荧光原位杂交在多发性骨髓瘤中的应用

多发性骨髓瘤(MM)是一种常见的浆细胞恶性肿瘤,重要的染色体异常导致MM进展,在MM中具有独立的预后判断价值.荧光原位杂交(FISH)检测技术不需要中期分裂相,可分析大量间期细胞,具有操作相对简单、重复性好、敏感性和特异性高的优点,在中期分裂相不易获得的MM中具有更突出的优势,可检测出与预后密切相关的累及基因位点的微缺失,异常克隆检出率显著提高,为MM的诊断、分型和预后提供理论依据,指导临床个体化治疗.     

多发性骨髓瘤中14q32易位与13q14缺失的相关性研究

目的 研究多发性骨髓瘤(MM)常见的分子遗传学异常14q32易位与13q14缺失及其与临床指标的关系.方法 采用间期荧光原位杂交(I-FISH)技术应用RB1、D13S319和LSI IGHC/IGHV探针检测49例MM患者骨髓标本中RB1基因、13q14.3缺失及14q32易位,结合临床资料作统计分析.结果 49例MM患者有26例(53.1%)检测到14q32易位,25例(51.02%)存在13q14缺失(其中18例检测到13q14.3缺失,9例存在RB1缺失).Spearman相关分析显示,14q32易位多见于浆细胞比例高的患者(r=0.316,P=0.27),与患者年龄、国际分期系统(ISS)分期、免疫球蛋白分型、β2微球蛋白及肾损害无相关性(P＞0.05).结论 13q14缺失及14q32相关的易位在MM中发生率均较高,两者有密切相关性;14q32易位的MM患者浆细胞百分比明显升高,14q32易位的检测可作为预测MM预后的指标.     

多发性骨髓瘤中14q32易位与13q14缺失的相关性研究

目的 研究多发性骨髓瘤(MM)常见的分子遗传学异常14q32易位与13q14缺失及其与临床指标的关系.方法 采用间期荧光原位杂交(I-FISH)技术应用RB1、D13S319和LSI IGHC/IGHV探针检测49例MM患者骨髓标本中RB1基因、13q14.3缺失及14q32易位,结合临床资料作统计分析.结果 49例MM患者有26例(53.1%)检测到14q32易位,25例(51.02%)存在13q14缺失(其中18例检测到13q14.3缺失,9例存在RB1缺失).Spearman相关分析显示,14q32易位多见于浆细胞比例高的患者(r=0.316,P=0.27),与患者年龄、国际分期系统(ISS)分期、免疫球蛋白分型、β2微球蛋白及肾损害无相关性(P＞0.05).结论 13q14缺失及14q32相关的易位在MM中发生率均较高,两者有密切相关性;14q32易位的MM患者浆细胞百分比明显升高,14q32易位的检测可作为预测MM预后的指标.     

多重荧光原位杂交在多发性骨髓瘤复杂核型异常检测中的应用

目的探讨多重荧光原位杂交(m u ltip lex fluorescence in s itu hybrid ization,M-F ISH)在多发性骨髓瘤(m u ltip le m ye lom a,MM)复杂核型异常(com p lex chrom osom a l aberrations,CCA s)检测中的价值。方法联合应用常规细胞遗传学(conven tiona l cytogenetics,CC)方法及M-F ISH分析2例伴有复杂核型的MM患者。结果M-F ISH证实了MM原有的异常染色体+5,+7,+9,-13,+15,de l(6)(q16q26),add(2)(p25),der(4)t(4;?)(p11;?),add(22)(q11),并确定了add(2)(p25),der(4)t(4;?)(p11;?),add(22)(q11)的具体来源;同时也发现了CC分析未能发现或不能识别的der(6)t(6;17)(q?;?),der(7)t(1;7)(?;q21)×2,de l(9)(q21),der(9)t(1;9)(?;q21),de l(16p12),充分显示了M-F ISH的优越性。结论M-F ISH对于检测MM的CCA s具有优势,是精确分析染色体核型不可缺少的技术。     

骨髓活检在多发性骨髓瘤诊断中的价值

目的:探讨骨髓活检在多发性骨髓瘤(MM)诊断中的价值.方法:同步观察多发性骨髓瘤26例患者骨髓涂片和活检塑料包埋切片.观察骨髓增生程度、浆细胞增殖模式及浸润程度.结果:MM患者骨髓造血组织在切片中的增生度明显高于涂片,两者差异有统计学意义(P<0.05).MM切片中浆细胞以簇片-间质型、结节-间质型、结节型及塞实型浸润为主,以结节出现为阳性诊断标准,其敏感性25例(96.1%) 明显高于涂片中浆细胞>15%的指标(76.9%).结论:骨髓活检能准确反映骨髓组织的增生程度、浆细胞浸润情况及增殖模式,对MM的诊断有重要价值.     

多发性骨髓瘤中14q32易位与13q14缺失的相关性研究

 目的　研究多发性骨髓瘤（MM）常见的分子遗传学异常14q32易位与13q14缺失及其与临床指标的关系。方法　采用间期荧光原位杂交（I-FISH）技术应用RB1、D13S319和LSI IGHC／IGHV探针检测49例MM患者骨髓标本中RB1基因、13q14.3缺失及14q32易位,结合临床资料作统计分析。结果　49例MM患者有26例（53.1 %）检测到14q32易位,25例（51.02 %）存在13q14缺失（其中18例检测到13q14.3缺失,9例存在RB1缺失）。Spearman相关分析显示,14q32易位多见于浆细胞比例高的患者（r＝0.316,P＝0.27）,与患者年龄、国际分期系统（ISS）分期、免疫球蛋白分型、β2微球蛋白及肾损害无相关性（P＞0.05）。结论　13q14缺失及14q32相关的易位在MM中发生率均较高,两者有密切相关性;14q32易位的MM患者浆细胞百分比明显升高,14q32易位的检测可作为预测MM预后的指标。     

应用荧光原位杂交技术检测多发性骨髓瘤

 目的　应用荧光原位杂交（FISH）技术检测多发性骨髓瘤（MM）常见基因异常。方法　采用1q21／RB1、D13S319／p53、IGH序列特异性基因探针,应用FISH技术对按照WHO诊断标准确诊的44例初诊MM患者进行检测,并与常规细胞遗传学技术（吉姆萨显带）检测结果及临床参数对比。结果　FISH技术检测44例初诊MM患者中32例（72.7 %）基因异常,其中1q21扩增11例（25.0 %）,RB1缺失17例（38.6 %）,D13S319缺失16例（36.4 %）,p53缺失6例（13.6 %）,IGH基因重排19例（43.2 %）。检出1种异常者10例（22.7 %）,同时有2种异常者11例（25.0 %）,3种异常者8例（18.2 %）,4种异常者3例（6.8 %）。44例应用常规吉姆萨显带检测16例无分裂象,28例有分裂象者中检出异常核型2例（7.14 %）,FISH技术基因异常检出率明显高于常规吉姆萨显带技术,差异有统计学意义（P＜0.05）。基因异常与临床参数比较结果显示,β2-微球蛋白（β2-MG）与IGH基因重排呈正相关（P＜0.05）,骨髓浆细胞数与D13S319缺失呈正相关（P＜0.05）,CRE与p53缺失及IGH基因重排呈正相关（P＜0.05）,CRP与p53缺失呈正相关（P＜0.05）。基因异常与MM分型、分期、年龄分组之间无明显相关性（P＞0.05）。结论　MM最常见的基因异常是IGH基因重排以及RB1和D13S319缺失,其次是1q21扩增,p53缺失最少。FISH可检测出与预后密切相关的累及基因位点的微缺失,异常克隆检出率较常规细胞遗传学技术显著提高,FISH可作为MM患者的常规检查,以评估预后,指导临床治疗。     

分析多发性骨髓瘤伴发淀粉样变患者实验室检查指标的变化特征

  目的  报道多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）伴发骨髓淀粉样变实验室指标特征，进一步分析MM伴发淀粉样变患者实验室检查指标的变化。  方法  临床诊断MM患者44例，骨髓涂片刚果红染色结合偏振光确定淀粉样变，将MM划分为淀粉样变阳性和阴性两组。分别对两组进行全血细胞、血清酶及免疫球蛋白含量测定。同时依据细胞形态学分析两组骨髓各系幼稚与成熟细胞及骨髓瘤细胞数量。  结果  MM发现骨髓淀粉样变阳性患者免疫标志物IgG含量明显低于阴性组，κ和λ含量均值有降低趋势，但是未见统计学差异。淀粉样变阳性患者血清LDH和LDH1活性明显高于阴性组，而PT、Alb、PA、Glo、血液RBC、WBC和PLT数量等指标无统计学差异。  结论  MM患者免疫球蛋白IgG含量降低及LHD和LDH1增高有可能作为辅助检查MM骨髓淀粉样变的标志物。      

91例初诊多发性骨髓瘤临床及实验室检查分析

目的 总结初诊多发性骨髓瘤（MM）的临床和有关实验室检查的特点。方法 对91例初诊MM患者的临床和实验摩资料作回顾性分析。结果 ①MM起病以骨痛和贫血最多见，IRG和IgA是最常见的免疫分型，占全部MM的83．5％。②本病起病隐匿．临床表现多样化。容易误诊。③大多异常的实验室检查结果无明显特异性。结论临床表现结合实验室相关指标检查，能够提高多发性骨髓瘤诊断的准确性．为临床诊断提供可靠依据。     

不同骨髓检查在淋巴瘤诊断中的价值

探讨3种骨髓检查方法（骨髓涂片、活检、流式细胞术分析）对淋巴瘤骨髓浸润的诊断及分期价值。方法：对74例患者进行3种方法的骨髓检查,评估不同方法的检出率、对分期的影响以及各亚型中骨髓浸润的风险。结果：骨髓涂片阳性者12例（16.2%）,骨髓活检阳性10例（13.5%）,流式细胞术分析阳性23例（31.1%）,流式细胞术分析的阳性率显著高于涂片和活检检查（P<0.05）;骨髓涂片、活检、流式细胞术分析可互相修正淋巴瘤患者的临床分期;弥漫大B细胞淋巴瘤亚型骨髓浸润比例最高;对于无淋巴结、肝脾肿大者,骨髓检查具有明确诊断的作用。结论：骨髓涂片、活检及流式细胞术分析对淋巴瘤有重要的诊断及分期价值,三者互为补充,不能相互替代。     

Allogeneic bone marrow transplantation in 24 patients with multiple myeloma reported to the EBMT registry

Twenty-four patients with multiple myeloma received an allogeneic bone-marrow graft from HLA-compatible sibling donors (n = 23), or a twin donor (n = 1). Eighteen patients are alive, 1-36 months post bone-marrow transplantation (median 14 months). Ten of these patients had no signs of multiple myeloma as judged by immunoglobulins in serum, light chains in urine, or the percentage of plasma-cells in bone-marrow aspirate. Bone lesions on X-ray were mainly unchanged. Six patients died from transplant-related complications 3 weeks to 5 months post transplantation. One of these patients had severe acute graft-versus-host disease (aGVHD). In other patients aGVHD was a minor problem. Allogeneic bone-marrow transplantation appears to be a promising method for treatment of a selected group of patients with multiple myeloma.     

CD28和CD117在初诊多发性骨髓瘤患者中的表达及其临床意义

目的探讨CD28和CD117在初诊多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达及其临床意义。方法回顾性分析2015年5月至2017年12月郑州大学第一附属医院115例初诊MM患者,多参数流式细胞术检测CD28和CD117表达,并分析二者与MM分期及临床参数的关系,分期根据国际分期系统(ISS)进行。结果 115例患者中,CD117阳性15例,CD28阳性30例。CD117阳性表达与红细胞沉降率(r=-0.481,P=0.039)、C反应蛋白水平(r=-0.314,P=0.015)、骨髓细胞学测定的浆细胞比例(r=-0.027,P=0.001)呈负相关。CD28阳性表达与乳酸脱氢酶水平(r=0.249,P=0.033)、ISS分期(r=0.319,P=0.017)呈正相关,与血红蛋白水平(r=-0.372,P=0.026)呈负相关。CD28阳性与轻链类型有关,以不分泌型常见(P=0.016)。CD28阳性组和CD117阳性组中溶骨性病变发生率较高,但与CD28阴性组和CD117阴性组比较,差异均无统计学意义(P值分别为0.052、0.479)。结论早期MM患者中CD117阳性表达水平高于晚期患者,而CD28阳性表达水平在晚期患者中高于早期患者,CD28和CD117有望成为初诊MM患者预后分层的指标。     

多发性骨髓瘤患者骨髓中Treg细胞与预后相关性研究

目的：检测多发性骨髓瘤（Multiple myeloma,MM）患者及正常人外周血和骨髓Treg细胞水平,评价MM患者骨髓微环境的免疫状态,以及免疫状态与疾病水平的相关性。方法采用流式细胞术检测45例MM患者外周血以及骨髓中Treg细胞水平,15例正常人外周血及骨髓中Treg细胞水平。以CD4^＋CD25high^＋细胞占CD4＋细胞的百分比代表Treg细胞水平。结果 MM患者外周血Treg细胞高于正常人外周血,MM患者骨髓中Treg细胞低于正常人骨髓,MM患者骨髓微环境中Treg细胞降低水平与浆细胞比例无关,而与疾病的预后相关,与β2-MG水平及ISS相关。结论 MM骨髓微环境中肿瘤诱导的免疫系统的改变是MM发病的原因之一,MM患者骨髓中Treg细胞降低比例与预后相关,而与肿瘤负担无关。     

Clinical significance of cytogenetics and interphase fluorescence in situ hybridization analysis in newly diagnosed multiple myeloma in Taiwan.

BACKGROUND: The incidence of multiple myeloma (MM) is lower in Asia than in Western countries. However, it is not known whether cytogenetic abnormalities (CA) characteristic of MM in Asia differ from those documented in the West. PATIENTS AND METHODS: We analyzed CA by conventional cytogenetics (CG) and/or fluorescence in situ hybridization (FISH), assessed their clinical significance in 150 Chinese MM patients and compared our data with that derived from Western countries. RESULTS: CA were detected by CG (CG_CA) in 44 (29.3%) of the 150 patients and by FISH (FISH_CA) in 59 (67%) of the 88 patients studied. Presence of either CG_CA or FISH_CA was associated with a poor prognosis. Patients with CG_CA and hyperdiploid chromosomes, always associated with several trisomies, had a longer survival (median 25 months versus 12 months; P=0.025) in comparison with those with non-hyperdiploid chromosomes, usually associated with a monosomy 13/partial deletion of 13q (Delta13) and a rearrangement of 14q32. A novel recurrent CG_CA, add(19)(p13), was found in four patients: all males with immunoglobulin G/lambda isotypes, extramedullary myeloma at diagnosis and a poor prognosis. Three groups of patients with significantly different survival, CG_Delta13, FISH_Delta13 but without CG_Delta13, and neither CG_Delta13 nor FISH_Delta13 (median 9 versus 15 versus 32 months; P=0.013) were identified. CONCLUSIONS: We conclude that MM CA in our patients are similar to those noted in Western countries, and that combined CG and FISH analysis can predict prognosis. The clinical significance of add(19)(p13) needs to be further investigated.     

初发多发性骨髓瘤的治疗进展

多发性骨髓瘤（MM）是一种恶性浆细胞肿瘤。MM患者大多数年龄超过65岁,目前认为65岁以下初发MM患者的标准治疗为大剂量美法仑化疗支持的自体干细胞移植（ASCT）,而65岁以上老年MM患者的标准治疗至今仍认为是口服美法仑和泼尼松（MP）方案。但是一些新药的发明,如沙利度胺、雷利度胺和蛋白酶体抑制剂硼替佐米,能针对骨髓瘤细胞和骨髓微环境进行靶向治疗,联合使用在很大程度上能提高以往化疗方案的临床疗效。     

13号染色体、p53基因缺失与多发性骨髓瘤的相关性研究

 目的　分析13号染色体、p53基因缺失与多发性骨髓瘤（MM）患者临床特点、治疗效果和生存期的相关性。方法　采用荧光原位杂交（FISH）技术检测22例MM患者del 13q14（RB1基因缺失）、p53基因缺失的情况,收集其临床资料,比较基因缺失组与基因正常组间的差异。结果　22例患者中,9例（40.9 %）为p53基因缺失,其中Ⅰ期0例,Ⅱ期2例（40.0 %）,Ⅲ期7例（50.0 %）。8例（36.4 %）患者为RB1基因缺失,其中Ⅰ期0例,Ⅱ期3例（60.0 %）,Ⅲ期5例（35.7 %）。基因缺失组与基因正常组比较,患者的年龄、性别、分型、分期、肾功能、血细胞计数、C反应蛋白（CRP）、乳酸脱氢酶（LDH）、血钙均无差异。但初诊时骨髓瘤细胞比例,p53基因正常组明显高于缺失组（P＝0.043）。22例患者治疗后共获得CR 5例,非常好的部分缓解（VGPR）7例,PR 6例,无效4例,总有效率为81.8 %。p53基因缺失组与正常组平均生存时间分别为11和47个月（P＝0.086）。RB1基因缺失组和正常组平均生存时间分别为14.9和43.3个月（P＝0.612）。2个基因均缺失组与正常组相比,平均生存期分别为9.4和45.4个月（P＝0.13）。结论　细胞遗传学的异常与MM患者的生存期具有显著的相关性。对于具有与不良预后相关的染色体异常的患者,传统化疗效果较差,应给予硼替佐米等新药治疗。     

Positive correlation between bone marrow mast cell density and ISS prognostic index in patients with multiple myeloma

We evaluated mast cell density (MCD) in myeloma bone marrow biopsies and correlated it with stage of disease and markers of angiogenesis. Fifty-three untreated myeloma patients and 28 of them responded to therapy were studied. Mast cells were highlighted using immunohistochemical stain for tryptase. Angiogenesis was evaluated measuring microvascular density and serum levels of basic-fibroblast growth factor and tumor necrosis factor-alpha. MCD was higher in untreated patients, compared to healthy population and responders. Significant association was found between MCD with angiogenesis and clinical stage of disease, suggesting that mast cells could be used as target for myeloma treatment.