高脂饲料诱导的肥胖倾向和肥胖抵抗倾向大鼠内脏脂肪visfatin和AMPK表达及其相互关系

目的:探讨大鼠内脏脂肪组织visfatin和AMPK的表达对肥胖倾向(OP)和肥胖抵抗倾向(ORP)形成的可能作用。方法:20只雄性Wistar大鼠,高脂饲料喂养10周,依据腹脂/体重比值选大鼠进入OP和ORP两组,每组各7只,测定大鼠血脂、血糖、血浆胰岛素和visfatin浓度,肾周脂肪组织中visfatin表达和AMPK活性。结果:与ORP组大鼠相比,OP组大鼠血浆visfatin浓度有升高趋势(P=0.16),肾周脂肪组织visfatin表达显著升高(P<0.05),而AMPK活性显著降低(P<0.05),内脏脂肪visfatin表达与AMPK活性之间存在负相关关系。结论:内脏脂肪组织中visfatin表达升高和AMPK活性降低可能与肥胖倾向有关。Visfatin可能通过负性调节AMPK活化程度影响肥胖倾向的发生。     

运动和限食减肥对肥胖大鼠血浆和胃组织ghrelin表达的影响

目的:观察运动和限食减肥对肥胖大鼠血浆和胃组织ghrelin表达的影响,初步探讨ghrelin在减肥中的作用。方法:100只雄性断乳SD大鼠按照体重随机分为对照组(普通饲料喂养,n=20)和模型组(高脂饲料加普通饲料混合喂养,n=80),以普通饲料组Lee’s指数正常值上限+tv,a.s为肥胖确定标准,高于此标准为肥胖。营养性肥胖SD雄性大鼠随机分为肥胖对照组、游泳减肥组、限食减肥组、游泳+限食减肥组,同时选取普通饲料组大鼠8只作为对照。游泳减肥组每天游泳40min,每周游泳6天,持续5周。限食减肥组计算减肥开始前2周动物平均每日进食量减量1/3,喂养3周后,再减量1/3,并再持续2周。游泳+限食减肥组游泳条件与单纯游泳减肥组一致,限食条件与限食减肥组一致。实验5周后取材,测定睾周和肾周脂肪量、血浆和胃组织ghrelin蛋白以及胃组织ghrelin mRNA表达量。结果:肥胖对照组胃ghrelin蛋白和mRNA表达均明显低于正常对照组(P<0.05),但血浆ghrelin下降不明显(P>0.05)。与肥胖对照组相比,减肥组大鼠体重和内脏脂肪含量明显下降,游泳减肥组及游泳+限食减肥组血浆和胃ghrelin蛋白和mRNA表达均升高(P<0.05),限食减肥组胃ghrelin mRNA表达增高(P<0.05),血浆和胃ghrelin蛋白变化不明显。结论:运动减肥过程中伴随着体重下降出现ghrelin水平回升,而限食减肥过程中,ghrelin的变化不太明显,因此,ghrelin可能主要参与运动减肥的过程。     

间歇低氧暴露对高脂膳食大鼠胰岛素敏感性的影响

目的:探讨间歇低氧暴露对高脂膳食肥胖大鼠胰岛素抵抗的影响。方法:40只雄性SD大鼠随机分为普通膳食常氧组、普通膳食间歇低氧组、高脂膳食常氧组、高脂膳食间歇低氧组。普通膳食采用普通饲料,高脂膳食采用高脂饲料,间歇低氧暴露采用常压低氧方法,氧浓度控制在15.4%,每天10小时。干预6周后取材测试大鼠内脏脂肪总量、空腹血糖和胰岛素,并计算胰岛素敏感指数。结果:与普通膳食常氧组相比,高脂膳食常氧组大鼠Lee指数、内脏脂肪总量和血清胰岛素水平极显著增加而胰岛素敏感指数极显著下降(P<0.01),但普通膳食间歇低氧组大鼠Lee指数、内脏脂肪总量显著减少(P<0.05,P<0.01),胰岛素敏感指数显著升高(P<0.05);与高脂膳食常氧组比较,高脂膳食间歇低氧组大鼠Lee指数、内脏脂肪总量和胰岛素水平极显著下降(P<0.01),胰岛素敏感指数极显著提高(P<0.01)。相关性分析显示,内脏脂肪总量与胰岛素水平存在一定正相关,且胰岛素水平和胰岛素敏感指数存在高度负相关(P<0.01)。结论:体内脂肪总量增加可使血清胰岛素水平升高,胰岛素敏感性下降,而间歇低氧暴露可以减少高脂膳食大鼠体内脂肪含量,提高胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗。     

有氧运动对肥胖小鼠胃组织Ghrelin和下丘脑GHSR-1a表达的影响

目的:探讨有氧运动对肥胖小鼠胃组织Ghrelin-下丘脑组织GHSR通路相关基因表达的影响,明确运动改善胃功能以抵抗肥胖的可能机制。方法:雄性C57BL/6J小鼠40只随机分为普通对照组(NC组,n=8),饲喂普通饲料;高脂膳食组(H组,n=32),饲喂高脂饲料8周以建立肥胖模型。建模成功后的小鼠随机分为高脂对照组(HC组,n=8)和高脂运动组(HE组,n=8),均继续饲喂高脂饲料,同时HE组进行速度12 m/min、1 h/次/天、6次/周的4周跑台训练。结束后取血清、胃和下丘脑组织。测试血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)、血糖(GLU)和总Ghrelin水平;RT-PCR和Western blotting测试胃组织Ghrelin、Goat和下丘脑GHSR-1a mRNA和蛋白表达水平。结果:(1)运动干预后,HE组体重较HC组降低(P<0.05);运动干预2周后,HE组每周摄食量较HC组下降,但运动4周后又趋于接近。(2)HC组血脂血糖各指标均高于NC组(P<0.05),HE组GLU水平较HC组下降(P<0.05)。(3)在胃组织,HC组Ghrelin和Goat mRNA水平与NC组相比下降(P<0.01),HE组Ghrelin mRNA(P<0.01)和蛋白水平(P<0.05)、Goat m RNA和蛋白水平(P<0.05)高于HC组。(4)在下丘脑,HC组GHSR-1αm RNA水平较NC组下降(P<0.01),HE组GHSR-1a蛋白水平较HC组升高(P<0.05)。结论:有氧运动可能通过上调肥胖小鼠胃组织Ghrelin-下丘脑GHSR信号通路而改善血脂血糖水平以抵抗肥胖。     

代谢综合征大鼠肥胖特征及ERK1/2和p38MAPK的作用研究

目的探讨ERK1／2和p38MAPK在脂肪组织生长中的作用。方法Wistar雄性大鼠20只,随机均分为代谢综合征组和正常对照组,观察代谢综合征大鼠的代谢指标及体重、内脏脂肪含量、脂肪细胞大小和组织病理学改变,Western blot法检测ERK1／2及p38MAPK蛋白在脂肪组织中的表达情况。结果代谢综合征大鼠血压、血浆游离脂肪酸、甘油三酯、空腹血糖及胰岛素均显著高于对照组（P〈0．01）,其体重、腹围、内脏脂肪含量、脂肪系数和各部位脂肪细胞大小亦比对照组显著增高（P〈0．01）,肝细胞存在脂肪变性。在棕色脂肪组织中ERK1／2蛋白的表达与对照组比较无显著性差异,皮下脂肪和内脏脂肪中ERK1／2蛋白的表达均显著高于对照组（P〈0．01）,而p38MAPK蛋白的表达在所有脂肪组织中均显著高于对照组（P〈0．01）。结论代谢综合征大鼠肥胖特征为腹型肥胖,脂肪组织生长以肥大性增生为主,并存在脂质异位沉着（脂肪肝）。代谢综合征大鼠脂肪组织增生可能与ERK1／2和p38MAPK信号通路激活有关。     

不同强度运动结合共轭亚油酸对肥胖大鼠内脏脂肪组织PPARγ表达和血浆PPARγ含量的影响

目的:探讨不同强度运动结合共轭亚油酸(CLA)对肥胖大鼠内脏脂肪组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)m RNA和蛋白表达以及血浆PPARγ浓度和血脂的影响。方法:选取正常的SD大鼠8只为空白对照组(C组);建立肥胖大鼠模型,选取建模成功SD大鼠40只,随机分为对照组(OC组)、单纯补充CLA组(OCC组)、低强度运动结合CLA组(OLC组)、中强度运动结合CLA组(OMC组)、高强度运动结合CLA组(OHC组),持续干预8周,记录体重。8周后测内脏脂肪组织重量,用q RT-PCR测内脏脂肪组织中PPARγm RNA,免疫组化法测内脏脂肪组织PPARγ蛋白表达,ELISA测血浆PPARγ浓度,全自动生化仪测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。结果:1OLC、OMC、OHC组脂肪组织PPARγm RNA的表达高于OC、OCC组(P<0.01),PPARγ蛋白表达与m RNA的表达情况具有相似性,OLC、OMC、OHC组血浆PPARγ浓度高于OC、OCC组(P<0.01),不同运动强度之间无差异。2OCC、OHC组的TC浓度低于OC组(P<0.05),OLC、OMC、OHC组的TG浓度低于OC、OCC组(P<0.01),OLC、OMC、OHC组的LDL-C浓度高于OC、OCC组(P<0.05)。上述各指标(除TC外)OCC组与OC组间均无差异。3OLC、OMC、OHC组体重增长幅度和内脏脂肪重量均低于OC、OCC组(P<0.01,P<0.05),不同运动强度组之间无差异,OCC组与OC组间均无差异。结论:补充CLA在运动的刺激下可能发挥更大的作用,受运动强度影响较小。     

基于学校的有组织的运动干预对肥胖青少年BMI和糖、脂代谢的影响

目的:探讨基于学校的有组织的运动干预对青春期早期肥胖青少年体重指数(BMI)和糖脂代谢的影响及其量效关系。方法:12~14岁肥胖青少年49名,按照BMI和个人意愿分为运动组(25名)和对照组(24名),运动组进行有组织的9个月、运动量两阶段(0~3个月,大运动量;4~9个月,小运动量)递减的运动干预。分别于运动前、3个月末和9个月末进行体格测试和空腹血脂、血糖、胰岛素水平和胰岛素抵抗指数检测。结果:(1)运动组男生和女生BMI在干预期末比干预前分别下降了0.3和0.5,对照组男生和女生BMI分别上升0.2和0.3。(2)运动组血清甘油三酯(TG)水平在第3个月末和9个月末与运动前相比均显著下降(P<0.05),对照组血清TG水平显著上升(P<0.05);运动组血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)在整个干预期间无显著性变化,而对照组血清HDL-C水平显著下降(P<0.01),且低于运动组水平(P<0.01)。(3)运动组血糖(P<0.01)、血清胰岛素水平(P<0.05)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)(P<0.05)在运动干预后均显著下降;对照组血糖显著升高(P<0.05),血清胰岛素水平和HOMA-IR无显著性变化。(4)运动组高甘油三酯血症检出率和空腹血糖受损率在3个月末分别下降了66.7%和100%,并持续维持到9个月运动干预末;对照组则分别上升了2.25倍和1.98倍。结论:基于学校的有组织的运动干预可以有效地预防和延缓肥胖青少年肥胖的进一步发展,改善糖脂代谢,降低高甘油三酯血症和空腹血糖受损发生率。     

跑台运动对高脂饮食诱导的肥胖大鼠骨骼肌肌联素表达的影响

目的:观察跑台运动对高脂饮食诱导的肥胖大鼠骨骼肌肌联素(myonectin)表达的影响。方法:5周龄健康雄性SD大鼠随机分成对照组和高脂喂养组,分别进行普通饲料和高脂饲料喂养,12周后筛选肥胖大鼠16只,随机分为高脂安静组和高脂运动组。跑台训练持续10周,每周5次,每次60 min,跑速26 m/min。测定大鼠血脂及血浆自由脂肪酸水平,采用real-time PCR方法测定比目鱼肌、腓肠肌肌联素m RNA表达,比目鱼肌脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)的m RNA表达。结果:与对照组相比,高脂饮食喂养大鼠体重和体脂显著增加(P<0.01),总甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白水平显著升高,高密度脂蛋白水平显著降低(P<0.05),血自由脂肪酸(free fatty acid,FFA)水平显著升高(P<0.05)。比目鱼肌和腓肠肌肌联素m RNA表达水平显著升高(P<0.05),比目鱼肌CD36表达显著上调(P<0.05)。与高脂饮食组大鼠相比,10周跑台运动大鼠体重显著降低(P<0.01),血脂改善,血FFA水平显著降低(P<0.05)。此外,比目鱼肌和腓肠肌肌联素m RNA表达显著下调(P<0.05),比目鱼肌CD36表达显著降低(P<0.05)。相关性分析发现,骨骼肌肌联素水平与血脂和血糖水平呈显著正相关(P<0.05)。结论:骨骼肌肌联素的表达与血脂、血糖水平显著相关,运动促进了血脂和血糖水平的降低,进而间接下调了骨骼肌肌联素的表达,提示肌联素可能不参与运动引起的自由脂肪酸水平的降低。     

急性运动对肥胖大鼠下丘脑ghrelin和obestatin的影响

目的:初步探讨一次性跑台运动影响肥胖大鼠摄食的神经内分泌机制。方法:10周成功建模营养性肥胖SD大鼠46只,分为对照组(C)和运动后即刻组(E0)、1小时组(E1)、3小时组(E3)、12小时组(E12)和24小时组(E24)。各运动组大鼠在专用电动跑台上进行一次性运动,跑台坡度5%,速度20m/min,时间为40min。分别于运动后即刻、1h、3h、12h和24h观察大鼠摄食量、血糖、血脂指标;采用放射免疫法测试血浆和下丘脑ghrelin和obestatin蛋白表达,RT-PCR方法测试下丘脑ghrelin受体GHSR-1α、obestatin假定受体GPR-39的基因表达。结果:一次性跑台运动后,与对照组相比,E1、E3、E12和E24组大鼠摄食量下降,血糖和血脂也有不同程度的下降趋势,其中E1组血糖和E12组血脂下降显著;与对照组比较,运动后不同时间段大鼠血浆ghrelin和obestatin无明显变化,而运动后即刻下丘脑ghrelin和obestatin显著下降(P<0.01),在12h和24h又明显上升(P<0.01);与对照组相比,运动后各组下丘脑GHSR-1α基因表达无明显差异,且未见下丘脑GPR-39基因表达。结论:Ghrelin影响大鼠摄食和能量代谢调节可能是通过下丘脑中枢机制,而与外周血ghrelin无关。     

运动、EGCG和肉碱对肥胖大鼠体重、内脏脂肪及肝脏CPT1表达的影响

目的:探讨运动、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和肉碱(LC)对肥胖大鼠体重、内脏脂肪及肝脏肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)基因、蛋白表达的影响。方法:选取造模成功的肥胖大鼠50只,随机分为5组:肥胖对照组(F),运动组(S),运动+EGCG组(S+E),运动+肉碱组(S+L),运动+EGCG+肉碱组(S+E+L),每组10只。用蒸馏水将EGCG、LC溶解成无色透明的溶液,EGCG和LC的补充量均按80 mg/kg体重计算,灌胃容量为1 ml/100g体重(体重超过500g的大鼠,灌胃容量都按5ml配比),F组、S组大鼠则按照1 ml/100g体重灌胃蒸馏水。除F组外,其他四组大鼠进行低强度有氧跑台训练,负荷设定为16m/min,60min/day,大约相当于大鼠58%最大摄氧量。7周后比较各组大鼠体重、内脏脂肪系数、肝脏甘油三酯(TG)水平及肝脏CPT1基因及蛋白表达水平。结果:S组、S+E组、S+L组、S+E+L组大鼠体重显著低于F组(P<0.05),S+E+L组体重显著低于S组(P<0.05)。S+E+L组内脏脂肪系数显著低于F组(P<0.05)。S+L组和S+E+L组肝脏TG水平显著低于F组、S组和S+E组(P<0.05)。S组大鼠肝脏CPT1基因及蛋白水平与F组无显著差异(P>0.05),S+E组、S+L组、S+E+L组大鼠CPT1基因水平较F组和S组显著增高(P<0.05),S+L组和S+E+L组CPT1蛋白量较F组显著增加(P<0.05)。结论:运动、EGCG、LC联合使用可起到减重、减少内脏脂肪和改善肝脏甘油三酯水平的作用,改变肝脏CPT1表达可能是其机制之一。     

间歇性低氧和运动对高脂饮食诱导胰岛素抵抗大鼠血清内脂素的影响

目的:探讨间歇性低氧和运动对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠血清内脂素的影响。方法:将72只雄性SD大鼠随机分为普通对照组(12只)和高脂造模组(60只),高脂造模组给予高脂饲料。6周末随机取12只高脂造模组大鼠处死,普通对照组同期处死,测试其空腹血糖和胰岛素水平,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)确定造模成功后,将其余48只高脂造模组大鼠分为常氧安静组、低氧安静组、常氧运动组和低氧运动组,每组各12只。低氧组暴露在14.5%氧浓度的环境中,4h/d,7d/w;运动组常氧状态下以20m/min进行跑台运动,1h/d,5d/w。4周末,测试各组大鼠血糖、血胰岛素、血清内脂素和内脏脂肪总量等指标。结果:6周高脂饮食后,高脂组大鼠胰岛素抵抗指数显著升高,造模成功。与常氧安静组比较,低氧安静组、常氧运动组胰岛素抵抗指数和血清内脂素均显著下降(P<0.01);低氧运动组血清内脂素较常氧运动组显著升高(P<0.01),与常氧安静组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:间歇低氧和有氧运动均可有效改善胰岛素抵抗,并降低血清内脂素水平;而间歇低氧和运动双重作用对血清内脂素的影响不显著。     

代谢综合征大鼠模型的建立及其相关基因表达变化的研究

目的建立与人类代谢综合征(MS)相似的大鼠模型,并分析其相关基因的表达变化。方法雄性8周龄Wistar大鼠30只随机分为普通膳食对照组(NC组)和高脂高盐膳食组(MS组)。喂养期间对大鼠体重、血压、空腹血糖(FPG)、血脂、胰岛素水平等进行连续监测;24周喂养结束进行高胰岛素-正常血糖钳夹试验和腹腔注射糖耐量试验,检测颈动脉血压,测量内脏脂肪重量;取其白色脂肪(肠系膜)、棕色脂肪和骨骼肌组织,以RT-PCR法检测胰岛素敏感组织基因表达变化。结果MS组体重、内脏脂肪、血压、血浆甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)与NC组比较显著增加(P<0·05或P<0·01),且存在严重的胰岛素抵抗[GIR:1·26±0·82mg/(kg·min)vs7·03±1·68mg/(kg·min),P<0·01]和糖耐量减退,表现为典型的MS特征;胰岛素敏感组织基因检测结果显示,与NC组比较,MS组与糖脂代谢和能量代谢相关的23种基因的mRNA表达水平在白色脂肪(肠系膜)、棕色脂肪和骨骼肌组织中多数变化显著。结论长期高脂和高盐饮食喂养可诱导类似于人类MS的基本临床特征大鼠模型,其机制可能与高脂摄入导致大鼠胰岛素敏感组织的糖脂代谢和能量代谢相关基因的变化有关。     

实验性肥胖大鼠药物减肥研究

 目的 研究胰高血糖素样肽-1受体激动剂(Exendin-4)对营养性肥胖大鼠的减肥作用.方法 建立营养性肥胖动物模型,然后将40只肥胖模型大鼠,随机分成4个组,分别为3个实验组(高、中、低3个剂量组)和1个对照组.连续给药9周,记录体重、摄食量,并检测血清胆固醇、三酰甘油、睾丸脂肪重量和细胞大小.结果 用药后高剂量组大鼠体重增长缓慢,睾丸周围脂肪重量与对照组相比明显降低,差异有统计学意义.而摄食量、血清胆固醇、三酰甘油、脂肪细胞大小不受药物的影响.其他各组与对照组比较差异无统计学意义.结论 Exendin-4长期皮下给药,对肥胖大鼠具有明确的延缓体重增长的效果.     

肥胖合并2型糖尿病患者胃旁路手术后相关指标的变化

 目的 探讨肥胖合并2型糖尿病患者腹腔镜胃旁路手术(LRYGB)后相关指标的变化。方法 回顾性分析2011-03至2012-02在原武警总医院普外科接受LRYGB的52例肥胖合并2型糖尿病患者的临床资料,分别在术前、术后3、6、12个月,采用人体成分分析仪检测全身脂肪总量和非脂肪总量变化,通过日本东芝公司80排螺旋CT+美国明维思公司校准体模和定量CT(QCT)分析软件,记录腹部总体脂肪体积(TAFV)、腹部内脏脂肪总体积(TVFV)和腹部皮下脂肪总体积(TSFV)的变化;同时测定相应时间点血清瘦素、脂联素(APN)及糖脂代谢指标,部分指标随访5年。结果 (1)术后12个月糖尿病达标率为86.5%,肥胖症治愈率为67.3%,术后各时间点空腹胰岛素(Fins)和HOMA-IR数值呈逐渐下降趋势,仅在术后12个月和术后5年明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05)。与术前相比,在术后12个月三酰甘油(TG)、胆固醇(CH)下降明显,差异均有统计学意义(P＜0.05),术后5年TG略有升高,但与术前差异仍有统计学意义(P＜0.05)。(2)与术前相比,术后6、12个月和2年瘦素下降明显,差异均有统计学意义(P＜0.05);术后APN在术后3个月略有下降,然后呈逐渐升高趋势,在术后12个月和2年APN数值显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05)。(3)术后各时间点体重和BMI均呈下降趋势,术后5年下降明显,与术前比较,差异有统计学意义(P＜0.05)。术后非脂肪总量有下降趋势,但仅在术后5年时变化明显。与术前相比,术后6个月TVFV显著下降,术后12个月TSFV显著下降,术后5年TSFV和TVFV均显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 LRYGB术后腹部内脏脂肪较皮下脂肪减少更为显著,伴血清瘦素降低和APN增高。     

Regular physical activity influences plasma ghrelin concentration in adolescent girls

PURPOSE: We examined the effect of regular physical activity on plasma ghrelin concentration after onset of puberty in girls. In addition, we also examined the association of fasting plasma ghrelin concentration with various plasma biochemical, body composition, and aerobic capacity variables in healthy adolescent girls. METHOD: Fifty healthy schoolgirls ages 11 to 16 yr were divided either into a physically active (N = 25) or a physically inactive (N = 25) group. The physically active group consisted of swimmers who had trained on an average of 6.2 +/- 2.0 h.wk(-1) for the last 2 yr, whereas the inclusion criterion for the physically inactive group was the participation in physical education classes only. The subjects were matched for age (+/- 1 yr) and body mass index (BMI; +/- 2 kg.m(-2)). Maturation I group (14 matched pairs) included pubertal stages 2 and 3, and maturation II group (11 matched pairs) included pubertal stages 4 and 5. RESULTS: Physically active girls had significantly higher (P < 0.05) mean plasma ghrelin levels than the physically inactive girls (maturation I: 1152.1 +/- 312.9 vs 877.7 +/- 114.8 pg.mL(-1); maturation II: 1084.0 +/- 252.5 vs 793.4 +/- 164.9 pg.mL(-1)). Plasma ghrelin concentration was negatively related to percent body fat, fat mass, peak oxygen consumption per kilogram of body mass, leptin, estradiol, insulin, and insulin-like growth factor-I (IGF-I) (r > -0.298; P < 0.05). Multivariate linear regression analysis to determine the predictors of ghrelin concentration using the variables that were significantly associated with ghrelin concentration demonstrated that plasma IGF-I was the most important predictor of plasma ghrelin concentration (beta = -0.396; P = 0.008). CONCLUSION: Regular physical activity influences plasma ghrelin concentrations in girls with different pubertal maturation levels. Plasma IGF-I concentration seems to be the main determinant of circulating ghrelin in healthy, normal-weight adolescent girls.