM-MSCs共培养后,p-AKT和Snail,N-cadherin表达水平均显著高于其单独培养组(P值均为0.01),E-cadherin的表达则显著降低(P=0.003);空白载体对照组细胞与BM-MSCs共培养后,Snail和N-cadherin的表达也显著增高(P =0.007,0.004),E-cadherin的表达显著降低(P =0.018),而p-AKT的表达未见明显变化(P=0.193).结论 BM-MSCs通过促进胃癌细胞的EMT进而增强其侵袭转移能力,CD133在该过程中可能是通过PI3 K/AKT信号通路参与对胃癌细胞EMT的调控.     

水平振摇在骨髓间充质干细胞提纯中的作用

目的研究水平振摇对全骨髓贴壁分离大鼠骨髓间充质干细胞在细胞数量、纯度、凋亡及远期增殖及分化能力的影响,探索更为简单、高效的间充质干细胞提纯方法。方法在全骨髓贴壁法的基础上,使用水平摇床,以180 r/min、4 h为干预条件,水平振摇后计算贴壁细胞总数量;使用流式细胞仪测定贴壁细胞纯度及凋亡情况;使用MTT法测定振摇后贴壁细胞24 h的增殖情况;对分离纯化后细胞使用定向诱导培养基进行诱导分化。结果经振摇处理后,获得的细胞总量有所下降,细胞纯度显著提升,凋亡略有增加,增殖情况变化不大,具有向成骨细胞和脂肪细胞分化的能力。结论水平振摇法可显著提高全骨髓贴壁法的提纯效率,具有推广价值。     

ERK1/2通路介导硫化氢在人骨髓间质干细胞对抗顺铂诱导损伤中的作用

 目的 探讨硫化氢在人骨髓间质干细胞（human marrow mesenchymal stem cells,HMMSCs）对抗顺铂诱导损伤中的作用及其机制。方法 0、5、10、20、40、60、80 mg/L顺铂分别作用HMMSCs 24 h;20 mg/L顺铂分别作用0、6、12、24、36、48 h;在20 mg/L顺铂作用24 h前分别用0、0.4、0.6、0.8、1.0 mmol/L的NaHS预处理30 min;0.6 mmol/L的NaHS预处理30 min前用ERK1/2通路抑制剂U0126处理30 min或用激动剂人上皮生长因子共同预处理30 min。检测细胞存活率、细胞凋亡率、磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）和总ERK1/2（t-ERK1/2）的表达。结果 5、10、20、40、60、80 mg/L顺铂作用后细胞存活率分别降至71.72%±2.72%、59.41%±5.44%、50.37%±4.55%、38.97%±2.92%、30.11%±4.64%、21.71%±5.35%,与0 mg/L组的差异有统计学意义;20 mg/L顺铂作用不同时间后细胞存活率分别降至70.30%±6.20%、61.63%±2.70%、51.29%±3.13%、38.72%±3.66%、27.57%±2.32%,与0 h组的差异有统计学意义;不同浓度NaHS预处理可使细胞存活率升高至65.99%±2.67%、72.93%±5.44%、75.10%±4.71%、76.56%±5.25%,与顺铂处理组的差异有统计学意义;0.6 mmol/L的NaHS预处理使细胞凋亡率从35.29%±2.77%下降至18.62%±0.97%;20 mg/L顺铂作用24 h使p-ERK1/2表达下调,NaHS预处理可抑制顺铂对p-ERK1/2表达的抑制作用。应用U0126或人上皮生长因子分别抑制或促进了NaHS的保护作用及上调p-ERK1/2表达的作用。结论 硫化氢预处理能通过激活HMMSCs的ERK1/2通路对抗顺铂诱导的细胞损伤。     

Smad4在TGF-β诱导人胆管癌细胞上皮-间质转化中的作用

目的 探讨Smad4在TGF-β诱导人胆管癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用.方法 用转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)处理RBE人胆管癌细胞系24h后,观察其形态变化,采用Western Blotting检测TGF-β1处理0h、12h、24h、48h后RBE细胞N-钙黏蛋白(N-cadherin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达.通过RNA干扰技术建立稳定干扰Smad4表达的细胞系,在无TGF-β1处理或TGF-β1处理24h后,观察Smad4干扰组与野生型组和空载体组细胞的形态差异,Western Blotting检测各组N-cadherin和E-cadherin的表达水平.结果 TGF-β1诱导RBE细胞的形态由上皮样向间质样转变,促进 N-cadherin表达增加和E-cadherin表达降低.在无TGF-β1处理时,Smad4干扰组细胞比野生型组和空载体组细胞的形态更趋于上皮样,E-cadherin表达水平也显著高于野生型组和空载体组(P＜0.05).在TGF-β1处理24h后,Smad4干扰组细胞形态的间质样变化程度、N-cadherin表达量明显低于野生型组和空载体组(P＜0.05);野生型组和空载体组细胞E-cadherin的表达缺失,而Smad4干扰组细胞仍表达较高水平的E-cadherin,两者间差异显著(P＜0.05).结论 TGF-β依赖Smad4介导人胆管癌细胞发生上皮-间质转化.     

CD44+-ESA+在结肠癌干细胞分选中的应用

目的 分选结肠癌细胞株SW480细胞中的CD133+-CD44+-ESA+亚群细胞,并观察其致瘤性.方法 用流式细胞仪分选SW480细胞中CD133+-CD44+-ESA+、CD133--CD44+-ESA+及CD133--CD44--ESA-亚群细胞.将这3组细胞分别接种于NOD/SCID小鼠,每组5只,观察肿瘤生长...     

腺病毒介导的NT-3基因在骨髓间质干细胞中的表达

目的:研究腺病毒介导的NT-3基因在培养的大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)中的表达.方法:在293细胞中培养扩增NT-3重组腺病毒(adenovirus vector for NT-3,Ad-NT-3),测定病毒滴度,然后用Ad-NT-3感染传代培养的MSCs,RT-PCR技术检测NT-3基因的表达.结果:Ad-NT-3扩增后获得了较高滴度的病毒,MSCs经Ad-NT-3感染后有NT-3 mRNA的转录.结论:腺病毒介导的NT-3基因可转入培养的MSCs并高效表达,为NT-3基因治疗的研究奠定了基础.     

EMT在胚胎发育及肿瘤发生过程中的生物学作用

上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)描述的是上皮细胞在与周围间质的相互作用过程中逐渐获得了某些间质细胞所特有的性状的现象。它不仅存在于多细胞生物的胚胎发生过程中,同时也存在于多种慢性疾病(如肾纤维化)的发病以及肿瘤的发展过程。它以上皮细胞极性的丧失及其间质特性(成纤维细胞样的外形,波形纤维蛋白、Snail、骨桥蛋白基因的表达)的获得为主要特征,并且与肿瘤细胞的原位侵袭和远隔转移有着密切的关系。本文综述了EMT的研究现状及其与肿瘤的发生、发展及预后的关系及表达情况,为EMT的深入研究做好铺垫。     

沉默 Notch-1 基因影响人膀胱癌 RT4 细胞生物学行为的体外实验研究

目的：研究沉默 Notch-1 基因对人膀胱癌 RT4 细胞增殖、凋亡、侵袭和上皮间质转化等生物学行为的影响。方法： 设计并构建 Notch-1 shRNA,选取 RT4 细胞作为研究对象分别进行转染。实验细胞分为 Notch-1 阴性对照组（shRNA NC）, Notch-1 干扰组（Notch-1 shRNA）。细胞转染 48 h 后,MTT 法检测细胞增殖水平变化;Transwell 检测细胞侵袭力的改变;流式细胞术检测细胞凋亡水平情况;RT-PCR 和 Western blot 检测凋亡相关蛋白（Bax、Bid、Bcl-2）及上皮间充质转化（EMT） 因子（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin）在 mRNA 和蛋白水平上的改变。结果：与 shRNA NC 组相比,Notch-1 shRNA 组细胞增殖率明显下降（t =4.629,P =0.010）,侵袭力减弱（t = 8.193,P=0.001）,细胞凋亡率明显升高（t= –18.441,P<0.001）,Bad（t = –12.521,P<0.001 ;t = –6.983,P =0.002）、Bid（t = –9.231,P<0.001 ;t= –8.871,P=0.001）、E-cadherin（t= –13.457,P<0.001 ;t= –5.610,P=0.005）mRNA 和蛋白表达量增多,Bcl2（t=10.651,P<0.001 ;t=6.973,P=0.002）、N-cadherin（t=6.505,P<0.001 ;t=10.132,P=0.001）、Vimentin（t=9.135,P<0.001 ;t =5.630,P =0.005）mRNA 和蛋白表达量显著降低。结论：沉默 Notch-1 的表达能够抑制人膀胱癌 RT4 细胞的增殖和侵袭迁移,促进其细胞凋亡,其机制可能与诱导 Bad、Bid、E-cadherin,抑制 Bcl2、N-cadherin、Vimentin 的表达有关。     

间充质干细胞在肾纤维化中的研究

随着肾脏疾病的进展,肾脏不可避免的出现纤维化,最终导致终末期肾病.虽然肾移植是治疗终末期肾脏病的有效措施,但肾源的不足及免疫排斥反应限制了肾移植的应用,为了克服这些问题,需要寻找一种新的治疗措施.间充质干细胞是目前广泛关注的一种成体干细胞,伴随着再生医学及间充质干细胞生物学特性的研究进展,有可能从间充质干细胞的角度找到治疗肾纤维化的理想措施.     

IL-6在猪肝细胞与骨髓间充质干细胞共培养中的作用

目的 探索IL-6在猪肝细胞与骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外共培养中的作用.方法 自中华实验猪髂前上棘抽取骨髓(3只),采用密度梯度离心法分离单个核细胞,贴壁传代培养至第3代;原位两步胶原酶法分离猪肝细胞后与MSCs按照2:1比例使用Millicell小室培养,检测共培养中肝细胞功能,观察IL-6、TNF-α、TGF-α的分泌水平变化.结果 肝细胞活率＞95%.共培养组肝细胞白蛋白分泌水平和尿素合成能力均显著高于单纯肝细胞组(P＜0.05).共培养组IL-6浓度显著高于对照组(P＜0.01).中和IL-6后共培养体系白蛋白、尿素合成水平明显下降(P＜0.01).结论 MSCs通过分泌IL-6改善共培养体系中肝细胞功能.     

干细胞niche在心脏干细胞稳态维持中的作用

目的综述干细胞niches(stem cell niches,SCNs)在心脏干细胞(cardiac stem cells,CSCs)稳态维持中的作用,并展望其应用前景。方法广泛查阅近十年来关于心脏SCNs(cardiac SCNs,CSCNs)的文献,分析其组成细胞、细胞外基质及分泌因子在CSCs稳态维持中的作用,并进行综述。结果研究表明,CSCNs能延缓CSCs老化,保护其不受外因损害,保持干性稳定,并提高纯净度和数量,但作用机制尚不完全清楚。结论 CSCNs在CSCs干性稳定的维持以及纯化、扩增方面具有良好应用前景,有待进一步深入研究。