他克莫司后处理对缺血再灌注脊髓组织炎性反应的抑制作用

目的探讨他克莫司后处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后组织炎性反应的抑制作用。方法成年雄性SD大鼠90只,随机分为假手术(SO)组、缺血再灌注(IR)组和他克莫司后处理(TP)组。采用经股动脉置管球囊扩张制备脊髓缺血模型,缺血20分钟后抽出球囊中液体行再灌注。再灌注15分钟、1、6、24小时切取相应脊髓节段,采用邻联二茴香胺法检测髓过氧化物酶(MPO)活性,再灌注24小时应用干湿差重法测定伤段脊髓组织水含量,同时制备组织切片行原位末端标记法(TUNEL)染色观察神经细胞凋亡。结果 SO组大鼠脊髓组织MPO活性在7.20~8.03 U/mg之间,与之相比IR组大鼠再灌注各时间点MPO活性升高明显(P0.01),TP组大鼠再灌注15分钟、1、6、24小时时MPO活性均显著低于IR组(P0.01)。SO组大鼠脊髓组织水含量为(61.17±1.49)%,再灌注24小时时IR组大鼠高达(69.34±0.91)%,而TP组脊髓组织水含量为(65.09±0.61)%,显著低于IR组(P0.01)。SO组大鼠脊髓神经细胞凋亡率为(5.44±1.31)%,再灌注24小时时IR组和TP组的凋亡率分别为(32.76±6.67)%和(20.40±5.43)%,TP组显著低于IR组(P0.01)。结论他克莫司后处理能抑制缺血脊髓再灌注后的中性粒细胞聚集和组织炎性水肿,减轻神经细胞凋亡,从而发挥神经保护作用。     

Lewis肺癌细胞TLR4对Foxp3表达的调控

目的:探讨小鼠Lewis肺癌(Lewis lung cancer,LLC)细胞中TLR4对Foxp3表达的调控作用。方法:选择LPS为配体活化TLR4,采用RT-PCR方法检测LPS在不同浓度(0,1,10μg/ml)和不同时间点(12,24,36,48小时)Foxp3 mRNA的表达量的变化,流式细胞术检测有效浓度LPS 10μg/ml和最佳作用时间点24小时Foxp3蛋白和TLR4蛋白表达量的变化,RT-PCR和流式细胞术检测anti-TLR4/MD2抗体阻断TLR4后再用LPS刺激LLC细胞Foxp3表达量的变化。结果:LPS在10μg/ml浓度作用LLC细胞后可显著上调Foxp3 mRNA的表达量,与未刺激组相比差异显著(P<0.05);LPS最佳作用时间为24小时;LPS在10μg/ml浓度作用LLC细胞24小时后可显著上调Foxp3蛋白和TLR4蛋白的表达量,与对照组相比差异显著(P<0.05);阻断TLR4后再用LPS刺激LLC细胞,Foxp3的表达量较未阻断组明显降低(P<0.05)。结论:LLC细胞TLR4蛋白参与对Foxp3的表达调控,TLR4可能是Foxp3的上游信号分子。     

复方当归注射液对大鼠脑缺血再灌注后炎症反应的保护作用及其保护机制的研究

目的:探讨复方当归注射液对脑缺血再灌注后的保护作用及其作用机制。方法:(1)参照Zea longa线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,并随机将SD大鼠分为假手术组、脑缺血再灌注模型组、复方当归注射液大剂量组、复方当归注射液中剂量组、复方当归注射液小剂量组和丹参注射液阳性药物对照组。各组大鼠分别在脑缺血2小时再灌注24小时后检测神经评分和梗死灶体积,并测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血浆内皮素(ET)的含量。(2)在脑缺血2小时再灌注24小时后,采用生化试剂测定各组大鼠脑组织匀浆的髓过氧化物酶(MPO)和一氧化氮(NO)的含量。…     

生脉注射液减轻兔肾缺血再灌流损伤的作用研究

用自制的肾缺血再灌流损伤模型,在20只新西兰兔,研究了生脉注射液在肾缺血再灌流操作中的作用。结果表明:肾缺血再灌流24小时后,单纯缺血再灌流组动物血尿素氮和肌酐较缺血前显著升高;生脉防治组血尿素氮较缺血前显著升高,但肌酐无显著变化;在再灌流2小时和24小时,血中过氧化脂质(LPO)的含量,单纯缺血再灌流组较缺血前呈升高趋势,生脉防治组呈降低趋势,但差异均无显著性;再灌流24小时肾组织中LPO含量,生脉防治组较单纯缺血再灌流组肾脏呈严重坏死改变,生脉防治组仅有轻度变性。结果揭示:生脉注射液具有减轻兔肾缺血再灌流损伤的作用。     

肝缺血再灌注损伤和氯丙嗪的保护作用—黄嘌呤脱氢酶活性的组化观察

本文用组织化学方法观察大鼠肝脏缺血不同时间后再灌注时对黄嘌呤脱氢酶(Xanthlne Dehydrogenase简称XDase)活性的影响,同时观察氯丙嗪的保护作用。结果表明,短时间(0.5小时)肝缺血后再灌注,XDase活性和HE染色都无异常改变。长时间(2小时)肝缺血,达到不可逆性损伤后再灌注3小时,可使XDase活性明显减低,再灌注24小时后,HE染色有大面积肝细胞凝固性坏死,氯丙嗪对这种改变有明显的保护作用。     

NF-κ Bp65在糖尿病大鼠脑缺血再灌注中的表达

目的:通过观察糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后转录核因子NF-κBp65表达的动态变化,以探讨糖尿病在脑缺血再灌注损伤中的可能机制.方法:将SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、假手术组(B组)、脑缺血再灌注组(C组)、糖尿病脑缺血再灌注组(D组),链脲佐菌素腹腔注射制作糖尿病模型,线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血 2 h再灌注模型,免疫组织化学方法观察再灌注第3、第6、第24、第48小时脑组织中NF-κ Bp65表达的动态变化.结果:脑缺血再灌注后,C组在第6小时、D组在第3小时即可见到NF-κ Bp65免疫阳性细胞,随着再灌注时间的延长,NF-κ Bp65免疫阳性细胞表达增加,第24小时达高峰,第48小时开始下降;NF-κ Bp65表达在各个缺血再灌注时间点上,D组较C组增加(P＜0.05).结论:糖尿病可促进NF-κ Bp65活化加重脑缺血再灌注损伤.     

新生儿心脏功能的昼夜节律研究

本文对下列新生儿组:第一组(正常、日龄>24小时、30例),第二组(足月低体体重儿,日龄>24小时,9例),第三组(早产儿,日龄>24小时,6例)和第四组(正常,日龄<24小时,15例)的心脏功能作了昼夜节律的探索。采用Doppler血流仪测定左室射血速度(V),射血加速度(dv/dt)和每搏距离(SD),每4小时测一次共6     

宫颈癌细胞通过分泌TSLP促进自身细胞活力

目的:探讨胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)对宫颈癌细胞活力的自分泌调节作用。方法:体外培养宫颈癌细胞株HeLa和CasKi,分别收集培养24、48和72小时的培养上清,ELISA法检测培养上清中TSLP的分泌水平;流式细胞术分析HeLa和CasKi细胞表面TSLP受体(TSLPR)的表达水平;再用MTT法分别检测HeLa和CasKi细胞经人重组细胞因子TSLP(1、10和100 ng/ml)处理24、48和72小时后细胞活力的水平变化。结果:HeLa和CasKi细胞均呈时间依赖性分泌TSLP(P<0.01),且HeLa细胞在24和48小时分泌TSLP的水平高于CasKi细胞(P<0.01或P<0.05);HeLa和CasKi细胞TSLPR阳性表达率分别为23.61±1.30和27.07±2.13,前者低于后者(P<0.05);此外,10或100 ng/ml TSLP作用HeLa和CasKi细胞48小时或72小时均能上调其细胞活力(P<0.05)。结论:宫颈癌细胞可能通过TSLP自分泌作用促进自身的活力,进而利于宫颈癌细胞的生长,因而参与宫颈癌的发病和进展。     

2型糖尿病人尿蛋白排泄率与尿IgG4的相关研究

目的　测定18例正常人和70例2型糖尿病病人24小时尿UAER(mg/24h)和尿IgG     

丹参提取物F对大鼠乙醇性胃粘膜损伤的影响与氧自由基的关系

用Wistar系大鼠,实验前禁食24小时,不限饮水。分三组:实验组在灌乙醇前6小时和2小时分别向胃内灌注丹参提取物F(DSE-F,1ml/100g)各一次,然后灌100%乙醇(0.5ml/100g),10分或30分后处死动物,对     

家兔急性心肌缺血及再灌注时粒细胞在肺微血管内的蓄积及其意义

本实验采用家兔急性心肌缺血及再灌注模型,应用光镜、透射电镜和扫描电镜冷冻割断技术,探讨了急性心肌缺血及再灌注时粒细胞在肺微血管内的变化。实验分假手术对照组(3例)、冠状动脉阻断24小时的缺血     

烫伤应激反应后大鼠脑组织M受体及乙酰胆硷变化初探

将Wistar大鼠随机分成对照组,烫伤后24、48、72小时组。为开水烫伤,背部创面控制30%。烫伤后24小时大鼠脑组织M受体数量较控制组下降,其Bmax由440.95±141.19fmol/mg蛋白降为280.48±110.49(P<     

尿游离甲氧基肾上腺素和甲氧基去甲肾上腺素检测标本前处理的尿液酸化研究

目的 检测24小时尿游离甲氧基肾上腺素(MN)和甲氧基去甲肾上腺素(NMN)是诊断嗜铬细胞瘤的首选筛查方法之一,需寻求24小时尿液收集和游离NMN、MN获得这两个前处理过程中尿液酸化处理的安全可控方式.方法 随机尿标本用于本研究,观察在添加或不添加浓盐酸及在室温或较高温(34℃)存放24小时和在不同酸性条件下(pH值为2、3、4)进行酸水解对尿游离NMN/MN水平的影响.结果 首先发现尿液在室温或较高温条件下不添加盐酸进行酸化存放24小时游离NMN/MN并没有显著降解.之后统计发现不同患者24小时尿量存在较大变化,常规方法留尿过程加入固定剂量的酸会引起pH值的波动(pH值2～4).通过调节尿液pH值,发现在不同酸性条件进行酸水解尿游离NMN的检测,其水平存在显著差异,pH值大于等于4不能达到酸水解的目的.最后利用40份随机尿标本验证发现尿液不加酸存放24小时但水解时酸化至pH 2为更可控的尿液酸化方式.结论 24小时尿留取过程不必添加盐酸但水解前用盐酸调节pH值到2是尿游离NMN、MN检测更加安全可控的前处理方式.     

黄腐酸对大鼠十二指肠溃疡的影响

本实验观察了黄腐酸对巯乙胺引起的大鼠十二指肠溃疡的影响。实验用20只雌性大鼠,体重160～200克,随机分为两组。经口灌入盐酸巯乙胺(700mg/kg,分两次)以制成溃疡模型。24小时后处死,取胃十二指肠标本,观察溃疡指数。实验组另以3到4小时间隔,皮下注射5次黄腐酸(1％生理盐水溶液),剂量为50mg/kg×5。以生理盐水作对照。 口服巯乙胺后24小时,对照组动物全     

丹参的抗氧化作用对大鼠急性胰腺炎的影响

本文应用SD大鼠胆汁返流性急性胰腺炎(AP)模型,腹腔内注射丹参液治疗,发现治疗组血MDA含量(1小时和12小时分别为6.55±1.09和7.59±1.10nmol/ml)明显低于AP组(1小时和12小时分别为10.75±1.45和13.10±1.85nmol/ml)(P<0.01),治疗组血SODa含量(1小时和12小时分别为202±24和207±47u/ml)明显高于AP组(1小时和12小时分别为107±41和64±23u/ml)(P<0.01),胰重下降,病理改变减轻,大鼠病死率和病死鼠平均存活时间明显改善。有力提示丹参可通过抑制AP大鼠体内氧自由基的产生和增加其清除,而起到良好的治疗作用。     

结核杆菌抗原特异性激发人γδT细胞活化信号涉及Ras/Erk途径

目的探讨Ras/Erk通路是否参与结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)启动的γδT细胞活化信号转导途径.方法分离获取PBMC,用佛波醇酯(PMA)和离子霉素(IM),CD3mAb或Mtb-Ag刺激不同时间,或PBMC先经PD98059处理后再刺激培养;用荧光单抗染色后在流式细胞仪测定细胞CD69分子的表达;计数培养扩增10天的细胞数量.结果PBMC用PMA+IM刺激6小时,总T细胞和γδT细胞中的CD69表达均达高峰(均＞99%),用CD3mAb刺激24小时,均达高峰(均在55%左右),用Mtb-Ag刺激24小时,亦均达高峰,但总T细胞和γδT细胞中CD69分别为16.0%和75.2%;用PD98059预处理PBMC,可明显抑制Mtb-Ag激活的γδT细胞CD69表达和γδT细胞的增殖.结论Mtb-Ag可特异性激活γδT细胞,其活化信号转导需通过Ras/Erk通路.     

低剂量LPS对PC12细胞抗氧化能力的影响

目的:探讨低剂量脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对PC12细胞抗氧化能力的影响。方法:分别以浓度为0、0.01、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1μg/μl的LPS刺激PC12细胞24小时,MTT法检测细胞活性确立对细胞没有毒性作用的安全剂量;采用安全剂量刺激PC12细胞24小时,收集培养基上清和细胞,采用试剂盒检测上清中的总抗氧化能力(T-AOC),细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的表达,Western blot检测细胞内Bcl-2蛋白的表达;流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)、钙离子(Ca2+)的平均荧光强度。结果:LPS浓度小于0.1μg/μl对细胞没有明显毒性作用(P>0.05);采用0、0.01、0.025、0.05、0.1μg/μlLPS分别刺激PC12细胞24小时,培养上清中T-AOC呈下降趋势,以0.05、0.1μg/μl组明显(P<0.01),细胞内SOD呈上升趋势(0.05μg/μl组,P<0.05;0.1μg/μl组,P<0.01),细胞内Bcl-2表达逐渐升高(0.025~0.1μg/μl组,P<0.01),细胞内ROS呈下降趋势(0.1μg/μl组,P<0.01),钙离子未见明显变化(P>0.05)。结论:低剂量LPS处理PC12 24小时具有剂量依赖性增强细胞抗氧化能力,并可能藉此参与应激耐受。     

儿童癫癎24小时动态脑电图与常规脑电图分析

目的:动态脑电图与常规脑电图检查对儿童癫癎的应用价值分析。方法:对252例儿童癫癎病人先行常规脑电图检查后,再行24小时动态脑电图记录,分别分析癎样放电的检出率。结果:24小时动态脑电图异常率为90.47%(228/252),癎样放电率为77.77%(196/252),并多在非动眼睡眠的Ⅰ、Ⅱ期出现。常规脑电图异常率56.74%,癎性放电29.76%。结论:24小时动态脑电图检查大大的提高了儿童癫癎的检出率。常规脑电图的非特异性改变检出率相对高。     

24小时不用泵测试膜式人工肺的生理学性能

麻醉下的6例杂种犬被施以低氧通气,以便观察小型(0.45m~2)膜式人工肺A-V转流24小时的气体转移功能和血细胞的破坏情况。在体外循环期间除血小板减少外,无其他特征性的血液学变化。以后数月观察试验动物亦无毒性反应。该小型膜式人工肺24小时平均血流量407ml/分,O_2转移率为13.81～29.15ml/m~2/分。     

高血糖经抑制磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶加重脑缺血再灌注损伤

目的:探讨磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)在高血糖加重脑缺血再灌注损伤中的作用。方法:通过注射链脲佐菌素制备糖尿病高血糖模型,线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型;分为假手术组(sham组),正常血糖脑缺血再灌注24 h组(NM I/R 24 h组)、72 h组(NM I/R 72 h组),高血糖脑缺血再灌注24 h组(HM I/R 24 h组)以及72 h组(HM I/R 72 h组),采用组织学、免疫组织化学及免疫印迹等方法,比较观察脑组织的损伤及p-AMPK的表达。结果:NM I/R 24 h组、NM I/R 72 h组大鼠均可见神经功能缺失的表现,HM组大鼠神经功能缺失评分明显高于NM组。NM I/R 24 h组梗死区脑组织疏松水肿,神经元固缩;HM组大鼠脑组织疏松水肿及固缩神经元较NM组大鼠明显增加;与NM I/R 72 h组比较,HM组大鼠仍存在脑组织疏松水肿,较多固缩神经元。免疫组织化学显色和免疫印迹结果可见,I/R 24 h和I/R 72 h,HM组p-AMPK相对蛋白量明显低于NM组。p-AMPK定位观察可见,p-AMPK与神经元共表达,但不与星形胶质细胞共表达。结论:糖尿病高血糖加重大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,可能与神经元磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶减少有关。