UPLC／MS／MS法研究拉西地平片的人体药动学

目的：建立血浆中拉西地平浓度的测定方法并应用于人体药动学研究。方法：采用ACQUITY UPLC^TM超高效液相色谱仪测定血药浓度,色谱条件：Acquity UPLC^TM BEH C18（50mm×2．1mm,1．7μm）色谱柱;流动相为乙腈-30mmol／L醋酸铵（82：18,v／v）;流速为0．28mL／min,质谱条件：Quattro Premier串联质谱检测器,离子源：EsI;极性（检出模式）,计算拉西地平药动学参数。结果：拉西地平在血药浓度范围为0．025～10．000μg／L内线性关系良好（r=0．9978）;定量下限为0．025μg／L,日内、日间误差〈10％。用此方法测定了12例志愿者口服拉西地平4mg后的血药浓度,主要药动学参数为：AUC0-24为（9．449±5．864）ng／h·mL^-1,AUC0-∞为（10．618±6．485）ng／h·mL^-1,Cax为（2．358±2．024）ng／mL,tmax为（1．59±0．40）h,t1／2为（8．49±2．29）h。药动学参数个体间差异大。结论：所建立的方法灵敏可靠,适合拉西地平体内药动学研究;拉西地平体内药动学参数个体差异大,应个体化给药。     

氯雷他定泡腾片的含量和含量均匀度测定

目的：建立HPLC法测定氯雷他定泡腾片含量和含量均匀度。方法：采用HPLC法,色谱柱：Thermo BDS HYPERSIL C18（250min×4．6mm,5μm）;流动相：甲醇-0．02mol／L磷酸二氢钾溶液（83：17）;检测波长：247nm;流速：1．0ml／min。结果：定量限为0．6ng,10．0-100．0μl/ml的范围内线性关系良好（r=0．9999）,平均回收率为99．4％（RSD=0．84％,n=9）。结论：经方法学试验,该方法灵敏、可靠、简便,可用于该制剂的含量和含量均匀度的测定。     

LC-MS／MS法测定大鼠血浆中3种丹参酮浓度及药动学研究

目的：建立LC-MS／MS法测定大鼠血浆中丹参酮I、隐丹参酮及丹参酮IIA的浓度,并对大鼠口服丹参酮提取物后的3种丹参酮成分进行药代动学研究。方法：血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以甲醇（含O．1％甲酸）一水（含0．1％甲酸）为流动相,梯度洗脱,采用AgilentZorbaxSB-C18（2．11T11TI×150lrllrt,5斗m）色谱柱分离,质谱以电喷雾离子源,选择反应监测（SRM）方式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m／z277．1→249．1（丹参酮I）,m／z297．1→251．2（隐丹参酮）,m／z295．1→277．1（丹参酮IIA）和m／z360．9→233．0（内标,非诺贝特）。结果：丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮IIA的线性范围为2-100ng·mL-1,日内、日间精密度（RSD）均小于12．0％,高、中、低3种浓度平均方法回收率均大于89．4％。结论：本方法灵敏、简便,可用于丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮IIA的药代动力学研究。     

气相色谱法测定帕米膦酸二钠中的有机溶剂残留量

目的建立气相色谱法测定帕米膦酸二钠中甲醇、氯苯的残留量。方法采用DIM—Wax毛细管柱（30m×0．32mm,0．50μm）;载气为氮气;以50％N,N-二甲基甲酰胺为溶剂;柱温40℃,保持5rain,以20℃／min升温至180qC,保持1min;进样口温度240℃;检测器温度250℃（FID）。结果甲醇在62．4—499．2mg／ml的浓度范围内线性关系良好,r=0．9992（n=,检测限为O．4ng,回收率为98．95％（RSD：1．12％）;氯苯在11．6—58．0mg／ml的浓度范围内线性关系良好,r=0．9994（n=5）,检测限为0．2ng,回收率为98．82％（RSD：1．40％）。结论气相色谱法可用于帕米膦酸二钠中甲醇、氯苯的残留量测定。     

高效液相色谱法测定大鼠组织样品中马兜铃酸A的含量

目的建立用高效液相色谱法（HPLC）测定大鼠脾虚模型组织与血浆样品中马兜铃酸A含量的方法。方法色谱条件为HypersilODS2柱（4．6mm×250mm,5μm）,柱温30℃,流动相为甲醇：乙腈：水（0．6％冰醋酸,pH=3．60）（30：30：40）,流速为1ml／min,检测波长为250nm,20μl进样。结果空白血浆中马兜铃酸A在0．05～25μg／ml范围内与峰面积线性关系良好（Y=57672X-10065,R^2=0．9994）,提取回收率为83．46％～94．13％,方法回收率为99．67％～106．43％。低、中、高3个浓度的日内精密度RSD分别为6．28％、3．36％、1．88％,日间精密度RSD分别为9．67％、4．27％、4．56％。血浆中马兜铃酸A的最低检测浓度为0．05μg／ml,组织中最低检测浓度为0．31ng／g。结论建立的HPLC法准确、稳定、重复性好、灵敏度高,可应用于大鼠脾虚模型组织和血浆样品中马兜铃酸A的含量测定。     

RP—HPLC法测定人血浆中头孢拉定的浓度

目的：建立测定血浆中头孢拉定浓度的高效液相色谱法。方法：色谱柱为DiamonsilC18柱（200mm×4．6mm，5μm）；流动相：0．05mol／LKH2PO4-乙腈（85：15）；柱温：35℃；流速：1．0ml／min；检测波长：262nm；进样量：20μl。结果：头孢拉定在0．5-40．0μg／ml范围内有良好的线性关系，r=0．9999；血浆中药物最低检测浓度为0．25μg/ml（S／N=3）：提取回收率为75％；血浆中三种浓度回收率分别为（106．0±6．3）％、（103．0±4．6）％、（97．5±1．2）％，日内、日间RSD分别为419％-26％、1．0％及7．9％、3．2％、1．9％。结论：本法操作简单、快捷、专属性强，方法灵敏度和准确度均较高，适用于头孢拉定血药浓度及生物利用度的测定。     

HPLC—MS法测定克拉霉素浓度

目的建立快速、简便的HPLC—MS法测定人血浆中克拉霉素浓度的方法。方法以罗红霉素为内标,采用Shim—packODSC18柱（250mm×2．0mm5m）甲醇-水溶液（含0．1％甲酸）（60：40v／v）为流动相,流速0．2mL／min,柱温30℃。采用质谱电喷雾离子源正源（ESI＋）将样品离子化,选择性离子监涮（SIM）准分子离子峰。结果克拉霉素在0．025～6．4μg／ml范围内线性关系良好（r=0．999）,最低定量限为0．025μg／ml,提取回收率均大干85％,批内与批间RSD均小于15％。结论该方法简单,快速、灵敏度高、专属性强．可较好应用于临床克拉霉素血浆浓度检测。     

不同厂家甘草配方颗粒中甘草苷含量的比较

目的考察不同厂家甘草配方颗粒中甘草苷的含量。方法采用高效液相色谱法。色柱：Diamonsil C18柱（4．6mm×250mm,5μm）;流动相：乙腈-1％冰醋酸（20：80,V／V）;流速：1．0mL／min;捡测波长：320mm柱温：30℃,进样量为10μL。结果甘草苷在148～2960ng范围内线性关系良好（r=0．9996）,平均回收率为98．12％（RSD=1．21,n=5）。不同厂家甘草配方颗粒中甘草苷的含量为0．47～3．93mg／g。结论不同厂家产品中甘草苷的含量差异显著。     

HPLC法测定吲达帕胺片的含量

目的：建立测定吲达帕胺片含量的方法。方法：采用HPLC法,C18柱（150mm×6mm,5μm）,流动相为甲醇-水-冰醋酸（45：55：0．1）,检测波长为240nm。结果：吲达帕胺在1．65-16．48μg／ml浓度范围内线性关系良好（r=0．9999）,平均回收率为99．20％,RSD=0．53％。结论：本方法简便、快速、准确,专属性强,可作为吲达帕胺片的含量测定方法。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中的左旋紫堇达明及其药代动力学研究

目的：建立快速、灵敏的LC-MS/MS分析方法定量测定大鼠血浆中左旋紫堇达明（L-CDL）的浓度,经系统方法学验证后,应用于该药的大鼠药代动力学研究。方法以普萘洛尔为内标,以水（含0.1%甲酸与5 mmol/L的甲酸铵）和乙腈（含0.1%甲酸）为流动相,血浆样品中的L-CDL和内标经C18（2.1 mm×750 mm,3μm）柱分离后,质谱电喷雾离子化源（ESI）正离子多反应监测（MRM）方式分别对离子对m/z 342?192.1和m/z 260?116.2进行检测。方法验证包括专属性、标准曲线与定量下限、批内和批间精密度、准确度、基质效应、提取回收率、稳定性。结果 L-CDL在大鼠血浆样品的定量线性范围为1~5000 ng/ml,最低定量下限为1 ng/ml,批内和批间精密度（RSD）＜10%,回收率93.5%~102.8%,基质效应108.3%~112.5%。大鼠经胃给予L-CDL 10 mg/kg后的主要药动学参数Cmax、T1/2、AUC0-24分别为：（557.8±330.1）ng/ml、（7.04±3.93）h、（2408±630）h·ng/ml。结论建立的LC-MS/MS方法简便、快速、灵敏,适用于L-CDL在大鼠体内的药代动力学研究。     

LC-MS/MS法同时测定Beagle犬血浆中柚皮苷和新橙皮苷的含量

目的:建立同时测定Beagle犬血浆中柚皮苷和新橙皮苷的LC-MS/MS分析方法。方法:以芦丁为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白处理,采用Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水(25:75)为流动相,流速为0.4 ml/min,柱温20℃;采用ESI(+)离子源,MRM扫描检测离子对为柚皮苷m/z 581→273、新橙皮苷m/z 611→303、芦丁(内标)m/z611→303。结果:血浆中柚皮苷在0.025～2.5μg/ml、新橙皮苷在0.015～1.5μg/ml浓度范围内线性关系良好,二者的方法回收率均近100%,分析方法的日内日间精密度RSD值均小于10%,内源性物质不干扰样品测定。结论:本方法简便、准确、灵敏度高、专属性好,适用于Beagle犬血浆中柚皮苷和新橙皮苷测定及其体内药代动力学的研究。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中1-脱氧野尻霉素及药代动力学研究

目的：建立大鼠血浆中1-脱氧野尻霉素（DNJ）的液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）测定方法,并用于大鼠口服桑叶总生物碱后DNJ的药代动力学研究。方法：血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以乙腈-6.5mmol·L-1甲酸铵水溶液为流动相,采用AgilentEclipsePlusC18柱（2.1mm×150mm,3.5μm）进行分离,梯度洗脱,流速0.4mL·min-1。采用电喷雾离子源,多反应监测（MRM）模式,正离子检测,用于定量的离子反应为m/z164.0→69.0（DNJ）,m/z208.1→146.0（米格列醇,内标）。结果：DNJ在1~500ng·mL-1浓度范围内线性关系良好,日内、日间精密度（RSD）均小于10.9%,准确度在92.4%~112.7%,DNJ和内标的提取回收率均大于84.1%。结论：本方法快速、灵敏、操作简便,可用于1-脱氧野尻霉素的药代动力学研究。     

高效液相-串联质谱方法测定法罗培南的血浆药物浓度

目的采用高效液相-串联质谱方法测定血浆中法罗培南的药物浓度。方法色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus（100mm×2.1mm,3.5μm）,流动相：乙腈与5mmol/L醋酸铵缓冲液（含0.1%甲酸）体积比为35：65,流速为0.3ml/min,文拉法新为内标。结果法罗培南的血浆浓度在0.1～20μg/ml范围内线性良好,标准曲线方程为Y=0.2700c＋0.00242（r=0.9955,n=8）,定量下限为0.1μg/ml,日内精密度〈5.4%,日间精密度〈7.9%,回收率为99.0%～113%。结论该方法处理操作简单,结果准确,专属性强,灵敏度高,适用于法罗培南人体药动学研究及生物等效性研究。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中的氯吡格雷

目的：建立灵敏、快速液相色谱-串联质谱法测定人血浆中氯吡格雷的浓度,并用于人体药动学研究.方法：500μl的血浆样品经甲基叔丁基醚提取处理后,以0.4％甲酸-乙腈（30∶70）为流动相,Poroshell 120 SB-C18柱分离,通过电喷雾离子源四极杆串联质谱,以多反应监测方式进行检测,选择离子反应为m/z 322.0→212.1（氯吡格雷）和m/z285.0→193.1（地西沣）.结果：氯吡格雷在5.04～10 080.0 pg/ml浓度范围内线性关系良好,定量下限为5.04 pg/ml,日内、日间精密度均不大于13.6％,氯吡格雷和内标地西泮的回收率分别为86.4％～ 88.6％和91.4％～100.2％.结论：该法选择性强、灵敏度高,适用于氯吡格雷片的临床药代动力学研究.     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中芍药内酯苷的浓度及其在毒代动力学研究中的应用

目的 建立测定大鼠血浆中芍药内酯苷的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法.方法 血浆样品经乙酸乙酯-异丙醇(95:5,V/V)提取后,以Poroshell 120 EC-C18柱(50 mm×2.1 mm,2.7μm)为分析柱,乙腈-水为流动相梯度洗脱,采用ESI源在多反应监测(MRM)方式下进行正离子检测.用于定量分析的离子反应为m/z 498.5→m/z 197.1(芍药内酯苷)和m/z 251.3→m/z 108.2(拉科酰胺,内标).结果 芍药内酯苷血浆浓度测定方法的线性范围为20~2000 ng/ml,日内、日间精密度RSD%均<15%,准确度(RE)在±8.06%之间.结论 该法适用于芍药内酯苷在大鼠体内的毒代动力学研究.     

HPLC—MS／MS测定益智合剂中芍药苷的含量

目的：建立HPLC—MS／MS法测定益智合剂中芍药苷含量的方法。方法：采用高效液相串联质谱法对益智合剂中痕量的芍药苷进行分析，选用ZORBAXC。8反相柱（2．1min×30mm，3．5um）为色谱柱，流动相为甲醇-5mmol/L甲酸铵（75：25），流速0．4ml／min，柱温25℃。质谱条件为电喷雾离子源（ESI），检测方式为多离子反应监测（MRM），负离子模式，用于定量分析的离子为m／z525→449。结果：用外标法定量分析，线性范围为20～5000ug/L，r=0．9999；益智合剂中芍药苷的最低检测限为2ug/L；精密度RSD为0．84％；平均加样回收率为96．34％，RSD为2．45％（n=5）；测得益智合剂中芍药苷的含量为31．45ug／L。结论：本法操作简单、快捷，结果准确可靠，可作为目前有效检测益智合剂中的痕量成分芍药苷的含量。     

LC-MS/MS法定量检测恩格列净原料药中杂质的含量

目的：建立一种LC-MS/MS法用于定量检测恩格列净原料药中杂质X（简称EPLZ-X）的含量。方法采用Thermo BDS C18（4.6 mm ×100 mm,2.4μm）色谱柱,以乙腈-水（75∶25,V/V）为流动相,流速0.7 ml/min。质谱扫描方式选用正离子模式,用于定量的多反应监测（MRM）离子对为m/z 785→m/z 475（CE为43 V）和m/z 785→m/z 418（CE为50 V）。结果在0.5~100.6 ng/ml范围内线性关系良好,低、中和高浓度质控样品的日内精密度分别为5.9%、5.4%和7.9%。日间精密度分别为6.3%、11.8%和10.7%,加样回收率分别为105.1%、109.8%、102.6%,最低定量下限为0.5 ng/ml。结论使用此法成功测定了3批原料药中该杂质的含量,均符合要求（不得超过60×10-6 g）。本法专属性强,灵敏度高,可用于其他批次样品的分析。     

液相色谱串联质谱用于原料药甲氧苄啶含量测定

目的建立甲氧苄啶原料药的液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测方法。方法样品经50%的甲醇溶解后进行液质联用分析。色谱柱为C18柱,流动相为甲醇：水（50∶50）,流速为0.2mL/min;质谱采用多重反应监测,正离子模式,离子对m/z（291.1→230.1）。结果甲氧苄啶的线性范围为60～252ng/mL,平均含量为93.64%,平均回收率为99.42%。结论利用液相色谱串联质谱技术测定原料药中甲氧苄啶的方法具有高选择性、高灵敏度等特点,具有一定实用性。     

HPLC-MS／MS同时测定血浆中九种胆汁酸亚组分浓度

目的：建立高效液相色谱．串联质谱（HPLC．MS／MS）法测定胆酸、脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸、石胆酸、甘氨胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、牛磺胆酸、牛磺脱氧胆酸、牛磺鹅脱氧胆酸九种胆汁酸亚组分浓度的方法。方法：采用色谱柱LunaC18 （2）柱（150×4．6mm,5ixm）,柱温30℃,流动相以10mmol／L乙酸氨为流动相A、乙腈-甲醇（3：1）为流动相B梯度洗脱,流速：0．6mL／min,血浆样品经乙腈沉淀蛋白后进样,MRM模式定量。结果：HPLC-MS／MS法测定胆汁酸九种亚组分浓度的最低检测限为0．50-8．00ng／mL;日内和日间变异系数均小于10％;回收率在92．75％-110．07％之间。结论：所建HPLC-MS／MS法灵敏、准确,重现性好,适用于测定血浆中九种胆汁酸亚组分含量,能够为临床及科学研究提供可靠的数据参考。