Bcl-xL基因在正常皮肤血管组织、增生及退化期血管瘤组织中的表达

背景：有文献报道Bcl-xL基因能抑制细胞凋亡,并可能参与血管形成,但目前Bcl-xL基因在恶性肿瘤中的研究较多,而在血管瘤的研究较少。 目的：应用免疫组织化学染色法检测增生期和退化期血管瘤和正常皮肤血管组织中Bcl-xL基因的表达。 方法：收集有完整临床和病理资料的40例皮肤血管瘤手术切除标本,包括增生期血管瘤22例,退化期血管瘤18例。另取瘤组织周围正常皮肤组织5例作为对照。采用免疫组织化学染色方法检测Bcl-xL在各组中的表达,并结合Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学染色证实表达Bcl-xL阳性表达的细胞为血管瘤组织中的内皮细胞,并测定Bcl-xL在各组中的平均吸光度和平均阳性面积率。 结果与结论：增生期血管瘤内皮细胞胞浆内可见较多的棕黄色颗粒沉积,Bcl-xL表达呈强阳性;退化期血管瘤和正常皮肤组织内皮细胞胞浆内可见少量的棕黄色颗粒或无棕黄色颗粒,Bcl-xL表达弱或无表达。增生期血管瘤与退化期血管瘤和正常皮肤组相比,Bcl-xL阳性表达的平均吸光度和阳性面积率明显增高(P < 0.01)。结果显示,Bcl-xL为抗凋亡基因,在增生期时呈高表达,其促进了血管内皮细胞的增殖,参与了血管瘤的增生。     

SSc治疗前后血浆血管内皮细胞活性因子测定的临床意义

目的：探讨血管内皮细胞活性因子和系统性硬皮病(SSc)的关系及其在临床治疗中的意义。方法：利用密度梯度方法检测循环内皮细胞记数(CEC),利用放射免疫分析检测血浆内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1a(6-K-PGF1a),利用Griss方法检测血浆一氧化氮(NO)水平,利用酶联免疫法检测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、P选择素(P-S),本文对52例SSc病人作了治疗前后的血浆水平的检测。结果：所有SSc患者均存在高CEC、ET、ICAM-1、P-S血症,存在低NO、6-K-PGF1a血症。结论：血管内皮细胞活性因子的变化同SSc的发生发展密切相关,其血浆水平的检测有助于SSc发病机制的探讨．有助于SSc疗效的观察。     

细胞周期素依赖性激酶2及p27Kipl与血管瘤

目的:进一步探讨细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)及p27Kipl.在血管瘤发生、发展及退化过程中的作用机制.方法:采用免疫组织化学SP法检测49例皮肤毛细血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织中CDK2和p27Kipl的表达水平;采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告管理系统,对CDK2和p27Kipl表达的平均光密度和阳性面积率进行图像分析.结果:增生期组CDK2的表达明显高于退化期组和正常皮肤组织组;增生期血管瘤内皮细胞p27Kipl的表达显著低于退化期血管瘤内皮细胞.结论:p27Kipl能抑制血管瘤内皮细胞的增殖,在血管瘤的退化过程中起了重要作用;而CDK2能促进血管瘤内皮细胞增殖,存血管瘤的增生过程巾起了重要作用.     

细胞周期素依赖性激酶2及p27^kip1与血管瘤

目的：进一步探讨细胞周期素依赖性激酶2（CDK2）及p27^kip1在血管瘤发生、发展及退化过程中的作用机制。方法：采用免疫组织化学SP法检测49例皮肤毛细血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织中CDK2和p27^kip1的表达水平；采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告管理系统，对CDK2和p27^kip1表达的平均光密度和阳性面积率进行图像分析。结果：增生期组CDK2的表达明显高于退化期组和正常皮肤组织组；增生期血管瘤内皮细胞p27^kip1的表达显著低于退化期血管瘤内皮细胞。结论：p27^kip1能抑制血管瘤内皮细胞的增殖，在血管瘤的退化过程中起了重要作用；而CDK2能促进血管瘤内皮细胞增殖，在血管瘤的增生过程中起了重要作用。     

妊高征脐动脉内皮细胞损伤与内皮素和NO合酶的变化及意义

目的 :探讨妊高征脐血管内皮细胞损伤与内皮素 (ET)、一氧化氮 (NO)释放和一氧化氮合酶 (NOS)活性的关系。方法 :用内皮细胞铺片法结合免疫组化技术观察内皮细胞损伤程度和内皮细胞中ET阳性率 ;用Criess法检测血浆中NO代谢产物亚硝酸基和硝酸基 (NO-2 /NO-3 )浓度 ,同时测定脐血管组织NOS活性。结果 :妊高征组脐血管内皮细胞损伤程度、ET阳性率明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;血浆NO/NO浓度和脐血管NOS活性显著低于正常对照组 (P <0 .0 1)。结论 :妊高征患者脐血管内皮细胞损伤加重 ,ET、NO和NOS代谢异常 ,导致血管舒缩功能障碍 ,可能是妊高征重要的发病机理。     

旁路活化补体协同TNF-α对血管内皮细胞ICAM-1表达和粘附作用的影响

目的 :探讨旁路活化补体协同TNF -α对血管内皮细胞ICAM - 1表达及中性粒细胞 -内皮细胞(PMN -EC)粘附的影响。方法 :采用酵母多糖活化人血清 (ZAHS)单独、和TNF -α协同作用于体外培养的内皮细胞单层 ,用直接细胞计数和改良细胞ELISA方法检测中性粒细胞 -内皮细胞粘附率的变化和细胞间粘附分子 (ICAM -1)的表达。结果 :旁路活化补体单独作用于内皮细胞对PMN -EC粘附和ICAM - 1的表达仅有轻微影响 ;和 4 0 μg/L的TNF -α共同作用可以明显促进PMN -EC粘附率和ICAM - 1的表达。结论 :旁路活化补体对TNF -α诱导的PMN-EC粘附及ICAM - 1的表达具有促进作用 ,从而引起炎症反应     

血管内光凝治疗大隐静脉曲张围手术期血浆ET-1和NO的水平

目的 :测定血管内激光光凝治疗大隐静脉曲张围手术期血浆内皮素 - 1(ET - 1)和一氧化氮 (NO)的水平。方法 :5 8例大隐静脉曲张患者 ,分为轻、重两组 ,采用激光血管内光凝治疗 ,在治疗后第 1,3,7和 14d取静脉血检测血浆内ET - 1和NO水平 ,检测方法分别为放射免疫分析和Griss法。同时 5 6例大隐静脉曲张患者行传统的大隐静脉高位结扎、分段剥脱治疗 ,同样在治疗后第 1,3,7和 14d检测血浆内ET - 1和NO水平。结果 :大隐静脉曲张患者轻症组ET - 1水平同正常对照组没有明显区别 ,而NO水平高于对照组 ;重症组ET - 1和NO均明显低于正常水平。两种手术方法治疗后血浆ET - 1和NO水平均呈先升高后降低 ,向正常水平接近的变化趋势 ,但血管内光凝组较传统的手术方法ET - 1和NO变化幅度小 ,且提前恢复到正常水平。结论 :ET - 1和NO水平高低是判断手术应激强度大小和病程转归的一种指标。     

雌激素受体与数种血管形成因子在血管瘤和血管畸形中的表达

目的:探讨雌激素受体与数种血管形成因子在血管瘤和血管畸形病理发生中的作用。方法:对35例手术切除的血管瘤及血管畸形标本及5例正常皮肤标本,采用免疫组织化学方法检测雌激素受体以及血管形成有关的血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶和组织蛋白酶D。结果:在血管瘤增生期,ER、VEGF、MMP-2及组织蛋白酶D均有较高表达;在血管瘤退化期,仅ER和组织蛋白酶D有较高表达;在血管畸形和正常皮肤对照中,ER、VEGF和MMP-2表达极弱,组织蛋白酶D有少许表达。结论:雌激素与多种血管形成因子可通过不同途径对血管瘤的病理发生过程发挥作用,对血管畸形则无作用。     

粘附分子在人直肠腺癌血管内皮细胞的表达及意义

目的：检测血管内皮的细胞间粘附分子（ICAM－）1和癌胚抗原（CEA）及血小板－内皮细胞粘附分子（CD31）的表达,以探讨癌细胞血管浸润转移机理。方法：免疫组织化学方法。结果：癌周直肠组织及淋巴结的血管内皮细胞,均有ICAM－1和CEA的表达。结论：提示在癌细胞沿血管转移过程中,ICAM-1和CEA是介导癌细胞和血管内皮细胞稳定的粘附分子。尚不能确CD31在癌在细胞与血管内皮细胞相互中的地位。     

葡萄糖、胰岛素对血管内皮细胞功能的影响

目的研究葡萄糖、胰岛素对内皮细胞一氧化氮(NO)和内皮素 -1(ET -1)生成及其mRNA水平的影响 ,探讨糖尿病血管并发症与血管内皮功能异常的关系。方法用放免法测定内皮细胞cGMP和ET -1水平 ,cGMP用来反映NO的量 ;半定量RT-PCR检测一氧化氮合酶(eNOS)mRNA和ET-1mRNA水平。结果(1)高浓度葡萄糖(20mM ,40mM)能促进内皮细胞合成cGMP和ET -1 ,并上调eNOSmRNA水平 ;(2)胰岛素(0.18nmol/L～6nmol/L)能促进内皮细胞生成cGMP ,胰岛素(1.8nmol/L～6nmol/L)能增加内皮细胞合成ET -1 ,并上调ET-1mRNA水平 ;(3)在高浓度葡萄糖下 ,胰岛素(1.8nmol/L)刺激NO的生成作用明显降低 ;(4)在相同浓度葡萄糖(20mM,40mM)、胰岛素(1.8nmol/L～6nmol/L)下 ,ET -1增加的倍数远高于cGMP增加的倍数。结论高浓度葡萄糖和胰岛素可直接导致血管内皮细胞功能的异常 ;在糖尿病患者体内高血糖、高胰岛素血症致血管内皮细胞ET -1、NO分泌失调 ,作用于血管壁 ,促进了糖尿病血管并发症的发生、发展     

Infantile hemangioma is a proliferation of LYVE-1-negative blood endothelial cells without lymphatic competence.

Infantile hemangiomas are common benign vascular tumors that exhibit a characteristic history of rapid proliferation in the first year of life and slow spontaneous involution during early childhood. The causative pathogenic event responsible for the abnormal endothelial proliferation remains elusive. The recent discovery of an immature phenotype of proliferating hemangioma endothelial cells due to the exclusive expression of the lymphatic endothelial hyaluronan receptor LYVE-1 led to the proposal that infantile hemangiomas are the result of a primary defect in endothelial cell maturation. To test this hypothesis, we looked for the expression of the lymphatic endothelial cell-specific markers LYVE-1, Prox-1, podoplanin and D2-40 in beta4 integrin-negative proliferating and beta4 integrin-positive involuting infantile hemangiomas. As beta4 integrin proved to be a suitable marker for staging infantile hemangiomas, we used it in combination with clinical and histological criteria to objectively determine the proliferative and involutional phases. In immunohistochemical and immunofluorescent stains, hemangioma vessels were negative for all lymphatic endothelial cell-specific markers tested during both proliferation and involution. LYVE-1 immunoreactivity, however, was found in the dense network of perivascular HLA-DR-positive cells with dendritic cell morphology that are supposed to play a role in hemangiogenesis by releasing pro- and antiangiogenic factors. Notably, this LYVE-1 staining failed to correlate with the growth status of infantile hemangiomas. Our results do not support the notion that LYVE-1 expression was restricted to the proliferative phase and downregulated during involution. Thus, LYVE-1 does not seem to be a reliable marker for proliferating infantile hemangiomas. We conclude that the suggested intrinsic defect in endothelial cell maturation is unlikely the cause for the post-natal rapid growth in infantile hemangiomas. In addition, the lack of lymphatic endothelial cell-specific markers implies that infantile hemangiomas are tumors of blood vessels without lymphatic competence.     

氧化修饰低密度脂蛋白对内皮细胞功能的影响

目的 观察氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）对内皮细胞NO／ET-1、t-PA／PAI-1合成、细胞表面细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达的影响。方法 采用培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs），在分另0加入不同浓度ox-LDL（50、100、150、200mg／L）孵育24h后，观察培养液中NO、ET-1、t-PA、PAI-1水平及细胞表面ICAM-1的表达。结果 ox-LDL可显著抑制NO、t-PA的合成。ox-LDL还可明显增加ET-1、PAI-1的分泌及诱导细胞表面ICAM-1的表达。结论 ox-LDL对内皮细胞具有明显的细胞毒作用，它对NO／ET-1、t-PA／PAI-．1及ICAM-1表达的影响可能是其致动脉粥样硬化发生的重要机制之一。     

兔饮食所致高同型半胱氨酸血症血管内皮功能的实验研究

目的：观察高同型半胱氨酸血症对血管内皮功能的影响。 方法： 建立兔高同型半胱氨酸血症模型。将18只新西兰兔随机分为：正常对照组（control组）6只、高蛋氨酸饮食组（M组）12只；于实验第4周始，将M组再随机分为两组，M+0组6只，继续饲高蛋氨酸饮食；M+F组6只，在高蛋氨酸饮食基础上，再加以叶酸、VitB12，继续观察3周；6周时统一处死动物，取腹主动脉，制备主动脉血管环，比较M+0组与M+F组及C组主动脉血管对Ach的最大舒张反应。同时，对3组高同型半胱氨酸血症形成过程中0周、3周、6周时血清中Hcy、ET-1、Ang-II、NO2ˉ/NO3ˉ、NOS各指标及处死动物时局部血管组织中ET-1、Ang-II、NO2ˉ/NO3ˉ、NOS指标进行检测并进行比较。 结果： （1）M+0组主动脉血管对Ach的最大舒张反应性(Emax=26.73±4.51)低于M+F组（Emax=47.84±5.62, P<0.05）及control组（Emax=56.42±7.82， P＜0.05）；(2) 3周时，M+0组及M+F组血清中Hcy、ET-1、Ang-II各指标均明显高于对照组及0周时（P＜0.05）；NO2ˉ/NO3ˉ、NOS明显低于对照组及0周时（P＜0.05）；(3)6 周时，M+0组上述指标继续升高；M+F组血清中Hcy低于 M+0组（P＜0.05）;NO2-/NO3-、NOS高于M+0组（P＜0.05）;ET-1、Ang-II各指标与M+F组无明显差异（P>0.05）。 结论： 高同型半胱氨酸血症对血管内皮最大舒张功能具有明显的抑制作用；其机制可能是通过影响局部血管组织内皮细胞 ET-1、Ang-II、NO的分泌而发挥作用的；早期以叶酸、VitB12干预治疗对血管内皮功能具有一定的拮抗作用。     

抗衰老Klotho蛋白对高糖作用下血管内皮细胞的保护作用

目的:研究抗衰老Klotho蛋白对高糖作用下血管内皮细胞的保护作用及其作用机制。方法:体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),设置PBS对照组、5.5 mmol/L葡萄糖组、33.3 mmol/L葡萄糖组、0.1μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组、1μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组和10μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖组。使用MTT法检测各组细胞活力;同时检测各组细胞培养上清中丙二醛(MDA)的含量以及乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)的活性;流式细胞术检测各组细胞中活性氧(ROS)含量变化;ELISA检测各组细胞培养液中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的浓度变化;Western blot法检测各组细胞中核因子κB(NF-κB)蛋白的表达。结果:与PBS对照组相比,33.3 mmol/L葡萄糖能够显著降低HUVECs的细胞活力,增加细胞中ROS的含量,增加细胞培养上清中LDH活性和MDA含量,降低SOD和GSH的活性,同时降低NO分泌,诱导ET-1、ICAM-1分泌及细胞中NF-κB蛋白的表达(P0.05)。不同浓度Klotho蛋白和33.3 mmol/L高糖同时作用HUVECs时,细胞活力逐渐上升,ROS和MDA含量以及LDH活性逐渐下降,SOD和GSH活性则逐渐上升,同时NO分泌增加,ET-1、ICAM-1分泌及NF-κB蛋白表达显著下降(P0.05)。结论:抗衰老Klotho蛋白能够提升高糖作用下HUVECs的细胞活力,减少高糖诱导的ROS生成及氧化损伤,恢复HUVECs的正常分泌功能,并通过减少NF-κB蛋白表达发挥抗损伤作用。     

p53、p63及p73在皮肤血管瘤组织中的表达

目的　为探讨p5 3p6 3及p73蛋白在皮肤血管瘤组织中的表达及意义。方法　采用免疫组织化学S P法和图像分析技术检测 4 0例血管瘤组织和 2 0例正常皮肤组织中p5 3、p6 3及p73基因的表达。结果　在增生期血管瘤、退化期血管瘤和正常皮肤组之间 ,p73蛋白免疫组化阳性反应颗粒的平均光密度分别为 6 4 0 8± 2 15 1、1 0 73± 0 5 16和 0 95 3± 0 12 0。p6 3蛋白免疫组化阳性反应颗粒的平均光密度分别为 8 2 71± 1 95 3、0 92 3± 0 191和 0 92 0± 0 187。p5 3蛋白免疫组化阳性反应颗粒的平均光密度分别为 7 2 4 0± 1 874、0 934± 0 187和 0 92 3± 0 16 5。增生期血管瘤与退化期血管瘤、正常皮肤组分别组比 ,p73、p6 3及p5 3阳性表达的差异均有高度显著性差异 (P <0 0 0 1) ,消退期血管瘤与正常皮肤组之间 ,p73、p6 3及p5 3阳性表达差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　在增生期血管瘤组织中p73、p6 3及p5 3呈高表达 ,促进了内皮细胞的增殖 ,是导致血管瘤发生、发展的主要因素     

西拉普利对缺氧大鼠肺血管内皮功能失调的改善作用

目的:进一步了解西拉普利(cilazapril)对缺氧大鼠肺血管内皮(EC)功能失调的改善作用。方法:采用生化、放射免疫、透射电镜和血流动力学技术研究缺氧肺血管EC结构和功能状况。结果:(1)缺氧大鼠肺血管EC超微结构发生变化, 细胞受损。(2)血管EC内皮依赖性舒缩功能失调, 表现为血浆NO、SOD和肺组织eNOS显著降低, 血浆ET－1、ACE和MDA显著增加, 这些舒缩因子与肺动脉平均压(mPAP)呈显著正相关或负相关。(3)cilazapril显著降低ET－1水平和ACE活性, 同时增加NO水平和eNOS及SOD活性, 减轻EC结构受损。结论:缺氧大鼠存在肺血管EC结构受损和功能失调是参与缺氧性肺动脉高压(PH)发病机理之一。Cilazapril能够减轻EC的损伤, 改善EC的分泌功能, 对PH防治有一定作用。     

Cyclic variability of stromal cell-derived factor-1 and endothelial progenitor cells during the menstrual cycle

The endometrium goes through a unique cycle of physiological angiogenesis during the normal menstrual cycle (MC). We studied whether there is a correlation between endothelial progenitor cells (EPCs) and plasma and endometrial levels of angiogenic growth factors during the MC. Ten healthy, regularly menstruating women provided blood samples and another 16 supplied endometrial biopsies. Blood samples were obtained over a single MC: twice in the proliferative and once in the secretory phase and at ovulation. Endometrial biopsies were provided in the proliferative or in the secretory phase. We assessed plasma levels of vascular endothelial and fibroblast growth factors, granulocyte and granulocyte-macrophage colony-stimulating factors and stromal cell-derived factor-1 (SDF-1) by ELISA; EPCs by a colony-forming unit (CFU) assay; immunostaining for endometrial SDF-1 by computer-assisted software; and endothelial cell (EC) markers by flow cytometry. In the proliferative phase, SDF-1 levels were significantly higher than during the secretory phase. EPC-CFUs correlated negatively to SDF-1 levels. Endometrial SDF-1 expression tended to be higher in the secretory than in the proliferative phase. Furthermore, vascular endothelial growth factor receptors and Tie-2 EPCs showed a cyclic pattern over the MC. Our results point to SDF-1 as a novel mediator of EPC trafficking during the MC.     

低氧大鼠冠状血管储备的变化及一氧化氮和内皮素-1的调节作用

目的:探讨一氧化氮和内皮素-1对低氧时冠状血管储备(CVR)变化的调节作用。方法:大鼠随机分为3组:(1)平原对照组;(2)急性低氧组;(3)慢性低氧组。分别测量心肌血流量、血浆和心肌NO₂^-、内皮素-1(ET-1)含量、心肌一氧化氮合酶(NOS)活性产并观察心肌血管结构改变。结果:(1)急性低氧导致双心室心肌血流量、心肌NO₂^-、ET-1含量、NOS活性明显增高,CVR明显下降。(2)间断低压低氧90d后,左室CVR、心肌ET-1/NO₂^-比值无明显改变;右室心肌ET-1含量、ET-1/NO₂^-比值明显增加,右室NO₂^-含量、CVR明显下降;右室冠状小血管壁增厚,管周胶原、血球压积(Hct)及右室重量指数增加。结论:急性低氧时,安静心肌血流量增加,CVR减少;慢性低氧时,右室CVR减少可能与心肌ET-1含量增加、NO含量减少、右室冠状小血管改建、Hct增高及右室肥大有关。     

内皮祖细胞移植对肺动脉高压大鼠一氧化氮、内皮素的影响

目的研究同种异体内皮祖细胞（EPCs）移植对野百合碱（monocrotaline,MCT）所致肺动脉高压（Pulmonary Artery Hypertensinn,PAH）大鼠的影响,并观察肺动脉血一氧化氮（NO）、内皮素（ET）的变化,探讨其治疗PAH的机制。方法体外培养并鉴定大鼠EPCs,MCT诱发肺动脉高压模型组由尾静脉注入标记的EPCs。在移植EPCs后第21天,测定肺血流动力学参数,计算平均肺动脉压（mPAP）,分别用硝酸还原酶法,放射免疫法测定NO及ET-1值。结果与模型组（29．33±3．01）mm—Hg相比,EPCs治疗组（21．89±2．69）mmHg平均肺动脉压明显下降,肺动脉血的NO值明显增加,（49．28±5．31 vs 21．64±3．06）μmol／L（P〈0．05）,ET-1值由（354．40±36．35）pg／ml降至（259．20±29．08）pg／ml（P〈0．05）。结论同种异体EPCs移植可有效降低肺动脉压力,作用机制可能与其分化为血管内皮细胞,修复损伤的肺血管内皮,调节NO与ET-1的含量有关。