术中经蜗窗龛电刺激记录听性脑干反应方法的建立及初步应用

目的 建立人工耳蜗手术中经蜗窗龛电刺激记录听性脑干反应的方法.方法 应用自制铂铱合金球形电极作为刺激电极,改装的人工耳蜗植入体连接体外言语处理器作为电刺激仪及Bio-logic Navigator Pro诱发电位仪,对17例不同病因(包括听神经病2例、耳蜗骨化1例、内耳畸形5例、脑白质异常1例,原因不明8例),不同年龄的人工耳蜗植入患者在手术中进行测试.植入人工耳蜗装置前,将刺激电极放置在蜗窗龛内,用电荷平衡双相脉冲电流经蜗窗龛进行电刺激,记录电诱发听性脑干反应.结果 17例患者均记录到明确的电诱发听性脑干反应波形,Ⅲ波和Ⅴ波的潜伏期分别为(2.12±0.18)ms 和(4.18±0.19)ms,阈值为(220.00±16.04)CL.其中2例听神经病、5例内耳畸形、1例耳蜗骨化、1例脑白质异常患者均记录到分化良好的波形.结论 电诱发听性脑干反应是一项能够较准确地反映听觉传导通路功能完整性的客观神经电生理测试方法,对于判断人工耳蜗植入后患者能否获得听性反应,具有重要的应用价值.本研究方法的安全性符合要求,听性反应的引出率高,值得推广应用.     

小儿蜗后听觉神经损害的临床与听力学特征及定位

目的 探讨包含了听神经病在内的ABR严重异常、DPOAE正常为特征的蜗后听觉神经功能障碍小儿的临床与听力学特征及其可能的病损部位.方法 选取2002至2006年听力专科中ABR严重异常、DPOAE正常,排除中耳传导功能异常的患儿86例(165耳),年龄8 d～7岁,平均1岁1个月,入选为本研究对象.选择ABR严重异常、DPOAE异常、排除中耳病变的听功能障碍26例(29耳)患儿作为蜗性病变对照组,选择健康同龄儿童86例(166耳)作为正常对照组,比较蜗后病变、蜗性病变、正常听力3组间ABR波Ⅰ、波Ⅲ、波Ⅴ潜伏期和振幅,以及Ⅰ～Ⅲ波间期等参数的异同.所有数据采用SPSS11.0统计软件包进行t检验.结果 86例蜗后听神经损害患儿中,51例(59.3%)的病例新生儿期有高胆红素血症史,其中40例血中间接胆红素水平达重度标准,11例为轻中度;在首次就诊的原因中,主诉运动障碍者40例(46.5%),听力言语障碍者10例(11.6%);在伴随的疾病中,32例(37.2%)确诊伴随有脑性瘫痪.在86例165耳蜗后听觉神经功能障碍患耳中,103耳最大强度声刺激(103 dB)ABR无波分化,27耳仅见波Ⅰ分化,19耳仅见波Ⅴ分化,13耳见波Ⅰ+Ⅲ分化,3耳见波Ⅰ+Ⅴ分化.仅见波Ⅰ分化耳,其波Ⅰ潜伏期较正常听力耳延长,振幅较正常听力耳低矮(t值分别为-6.75和2.58,P值均<0.05);有波Ⅰ+Ⅲ分化耳,波Ⅰ潜伏期和振幅与正常听力耳差异无统计学意义,波Ⅲ潜伏期则较正常听力耳延长,振幅较正常听力耳低矮(t值分别为-2.77和3.63,P值均<0.05),Ⅰ～Ⅲ波间期较正常听力耳Ⅰ～Ⅲ波间期延长(t=-2.99,P<0.05).结论 在蜗后听觉神经功能损害类型中,最常见的类型为ABR从波Ⅰ开始就严重异常,即听神经病,其病变主要在第Ⅷ颅神经听支;仅见波Ⅰ分化耳,其病变部位主要在第Ⅷ颅神经听支以后;ABR有波Ⅰ+波Ⅲ分化耳,主要病变部位在波Ⅲ的发源神经核团,即上橄榄核以后的听觉神经通路.振幅低矮的波Ⅴ不是听神经病独有的特征.高胆红素血症导致的蜗后听觉神经系统病变的病例中,其受侵害部位的先后次序可能为大脑皮层、腩干听觉神经核团、第Ⅷ对颅神经听支.     

神经干细胞移植到神经导管修复大鼠面神经缺损的研究

目的:观察移植神经干细胞到可降解的聚乳酸/聚羟基乙酸(PLGA)神经导管修复大鼠面神经缺损的可行性。方法:20只SD大鼠随机分为2组,每组进行右侧面神经损伤手术,分别移植PLGA导管(A组)或含有神经干细胞的PLGA管(B组)。术后4、12周分别通过电生理检测、轴突形态学检测等方法来评估面神经的修复效果。结果:术后4周和12周,B组在神经动作电位的振幅分别为(27.53±7.48)、(141.23±21.18)μV,轴突的面积为(10 539.48±3 605.35)、(30 076.22±7 614.05)μm2,都高于A组[术后4周和12周,动作电位振幅为(13.03±11.38)、(118.50±22.70)μV;轴突面积为(6 633.20±3 759.30)、(20 772.53±10 903.65)μm2](P<0.05)。结论:神经干细胞移植可能会促进面神经的再生。     

心钠素对耳蜗缺血再灌注损伤的影响

目的观察心钠素对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤的影响。方法将豚鼠分为4组：实验组（A1、B1）及对照组（A2、B2）。采用造血栓后溶栓的方法制备耳蜗缺血再灌注模型。实验组A1在建模前10min静脉注射心钠素，实验组B1在再灌注即刻静脉注射心钠素，对照组（A2、B2）在相应时间静脉注射等量生理盐水。实验过程中采用激光多普勒血流量仪监测耳蜗血流量（cochlear blood flow，CoBF）并测定豚鼠听性脑干反应（auditory brainstem response，ABR）值。结果缺血前实验组A1的CoBF较对照组A2高，再灌注后至实验结束，2组CoBF值未见明显差别。实验组B1和对照组B2用药前的CoBF无明显差别，再灌注后对照组B2恢复到实验开始时的70％左右，而实验组B1恢复到实验开始时相同水平。缺血前4组听阈差异无统计学意义。缺血30min时，实验组A1的听阈较对照组A2低（t=7．761，P〈0．05）。实验组B1和对照组B2听阈差异无统计学意义。再灌注30min和60min时，实验组A1与对照组A2差异无统计学意义。实验组B1比对照组B2显著降低（t值分别为9．846和19．242，P值均〈0．05）。结论缺血再灌注后即刻应用心钠素，可以减轻耳蜗的缺血再灌注损伤，可以在增加耳蜗血流的同时降低听反应阈。为临床内耳微循环障碍疾病提供一种新的药物治疗方法。     

蜗后病变致突发性聋的病因研究

突发性聋是耳科临床常见疾病,其诊断需排除传导性聋及已知原因的感音神经性聋。蜗后病变是导致突发性聋的重要病因,基于MRI或脑干听觉诱发电位可明确蜗后病变。本文就导致突发性聋的蜗后病变及病因、MRI对蜗后病变的检查序列及价值做一综述,以期为突发性聋的诊断及检查方法的选择提供新思路。     

听神经病及蜗神经发育不良儿童人工耳蜗植入的有效性

目的 通过问卷量表评估,探讨听神经病及蜗神经发育不良儿童的人工耳蜗植入效果.方法 实验组为2004年1月至2010年10月期间接受人工耳蜗植入的符合听神经病或蜗神经发育不良诊断标准、且术前至少佩戴3个月助听器并接受语言训练的患儿,共21例,其中听神经病9例,蜗神经发育不良12例.植入对照组为20例同期植入人工耳蜗的感音神经性聋患儿.所有人工耳蜗植入患儿均开机使用6个月以上.正常听力对照组为42例听力正常的儿童,按年龄分为正常听力A组(年龄在24个月以下)18例、正常听力B组(年龄24～ 48个月)16例和正常听力C组(年龄在48个月以上)8例.采用听觉行为分级(Categories of Auditory Performance,CAP)和言语可懂度分级(Speech Intelligibility Rating,SIR)两个量表进行评分,使用SPSS16.0软件对实验组得分与植入对照组和正常听力对照组进行比较.结果 听神经病组、蜗神经发育不良组、感音神经性聋组以及三组正常听力儿童的CAP得分(x±s,下同)分别为(4.44±1.50)分、(4.83±1.69)分、(4.55±1.66)分、(5.22±1.11)分、(6.75±0.45)分和(7.00±0.00)分,SIR得分分别为(2.66±1.11)分、(2.33±1.15)分,(2.40±0.75)分,(2.56±1.04)分、(4.12±0.81)分和(5.00±0.00)分.CAP和SIR得分在六组受试者间差异均具有统计学意义(x2=35.481,P＜0.001;x2 =40.549,P＜0.001);组内两两比较,听神经病组/蜗神经发育不良组与感音神经性聋组及正常听力A组得分比较,差异无统计学意义(P值均＞0.05),而与正常听力B组及C组相比,差异具有统计学意义(P值均＜0.01).结论 听神经病和蜗神经发育不良儿童接受人工耳蜗植入后,同感音神经性聋患儿一样,能够获得听觉及言语能力的进步,但落后于听力正常的同龄儿童.人工耳蜗提高此类患儿听觉及言语能力的远期效果还有待进一步随访和评估.     

胚胎大鼠神经干细胞的冷冻及复苏

目的:研究胚胎大鼠神经干细胞(NSCs)冻存复苏后的存活率及再培养生长情况,观察低温冻存对NSCs生物特性的影响。方法:含有10%BSA及7.5%DMSO的NSCs无血清培养液(不含神经生长因子)作为冻存液,将利用无血清培养液体外培养的原代、第3代、第6代胚胎大鼠NSCs进行冻存,于1周、4周、8周、12周、16周分别复苏,计数活细胞比例并进行再培养、分化鉴定。结果:不同的细胞代数,不同的冻存时间对复苏后的细胞存活率都无明显影响。复苏后NSCs的存活率均达到60%～70%,并能分化为神经元和星型胶质细胞。结论:本实验成功地对胚胎大鼠NSCs进行了冻存复苏及再培养,为择期应用NSCs耳蜗内移植治疗感音神经性聋的实验研究奠定了基础。     

蜗神经管狭窄患者人工耳蜗植入术后听觉康复效果分析

目的：分析蜗神经管狭窄患者人工耳蜗植入术（cochlear implantation,CI）后康复效果。方法对30例术前颞骨高分辨率CT诊断为蜗神经管狭窄的双耳极重度感音神经性聋患者术中和CI术后3、6、9个月行听神经复合动作电位（evoked compound action potential,ECAP）和电刺激脑干诱发电位（evoked auditory brainstem re-sponse,EABR）检测,并于术前、术后3、6、9个月行声场测听,其中17例3岁以上（含3岁）患者行封闭式言语识别率测试,分析其听觉康复效果。结果①30例患者术后3、6、9个月 ECAP 和 EABR 的波形均无明显变化。②术后3、6、9个月声场听阈分别为65±8、62±4、61±7 dB HL,较术前（100±5 dB HL）明显改善。③17例术后3、6及9个月的单韵母识别率分别为55％±7％、56％±8％、80％±4％,术后9个月时较术前（52％±8％）明显改善;单声母识别率分别为9％±3％、8％±4％、9％±2％,较术前（8％±2％）无明显改善。结论双侧蜗神经管狭窄患者CI术中、术后ECAP与EABR检测均不能引出典型波形,术后主观听力及言语识别率较差,语言交流存在障碍。     

听神经病患者80Hz听觉稳态诱发电位研究

目的:探讨听神经病患者80 Hz听觉稳态诱发电位的特点及与听性脑干诱发电位V波的相关性.方法:以1000 Hz短音95 dBnHL作声刺激,比较听神经病组和正常对照组80 Hz听觉稳态诱发电位及短音听性脑干反应(ABR)的波形差异.结果:听神经病组两种听觉诱发电位波形的同时引出率为85.4%且波幅低或极低,ABR的Ⅰ、Ⅲ波消失;14.6%两种听觉诱发电位波形同时消失.而正常对照组两种波形的同时引出率为100.0%.结论:80 Hz听觉稳态诱发电位与听性脑干反应的V波有明显相关性.     

人工耳蜗术前电刺激听觉脑干诱发电位评估残余听力及术后效果分析

目的 探讨最大声刺激无反应患者人工耳蜗术前电刺激听觉脑干诱发电位系统(electrically evoked auditory brainstem responses,EABR)检测听觉通路的方法及分析术后康复效果。方法 选取中国医学科学院北京协和医院2015～2016年最大声刺激无反应患者21例,分析临床资料,人工耳蜗术前采用EABR检测听觉通路,随访术后神经反应遥测(neural response telemetry,NRT)及调机结果,应用听觉行为分级标准(categories of auditory performance,CAP)和言语可懂度分级标准(speech intelligibility rating,SIR)问卷评价术后听力和言语结果;另选择有残余听力耳聋患者10例作为对照组。结果 实验组21例患者术前EABR的Ⅴ波阈值(178.23±14.18)CL,术后听力言语康复CAP(5.50±1.75)等各指标和对照组统计学分析有显著差别(P<0.05);术后均获得不同程度电听觉,开机测试NRT引出率(33%)低于对照组(90%);两组患者I/O曲线斜率和术后CAP...     

方剂突聋灵治疗光化学诱导法致豚鼠突发性聋的实验研究

目的探讨中药方剂突聋灵治疗光化学诱导法所致豚鼠突聋效果.方法采用光化学诱导法建立豚鼠耳蜗微循环障碍诱发突聋模型36只,随机均分为正常对照组,单纯造模组,中药给药A组和中药给药B组.以听性脑干反应阈值变化和耳蜗外侧壁铺片为观察指标,观察中药突聋灵对听力的作用及血管纹的变化.结果中药组动物ABR反应阈值较单纯造模组明显降低(P＜0.01),耳蜗外侧壁铺片显示血管纹毛细血管网萎缩明显好转.结论方剂突聋灵改善耳蜗微循环效果良好.     

鼻咽癌放疗对听性脑干功能的远期影响

目的：探讨放射治疗对鼻咽癌患者听性脑干功能的远期影响。方法：对鼻咽癌33例(66耳)患者于放疗前,放疗后第1天及第3、6、12、24、36个月分别行听性脑干反应(ABR)检测。结果：放疗完成后第1天与放疗前对比,听性脑干无明显减退。听性脑干部分指标3个月后开始减退,6个月后全面减退。在6～12个月之间,听性脑干部分修复,但此后听性脑干呈缓慢减退的趋势。结论：常规的鼻咽癌放疗对患者近期听性脑干可能无明显影响,但会引起其远期的损伤,为了防止出现严重后果,必需早期采取积极的防治措施。     

不同病因引起的新生儿高胆红素血症听性脑干反应的特点

目的 探讨不同病因引起的新生儿高胆红素血症的听性脑干反应(ABR)特点及其与临床的关系.方法 将88例(176耳)高胆红素血症患儿按病因分为6组,同时选取15名(30耳)健康新生儿作为正常对照,均进行ABR测试,并比较各组间的差异,42 d后患儿复查ABR.结果 不同病因中,葡萄糖6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G-6-PD)缺乏症所致的高胆红素血症ABR反应阈增高最明显,异常率最高.不同病因组之间及与对照组间ABR的Ⅲ波、Ⅴ波潜伏期及Ⅲ-Ⅴ、Ⅰ-Ⅴ波间期差异均具有统计学意义(P值均＜0.05).高胆红素血症患儿ABR各波潜伏期及波间期均较对照组延长,其中新生儿感染最容易引起ABR各波潜伏期及波间期延长,其次是ABO溶血与其他不明原因组,母乳性黄疸组潜伏期与波间期相对要短.多病因组ABR反应阈的异常率明显高于单病因组(P＜0.05);单种病因与多种病因引起的高胆红素血症组间比较,ABR各波潜伏期及波间期差异无统计学意义(P值均＞0.05).30例患儿进行了复查,复查前后除Ⅰ-Ⅲ波间期外,各波潜伏期及波间期差异均具有统计学意义(P值均＜0.05).结论 高胆红素血症对听觉系统的损害与病因的种类及数量有关.由G-6-PD缺乏、新生儿感染、ABO溶血、多病因以及不明原因引起的高胆红素血症与母乳性黄疸相比,更易导致听觉功能损害.高胆红素血症对听觉的损害存在一定的可逆性.

Abstract：

Objective To explore the characteristics of auditory brainstem response (ABR) in neonatal hyperbilirubinemia induced by different causes. Methods A total of 88 neonates ( 176 ears) with hyperbilirubinemia were divided into several groups according to the causes and followed up after 42 d, and 15 nomal neontes (30 ears) were measured ABR and analyzed the results. Results The thresholds of ABR in glucose-6-phosphate dehydrogenase were the highest in all the groups and had the lowdest incidence rate.The wave Ⅲ, Ⅴ latencies and Ⅲ-Ⅴ, Ⅰ -Ⅴ interwave intervals of the ABR were significantly difference and prolonged during test in comparison to the latencies in the control group ( P ＜ 0. 05 ). The neonatal infections group had the longest wave and interwave intervals, followed by ABO incompatibility hemolytic diseases and the unknown cause groups, while the breastfeeding jaundice were the shortest in the groups of neonatal hyperbilirubinemia. The thresholds of ABR in the hyperbilirubinemia caused by several etiologies were significant abnomality when compared with the single etiology. However, they were similar in the wave latencies and interwave intervals of ABR. During the follow up, the ABR wave latencies and interwave intervals except for interwave latency Ⅰ-Ⅲ were significantly shorter. Conclusions The toxicity of hyperbilirubinemia to the auditory nervous system are related to the species and number of etiologies. The neonate hyperbilirubinemia cuased by glucose-6-phosphate dehydrogenase, infections, ABO incompatibility hemolytic diseases and many etiologies are much more dangerous to the auditory system than the breastfeeding jaundice. The damages of hyperbilirubinemia to the auditory nervous system are reversible probably.     

Ramsay Hunt综合征的听性脑干诱发电位分析

目的:探讨RamsayHunt综合征患者听性脑干诱发电位(ABR)改变。方法:对36例单侧发病,对侧耳正常的RamsayHunt综合征患者进行纯音测试及ABR检查。以健侧耳为对照,分析双耳Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波潜伏期及Ⅰ～Ⅲ、Ⅰ～Ⅴ、Ⅲ～Ⅴ间期的差异。结果:RamsayHunt综合征患者的患侧耳Ⅲ、Ⅴ波潜伏期及Ⅰ～Ⅲ、Ⅰ～Ⅴ间期较健侧耳延长,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:RamsayHunt综合征患者常存在听觉通路损害,表现为蜗性损害、蜗后损害或蜗性损害并发蜗后损害,单纯蜗性损害较少见。     

干细胞向雏鸡和成年豚鼠耳蜗的移植方法

目的建立干细胞向雏鸡和成年豚鼠耳蜗移植的方法。方法从绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）转基因胚胎小鼠中分离出GFP标记的嗅球神经干细胞。雏鸡耳蜗的干细胞移植是经外耳道剥离鼓膜,暴露中耳腔的蜗窗,再经蜗窗膜造孔注入千细胞。成年豚鼠耳蜗鼓阶的干细胞移植是行耳后切口暴露听泡,在耳蜗底转近镫骨动脉处钻孔,并注入干细胞。中阶的移植是经耳蜗第三转的血管纹外侧壁注入干细胞。细胞移植1天后,分离雏鸡和豚鼠的耳蜗作冰冻切片,在荧光显微镜下观察移植细胞的分布。结果分离出GFP标记的嗅球神经干细胞。移植后的千细胞可分布于雏鸡耳蜗及豚鼠耳蜗的鼓阶、中阶。结论成功建立了干细胞向雏鸡和成年豚鼠耳蜗移植的方法,为进一步将干细胞应用于耳聋的治疗及机制研究奠定基础。     

西地那非对豚鼠噪声性听觉损伤阈移的影响

目的 探讨西地那非(sildenafil)对豚鼠噪声性听觉损伤阈移的影响.方法 将豚鼠按随机数字表法分为对照组、噪声暴露组和西地那非给药组,每组10只.西地那非组及噪声组豚鼠在白噪声(A计权声压级110 dB)暴露1周后分别腹腔注射西地那非10 mg/(kg·d)及生理盐水4mL/(kg·d),连续给药4周.分别测试噪声暴露前1日、噪声暴露后1、2及4周听性脑干反应(ABR)阈值,并通过扫描电镜观察噪声暴露后4周豚鼠耳蜗毛细胞的形态变化.结果 噪声暴露1后,噪声暴露组豚鼠ABR阈值(声压级)平均提高19.1 dB,随着时间推移,阈移逐渐加大,暴露后4周,阈值平均提高22.0 dB;西地那非组噪声暴露后ABR阈值提高19.8 dB,给药后阈移逐渐减小,给药后4周,阈值仅平均提高4.8 dB.西地那非组与噪声暴露组相比,除噪声暴露结束后这一时间点以外,其余给药后各时间点ABR阈值差异均具有统计学意义(P值均＜0.05).扫描电镜显示,噪声组豚鼠耳蜗内、外毛细胞均出现听毛紊乱、融合及缺失;而西地那非组耳蜗病变较轻,听毛仅有轻微倒伏、融合现象.结论 西地那非能够减轻噪声对豚鼠耳蜗毛细胞的损害,降低噪声性听觉损伤引起的ABR阈值升高.     

两种内淋巴给药方式对豚鼠耳蜗功能和形态的影响

目的 观察经耳蜗侧壁打孔(侧壁径路)和经圆窗膜、基底膜穿刺(双膜径路)两种内淋巴系统给药方式对豚鼠耳蜗整体形态结构和功能的影响并比较两种方式的优劣.方法 40只正常健康杂色豚鼠分为A、B两组(每组20只),所有动物左侧为给药耳,右侧为非给药耳.A组采用侧壁径路进入中阶灌注携带增强型绿色荧光蛋白基因的5型重组腺病毒(adenovirus5-enhanced green fluorescence protein,AdS-EGFP)5 μl;B组采用双膜径路进入中阶灌注AdS-EGFP 5μl.给药前后行听性脑干反应(ABR)测试,观察听功能改变.耳蜗冰冻切片直接荧光观察腺病毒分布,HE染色观察手术径路的愈合情况.基底膜铺片鬼笔环肽染色观察毛细胞受损情况,扫描电镜观察局部损害情况.结果 所有动物术后均存活.穿刺部位修复良好,耳蜗的完整性得以保持.EGFP在Corti器和血管纹内壁细胞内标记明显,表明两种给药径路都可以将药物成功注入内淋巴系统.A组证实成功14只(70%),手术前后ABR反应阈(声压级)变化[(33.1±10.3)dB]与对侧非给药耳[(9.4±3.9)dB]比较差异具有统计学意义(F=46.34,P=0.0005);B组证实成功8只(40%)手术前后阈值改变[(2.5±3.8)d8]与对侧耳[(2.5±3.8)dB]比较差异无统计学意义(F=0.00,P=1.000).两种方法在部分动物中都有药物渗漏入外淋巴的现象,给药局部产生炎性反应,侧壁径路对毛细胞的损害范围大于双膜径路.结论 两种手术径路都可将药物成功注人豚鼠耳蜗的内淋巴系统中,局部有炎性反应,术后耳蜗的完整性可以获得完全恢复.侧壁径路对豚鼠耳蜗毛细胞缺失和ABR反应阈的影响大于双膜径路,但是经侧壁径路进入中阶的手术成功率高于双膜径路,选择何种灌注径路需要根据实验要求来定.