双酚A暴露对KGN细胞m6A修饰水平的影响

目的 研究双酚A(BPA)暴露对卵巢颗粒细胞功能表观遗传学的影响。方法 将人卵巢颗粒瘤细胞(KGN细胞)暴露于BPA(浓度分别为0、0.02、0.2、2、20μg/mL) 24 h,作为溶剂对照组、0.02μg/mL BPA组、0.2μg/mL BPA组、2μg/mL BPA组、20μg/mL BPA组,测定mRNA m6A的修饰水平和m6A甲基化调控基因的表达变化;Merip-qPCR法检测抗氧化转录因子(Nrf2)的m6A修饰水平。结果 BPA下调mRNA m6A修饰水平(P<0.001),并改变了m6A甲基化调控基因的表达(P<0.05),2μg/mL BPA组的超氧化物歧化酶(SOD)表达降低(P<0.05),Nrf2的m6A修饰水平降低(P<0.05)。结论 BPA暴露通过下调Nrf2的m6A修饰导致人卵巢颗粒瘤细胞(KGN细胞)氧化应激增加,颗粒细胞功能损伤,对卵巢颗粒细胞表观遗传学产生影响。     

双酚A干扰人卵巢颗粒细胞雌二醇生成的机制

目的:研究双酚A(BPA)对人卵巢颗粒细胞细胞色素P450芳香化酶(P450arom)和雌二醇(E2)表达的影响机制。方法:提取人卵巢颗粒细胞进行体外培养,细胞鉴定采用免疫细胞化学法,CCK-8增殖实验分析细胞体外增殖活力。予以不同浓度BPA(0,0.1,1,10,100mg/L)或BPA+PPAR-γ抑制剂GW9662 1μmol/L处理处理人卵巢颗粒细胞,ELISA法测定各组E2浓度,获取细胞沉淀,RT-PCR法测定P450arom mRNA表达。结果:人卵巢颗粒细胞体外培养第3-5天达增殖分裂高峰,FSHR免疫细胞化学鉴定显示阳性染色定位于细胞膜和细胞质,细胞纯度达95%以上,ELISA及RT-PCR结果显示当BPA浓度为0.1mg/L时,P450arom mRNA及E2生成较空白对照组增加(P<0.05),当BPA浓度为1,10,100mg/L时,P450arom mRNA及E2生成逐渐减少(P<0.05),加入GW9662后,P450arom mRNA及E2表达量较单独BPA处理组增高(P<0.05)。结论:BPA干扰人卵巢颗粒细胞E2的生成,该干扰可能通过PPAR-γ核受体途径进行。     

双酚A暴露诱导雌性大鼠性早熟的下丘脑KISS-1和GPR54基因甲基化分子机制探讨

目的 探讨双酚A(BPA)暴露诱导雌性大鼠性早熟的下丘脑KISS-1和GPR54基因甲基化分子机制.方法 将SD雌性幼鼠(21 d龄)分为4组,即BPA干预组(0.25 mg/kg)、BPA空白对照组(与BPA组同时处死)、17β-雌二醇组(E2,0.1 mg/kg)、溶剂对照组(直至大鼠出现阴道开口再处死),每天以灌胃方式持续给药10 d,以大鼠阴道开口时间(VOD)为观察终点(VOD当天处死),BPA干预组阴道开口当天处死时,按1:1比例处死BPA空白对照组.收集大鼠卵巢和下丘脑组织,采用real-time PCR方法检测卵巢ERα、ERβ mRNA和下丘脑KISS-1、GPR54 mRNA相对表达水平,焦磷酸测序PCR方法检测KISS-1、GPR54基因甲基化水平.结果 BPA干预组和E2组VOD较溶剂对照组提前(P＜0.05),BPA空白对照组处死时未出现阴道开口,BPA干预组下丘脑KISS-1、GPR54 mRNA表达水平明显高于BPA空白对照组(P＜0.05),但与溶剂对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).E2组下丘脑KISS-1 mRNA和卵巢ERβ mRNA表达水平明显低于溶剂对照组(P＜0.05).BPA干预组、BPA空白对照组、E2组和溶剂对照组4组间比较,下丘脑KISS-1基因CpG位点甲基化水平差异无统计学意义,而GPR54基因CpG位点甲基化水平存在显著性差异,其中BPA干预组、E2组和溶剂对照组GPR54片段1 CpG位点甲基化水平显著低于BPA空白对照组(P＜0.05),且其甲基化水平与VOD呈正相关(rs=0.245,P=0.009).BPA干预组GPR54片段2 CpG位点甲基化水平显著低于溶剂对照组,而E2组卵巢ERβ基因甲基化水平显著高于溶剂对照组(P＜0.05).结论 BPA暴露可导致雌性幼鼠阴道开口(性早熟)提前,其下丘脑GPR54基因甲基化水平改变可能是毒性机制之一.     

卵泡液中双酚A浓度与卵巢储备功能下降的相关性

目的:初步探讨卵泡液中双酚A(BPA)浓度与卵巢储备功能下降(DOR)的相关性。方法:于取卵日收集行体外受精/卵胞质内单精子显微注射(IVF/ICSI)的DOR患者和非DOR患者的卵泡液,酶联免疫吸附(ELISA)技术测定54例DOR患者及67例非DOR患者卵泡液中BPA浓度及激素水平,采用SPSS 17.0软件进行统计学分析。结果:DOR组较非DOR组卵泡液中BPA浓度显著升高[(234.048±81.736)ng/L vs(193.300±67.225)ng/L,P<0.01];DOR组较非DOR组卵泡液中抗苗勒氏管激素(AMH)[(555.689±74.224)pg/ml vs(587.178±77.731)pg/ml,P<0.05]及雌二醇(E2)[(209.720±31.556)pg/ml vs(221.845±32.632)pg/ml,P<0.05)水平低;且卵泡液中BPA与AMH及E2水平有弱负相关性(rBPA&AMH=-0.312,P<0.05;rBPA&E2=-0.290,P<0.05)。结论:DOR患者卵泡液中BPA浓度显著偏高,卵泡液BPA浓度与卵泡液AMH和E2浓度呈弱负相关性;BPA可能通过调节卵泡液中激素水平来影响卵巢储备功能。     

8种环境内分泌干扰物对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗的影响

目的通过检测多囊卵巢综合征(PCOS)患者血中8种环境内分泌干扰物,初步探讨其与PCOS胰岛素抵抗的关系。方法分别测定60例PCOS患者(PCOS-IR组23例和PCOS-NIR组37例)及29例输卵管性不育、男性不育、月经紊乱原因就诊非PCOS非胰岛素抵抗对照组血清中的六种邻苯二甲酸酯类(PAEs)、双酚A(BPA)及辛基酚(OP)的含量,SPSS16.0软件进行统计分析。结果六种PEAs、BPA在PCOS与非PCOS对照组间以及PCOS-IR与PCOS-NIR之间差异均无明显统计学意义(P>0.05)。OP在PCOS与非PCOS对照组间差异无明显统计学意义(P>0.05),但在PCOS-IR与PCOS-NIR之间差异有统计学意义(P<0.05),且OP在PCOS-IR组含量低于在PCOS-NIR组含量。结论 PEAs、BPA对PCOS的发病及胰岛素抵抗无明显影响,OP则可能对PCOS胰岛素抵抗有影响。     

双酚A与人类健康的研究进展

双酚A(BPA)在环境中普遍存在,可以通过许多途径被人类接触和摄入,并在人体的多种体液及组织中都能检测到。BPA作为一种内分泌干扰物在临床和动物实验均已被广泛证明,一定程度影响暴露者的生殖和发育功能。此外,BPA与肾脏、免疫、代谢和炎症等方面疾病亦密切相关。本文基于最新的研究进展,全面介绍BPA对人类健康的影响。     

双酚A对小鼠囊胚发育和植入的影响

目的 研究双酚A(BPA)对囊胚发育和植入的影响。方法 对妊娠鼠进行完全随机化分组,分为100、300、600 mg/(kg·d)BPA组和对照组,将BPA处理组的孕鼠从妊娠的0.5~3.5 d灌服100、300和600 mg/(kg·d)BPA,着床点染色,统计胚胎的着床数和着床率,检查植入前囊胚的发育和孵化情况,激光扫描共聚焦显微镜观察孵化囊胚的卵裂球分布和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3的表达。结果 300 mg/(kg·d)BPA显著降低了孕鼠的着床点数和着床率,而600 mg/(kg·d)BPA处理的孕鼠未观察到着床点,抑制了胚胎的植入。不同浓度的BPA对妊娠第4天囊胚发育率和囊胚总细胞数无影响,但300和600 mg/(kg·d)BPA显著降低了囊胚的孵化率,提高了孵化囊胚中凋亡细胞的数量。结论 高浓度的BPA损伤了附植前囊胚的发育,影响了胚胎的植入。     

双酚A与胰岛素抵抗及2型糖尿病关系的研究进展

双酚A(BPA)是工业制造中广泛使用的一种化学物质,主要被用来制造塑料制品.日常生活中,人们通过饮食,呼吸、皮肤接触吸收BPA.BPA具有内分泌的干扰作用,被称为环境内分泌干扰物.BPA可以模拟雌激素的作用机制,影响胰岛B细胞以及雌激素敏感的组织如脂肪细胞、肝细胞、中枢神经系统,影响糖、脂代谢,引起胰岛素抵抗,影响脂肪细胞分化和脂质累积等,从而促进糖尿病的发生和发展.流行病学研究表明,BPA暴露水平过高可促进代谢性疾病,如胰岛素抵抗和2型糖尿病的发生.根据目前的研究结果,文章对BPA与胰岛素抵抗及2型糖尿病发生和发展的关系进行综述.     

环境雌激素双酚A对花背蟾蜍血清蛋白的影响

目的 研究花背蟾蜍腹腔注射不同剂量BPA对血清蛋白的影响。方法 实验分组饲养,对照组注射花生油,实验组每天注射不同浓度BPA溶液,分低剂量组(50 μmol/l),中剂量组(100 μmol/l),高剂量组(150 μmol/l),第7 d进行解剖,心脏取血,离心取上清液,醋酸纤维薄膜电泳,测定泳动度,紫外可见分光光度计752N 620 nm处测OD值,计算其相对含量。结果 表明不同剂量的BPA对蟾蜍血清蛋白有影响,各实验组电泳图谱中不同蛋白的含量差异显著。实验组中随BPA剂量的增大,中、高剂量组减少γ-球蛋白条带,各蛋白条带之间的分界不明显。结论 BPA对蟾蜍血清中的γ-球蛋白有明显影响。     

双酚A雌性生殖毒性及其机制研究进展

双酚A(bisphenol A,BPA)作为一种重要的有机化工原料,广泛用于生产高分子材料及精细化工产品,属于环境内分泌干扰物.BPA可以通过消化道、呼吸道以及皮肤进入机体,对多个系统均能产生有害的影响,其生殖系统毒性尤为引起人们重视.流行病学调查结果与动物实验数据表明,BPA暴露对雌性生殖系统会产生不利的影响,但具体...     

双酚A对成年雄性小鼠的生殖毒性及其作用机制

目的: 探讨双酚A(BPA)对成年小鼠睾丸组织的损伤作用,阐明BPA对动物机体的生殖毒性及其作用机制。方法: 8周龄昆明小鼠40只随机分为对照组(玉米油)和低(100 mg·kg^-1 BPA)、中(200 mg·kg^-1BPA)、高(400 mg·kg^-1BPA)剂量BPA组。灌胃染毒4周后,取小鼠睾丸组织,采用流式细胞术检测小鼠睾丸组织中细胞凋亡率;免疫组织化学法检测Fas和FADD蛋白表达情况。结果: 与对照组比较,低剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、Fas和FADD阳性细胞表达率无明显变化(P>0.05);中和高剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、Fas和FADD阳性细胞表达率明显升高(P<0.05)。与低剂量BPA组比较,中和高剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、FAS和FADD阳性细胞表达率明显升高(P<0.05);与中剂量BPA组比较,高剂量BPA组小鼠睾丸组织中细胞凋亡率、FAS和FADD阳性细胞表达率明显升高(P<0.05)。中剂量BPA组细胞凋亡率与FAS、FADD阳性细胞表达率呈正相关关系(r=0.430,P<0.05;r=0.238,P<0.01),高剂量组细胞凋亡率与Fas、FADD阳性细胞表达率呈正相关关系(r=0.637,P<0.01;r=0.359,P<0.01)。结论: 一定剂量BPA会导致小鼠睾丸组织中细胞凋亡率升高,凋亡调控基因Fas和FADD表达上调;BPA对小鼠睾丸组织有损伤作用,其生殖毒性与激活Fas死亡受体信号通路从而导致细胞过度凋亡有关。     

双酚A对PEO4卵巢癌细胞凋亡的影响及其作用机制研究

目的　探讨环境类雌激素双酚 A(BPA)对 PEO4卵巢癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法　PEO4细胞在 DMEM培养液 (含 1 0 %小牛血清 )中进行常规传代培养 ,试验前 4天将细胞用 PBS洗涤后改变在无酚红 DMEM(含5% CDT- FBS)中培养 ,以耗尽细胞内储存的雌激素。采用流式细胞术观察 BPA对细胞凋亡的影响并使用免疫组织方法检测其对凋亡调节蛋白 Bax和 Bcl- 2表达的影响。结果　雌激素耗尽可诱导 PEO4细胞发生凋亡 ;32× 1 0 -7和 96× 1 0 -7mol/ L BPA处理细胞 72 h可显著抑制细胞的凋亡 ,并可促进细胞由 G0 / G1期进入 S期和 G2 / M期 ,此效应在 2～ 96×1 0 -7mol/ L浓度范围内有良好的剂量 -效应关系。免疫组化分析结果表明 ,32× 1 0 -7mmol/ L BPA对细胞处理 72 h可促进抗凋亡蛋白 Bcl- 2的表达并抑制促凋亡蛋白 Bax的表达。结论　对于雌激素反应性肿瘤细胞 PEO4而言 ,BPA具有抑制凋亡和促进有丝分裂的作用 ,此作用可能主要是通过调节凋亡相关蛋白 Bcl- 2和 Bax而实现的     

Influence of Genista Tinctoria L or Methylparaben on Subchronic Toxicity of Bisphenol A in Rats

Objective To evaluate the influence of an extract of Genista tinctoria L. herba （GT） or methylparaben （MP） on histopathological changes and 2 biomarkers of oxidative stress in rats subchronicly exposed to bisphenol A （BPA）. Methods Adult female Wistar rats were orally exposed for 90 d to BPA （50 mg/kg）, BPA＋GT （35 mg isoflavones/kg） or BPA＋MP （250 mg/kg）. Plasma and tissue samples were taken from liver, kidney, thyroid, uterus, ovary, and mammary gland after 30, 60, and 90 d of exposure respectively. Lipid peroxidation and in vivo hydroxyl radical production were evaluated by histological analysis along with malondialdehyde and 2,3-dihydroxybenzoic acid detection. Results The severity of histopathological changes in liver and kidneys was lower after GT treatment than after BPA or BPA＋MP treatment. A minimal thyroid receptor antagonist effect was only observed after BPA＋MP treatment. The abnormal folliculogenesis increased in a time-dependent manner, and the number of corpus luteum decreased. No significant histological alterations were found in the uterus. The mammary gland displayed specific estrogen stimulation changes at all periods. Both MP and GT revealed antioxidant properties reducing lipid peroxidation and BPA-induced hydroxyl radical generation. Conclusion GT L. extract ameliorates the toxic effects of BPA and is proved to have antioxidant potential and antitoxic effect. MP has antioxidant properties, but has either no effect or exacerbates the BPA-induced histopathological changes.     

双酚A对雄性小鼠睾丸酶活性的影响

目的观察双酚A对小鼠睾丸酶活性的影响,探讨双酚A致睾丸损伤的可能机制。方法分别对雄性小鼠进行相同作用时间、不同剂量及相同剂量、不同作用时间的双酚A染毒,将小鼠处死后,采用紫外分光光度法检测睾丸组织匀浆中乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)活性。结果双酚A可以引起小鼠睾丸组织匀浆中LDH活性降低,G-6-PD活性升高。双酚A一次进入体内所引起的睾丸生殖酶活性变化可在36 h恢复正常水平。结论双酚A对雄性小鼠具有一定的生殖毒性。     

猪卵透明带抗体对卵巢功能的影响

用sephadex G-100柱层析分离提纯的猪卵透明带(ZP)抗原,及卵巢组织中的其他蛋白抗原,分别免疫兔和猪。观察到不论是异种还是同种兔疫时,只有在猪被免疫时,其卵巢功能受到不同程度的抑制。提示ZP免疫动物的抗生育作用,与卵巢功能受抑制有关。     

Combined Subchronic Toxicity of Bisphenol A and Dibutyl Phthalate on Male Rats

Objective To evaluate the combined subchronic toxicity of bisphenol A(BPA) and dibutyl phthalate(DBP) in male Sprague Dawley(SD) rats.Methods Forty 4‐week‐old male rats weighing 115‐125 g were randomly divided into BPA‐treated,DBP‐treated group,BPA+DBP‐treated and control groups and fed with a soy‐ and alfalfa‐free diet containing 285.4 ppm BPA,285.4 ppm DBP,285.4 ppm BPA plus 285.4 ppm DBP,and a control diet,respectively,for 90 consecutive days.At the end of the study,the animals were sacrificed by exsanguination via the carotid artery under diethyl etherane aesthesia and weighed.Organs,including liver,kidneys,spleen,thymus,heart,brain,and testis underwent pathological examination.The androgen receptor(AR),gonadotropin‐releasing hormone receptor(GNRHR),and progesterone hormone receptor(PR) genes from the hypothalamus were detected by real‐time PCR.The biomedical parameters were analyzed.Results No significant difference was found in food intake,body weight,tissue weight,organ/brain weight ratio,and biomedical parameters among the four groups(P>0.05).However,BPA and DBP up‐regulated AR,PR and GNRHR expression levels in rats and showed a synergistic or an additive effect in the BPA+DBP group.Conclusion The combined subchronic toxicity of BPA and DBP is synergistic or additive in male SD rats.     

双酚A的活性污泥法处理特性

研究了活性污泥法处理双酚A(BPA)废水的效果、降解动力学特性和净化机理。结果表明:污泥驯化与否对处理效果影响很大,驯化污泥对双酚A降解率可达90%以上。测得的最大比基质降解速率(qm ax)为0.35-d 1,半饱和常数(Ks)为15.5 m g/L,降解速率较慢。活性污泥法处理时BPA的去除主要是生物降解起作用,吸附作用很小,BPA不会在剩余污泥中积累。     

采用不同载体的玻璃化冷冻对人卵巢组织冻存效果的比较研究

目的比较采用不同载体的玻璃化冷冻方案对人卵巢组织的卵泡形态、冻融后体外培养时卵泡生长和激素分泌能力的影响,寻找临床上简便易行且保存效果上佳的人卵巢组织玻璃化冷冻方案。方法将16例患者的卵巢组织切割成皮质小条后随机分配到新鲜组和不同载体玻璃化组,包括冷冻管组、最小微滴组、不锈钢网筛组和固相表面玻璃化组。观察各组卵巢组织卵泡形态;冻融后的卵巢组织行体外培养,比较卵泡生长情况以及培养液中雌二醇和孕酮的浓度。结果冻融后各组原始卵泡正常形态率均低于新鲜组,差异有统计学意义（P〈0.05）。冷冻管组、最小微滴组、不锈钢网筛组和固相表面组,原始卵泡形态正常率分别为（64.57±11.84）%、（78.36±7.62）%、（77.21±6.51）%和（84.70±5.03）%。固相表面组原始卵泡形态正常率明显高于其他玻璃化组（P〈0.05）。体外培养液中雌二醇和孕酮的平均水平随培养时间逐渐升高。固相表面玻璃化组两种激素平均浓度明显高于其他玻璃化组。培养后卵巢组织中原始卵泡所占比例均较新鲜组下降,生长卵泡比例升高。固相表面玻璃化组培养后生长卵泡比例明显高于其他玻璃化组。结论固相表面玻璃化冷冻可以保存大部分原始卵泡的正常形态,并能较好地保存其体外生长和性激素分泌功能。该技术简便易行且冷冻效果好,适合人卵巢组织玻璃化冷冻的临床使用。     

β-catenin、DKK-1蛋白在出生前后双酚A暴露的子鼠雄性生殖细胞中的表达

目的：探讨 Wnt/β-catenin 信号通路主要蛋白(β-catenin、DKK-1)在出生前后双酚A(BPA)暴露的成年子鼠雄性生殖细胞中的表达及意义。方法自受孕第0天(PGD0),ICR孕鼠饮水BPA染毒,随机将孕鼠分为溶剂对照组、BPA低剂量(10 nmol/L )组、BPA中剂量(50 nmol/L)组、BPA高剂量(300 nmol/L)组,每组6只。雄性仔鼠出生后继续饮水染毒,剂量同上,6周(PGD42)处死,取睾丸组织,计算睾丸系数;免疫组化和Western blot法检测β-cate-nin、DKK-1蛋白的表达。结果 BPA暴露组较溶剂对照组仔鼠睾丸脏器系数降低,β-catenin、DKK-1蛋白表达明显增加;免疫组化显示,β-catenin、DKK-1蛋白多位于睾丸间质细胞和精原细胞中。结论β-catenin、DKK-1可能参与了出生前后BPA暴露对子鼠雄性生殖细胞发育的影响。     

邻苯二甲酸二乙己酯及双酚A联合染毒对大鼠肝脏的影响

目的研究邻苯二甲酸二乙基己酯（Di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP）和双酚A（Bisphenol A,BPA）联合暴露对大鼠肝脏的影响。方法将Wistar大鼠随机分4组,分别灌胃1 500mg/kg DEHP、200mg/kg BPA及750mg/kg DEHP＋100mg/kg BPA染毒6周。染毒终点测定血清中碱性磷酸酶（ALP）、胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）及镁离子（Mg2＋）含量;检测肝匀浆中谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量。结果与对照组比较,DEHP明显升高血清ALP、CHO及Mg2＋含量,而BPA明显增加肝中MDA含量（均P〈0.05）。与对照组比较,DEHP＋BPA联合染毒除明显增加肝脏脏器系数外,对大鼠体重、肝MDA、血脂及血清Mg2＋和ALP含量均无明显影响。与DEHP＋BPA联合染毒组比较,BPA显著升高肝脏MDA含量;DEHP增加血清Mg2＋含量差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论 DEHP和BPA单独染毒均可产生肝损伤,其联合暴露产生交互作用。