急性心肌梗塞时心肌线粒体钙变化的实验研究

用Ｖｉａｌ方法分离心肌线粒体，按Ｎａｋａｎｉｓｈｉ方法测定线粒体钙，并按张源鑫方法测定Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ（钙－镁－三磷酸腺苷酶），研究心肌缺血后心肌线粒体钙变化，线粒体膜Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性并相应观察心肌的超徽结构变化。结果表明缺血后心肌线粒体钙明显增高，缺血３０ｍｉｎ和正常组比较Ｐ＜０．０５，６０ｍｉｎ和１８０ｍｉｎ增高更明显。此变化和心肌线粒体超微结构改变相吻合，缺血３０ｍｉｎ时线粒体肿胀，此时尚为可逆性变化。６０、１８０ｍｉｎ后线粒体出现坏死。线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ在缺血后呈进行性下降（Ｐ＜０．０１。说明线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性降低是导致线粒体钙超载的原因之一。     

实验性脑缺血及缺血再灌流大鼠脑内SP、NKA、CGRP、SS含量的变化

目的研究脑缺血及脑缺血再灌流大鼠脑内Ｐ物质（ＳＰ）、神经激肽Ａ（ＮＫＡ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）、生长抑素（ＳＳ）含量变化及其意义，为临床探讨脑缺血的病理生理过程及指导治疗提供科学依据。方法应用四血管关闭全脑缺血模型及再灌流模型，借助放射免疫分析法，对大鼠全脑缺血５，１０，１５，２０，３０，６０，１２０ｍｉｎ７个时点４个脑区（皮质、纹状体、下丘脑、中脑）和垂体的ＳＰ、ＮＫＡ、ＣＧＲＰ、ＳＳ含量变化进行观察，在此基础上测定缺血５ｍｉｎ再灌流５ｍｉｎ、缺血１５ｍｉｎ再灌流４５ｍｉｎ、缺血３０ｍｉｎ再灌流３０ｍｉｎ各脑区及垂体四种神经肽的变化。结果大鼠脑缺血后脑区、垂体ＳＰ、ＮＫＡ、ＣＧＲＰ、ＳＳ含量的变化规律不尽相同，但大部分呈现下降趋势。缺血５ｍｉｎ尚处于可逆状态，缺血５ｍｉｎ再灌流肽类呈不同程度的上升，缺血３０ｍｉｎ再灌流肽类上升不明显，甚至下降。缺血１５ｍｉｎ再灌流肽类变化介于上述两种情况之间。结论ＳＰ、ＣＧＲＰ、ＳＳ均为与学习、记忆过程有关的神经肽，在脑缺血后其含量的降低可能与脑缺血后智能障碍有关。从实验动物的神经肽角度看，应在缺血超早期（＜１５ｍｉｎ）积极恢复血液供应。ＣＧＲＰ对缺血性脑损伤是一     

大鼠脑缺血再灌注降钙素基因相关肽的变化

目的 观察大鼠脑缺血再灌注中脑及垂体降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）含量的变化。方法 采用放射免疫测定方法,测定大鼠全脑缺血５ｍｉｎ再灌注５ｍｉｎ、缺血１５ｍｉｎ再灌注４５ｍｉｎ、缺血３０ｍｉｎ再灌注３０ｍｉｎ大脑及垂体ＣＧＲＰ含量变化,并与相同缺血时间组、假手术组及总时间相同但仅有血组相比。结果 缺血５ｍｉｎ再灌注５ｍｉｎ组ＣＧＲＰ含量与相应的缺血性与假手组均相比明显升高;缺血３０ｍｉｎ再灌注３０ｍ     

脊髓缺血再灌流损伤后的电解质和水含量分布

本文观测清醒兔脊髓缺血２０ｍｉｎ及其再灌流２ｈ和２４ｈ、缺血６０ｍｉｎ及其再灌流２ｈ、缺血１０￣３５ｍｉｎ再灌流７ｄ，Ｌ７至Ｔ８脊髓Ｃａ、Ｍｇ、Ｆｅ、Ｎａ、Ｋ和水含量的节段性变化。正常脊髓的各离子和水含量在各节段间均无显著的统计学差异，也未见明显的波浪式高低分布。不同程度缺血及再灌流后各离子和水含量均发生不程度变化，其中Ｃａ含量呈显著的波浪式节段分布Ｌ４和Ｌ６明显低于Ｌ７、Ｌ５和Ｌ３。结果表明脊髓     

再灌注兔脑细胞膜功能的变化

利用“四血管”式造成兔脑完全性缺血３０ｍｉｎ，将动物随机分成未缺血、缺血３０ｍｉｎ后再灌注３０、１８０ｍｉｎ和３６０ｍｉｎ四组（每组ｎ＝８），观察了再灌注时脑细胞膜（ＢＣＭ）上ＡＴＰ酶、磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）和总磷脂的变化。与未缺血动物相比，Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶在再灌注３０、１８０和３６０ｍｉｎ时下降（Ｐ＜０．００１），而ＰＬＡ２升高（Ｐ＜０．００１），总磷脂在再灌注１８０ｍｉｎ和３６０ｍｉｎ时减少（Ｐ＜０．０５），结果提示，完全性缺血后再灌注时ＢＣＭ功能下降和结构受损，如能稳定ＢＣＭ，可望为完全复苏脑细胞提供条件     

局限缺血－再灌注心肌细胞内钙超负荷发生机制的探讨

本文通过犬急性心肌缺血－再灌注模型探讨缺血－再灌注心肌Ｃａ２＋超负荷的发生机制。当心肌持续缺血１５０ｍｉｎ，心肌细胞内Ｃａ２＋、Ｎａ＋增加、Ｋ＋降低；心肌细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性降低，心肌组织丙二醛（ＭＤＡ）含量增加．而心肌缺血９０ｍｉｎ后，再灌注６０ｍｉｎ，与之比较细胞内Ｃａ２＋明显增加，伴Ｎａ＋升高、Ｋ＋降低，心肌细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性降低，ＭＤＡ含量增加，说明缺血－再灌注过程中Ｎａ＋升高、Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换增加，Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性降低是细胞内Ｃａ２＋超负荷发生的重要原因。     

盐酸氟桂利嗪对鼠肝细胞钙超载的作用

目的：观察再灌注损伤时盐酸氟桂利嗪（ｆｌｕｎａｒｉｚｉｎｅ,ＦＬＵ）对肝细胞线粒体钙超载的影响。方法：Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为３组,每组１３只,Ａ组为对照组,Ｂ组为缺血／再灌注组,Ｃ组为ＦＬＵ组,其中Ｂ、Ｃ两组均阻断肝门造成肝脏完全缺血３０ｍｉｎ后再灌注９０ｍｉｎ。测定各组动物血清中ＡＬＴ、ＬＤＨ、ＴＢＩ含量、肝组织及肝细胞线粒体钙含量,行线粒体超微结构观察。结果：与Ａ组比较,Ｂ组血清ＡＬＴ、ＬＤ     

热休克对大鼠缺血-再灌心肌的保护作用探讨

目的：从离体和在体两方面探讨热休克反应对缺血再灌心肌的保护作用。方法：实验采用ＳＤ大鼠，随机分为热休克组和对照组。动物经热休克处理恢复２４ｈ后，离体部分取心进行Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ灌流，复制缺血３０ｍｉｎ／再灌３０ｍｉｎ的模型，实验中全程记录心电图（ＥＣＧ）及心肌收缩幅度，并测定冠脉流出液的流量变化、肌酸激酶（ＣＫ）活性及丙二醛（ＭＤＡ）含量；在体部分行冠脉左前降支结扎／松绑术复制缺血３０ｍｉｎ／再灌３０ｍｉｎ的模型，实验全程记录ＥＣＧ并测定ＭＤＡ的含量。结果：离体部分热休克组再灌注２、５、１０、１５、２０、３０ｍｉｎ，６个时点心肌收缩幅度及冠脉流量的恢复率显著高于对照组，再灌最初５ｍｉｎ内心律失常的发生率显著低于对照组，再灌３０ｍｉｎ时心肌内ＭＤＡ的含量也显著低于对照组；在体部分热休克组再灌最初５ｍｉｎ内心律失常的发生率及再灌３０ｍｉｎ时心肌内ＭＤＡ的含量均显著低于对照组。结论：热休克反应对大鼠离体与在体的缺血再灌心肌均有一定的保护作用。     

猫心肌缺血再灌注对Ca2+┐ATPase活力及肌浆网钙摄取能力的影响

目的：观察猫心肌缺血再灌注过程中心肌细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力、肌浆网钙摄取能力、线粒体丙二醛及心肌ＡＴＰ含量变化。方法：利用猫体外循环模型，心脏低温停搏６０ｍｉｎ后，恢复正常血液灌注６０ｍｉｎ。测定心肌细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力、肌浆网钙摄取能力、心肌ＡＴＰ及线粒体丙二醛含量。结果：心脏缺血６０ｍｉｎ时，随着心肌ＡＴＰ含量的下降，Ｃａ２＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ活力及肌浆网钙摄取能力下降，而丙二醛含量仅有轻微增加；恢复灌注６０ｍｉｎ后，Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力及肌浆网钙摄取能力进一步下降，同时丙二醛含量明显增加。结论：缺血期间心肌细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力及肌浆网钙摄取能力的下降主要与心肌能量储备降低有关，而复灌后Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力及肌浆网钙摄取能力进一步下降，可能与复灌过程中氧自由基大量产生，使膜脂质过氧化有关     

牛磺酸对缺血大鼠心肌镁钙钾钠含量的影响

给大鼠注射异丙肾上腺素（５０ｍｇ／ｋｇ），诱导急性心肌缺血后测定Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｋ＋及Ｎａ＋含量。结果显示，急性心肌缺血时心肌Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｋ＋及Ｎａ＋含量出现了不同程度的改变，其中Ｍｇ２＋含量下降较早，随后出现Ｃａ２＋和Ｎａ＋的超载及Ｋ＋含量的降低。在注射异丙肾上腺素前３０ｍｉｎ腹腔注射牛磺酸（２００ｍｇ／ｋｇ），能显著抑制缺血心肌Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｋ＋及Ｎａ＋含量的上述改变。结果表明，牛磺酸具有拮抗缺血心肌Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｋ＋和Ｎａ＋含量改变的细胞保护作用     

大鼠肝缺血再灌注损伤Fos和NOS在脑组织的表达

目的:观察肝缺血再灌注损伤(HIRI)过程中脑组织中Fos和一氧化氮合酶(NOS)的变化,探讨两者在脑组织不同部位的改变及可能的作用。方法:建立肝缺血再灌注(I/R)损伤动物模型,分为对照组、缺血30min组(I组)、缺血30min再灌注组(I/R组),I/R组又分为再灌注后1h组(I/R1h)、再灌注后2h组(I/R2h)、再灌注后4h组(I/R4h),应用免疫组化法分别测定各组大鼠不同部位脑组织Fos和NOS的变化。结果:肝缺血再灌注损伤的不同时段可出现脑组织不同部位Fos和NOS改变,尤其在再灌注后期表现明显。结论:HIRI状态下,Fos和NOS在脑内参与了损伤过程。下丘脑中两者的变化在中枢调节作用中可能起着中介作用。     

急性脑缺血对大鼠肾脏细胞凋亡的影响

目的:探讨急性脑缺血时大鼠肾脏细胞凋亡的动态变化以及钙超载、氧自由基与肾脏细胞凋亡的关系,了解缺血性脑血管病引起肾脏损伤的机制。方法:随机取36 只Wistar大鼠,将其中的6 只作为对照组,另外30只以30、60、90、120、180 min为时限又分为5个实验组。观察各组肾功能、血及肾组织中丙二醛(MDA)浓度、肾组织细胞内钙含量的动态变化以及肾脏细胞凋亡的情况。结果:(1)血清尿素氮(BUN)以及血清肌酐(Cr)水平随缺血时间延长逐渐升高,至180 min时达高峰,对照组与缺血30 min组相比差异有统计学意义(P<0.05);(2)肾脏细胞凋亡指数明显增加,各实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);(3)血清及肾组织中MDA浓度、肾组织细胞内钙含量随时间延长持续升高,60、90、120、180 min 4个实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05或0.01); (3)电镜下肾脏细胞有超微结构的改变。结论:当发生急性脑缺血时,大鼠血清及肾组织MDA的浓度、肾组织细胞内钙含量随时间延长持续增加,可通过激活促细胞凋亡的程序而诱导肾脏细胞凋亡。     

实验树鼩心肌缺血再灌注离体模型的构建

目的建立实验树鼩心肌缺血再灌注离体模型。方法采用Langendorff 离体心脏灌流系统建立实验树鼩心肌缺血再灌注 模型,依据不同的停灌和再灌注时间实验分为5组;酶标法测丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天冬氨酸氨基转移酶（AST）和乳酸脱氢 酶（LDH）,免疫抑制法测定肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）2,3,5-氯化三苯基四唑染色法（TTC）测定切片梗死面积。结果心肌 酶学指标和梗死面积检测发现,停灌30 min再灌注30 min组和停灌30 min再灌注60 min组灌流液CK-MB,灌流液LDH,组织 ALT,组织CK-MB和组织LDH等指标均显著高于其它3组（P<0.05）,但两组间差异无统计学意义（P>0.05）。心电分析发现,停 灌30 min再灌注60 min组心率显著低于持续灌注组,停灌15 min 再灌注30 min 组和停灌30 min 再灌注30 min 组（P<0.05）, 而停灌30 min 再灌注30 min 组心率与持续灌注组和停灌15 min再灌注30 min组差异无统计学意义（P>0.05）,停灌30 min再 灌注30 min组的离体心脏平均心率更接近于实验树鼩的生理指标。结论实验树鼩心肌缺血再灌注离体Langendorff模型构建 成功,停灌30 min再灌注30 min模型效果最好。     

芬太尼对家兔缺血再灌注期心肌组织及血清IL-6、TNF-α的影响

目的 :观察芬太尼对家兔缺血再灌注期心肌组织及血清白介素 6 (IL 6 )、肿瘤坏死因子 (TNF α)的影响。方法 :2 4只家兔随机分为 3组。假手术组 (C组 )、缺血再灌注组 (IR组 )和芬太尼组 (F组 ) ,每组 8只。IR组行冠状动脉左前降支阻断 30min ,再灌注 3h ,于缺血前 5min(I0 )、缺血 30min(I1 )、再灌注 1h(R1 )和 3h(R2 )取颈内静脉血并于实验结束取心肌组织 ,分别测定IL 6和TNF α浓度 ,光镜下观察心肌病理结构变化。F组缺血前 2 0min缓慢静注芬太尼 5 0 μg kg后 ,以 4 0 0 μg (kg·h)速度维持 ;C组仅分离血管 ,不阻断血流 ,采样时点和检测指标均同IR组。结果 :IR组血清IL 6在R1 和R2 时持续升高 (P <0 .0 1) ,TNF α在I1 时显著升高 (P <0 .0 1) ,TNF α和IL 6水平同F组和C组差别有显著性 (P <0 .0 1) ;心肌组织中IL 6和TNF α含量明显增加 ,同F组和C组比差异有高度显著性 (P<0 .0 1)。F组血清IL 6在R2 时升高 ,为I0 的 1.33倍 (P <0 .0 5 ) ,TNF α在I1 及R1 时升高 (P <0 .0 5 ) ,R2 时降低 (P>0 .0 5 ) ;心肌组织IL 6、TNF α虽较C组有升高 ,但明显低于IR组 (P <0 .0 1)。光镜下F组心肌水肿较轻 ,白细胞浸润较少 ;IR组水肿严重 ,白细胞明显浸润。结论 :芬太尼抑制缺血再灌注心肌组织和血清IL 6?     

醒脑静注射液对脑缺血-再灌注损伤家兔血清白介素-8的影响

目的 :观察醒脑静注射液 (XNJI)对脑缺血 再灌注损伤 (CIRI)家兔血清白介素 8(IL 8)水平的影响 ,并探讨其脑保护机制。方法 :2 8只家兔随机分为假手术对照组 (C组 )、缺血再灌注组 (I R组 )和醒脑静注射液组 (XNJI组 ) ,分别在缺血前、缺血 3 0min、再灌注 3 0min、60min、12 0min时取静脉血 ,测定血清IL 8浓度 ,实验结束后取脑组织观察脑超微结构的变化。结果 :脑缺血 再灌注期间 ,I R组不同时点血清IL 8水平明显高于XNJI组 ,缺血 3 0min为 (0 .62± 0 .18)ng·L-1及 (0 .43± 0 .0 8)ng·L-1,P <0 .0 5 ;再灌注 3 0min ,为血清IL 8水平 (0 .73± 0 .19)ng·L-1及 (0 .45± 0 .0 9)ng·L-1;再灌注 60min ,血清IL 8水平为 (0 .87± 0 .2 9)ng·L-1及 (0 .47± 0 .0 6)ng·L-1;再灌注 12 0min血清IL 8水平为 (1.0 3± 0 .43 )ng·L-1及 (0 .44± 0 .0 7)ng·L-1,再灌注各时点组均P <0 .0 1,超微结构发生异常改变 ;XNJI组不同时点血清IL 8浓度显著低于I R组 (XNJI组缺血 3 0min为(0 .48± 0 .0 7)ng·L-1,P <0 .0 5 ;再灌注 3 0min为 (0 .5 0± 0 .0 8)ng·L-1;再灌注 60min为 (0 .5 5± 0 .14)ng·L-1;再灌注 12 0min为 (0 .5 9± 0 .17)ng·L-1,再灌注各时点组P <0 .0 1) ,其超微结构异常改变较I R组     

针刺留针与否对大鼠脑缺血再灌注后白细胞浸润的影响

目的:研究针刺留针与否对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织中白细胞浸润及神经组织缺血程度的影响。方法:40只SD大鼠,随机分为正常组、假手术组、模型组、针刺留针组及针刺不留针组。针刺留针组在造模后2 h、24 h针刺三阴交、内关、人中,留针30 min;针刺不留针组针刺时间、穴位与针刺留针组相同,针刺后即起针。造模48 h后,取脑固定后行HE染色,比较各组大鼠浸润白细胞计数和神经组织缺血程度。结果:针刺留针组与针刺不留针组浸润白细胞数均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);神经组织缺血程度较模型组轻,差异无统计学意义(P>0.05)。针刺留针组与针刺不留针组脑组织中浸润白细胞数及神经组织缺血程度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:针刺能明显减少脑缺血坏死周边区的白细胞浸润,减轻神经细胞缺血程度。     

马来酸桂哌齐特对大鼠局灶性脑缺血再灌注后白介素-1β、白介素-6的表达及神经功能的影响

目的 研究马来酸桂哌齐特(cinepazide maleate,CM)对大鼠急性脑缺血后IL-1β、IL-6的表达及神经功能的影响.方法 成年雄性SD大鼠48只,采用随机数字表法分为正常组、假手术组、缺血再灌注组及CM治疗组,在缺血再灌注后第2、7 天对脑组织进行HE染色、测定脑组织含水量及采用免疫组化法测定皮质IL-...     

心肌早期缺血再灌流损伤HSP_(70)的表达

目的　探讨早期缺血再灌流损伤心肌组织热休克蛋白 70 (HSP70 )的变化 ,为心源性猝死的法医病理学鉴定寻找新的依据。方法　建立家兔早期心肌缺血再灌流动物模型 ,用免疫组化SABC法观察HSP70 的表达。结果　心肌缺血 15min再灌流 30min后 ,再灌流区心内膜下可见HSP70 阳性表达 ;缺血 30min再灌流 30min后 ,HSP70 阳性反应细胞数目较多 ,散布于心肌全层 ;缺血 6 0min再灌流 30min后 ,再灌流区阳性表达明显减少 ,而其边缘见阳性表达略有增强。各实验组正常区和对照组心肌组织均未见阳性反应。结论　心肌组织HSP70 的阳性表达是一项显示心肌早期缺血再灌流损伤的灵敏指标 ,HSP70 的免疫组化检测对缺血再灌流损伤所致心性猝死的死后诊断具有一定的应用价值。     

水飞蓟素对大鼠缺血再灌注损伤的保护作用

目的　探讨水飞蓟素对大鼠缺血再灌注损伤的保护作用。方法　 2 0只大鼠随机分为对照组和观察组 ,各 10只 ,两组术前分别灌服 0 .5 %羧甲基纤维素钠 (CMCNa)溶液和水飞蓟素CMCNa混悬液 ,观察组大鼠腹主动脉缺血 30 m in后再灌注 4 5 m in,检测并比较两组血清中丙二醛 (MDA )及超氧化物歧化酶 (SOD)的变化。结果　两组缺血前血清中 MDA含量及 SOD活性无显著差异 (P>0 .0 5 )。再灌 4 5 min后 ,两组 MDA含量均有升高 ,但观察组明显低于对照组 (P<0 .0 1) ;再灌 4 5 m in后 ,血清中 SOD均有所下降 ,但观察组下降幅度明显低于对照组 (P<0 .0 1)。结论　水飞蓟素对缺血再灌注损伤具有保护作用。     

臭氧氧化后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤慢性纤维化的作用

目的 观察臭氧氧化后处理(简称"臭氧后处理")对大鼠肾缺血再灌注损伤远期改变的影响.方法 通过随机数字表将36只SD雄性成年大鼠分为假手术(Sham)组、缺血再灌注(I/R)组和臭氧后处理(Postcond)组,每组12只.Sham组:腹部正中切开后充分游离并显露双侧肾脏,切除右肾结束手术.I/R组:切除右肾后,无创血管夹阻断肾蒂45 min,随后开放肾血管.Post-cond组:同样操作夹闭左肾蒂45 min,在恢复肾动静脉血灌流后,连续10 d经直肠给予臭氧治疗.术后2周测定肾功能,包括血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平浓度.分别于术后2周及8周观察肾组织病理变化,蛋白水平上检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞转化生长因子(TGF-β1)和信号传导蛋白(Smad-2)在肾脏的表达.结果 术后2周各组肾功能已经基本恢复正常(P>0.05).Postcond组引起的肾小管间质损伤接近于Sham组,而I/R组HE显示仍有肾小管细胞萎缩变形,炎性细胞浸润甚至空泡形成.同时Masson染色显示小管间质胶原纤维增加(P<0.05).Postcond组的α-SMA、TGF-β1和Smad-2蛋白的表达高于Sham组,但是都明显低于其在I/R组的表达(P<0.05).结论 臭氧可以减轻肾缺血再灌注损伤从而减少肾纤维化,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad-2信号通路,降低α-SMA、TGF-β1和Smad-2蛋白在肾组织的表达有关.