巢式RT—PCR检测抗癌中药对结肠癌患者外周血CEAmRNA表达的作用

目的：分析外周血中癌胚抗原信使核糖核酸（CEAmRNA）在诊断结肠癌血行转移中的应用价值，评价抗癌中药“卡宁”对结肠癌的疗效。方法：选取结肠癌患者40例作为研究对象，随机分为对照组与实验组，每组20例，应用巢式-逆转录-聚合酶链反应技术（巢式RT—PCR）检测患者服用“卡宁”前后血CEAmRNA的含量。结果：结肠癌患者治疗前，实验组CEA和CEAmRNA阳性率分别为32．5％、60．0％；对照组分别为37．5％、55．0％。治疗后，对照组患者CEA和CEAmRNA的阳性率分别为30％、45％；实验组分别为29．6％、41.2％（P〉0.05）。实验组治疗前后CEA与CEAmRNA含量有显著性差异（P〈0．05）。结论：CEAmRNA是一个实用价值较高的诊断消化系统肿瘤血行转移的指标，抗癌中药“卡宁”可有效治疗结肠癌。     

CEA蛋白、CEAmRNA的检测在大肠癌、胃癌早期诊断中的应用价值

目的研究CEA蛋白、CEAmRNA在大肠癌、胃癌患者血清、癌组织中的表达,为大肠癌、胃癌的早期诊断提供理论依据。方法选取21例大肠腺癌、20例胃腺癌住院患者和40例胃肠道良性疾病患者,检测其术前血清CEA蛋白表达;用免疫组织化学法和实时荧光定量RT-PCR法检测癌组织、癌旁组织及良性胃肠道疾病组织中CEA蛋白和CEAmRNA表达。结果大肠癌、胃癌癌组织CEA蛋白及CEAmRNA的表达均高于癌旁组织及良性胃肠道疾病组织（P〈0.01,P〈0.05）,胃癌组织CEAmRNA表达与血清及组织中CEA表达比较有统计学显著差异（P〈0.05）;大肠癌组织CEAmRNA表达与血清CEA表达比较有统计学差异（P〈0.05）。CEA和CEAmRNA在癌旁组织和良性胃肠道组织中表达率低。结论应用实时荧光定量RT-PCR法检测组织CEAmRNA在大肠癌和胃癌早期诊断中有重要价值。     

MMP10、FHIT基因在食管癌中的表达及临床意义

目的：探讨基质金属蛋白酶10（MMP10）、脆性组氨酸三联体（FHIT）基因在食管癌中的异常表达及二者对其发生、发展的作用。方珐：应用免疫组化法对54例食管癌组织及癌旁正常组织MMP10、FHIT基因的表达水平进行检测,并研究与病史及临床病理指标的关系。结果：MMP10在食管癌组织阳性表达率为35．19％（19／54）,而食管癌旁正常组织为阴性表达。FHIT基因在食管癌组织中缺失率为72．22％（39／54）,明显高于食管癌旁正常组织中缺失率12．96％（7／54）,二者差异有统计学意义（P〈0．01）。MMP10在食管癌中的表达与食管癌组织分化程度呈负相关（r=-0．697）,与P—TNM分期呈正相关（r=0．85）．淋巴结转移组明显高表达（P〉0．05）。FHIT基因缺失与食管癌患者的性别、病史长短、吸烟、饮酒、P-TNM分期及淋巴结转移无明显关系（P〉0．05）。而与食管癌组织分化程度有关（P〈0．05）。结论：MMP10在食管癌组织中有较高的阳性表达率,而FHIT基因存在较高的缺失率,且二者与食管癌临床病理指标有关．提示MMP10、FHIT基因在食管癌的发生、发展中起重要作用。     

食管癌患者外周血CK20、CK19、CEA mRNA的表达及其临床病理意义

目的：研究89例食管癌患者外周血中CK20、CK19及CEA mRNA的表达,并探讨其临床病理意义。方法：巢式RT—PCR技术检测89例食管癌患者术前外周血中CK20、CK19、CEA mRNA的表达。结果：89例食管癌患者外周血中CK20、CK19及CEA的阳性表达率分别为49．44％、34．83％及52．81％;三基因同时检测时,至少1个基因检测结果为阳性的表达率为71．91％,与食管癌的淋巴结转移和（或）远处转移具有相关性。结论：CK20、CEA可作为检测食管癌患者外周血微转移的生物学标志,RT—PCR联合检测多种标志物可为了解肿瘤的恶性生物学行为、指导临床治疗方案的选择、判断预后及监测疗效提供依据。     

Jagged2和Gli 1在人结肠癌组织中的表达及其相关性

目的：检测Jagged2和Glil蛋白在结肠癌组织中的表达情况并分析两者表达相关性。方法：采用免疫组织化学染色检测60例原发性结肠癌及对应癌旁组织中Jagged2和Glil蛋白的表达情况,分析Jagged2蛋白表达与结肠癌不同临床病理特征的相关性以及其与Glil蛋白表达相关性。结果：Jag—ged2和Glil蛋白在结肠癌组织中的阳性表达率分别为71．7％（43／60）和78．39／6（47／60）,而对应癌旁组织中Jagged2和G1n蛋白阳性表达率分别为33．3％（20／60）和36．7％（22／60）,差异具有统计学意义（χ2=17．678,P=0．000;χ2=21．313,P=0．000）。结肠癌组织中Jagged2蛋白表达与浸润深度（χ2=4．930,P=0．026）、淋巴结转移（χ2=7．520,P=0．006）和肿瘤分期（χ2=4．705,P=0．030）有关。另外,结肠癌组织中Jagged2与Glil蛋白表达呈显著负相关（r=-0．518,P=0．019）。结论：结肠癌组织中Jagged2蛋白高表达并与恶性临床病理特征密切相关,且Jagged2与Glil蛋白表达负相关,提示Jag—ged2在胃癌侵袭转移中可能发挥重要作用。     

Skp2在食管癌组织中的表达及其与p27表达的关系

目的：研究细胞S期激酶相关蛋白（S—phasekinase—associatedprotein2，Skp2）和p27蛋白在食管癌组织中的表达及两者相互关系。方法：应用免疫组化S～P方法检测90例食管癌组织中Skp2与p27蛋白的表达水平和78例正常食管组织中Skp2蛋白与p27蛋白表达水平。结果：Skp2蛋白表达率在食管癌中为61．1％（55／90），而在正常食管组织中为17．9％（14／78），差异有统计学意义（P〈0．05）。p27蛋白表达率在食管癌中为22．2％（20／90），而正常食管组织中为75．6％（59／78），差异有统计学意义（P〈0．05）。Skp2与p27表达呈显著负相关（P〈0．05）。结论：采用免疫组化法联合检测Skp2与p27的表达可以用于食管癌的早期诊断。     

CEAmRNA-CEAp系统在良恶性腹水中表达差别的临床意义

目的：了解癌胚抗原信使核糖核酸（CEAmRNA）．癌胚抗原蛋白（CEAp）系统在良、恶性腹水中表达的差别,评估检测CEAmRNA—CEAp系统指标诊断与鉴别诊断良、恶性腹水的应用价值．方法：恶性腹水组60例,良性腹水组33例．采集腹水为检测标本,应用反转录套式聚合酶链反应（RT—NP—PCR）技术检测CEAmRNA．磁性抗体分离酶免疫测定（MAIA）技术检测CEAp．结果：良、恶性组腹水中CEAmRNA和CEAp的阳性率分别为3．0％（1／33）和9．1％（3／33）．81．7％（49／60）和56．7％（34／60）,良、恶性腹水间均具有显著的统计学差异（P〈0．01）．用CEAmRNA和CEAp指标诊断与鉴别诊断恶性腹水的特异度、敏感度、阳性似然比、阴性似然比、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为0．970和0．909,0．817和0．567,27．233和6．231,0．189和0．476,0．980和0．919,0．744和0．544,0．871和0．699．结论：检测腹水中CEAmRNA和CEAp对良、恶性腹水的诊断与鉴别诊断均具有较高的应用价值,其中以CEAmRNA指标更为重要．     

Survivin蛋白预测直肠癌术前放疗敏感性的临床意义

目的探讨Survivin蛋白表达与直肠腺癌术前放疗病理反应程度的关系,评价Survivin蛋白表达水平在预测直肠癌术前放疗敏感性的价值。方法63例采用术前放疗的直肠腺癌患者,评价其放疗后病理反应程度,免疫组化方法检测手术治疗前活检标本和手术后切除标本中Survivin蛋白的表达水平,分析活检组织中Survivin蛋白表达水平与病理反应程度的关系,以及放疗前后蛋白表达水平的变化。结果直肠癌术前放疗后病理反应良好,有效率达71％,联合放化疗者优于单纯放疗者（P〈0．05）。单纯放疗组Survivin蛋白表达高低与放疗疗效相关（P〈0．05）,同期放化疗组则显著相关（P〈0．01）。两组均显示Survivin蛋白表达高的,放疗效果差。肿瘤组织放疗后Survivin蛋白表达水平无明显下降。结论直肠癌组织中Survivin蛋白表达水平可作为术前放疗敏感性的预测因子。     

鼻咽癌患者放疗前后血清EB病毒特异性DNA酶抗体的变化

目的：了解鼻咽癌（NPC）患者放疗前后血清EB病毒特异性DNA酶（EBV－DNase)抗体的变化,以评估其预后。方法：用WesternBlot及放射免疫法检测24例NPC患者放疗前后BV－DNase抗体,并用免疫酶法测定血清EB病毒壳抗原IgA(EBVCA-IgA）。结果：（1）WesternBlot法检测NPC患者放疗前后血清EBV－DNaes抗体,放疗前抗体阳性率87．50％（21／24）,放疗后为29．16％（7／24）,差异显著（P＜0．01）;（2）放免法测得两组血清抗酶率（AER）平均值分别为74．02％、31．75％,二者有显著差异（P＜0．05）。（3）放疗后的血清EBVCA－IgA平均几何滴度（GMT）为1：23．4,较放疗前明显降低（P＜0．05）。结论：PNC放疗后血清EBV－DNase抗体水平有明显下降,比EBVCA－IgA检测更加准确地反映了病情变化。提示血清EBV－DNase抗体检测对评估NPC预后,疗效监测可能有帮助。     

食管癌组织中S期激酶相关蛋白2mRNA的表达意义

目的：探讨S期激酶相关蛋白2mRNA在食管癌及其癌旁组织中的表达及其与食管癌临床病理特征的关系．方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测S期激酶相关蛋白2mRNA在45例手术切除的食管癌组织及癌旁组织中的表达．结果：S期激酶相关蛋白2mRNA表达率在食管癌中为66．6％（30／45）,而癌旁组织中为24．4％（11／45）,差异有显著性（P〈0．05）．S期激酶相关蛋白2mRNA阳性表达率与患者年龄、性别、肿瘤大小、及有无淋巴结转移无关,与肿瘤分化程度及TNM分期有关（P〈0．05）．结论：S期激酶相关蛋白2的高水平表达促进了食管癌的发生发展．并将可能为食管癌的早期诊断和治疗提供新的手段．     

RT PCR检测食管癌患者骨髓CEA mRNA的表达及其临床意义

目的：探讨食管癌患者骨髓微转移的检测及临床意义。方法： 以癌胚抗原（CEA）为分子标记物，采用RT PCR技术检测43例食管癌患者及17例食管良性病变患者肋骨骨髓中癌胚抗原的表达。结果： 43例食管癌患者骨髓中CEA mRNA阳性率为34.9 %，食管良性病变患者骨髓中未见表达，两者差异有统计学意义（P＜0.05），CEA mRNA的表达与食管癌患者年龄、性别、病理组织类型、肿瘤细胞分化程度无相关性，但与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P＜0.05）。结论：用RT PCR法检测食管癌患者肋骨骨髓微转移具有较高的敏感性和特异性，骨髓中CEA的检测可帮助综合判断疾病的恶性程度及患者预后，有助于发现亚临床转移灶。     

食管鳞癌放疗前后外周血survivin检测的临床意义

目的:研究食管鳞癌(esophagus squamous cell carcinoma,ESCC)患者放疗前后外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)标记生存素(survivin) mRNA的表达及其临床意义?方法:收集72例ESCC患者根治性放疗前后外周血,应用巢式RT-PCR检测survivin mRNA的表达,分析其与临床病理特征?放疗疗效及两年无进展生存期(progerssion-free survival,PFS)的关系?结果:放疗前后survivin mRNA阳性者分别占54.2%(39/72)与38.9%(28/72),差异无统计学意义(P = 0.066),放疗前后survivin mRNA阳性均与淋巴结转移相关(P值分别为0.012和0.005),放疗后survivin mRNA阳性提示放疗疗效不佳(P = 0.030)?生存分析表明放疗前后survivin mRNA阳性与PFS减少有关 (P值分别为0.040和 < 0.001),Cox回归模型证实放疗后survivin mRNA阳性?KPS评分和规范化后续化疗是独立预后指标?结论:放疗后外周血survivin mRNA阳性有望成为ESCC根治性放疗疗效评估和预后判断的有效分子标记?     

D-二聚体与肿瘤标记物联合检测在食管癌中的价值

目的:探讨D-二聚体与肿瘤标记物联合检测对食管癌的诊断价值和意义。方法:采集40例经胃镜确诊的食管鳞癌患者和40例慢性食管炎患者的血清,用胶体金方法测血浆D-二聚体(D-dimmer)含量;用电化学发光法检测其血清中癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)的含量。结果:食管癌患者血清D-二聚体及2种肿瘤标记物单项检测含量均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);D-二聚体与CEA、CA19-9联合检测率高于对照组,差异具有统计学意义(P均<0.05);D-二聚体与CEA、CA19-9联合检测阳性率分别为65%和52.5%,比其单项检测的敏感性高。结论:D-二聚体联合与肿瘤标记物联合检测能提高食管癌的检测率,对食管癌和慢性食管炎的鉴别有一定的临床价值。     

肺癌患者外周血肺组织特异性基因mRNA检测的诊断价值

目的: 探讨荧光定量RT-PCR法测定外周血肺组织特异性基因(lung-specific X protein gene,LUNX) mRNA表达对肺癌的诊断价值。方法: 荧光定量RT-PCR法检测67例肺癌患者(其中30例手术患者测定术前和术后外周血)、40例良性肺疾病患者、20名健康体检者外周血LUNX mRNA表达,67例肺癌患者同时用放免法测定外周血中CEA、CA125、Cyfra21-1。结果: 肺癌患者外周血LUNX mRNA表达阳性率(56.7%)均高于CEA、CA125、Cyfra21-1单项或三者联合检测(分别为16.4%、26.9%、11.9%和32.8%)(P<0.05~P<0.005)。荧光定量RT-PCR法测外周血LUNX mRNA表达诊断肺癌的敏感性为56.7%,特异性100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为67.4%。结论: 荧光定量RT-PCR法测定外周血LUNX mRNA可能成为肺癌基因诊断一项较好的指标。     

新疆哈萨克族食管鳞癌患者外周血YYl mRNA的表达及意义

目的:研究转录调节因子YY1 mRNA在新疆哈萨克族食管鳞癌患者((Esophageal squamous cell carcino-ma,ESCC))外周血中的表达及意义。方法:应用RT-PCR技术检测40例食管鳞癌和40例非食管鳞癌患者外周血中YY1 mRNA的表达。结果:40例食管鳞癌患者外周血中YY1 mRNA阳性表达率为47.5%(19/40);40例非食管鳞癌患者外周血中YY1 mRNA阳性表达率为2.5%(1/40);随着恶性程度增加及病程进展,YY1 mRNA阳性率逐渐上升(P<0.05),YY1 mRNA在低分化鳞癌组阳性表达率(81.82%)显著高于高分化鳞癌组(21.05%,P<0.05)。结论:应用RT-PCR方法检测食管鳞癌患者外周血中的YY1 mRNA具有较高的敏感性和特异性,YY1 mR-NA是有价值的食管癌微转移标志物,有望成为判断食管鳞癌恶性程度和监测疗效的客观指标。     

循环肿瘤细胞在晚期食管鳞癌患者疗效评估中的临床价值*

目的 探究循环肿瘤细胞（CTC）在评估晚期食管鳞癌患者同步放化疗疗效的临床应用。方法 选取2015年12月31日—2016年12月31日安徽医科大学第一附属医院肿瘤放疗科的食管鳞癌晚期患者（Ⅲ、Ⅳ期）38例,予以50?Gy的三维适行放疗联合TP方案（紫杉醇135?mg/m2;顺铂25?mg/m2）化疗,在放化疗前采集患者的外周血检测CTC,并对患者进行2年密切随访,运用t检验,Z检验分析CTC值变化,Kaplan-Meier方法及Log-rank χ2检验分析患者CTC值与生存率的关系,并运用Cox回归模型进行多因素分析。结果 食管鳞癌患者同步放化疗后肿瘤直径较治疗前明显减小,同步放化疗前后CTC差值（dCTC）、CEA的差值（dCEA）、CA199的差值（dCA199）、放疗前CA125值对患者预后有影响,dCTC和放疗前CA125值是评估入组患者预后的独立影响因素。结论 对食管癌同步放化疗的患者,放疗前后CTC的差值,放疗前CA125值相比较放疗前CTC、CEA及CA199值,能更好地评估患者的预后。     

良、恶性胃病变组织表达CEA mRNA的差别

目的:研究良、恶性胃病变组织表达癌胚抗原(CEA)mRNA的差别,评估其在胃癌诊断中的应用价值。方法:以胃癌和良性胃病组织为检测标本,应用反转录套式聚合酶链反应技术检测CEAmRNA。结果:胃癌组织CEAmRNA的阳性表达率为82.4%、良性胃病组织标本为6.7%,差别有统计学意义(P<0.01)。应用CEAmRNA指标诊断胃癌的特异性为93.3%、敏感性为82.4%。结论:CEAmRNA在胃细胞恶性变时有高水平的表达,检测组织标本CEAmRNA指标诊断胃癌具有较高的应用价值。     

食管癌患者血清中DKK-1的表达

目的 探讨DKK-1在食管癌患者血清中表达的临床意义。方法 应用酶联免疫（Elisa）法检测80例食管鳞癌患者和35例正常人血清中的DKK-1的表达水平,并与常规肿瘤标记物进行比较,探讨其在食管癌中的诊断价值。结果 食管鳞癌患者血清中DKK-1浓度为（90.44±57.41）ng／mL,而正常人血清浓度为(11.29±9.45)ng／mL,两者之间差异有统计学意义（P<0．01）。若以正常人血清DKK-1浓度95％可信区间上限为界值(14.54ng／mL),则食管癌鳞患者血清中DKK-1的敏感性为66.25％(53／80),特异性为82.86％;血清中的DKK-1的阳性率仅为17.14％(6／35),两者之间差异有统计学意义(P<0．01)。经过统计学分析显示,食管鳞癌患者血清中的DKK-1水平与肿瘤大小、分期及淋巴结转移等因素相关(P<0．05),而与性别、年龄及肿瘤的分化程度无关（P＞0.05）。通过与其他标记物比较发现DKK-1的检测对食管鳞癌诊断的敏感度明显高于常规肿瘤标记物(CEA 39.44%,CYFRA21-1 25.35%,P<0．01),三者联合检测能明显提高诊断食管癌的敏感性。结论 DKK-1可作为检测食管癌的一种新的肿瘤标记物,对食管癌的诊断和病情评估有一定的辅助参考价值。     

胃癌患者外周血CEA mRNA的检测及意义

目的 探讨胃癌患者外周血中CEA mRNA的表达及临床意义。方法 采用巢式RT-PCR技术检测70例胃癌患者手术前、后外周血CEA mRNA的表达情况，并以20例健康志愿者为阴性对照组，以10例新鲜胃癌组织作阳性对照。结果 CEAmRNA术前阳性表达率为51．4％，阳性表达率与组织学类型、TNM分期具有显著相关性（P〈0．05），而与肿瘤的部位、患者性别无相关性（P〉0．05）；20例健康志愿者无1例阳性表达，10例胃癌组织均为阳性表达。结论 CEA mRNA作为标志物检测胃癌血循环微转移是可靠的，对于指导临床诊断、治疗及判断预后具有重要意义。