转录因子GATA—2基因在ANLL、CML和MDS中的表达

目的：了解GATA－2基因在急性非淋巴细胞白血病（ANLL）、慢性粒细胞白血病（CML）和骨髓增生异常综合征（MDS）中的表达情况。方法：利用RT－PCR扩增ANLL、CML和MDS等246例患者外周血单个核细胞中GATA－2基因。结果：GATA－2基因在ANLL、CML和MDS中的表达率分别为88．4％、81．6％和97％,差异与正常人有高度显著性（P＜0．01）,结论：绝大多数髓系白血病和MDS标本表达GATA－2基因,GATA－2可能是白血病细胞的增殖过程中所需要的转录因子之一。     

哮喘患者外周血中调节性T细胞GATA3及调节因子PIM2的表达和临床意义

目的：探究哮喘患者外周血中调节性 T 细胞特异性转录 GATA3及其调节因子 PIM2的表达。方法本研究纳入来自上海交通大学医学院附属瑞金医院的哮喘患者32例作为哮喘组,健康志愿者22名作为健康对照组。采用流式细胞术检测外周血中调节性 T 细胞表达 GATA3的水平;采用流式分选技术分选出外周血中调节性 T 细胞后,利用细胞免疫组化技术测定调节性 T 细胞内 PIM2的表达水平。结果哮喘组和健康对照组中 GATA3+ Treg/Treg%分别为(9.40±0.94)%,(5.37±0.33)%,哮喘组较健康对照组升高,差异有统计学意义(P <0.01)。将哮喘组中间歇轻度组和中重度组分别为(9.33±4.17)%和(9.51±6.84)%,较健康对照组均升高(P <0.01,P <0.05),而间歇轻度组与中重度组差异无统计学意义(P >0.05)。哮喘患者外周血中 GATA3+ Treg/Treg%与FEV1%pred 存在负相关(r =-0.85,P <0.05)。在哮喘组(n =12)中,PIM2的表达水平为(2011.00±524.00)IOD,而健康对照组(n =8)中 PIM2的表达水平为(202.00±34.24)IOD,差异具有统计学意义(P <0.01)。结论哮喘患者外周血中调节性 T 细胞表达 GATA3、PIM2增多,推测 PIM2的增多使得 GATA3的表达上调,从而使得哮喘患者中调节性 T 细胞的功能发生改变。     

特发性房颤相关GATA5基因新突变的识别

目的:识别特发性房颤(AF)相关GATA5基因新突变. 方法:收集120例无血缘关系的特发性AF患者和200名无血缘关系且种族匹配的健康对照者的临床资料和血标本.抽提基因组DNA,通过聚合酶链反应扩增AF候选基因GATA5的全部外显子及其两侧的部分内含子,采用双脱氧核苷链末端合成终止法对全部扩增片段进行测序.将所测的序列与GenBank数据库中的GATA5基因序列进行比对,以发现GATA5基因突变.应用多序列比对软件ClustalW评估突变氨基酸的保守性,应用致病性预测软件MutationTaster预测突变的致病性. 结果:在2例AF患者各发现1个新的GATA5基因杂合错义突变,突变率约为1.67％.突变分别为GATA5基因编码核苷酸序列第668位的腺嘌呤(adenine,A)变为胸腺嘧啶(thymine,T),即c.668A＞T突变；第863位的A变为胞嘧啶(cytosine,C),即c.863A＞C突变.多序列比对显示2种突变氨基酸在进化上均高度保守,致病性预测表明2种突变均有致病性. 结论:本研究识别出AF相关GATA5基因新突变,有助于揭示AF发生的分子机制.     

先天性心脏病相关GATA5基因突变研究

目的:识别先天性心脏病(CHD)相关GATA5基因新突变。方法:收集100例无血缘关系的CHD患者和200名无血缘关系且种族匹配的健康对照者的临床资料和血标本。抽提基因组DNA,通过聚合酶链反应扩增GATA5基因的编码外显子及其剪接位点,采用双脱氧核苷链末端合成终止法对全部扩增片段进行测序。将所测的序列与GenBank数据库中的GATA5基因序列进行比对以发现GATA5基因突变。应用多序列比对软件ClustalW评估突变氨基酸的保守性,应用致病性预测软件MutationTaster预测突变的致病性。结果:在2例CHD患者各发现1个新的GATA5基因杂合错义突变,突变率为2%。其中1个是GATA5基因编码核苷酸序列第395位的鸟嘌呤(guanine,G)变为胸腺嘧啶(thymine,T),即c.395G>T突变;另一个是GATA5基因编码核苷酸序列第991位的胞嘧啶(cytosine,C)变为腺嘌呤(adenine,A),即c.991C>A突变。多序列比对显示2种突变氨基酸在进化上均高度保守。致病性预测显示2种突变均有致病性。结论:本研究发现了CHD相关GATA5基因新突变,有助于揭示CHD新的分子机制。     

GATA3基因变异导致甲状旁腺功能减退症患者的临床特征和分子机制

目的分析GATA3基因变异导致甲状旁腺功能减退症(hypoparathyroidism, HP)患者的临床特点及分子机制。方法在1975年至2020年间于北京协和医院内分泌科随诊并行靶向基因捕获联合二代测序的198例未成年人(≤18岁)起病的非手术性HP患者中筛查到5例GATA3基因致病/可疑致病性变异, 回顾性收集分析其临床资料, 并对基因检测结果进行生物信息学分析。结果 5例患者HP的起病年龄为0.5(0.1, 1.3)岁, 发病至诊断为HP和甲状旁腺功能减退-耳聋-肾发育不良(hypoparathyroidism-deafness-renal dysplasia, HDR)综合征的时间分别为(7.0±5.2)年和(15.0±5.4)年。临床表现为手足搐搦伴癫痫样发作、颅内钙化各5例, 白内障1例, 听力减退4例, 肾脏畸形或缺如2例。治疗前血钙和血甲状旁腺激素(PTH)分别为(1.65±0.31)mmol/L和(4.64±2.63)ng/L。5例患者GATA3基因的杂合变异, 分别引起无义突变、移码突变和剪接位点突变, 经Clin Var数据库预测及美国医学遗传学和基因组学学会(...     

中国儿童急性淋巴细胞白血病GATA3基因单核苷酸多态性与预后的相关性研究

目的 研究中国儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿GATA3基因单核苷酸多态性(SNP)分布特点及其对预后的影响.方法 利用TaqMan探针荧光定量PCR法检测上海儿童医学中心2009-05～2014-12收治的678例ALL患者GATA3基因rs3781093和rs3824662两个SNP位点,分析其与早期治疗反应、...     

鼻腔滴入IFN-γ对AR大鼠鼻腔黏膜中GATA-3表达的影响及意义

目的 探讨鼻腔吸入IFN-γ对大鼠变应性鼻炎(AR)的治疗作用及其机制. 方法将32只大鼠随机分为四组,各8只.A组为阴性对照组.B、C、D组采用卵清蛋白、氢氧化铝建立大鼠AR模型,B组为阳性对照组、C组为IFN-γ治疗组、D组为丙酸倍氯米松治疗对照组.B、C、D组于模型建立后第31～38天,每只每日每侧鼻腔分别滴入PBS 50 μl、IFN-γ 1μg和丙酸倍氯米松3.5 μg.第39 天取鼻腔黏膜,观察鼻腔组织病理学改变,用免疫组化SP法检测转录因子GATA3. 结果与A组相比,B组鼻黏膜充血、水肿,黏膜层增厚,有嗜酸细胞为主的炎性细胞浸润,GATA3表达增加;C、D组上述炎性改变明显减轻,鼻黏膜中GATA3表达减少. 结论鼻腔滴入IFN-γ治疗AR可能与阻断GATA3表达,从而继发抑制Th2型反应有关.     

GATA6在胰岛素瘤中的表达及与胰岛素瘤细胞增殖和凋亡的关系

目的 探究锌指转录因子GATA6在胰岛素瘤中的表达及与胰岛素瘤细胞增殖和凋亡的关系。方法 收集2009年1月至2014年9月于上海交通大学附属第六人民医院确诊的3例胰岛素瘤患者的瘤体及其相应瘤旁组织,应用蛋白印迹法（Western blotting）检测GATA6在胰岛素瘤瘤体及瘤旁的表达差异。另外收集正常胰腺组织标本2例,免疫荧光法观察GATA6在胰岛素瘤组织及正常胰腺组织中的表达及定位。培养小鼠胰岛素瘤细胞系MIN6细胞,小干扰RNA（siRNA）干扰GATA6表达后,用流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期的变化。结果 胰岛素瘤瘤体组织GATA6表达水平较瘤旁组织异常升高（P＜0.05）;免疫荧光法显示胰岛素瘤正常胰岛结构丧失,GATA6主要位于胰岛素瘤细胞的细胞核中,在胰岛素瘤中大量表达,在正常胰岛β细胞中少量表达。沉默GATA6表达后胰岛素瘤细胞凋亡显著增加（P＜0.05）,且细胞增殖受抑制（P＜0.05）。结论 GATA6在胰岛素瘤中异常高表达,与胰岛素瘤细胞增殖凋亡关系密切,提示GATA6可能在胰岛素瘤的发病机制中起重要的作用。     

鼻腔滴人IFN-γ对AR大鼠鼻腔黏膜中GATA-3表达的影响及意义

目的 探讨鼻腔吸入IFN-γ对大鼠变应性鼻炎（AR）的治疗作用及其机制。方法将32只大鼠随机分为四组,各8只.A组为阴性对照组。B、C、D组采用卵清蛋白、氢氧化铝建立大鼠AR模型,B组为阳性对照组、C组为IFN-γ,治疗组、D组为丙酸倍氯米松治疗对照组。B、C、D组于模型建立后第31～38天,每只每日每侧鼻腔分别滴入PBS 50μ1、IFN-γ 1μg 和丙酸倍氯米松3．5μg。第39天取鼻腔黏膜,观察鼻腔组织病理学改变,用免疫组化SP法检测转录因子GATA3。结果与A组相比,B组鼻黏膜充血、水肿,黏膜层增厚,有嗜酸细胞为主的炎性细胞浸润,GATA3表达增加;C、D组上述炎性改变明显减轻,鼻黏膜中GATA3表达减少。结论鼻腔滴入IFN-γ治疗AR可能与阻断GATA3表达,从而继发抑制Th2型反应有关。     

食管癌GATA基因家族高甲基化研究

背景 GATA转录因子家族在胚胎发育时期能够促进胃肠道的正常发育，并有助于在成年肠上皮的不断更新中调节组织分化，最近有报道在人胃肠肿瘤中GATA基因，即GATA—4，GATA—5的表达缺失。目的 探讨在食管肿瘤中渐进性的转录沉默而导致GATA相关基因表达缺失的情况。方法 用RT—PCR法检测GATA—4，—5，—6基因在17个食管鳞癌细胞系中的表达，从每个细胞系及88例原发性食管肿瘤标本中提取DNA，进行甲基化特异性PCR(methylation—specific PCR，MSP)，以检测GATA相关基因增强子区的甲基化情况，用5—aza—2’—deoxycytidine c5—aza—dc)在去甲基化的细胞系中进行检测GATA—4，—5基因的表达与增强子甲基化之间的关系，并对GATA增强子区进行亚硫酸氢盐测序以证实MSP的结果。结果 GATA—4／—5的表达在大多数食管癌细胞系中缺失，在每个未检测到GATA基因表达的细胞系中均可发现转录起始下游包括CpG岛在内的异常甲基化，GATA—6在每一细胞系中均表达。在正常食管粘膜中未发现GATA—4／—5增强子的甲基化，而GATA—4／—5的甲基化却可以在原发性食管癌中检测到。在27／44(61％)的食管鳞癌和31／44(71％)的食管腺癌中，发现GATA—4的甲基化，与此类似，GATA—5的甲基化也在一部分食管肿瘤中被检测到。结论 本文是关于继发于基因增强子高甲基化的食管肿瘤中，GATA—4，—5而不包括—6表达沉默的首篇报告。     

冠心病合并2型糖尿病患者临床及冠状动脉造影对比分析

目的:探讨冠心病合并2型糖尿病患者临床表现和冠状动脉造影的特点。方法:回顾性分析126例冠心病患者,其中合并糖尿病者65例,不合并糖尿病者61例。对其临床表现和血管造影资料进行对比分析。结果:冠心病合并2型糖尿病组高血压、高血脂、无痛性心肌缺血及心肌梗死的发生率明显升高,冠状动脉病变严重,呈多支、严重弥散性病变。结论:冠心病合并2型糖尿病患者的高血压、高血脂发生率高,冠状动脉病变程度重。在临床上治疗冠心病的同时,应充分考虑其特点,对冠心病的发展及预后有重大意义。     

重组大鼠GATA4-pEGFP基因在骨髓间充质干细胞的表达及意义

目的 体外获得表达重组大鼠GATA4-pEGFP基因的骨髓间充质干细胞(MSCs),为进一步研究后者在心肌梗死治疗中的作用奠定基础.方法 提取胎鼠心肌细胞总RNA,RT-PCR法扩增获得GATA4基因,将目的基因克隆到pEGFP-N3载体并获得重组后GATA4-pEGFP质粒,采用密度梯度离心法联合贴壁法分离骨髓单个核细胞并获得MSCs.将重组质粒GATA4-pEGFP以Lipo2000转染到大鼠MSCs,G418筛选2周,Western blot和荧光检测重组质粒在MSCs中的表达情况.结果 成功构建重组大鼠GATA4-pEGFP真核表达载体并转染入MSCs中,Western blot和荧光检测证实GATA4-pEGFP基因在MSCs中呈阳性表达.结论 成功建立表达大鼠GATA4-pEGFP基因的MSCs,此为利用组织工程学方法治疗心肌梗死的研究奠定了基础.     

替米沙坦对压力超负荷大鼠心肌内皮素-1表达和GATA DNA结合活性的影响

目的 研究压力超负荷心肌肥厚大鼠心肌组织(GATA)DNA结合活性和内皮素(ET)-1蛋白表达的变化及其意义,观察替米沙坦对压力超负荷心肌肥厚大鼠血流动力学参数[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和平均压(MBP)]、左室质量指数(LVMI)、心肌细胞横径(DC)、心肌组织GATA DNA结合活性和ET-1蛋白表达的影响.方法 腹主动脉缩窄法建立压力超负荷大鼠心肌肥厚模型.健康SD大鼠24只,随机分为三组:假手术组(n=8);手术组(n=8);替米沙坦组(手术后第7天给替米沙坦3 mg·kg-1·d-1灌胃4 w,n=8).测定大鼠SBP、DBP、MBP、LVMI及DC;免疫组化半定量检测心肌组织ET-1蛋白的表达,电泳迁移率变动分析检测ET-1与GATA的特异性结合及GATA DNA结合活性的变化.结果 ①与假手术组比较,手术组SBP、DBP、MBP、LVMI和DC均显著升高(P均<0.05);光镜下见心肌实质、间质结构改变;心肌组织ET-1蛋白表达和GATA DNA结合活性均明显增加(P均<0.05);心肌组织ET-1蛋白表达与LVMI和DC均呈显著正相关(r=0.895,r=0.899,P均<0.01);②与手术组比较,替米沙坦组SBP、MBP、LVMI、DC、心肌组织ET-1蛋白表达和GATA DNA结合活性均明显降低(P均<0.05).结论 (1)GATA DNA结合活性增加使ET-1蛋白表达增加与压力超负荷大鼠的心肌肥厚有关;(2)替米沙坦能够抑制压力超负荷大鼠的心肌肥厚,其机制可能与替米沙坦降低GATA DNA结合活性从而下调ET-1蛋白表达有关.     

妊娠合并心脏病患者MMP-1、GATA6、PTX3水平与不良妊娠结局的关系研究

目的探讨妊娠合并心脏病患者基质金属蛋白酶-1 (MMP-1)、GATA结合蛋白6 (GATA6)、正五聚蛋白3(PTX3)与不良妊娠结局的关系。方法选取2019年1月至2021年1月温州市中西医结合医院收治的妊娠合并心脏病患者42例,根据是否发生不良妊娠结局分为观察组(20例)和对照组(22例),比较两组的妊娠风险及MMP-1、GATA6 m RNA和PTX3水平,分析MMP-1、GATA6 mRNA和PTX3与妊娠风险分级关系及预测不良妊娠结局的价值。结果观察组妊娠风险分级与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组MMP-1、PTX3高于对照组,GATA6 m RNA低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);MMP-1和PTX3与妊娠风险分级呈正相关(r=0.598、0.829,均P<0.05),GATA6 mRNA与妊娠风险分级呈负相关(r=-0.690,P<0.05)。多因素logistic回归分析显示MMP-1、GATA6 m RNA和PTX3是不良妊娠结局的相关影响因素(均P<0.01);联合MMP-1、GATA6 mRNA和...     

2例长期未确诊的足部疣状皮肤结核分析

目的:总结2例长期未确诊的足部疣状皮肤结核患者未确诊的可能原因与诊断线索。方法:分析2例疣状皮肤结核患者的临床表现、组织病理特点及治疗经过,结合国内外相关文献进行总结。结果:2例患者病程分别长达30余年及10余年未确诊,根据临床表现中原发皮肤损害表现及组织病理发现肉芽肿性炎,结合病原学检查均诊断为疣状皮肤结核。经三联抗结核治疗1年后基本痊愈。结论:疣状皮肤结核的临床表现在发生、发展的过程中会有较大变化,但是重视病程中的基本皮肤损害及肉芽肿性炎的组织病理的相对稳定性的特点,再结合特异的病原学检查结果及诊断性治疗结果可以确诊。     

肝细胞癌患者PBMCs中T-bet、GATA3和Foxp3 mRNA水平及其意义

目的探讨肝细胞癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中T-bet、GATA3和Foxp3 mRNA水平变化及意义。方法在肝细胞癌患者20例和健康对照人群10例,采用RT-PCR法检测PBMC中T-bet、GATA3和FoxP3mRNA水平。结果 HCC患者和健康对照T-bet水平分别为0.554±0.030和0.514±0.071(P=0.391);HCC患者和健康对照GATA3水平分别为0.956±0.030和0.535±0.028(P<0.01);HCC患者和健康对照FoxP3水平分别为0.976±0.073和0.772±0.083(P<0.01);HCC患者和健康对照T-bet/GATA3比值分别为0.697±0.078和0.963±0.133(P<0.01)。结论肝细胞癌患者PBMC中GATA3和FoxP3 mRNA水平上调,可能参与了HCC的发生和发展过程。     

先天性房间隔缺损相关GATA6基因新突变的识别

目的：识别先天性房间隔缺损（ASD）相关GATA6基因新突变。方法：收集110例先天性AsD患者和200名健康对照者的临床资料和血标本,使用DNA纯化试剂盒提取基因组DNA。通过聚合酶链反应扩增GATA6基因的编码外显子和其两侧的部分内含子,应用双脱氧核苷链末端合成终止法进行DNA测序。将所测序列与GenBank数据库中的GATA6基因序列进行比对,识别GATA6基因突变。分别借助在线程序MUSCLE和MutationTaster评估突变氨基酸的保守性和致病性。结果：在1例家族史阴性的先天性ASD患者发现了1种新的GATA6基因杂合错义突变,即P．Q363E突变,突变率约为0．91％。该突变不存在于200名健康对照者,多物种序列比对显示,被改变氨基酸在进化上高度保守,致病性预测表明这种变异为致病性突变。结论：发现ASD相关GATA6基因新突变,有助于揭示ASD新的分子机制。     

miR-155对变应性鼻炎患者ILC2转录因子GATA3调控作用的研究进展

［摘要］　Ⅱ型固有免疫细胞(ILC2)受刺激后可产生Th2型细胞因子,促进变应性鼻炎（AR）迟发相反应。miR-155在免疫系统的发育、免疫细胞的成熟分化以及维持免疫功能中都发挥至关重要的作用。GATA结合蛋白3（GATA3）是能够促进ILC2发育成熟的转录因子,而在肿瘤研究中,GATA3是miR-155的靶基因。该文对参与AR鼻黏膜中的ILC2转录因子GATA3及可干扰其表达的miR-155作一综述。     

法乐四联症患儿NKX2.5、TBX5、GATA4基因的表达研究

目的:探讨NKX2.5、TBX5、GATA4基因与法乐四联症的发病关系及法乐四联症形成的分子机制. 方法:10例法乐四联症患儿(法乐四联症组),为我院2005-06至2005-12心脏中心住院患儿.年龄4个月～8岁,平均3.5岁.6例非先天性心脏病(先心病)意外死亡患儿作为对照(对照组),均没有先心病病史和遗传病家族史.年龄4个月～9岁,平均年龄3.8岁.留取各病例右心室流出道心肌组织,提取心肌组织总RNA,逆转录为与RNA链互补的单链DNA(cDNA).按照引物设计原则进行引物设计,用来扩增心肌组织NKX2.5、TBX5、GATA4、GAPDH mRNA目的片段.引物长度18 bp～22 bp,扩增片段长度163 bp、206 bp、237bp、203 bp.应用双标准曲线、实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法比较NKX2.5、TBX5、GATA4基因的mRNA含量在对照组和法乐四联症组之间的统计学差异. 结果:法乐四联症组的NKX2.5mRNA含量较对照组显著降低,差异有统计学意义.TBXSmRNA和GATA4mRNA含量在法乐四联症组与对照组的差异无统计学意义. 结论:人心肌组织中有心脏发育相关基因NKX2.5、TBX5和GATA4mRNA的表达;法乐四联症可能与心肌组织中NKX2.5mRNA含量降低相关.     

心肌营养素-1对三个主要心肌转录因子转录表达的选择性的研究

目的研究心肌营养素-1（cardiotrophin-1,CT-1）对三大主要心肌转录因子的选择性作用,在转录因子水平探讨CT-1肥大刺激作用的特殊机制。方法应用半定量RT-PCR及免疫组化技术,鉴定CT-1对心肌细胞形态学影响。测定CT-1对大鼠心肌细胞GATA4、MEF2以及NKX2-5基因转录的时间、剂量依赖影响。结果GATA4与NKX2-5的表达均与CT-1具有时间、剂量依赖关系,而CT-1则未对MEF2的表达产生影响。从作用时间上看,NKX2-5的表达在1×10-10mol/L的CT-1刺激1h时即开始明显增加,而GATA4的表达则在3h时显著性增加,NKX2-5的表达增强的时间较GATA4略早。结论CT-1以时间和剂量依赖性的方式上调大鼠心肌细胞GATA4及NKX2-5mRNA表达,对大鼠心肌细胞MEF2mRNA表达没有明显影响。