诱导HO-1表达延长大鼠心脏移植物存活时间

目的了解血红素加氧酶-1(HO-1)在延长异基因大鼠心脏移植物存活中的作用及其机制。方法雄性LEW(RT11)和LEW.1W(RT1u)大鼠分别作为供体和受体,受体鼠分别应用CoPPIX 5 mg/(kg.d),SnPPIX5 mg/(kg.d)。对照组及实验组均6只鼠。由移植手术前1日开始至发生排斥,比较心脏移植物存活时间,分别在移植后第5天取心脏进行HE染色及CD3、CD25、ED1和K i-67染色;并测定HO-1活性和用W estern b lot定量HO-1蛋白;进行受体脾细胞接受供体脾细胞刺激的混合淋巴细胞培养。结果对照组心脏移植物平均7 d出现排斥;应用CoPPIX诱导HO-1表达后存活时间为13.5 d,显著长于对照组(P<0.05)。而应用SnPPIX治疗后存活时间为6.5 d。对照组与SnPPIX治疗组的心脏移植物中有中等量的细胞浸润,CoPPIX治疗组移植物组织中的CD3 T细胞、CD25 细胞、巨噬细胞和增殖细胞都明显少于SnPPIX及对照组。同对照组相比,CoPPIX诱导HO-1表达明显抑制体内脾细胞增生(P<0.05),而SnPPIX无抑制。结论诱导HO-1表达能够抑制大鼠淋巴细胞的免疫活性并延长异基因心脏移植物的存活。     

血红素加氧酶-1的抗肿瘤细胞凋亡作用研究进展

血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)是血红素分解的关键酶,其促进血红素分解释放胆绿素、CO和亚铁离子。HO-1在机体内发挥多种生物学功能,主要有减轻炎症反应、降低氧化损伤、抑制细胞凋亡以及调节细胞增殖。随着研究的不断深入,HO-1与肿瘤的相关性研究逐渐增多,表明其与肿瘤关系密切,参与调控肿瘤细胞凋亡、增殖等过程。本文主要就HO-1蛋白与肿瘤细胞凋亡的相关性作一综述。     

血红素加氧酶-Ⅰ与实体肿瘤

血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)是血红素分解代谢的关键酶,它能催化血红素降解释放出胆绿素、CO和Fe2 。它参与维持细胞稳态,并在降低氧化损伤、减轻炎性反应、抑制细胞凋亡和调节细胞增殖等方面发挥重要作用。近年研究发现,HO-1与肿瘤相关,尤其与实体瘤关系较为密切。HO-1既可通过抗凋亡作用促进某些肿瘤快速增长,又可对某些肿瘤细胞发挥有效的抗增殖作用。文章综述了HO-1表达变化、HO-1基因多态性、HO-1抗凋亡等特征与实体瘤发生、发展的关系。     

血红素加氧酶-1过表达延长肝脏低温保存时间的研究

目的 研究血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)过表达延长肝脏低温保存的时间及其机制.方法 利用大鼠肝脏离体再灌注模型,用钴-原卟啉(cobalt protoporphyrin,CoPP)和锌-原卟啉(zincprotoporphyrin,ZnPP)特异地诱导和抑制HO-1,观察肝脏保存0、6、24h,灌注2h后的胆汁生成量,灌流液AST、LDH、TNF-α和IL-6的活性,肝脏MDA的含量,肝组织HO-1蛋白表达的Western印迹,细胞凋亡情况等.结果 CoPP诱导了肝组织HO-1的表达,与未诱导24h保存组相比,CoPP诱导组的肝脏灌流液AST、LDH、TNF-α和IL-6的活性以及肝脏MDA含量显著降低,胆汁生成量明显增加,凋亡细胞数量减少(P<0.05),并与未诱导6h保存组接近.给予ZnPP后,这些保护作用消失.结论 HO-1过表达延长了肝脏低温保存时间,原因可能与抗氧化应激、抑制炎性因子的表达和细胞凋亡有关.     

迟发缺血预处理低温保存肾移植供体中血红素加氧酶1的表达

背景：缺血预适应延迟反应通过诱导保护性蛋白增强组织对缺血再灌注损伤的耐受能力;血红素加氧酶1参与缺血预适应延迟保护作用。迟发缺血预处理对低温保存肾脏的作用及血红素加氧酶1是否参与其中尚不清楚。 目的：观察缺血预处理诱导血红素加氧酶1的迟发缺血预处理反应对低温保存肾脏移植供体的作用。 方法：雄性SD大鼠随机分入5组：空白对照组、低温保存组、缺血预处理组、缺血+低温组(n=12);缺血+给药+低温组。各组大鼠均行右肾切除,预处理或假手术操作处理后24 h采用大鼠肾脏非循环离体灌注模型获取肾脏,分别于保存24,48,72 h取样。缺血+给药+低温组除上述处理外,还于原位低温灌注术前1 h接受1次血红素加氧化酶1抑制剂锡原卟啉腹腔注射。低温保存肾脏于各保存终点留取保存液,测定pH值和乳酸脱氢酶含量;切取1/2肾脏按照光镜要求制备标本送检;剩余1/2肾脏用于免疫印迹法测定血红素加氧酶1表达,比色法测定皮质Na-K-ATP酶活性、丙二醛和还原型谷胱甘肽含量;未保存肾脏仅通过免疫印迹法测定血红素加氧酶1的基础表达情况。 结果与结论：迟发缺血预处理诱导了肾组织血红素加氧酶1的表达,与单纯低温保存组相比保存24,48 h后,缺血+低温组保存液pH值、乳酸脱氢酶活性降低;肾脏组织Na-K-ATP酶活性、谷胱甘肽含量增加,丙二醛含量降低;同时点预处理组肾组织光镜形态学改变稍好于单纯低温保存组。给予血红素加氧酶1抑制剂后,这种保护作用消失。提示,迟发缺血预处理延长了肾脏低温保存时限,这可能与诱导血红素加氧酶1,增加组织抗氧化能力,减轻低温保存氧应激有关。     

血红素加氧酶-1在心血管疾病中的作用研究新进展

血红素加氧酶-1是一种应激蛋白, 除了促进血红素代谢, 还具有抗炎、抗凋亡、抗增生和抗氧化应激等许多重要生物学作用。这一功能广泛的氧化酶系统参与心血管系统的病理生理过程,它的作用涉及血压的调控、抗动脉粥样硬化的发生发展、预防缺血/再灌注损伤和冠状动脉介入治疗后再狭窄的发生。     

血红素加氧酶-1促进巨噬细胞极化的研究进展

血红素加氧酶-1(HO-1)是细胞内可诱导的关键抗氧化酶,其表达被认为是对抗炎症反应和氧化损伤的适应性细胞反应。巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞群,活化的巨噬细胞可在不同局部微环境刺激下极化为促炎M1表型和抗炎M2表型。HO-1在巨噬细胞中具有重要的免疫调节功能,可通过多种途径诱导驱动巨噬细胞向M2型极化,并参与多种疾病的发生发展,提示巨噬细胞中HO-1诱导是人类疾病的潜在治疗途径。本文主要综述HO-1的调控机制及巨噬细胞的极化,并着重讨论HO-1促进巨噬细胞向M2表型极化的作用及其在多种疾病发生发展过程中的作用。     

血红素加氧酶-1减轻糖尿病小鼠心肌损伤

目的观察血红素加氧酶-1(HO-1)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病心肌病是否发挥保护作用,并探讨相关的分子机制。方法常规腹腔注射STZ构建HO-1转基因小鼠(HO-1/DM)和同笼阴性小鼠(Wt/DM)糖尿病模型,8周后超声心动图检测小鼠左心室心脏功能。HE染色检测左室心肌,用RT-qPCR法检测心肌IL-6、TNF-α、Gpx3和p47 phox mRNA的表达。给予H9C2细胞高糖培养,过表达HO-1观察其对ROS生成的影响。结果 8周后Wt/DM组和HO-1/DM组小鼠较Wt/Con组体质量显著降低(P0. 05)。与Wt/Con组小鼠相比,Wt/DM组小鼠左心室心脏功能明显障碍,HO-1/DM组小鼠左心室功能明显好于Wt/DM组小鼠; Wt/DM组小鼠心肌结构紊乱,炎性反应细胞浸润,HO-1/DM组小鼠心肌结构趋于正常。Wt/DM组小鼠心肌中IL-6、TNF-α、Gpx3、p47phox mRNA表达较Wt/Con组小鼠升高(P0. 05),过表达HO-1可明显抑制该现象。结论 HO-1可能通过抗氧化和抗感染作用保护高血糖引起的心脏功能障碍和心肌结构损伤。     

血红素加氧酶-1重组载体的构建及在胃癌细胞中的初步研究

目的 构建人血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)及其突变体的真核表达载体,观察其在胃腺癌细胞中HO-1表达和活性变化,研究HO-1活性变化的胃腺癌细胞对顺铂抗药能力的变化,为进一步研究HO-1对肿瘤细胞影响机制奠定基础.方法 根据GenBank中HO-1 cDNA序列设计引物,调取基因并克隆人pcDNA3.1(+)质粒中,构建表达人野生型HO-1与突变型HO-1(HO-1G143H)的重组质粒.脂质体介导重组质粒转染胃腺癌细胞BGC823,用RT-PCR和Western印迹法分别检测细胞中HO-1 mRNA的表达和蛋白表达水平,体外测定HO-1活性变化,应用顺铂进行体外抗药性实验.结果 酶切鉴定和测序证实,HO-1真核表达载体构建成功;转染质粒后的BGC823,HO-1的mRNA和蛋白的表达水平明显上升;转入野生型质粒的细胞HO-1活性上升,转入突变型质粒的细胞HO-1活性下降;HO-1活性下降BGC823细胞抗顺铂杀伤能力增强.结论 构建了HO-1野生型与突变型真核表达载体;将其转入胃腺癌细胞,引起了HO-1的mRNA和蛋白表达的增加和活性变化;体外实验表明,HO-1活性下降的BGC823细胞抗顺铂能力增强.     

诱导血红素加氧酶-1表达在器官移植中的保护作用

器官移植术中及术后移植器官的缺血再灌注损伤(ischemia-repeffusion injury,IRI)和免疫排斥反应一直困扰着外科医生.血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)是血红素代谢过程中的限速酶,广泛分布于哺乳动物的各种组织细胞中.血红素在它的催化下降解代谢为一氧化碳(CO)、胆绿素和游离铁离子.HO-1在氧化应激、炎性反应、低氧和缺血等状态下均能高度表达.HO-1及其催化血红素代谢产物主要通过抗炎性反应、抗氧化反应、调节同种异体反应性T细胞的活性及增殖、抗内皮细胞凋亡、抑制内皮细胞活化等作用机制,对移植器官起到抗IRI和抗免疫排斥作用,从而增加移植器官成活率及延长其存活时间.     

Heme oxygenase 1 plays role of neuron-protection by regulating Nrf2-ARE signaling post intracerebral hemorrhage

The NF-E2 related factor 2 (Nrf2) could be activated in intracerebral hemorrhage (ICH), and trigger the expression of ARE regulated heme oxygenase 1 (HO-1) subsequently. This study aims to explore neuroprotection of HO-1 protein in regulating the Nrf2-ARE signaling pathway in ICH. In this study, the femoral artery injection method was used to establish the ICH model. The zinc porphyrin-9 (ZPP-IX) was used to inhibit the HO-1 expression in ICH rats. The ICH rats were randomly divided into 3 groups, ICH group, ZPP-IX (10 mg/kg) + ICH group and DMSO (10 mg/kg) + ICH group. Neurological scores were evaluated for the 3 groups. Double immunofluorescence staining method was employed to observe the co-expression of HO-1, Nrf2, NF-κB and TNF-α and CD11b in glia cells. Western blot and RT-PCR assay were used to detect the total Nrf2, binding Nrf2, HO-1, NF-κB and TNF-α expression. The results indicated that ZPP-IX could aggravate the neurological dyafunstions of ICH rats. The HO-1 level in ZPP-IX group was significantly decreased compared to the ICH group (P < 0.05). The binding-Nrf2 protein was significantly increased in ZPP-IX group compared to ICH group (P < 0.05). The NF-κB and TNF-α level were significantly increased in ZPP-IX group compared to ICH group (P < 0.05). The ZPP-IX significantly inhibited the HO-1 and Nrf2, and enhanced NF-κB and TNF-α co-expressing with the CD11b compared to the ICH group (P < 0.05). In conclusion, HO-1 protein regulates the Nrf2-ARE pathway in ICH model by inhibiting the Nrf2 entering nucleus and activating the NF-κB and TNF-α expression.     

Heme oxygenase activity and some indices of antioxidant protection in rat liver and kidney in glycerol model of rhabdomyolysis

Activity of heme oxygenase, superoxide dismutase, and catalase, the content of reduced glutathione and total heme in the liver and kidneys, and serum absorption spectrum in the Soret band were studied in rats with glycerol-induced rhabdomyolysis. Glycerol increased the content of heme-containing metabolites in the serum and the total heme content in the liver and kidneys, and decreased the content of reduced glutathione and catalase activity in the examined organs. Superoxide dismutase activity increased in the liver and decreased in the kidneys. Heme oxygenase activity increased in the liver and kidneys 2 and 6 h postinjection, respectively. The effects of heme delivered to the liver and kidneys from the vascular bed on the antioxidant defense and heme oxygenase activity were studied.     

黄芪对豚鼠哮喘模型血红素氧合酶—1表达的影响

用免疫组织化学染色方法观察血红素氧合酶-1（HO-1）在哮喘豚鼠肺组织中的表达变化,测定全血一氧化碳血红蛋白（COHb)的百分比含量并观察气道壁嗜酸性粒细胞（EOS）浸润情况,以探讨黄芪对哮喘豚鼠HO-1表达的影响。发现HO-1主要表达在气道上皮细胞,哮喘各组HO-1的表达水平均显著高于正常组（P＜0.01)。黄芪治疗后HO-1的表达水平显著低于哮喘各组（P＜0.01)。可见黄芪能显著抑制哮喘豚鼠气道上皮细胞HO-1的表达,提示黄芪抑制细胞HO-1的表达可能是黄芪治疗哮喘的作用机制之一。     

猪-猕猴延迟性异种移植排斥反应的发生机制

目的：探讨猪．猕猴延迟性异种移植排斥反应(DXR)的发生机制。方法：建立湖北白猪-云南猕猴的腹腔异位心脏移植模型，应用中华眼镜蛇毒因子(Y-CVF)完全清除受者体内补体，并应用环孢素A(CsA)、环磷酰胺(CTX)和甲泼尼龙(M．P)三联免疫抑制治疗。检测血清C3、C4、抗猪内皮细胞天然抗体，免疫组化方法染色检测移植物中C3、C5b-9、IgG、IgM、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核巨噬细胞(CD68)、NK细胞(CD57)、CIM T细胞和CD8 T细胞的表达。结果：移植心存活时间分别为8、10、13和13天，血清C3和补体总活性均下降为0，抗猪内皮细胞天然抗体水平在移植后则有一个更为明显的下降，在移植心失功前2～4天开始天然抗体稍有回升，但较术前正常时仍明显偏低。移植心有程度不等的C3、C4、C5b-9、IgG及IgM沉积，大量的单核细胞(50％)，少量的NK细胞(8％～10％)、CD4 T细胞(15％)和CD8 T细胞(25％)。移植物血管内皮细胞表面出现ICAM-1的表达上调，移植物间质中出现TNF-α的表达增加。结论：体液免疫和细胞免疫参与猪-猕猴DXR排斥反应的发生。     

Heme oxygenase-1 expression in the ovary dictates a proper oocyte ovulation, fertilization, and corpora lutea maintenance

Citation Zenclussen ML, Jensen F, Rebelo S, El‐Mousleh T, Casalis PA, Zenclussen AC. Heme oxygenase‐1 expression in the ovary dictates a proper oocyte ovulation, fertilization, and corpora lutea maintenance. Am J Reprod Immunol 2012; 67: 376–382 Problem Animals deficient in Heme oxygenase‐1 (HO‐1, Hmox1^?/? mice) have impaired pregnancies, characterized by intrauterine fetal death. HO‐1 expression has been shown to be essential for pregnancy by dictating placentation and intrauterine fetal development. Its absence leads to intrauterine fetal growth restriction and fetal loss, which is independent of the immune system. Defect in previous steps, e.g., ovulation, may, however, also count for their poor reproductive outcome. Method of study Here, we investigated ovulation after hormonal hyperstimulation in Hmox1 wild‐type and knockout animals. Results and Conclusions We observed that animals lacking HO‐1 produced significantly less oocytes after hormonal stimulation than wild type animals and this was mirrored by the number of corpora lutea in the ovary. Furthermore, ovulated oocytes from Hmox1^?/? animals were poorly fertilized compared with those from wild‐type animals. In conclusion, we demonstrate here that HO‐1 plays a pivotal role in the process of oocyte ovulation as well as fertilization, bringing to light a new and unsuspected role for HO‐1.     

核因子-κB对哮喘患者T淋巴细胞血红素氧合酶-1表达的调控

探讨核因子κB（NF－κB）对哮喘患者T淋巴细胞HO－1表达的转录调节机制。分离18例急性发作期哮喘患者外周血T淋巴细胞，并分成3组培养：对照组、加入NF－κB激动剂肿瘤坏死因子－α（TNF－α）组、同时加入TNF－α和NF－κB抑制剂二硫代氨基甲醇吡咯烷（PDTC）组。培养6h后留取细胞，用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测血红素氧合酶－1（HO－1）的mRNA。培养24h后留取细胞用Western印迹法检测HO－1的表达。发现TNF－α组T淋巴细胞HO－1蛋白和mRNA表达水平显著高于对照组（q=44.48、29.94,P均＜0.01)，而同时加入TNF－α和PDTC培养组T淋巴细胞HO－1蛋白和mRNA表达水平显著低于TNF－α组（q=43.23、27.99,P均＜0.01)。可见哮喘患者T淋巴细胞HO－1基因转录可能是通过激活NF－κB进行调控。T淋巴细胞NF－κB－HO氧化激活途径可能是哮喘的发病机制之一。