菟丝子黄酮对雷公藤多苷损伤雄性幼鼠睾丸组织凋亡相关蛋白Bcl-2和蛋白Bax表达的影响

目的：研究菟丝子黄酮对雷公藤多苷（GTW）损伤雄性SD幼鼠睾丸组织凋亡相关蛋白蛋白Bcl-2和蛋白Bax的表达的影响。方法：健康3周龄SD雄性幼鼠36只,随机分为三组：空白组、雷公藤多苷组、菟丝子黄酮＋雷公藤多苷组。免疫组化法测定Bcl-2/Bax表达。结果：各实验组Bcl-2蛋白表达：雷公藤多苷组表达最少,与其他各组之间比较（P〈0.05）差异有统计学意义。空白组表达最高,菟丝子组次之,空白组与菟丝子组之间比较（P〉0.05）差异没有统计学意义。各实验组Bax蛋白表达：雷公藤多苷组表达最高,与其他各组之间比较（P〈0.05）差异有统计学意义。空白组表达最少,空白组与菟丝子组之间比较（P〈0.05）差异有统计学意义。结论：菟丝子黄酮能增强雄性幼鼠生育能力,其机制可能是对抗雷公藤多苷所致雄性幼鼠睾丸组织Bcl-2蛋白表达减少和Bax蛋白表达增强。     

补肾中药对雷公藤多苷所致生殖损伤雄性幼鼠血清睾酮及睾丸组织P450scc的影响

目的:研究雷公藤多苷(glycosides of Tripterygium wilfordii,GTW)对幼年雄性大鼠血清睾酮及睾丸组织中睾酮生成酶细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(cyto-chrome P450 side chain cleavage,P450scc)的影响以及补肾中药(菟丝子黄酮、六味地黄丸)对其损伤的干预作用.方法:3～4周龄SD雄性幼鼠48只,随机分为4组:空白组(CMC-Na)、多苷组(9 mg·kg-1·d-1)单独ig,六味组(六味地黄丸1g·kg-1·d-1 +GTW9 mg· kg-1·d-1),黄酮组(菟丝子黄酮0.1 g·kg-1·d-1+GTW 9mg · kg-1·d-1)混合ig,持续给药12周后,处死大鼠留取血清和睾丸组织,采用放免法检测血清睾酮浓度;采用RT-PCR和Western blot检测睾丸组织中p450scc在基因和蛋白水平的表达.结果:GTW组与空白组相比可以明显降低血清睾酮(P＜0.01);六味组与多苷组相比可以明显提高血清睾酮(P＜0.05);在蛋白水平GTW与空白组相比可以明显降低睾丸组织P450scc(P ＜0.05);在基因水平GTW组与其他组比较无显著性差异.结论:GTW对幼年大鼠生殖系统有一定损伤作用;六味地黄丸可以通过提高雄鼠血清睾酮水平而达到保护生殖损伤的作用.     

菟丝子黄酮、雷公藤多苷对体外培养幼鼠生精细胞周期及凋亡的影响

目的通过观察含雷公藤多苷(GTW)、菟丝子黄酮药物血清对体外培养的大鼠睾丸生精细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响,探讨菟丝子黄酮干预GTW所致生殖损伤的作用机制。方法体外培养大鼠睾丸生精细胞,将其分为空白组、9mg GTW组(多苷1号组)、9mg GTW+菟丝子黄酮组(黄酮1号组)、12mg GTW组(多苷2号组)、12mg GTW+菟丝子黄酮组(黄酮2号组),加不同含药血清,于培养24h、48h后,通过MTT法检测含药血清对生精细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测含药血清对生精细胞细胞周期及凋亡的影响。结果生精细胞增殖方面:血清作用24h、48h时,黄酮1号组OD值明显高于多苷1号组;黄酮2号组OD值高于多苷2号组;均具有明显统计学差异(P0.05)。生精细胞S期细胞百分比:黄酮2号组较多苷2号组明显降低(P0.05);而黄酮1号组与多苷1号组比较无统计学意义(P0.05)。生精细胞凋亡方面:黄酮1号组较多苷1号组明显降低(P0.05);而黄酮2号组与多苷2号组比较无统计学意义(P0.05)。结论GTW可使体外培养幼鼠生精细胞增殖能力下降,细胞凋亡增多。菟丝子黄酮可干预生精细胞的分裂周期,同时对生精细胞凋亡有明显的调控作用。     

菟丝子黄酮干预雷公藤多苷所致雄性幼鼠生殖损伤

目的:研究不同剂量菟丝子黄酮干预雷公藤多苷(GTW)所致雄性幼鼠生殖损伤的影响。方法:雄性SD幼鼠80只,分2批喂养,每批40只。每批随机分为5组,空白组[ig羧甲基纤维素钠(CMC-Na)],多苷组(ig GTW,9 mg·kg~(-1)·d~(-1)),黄酮高、中、低剂量组(ig菟丝子+GTW,0.2 g·kg~(-1)+9 mg·kg~(-1),0.1 g·kg~(-1)+9 mg·kg~(-1),0.05 g·kg~(-1)+9 mg·kg~(-1)),持续给药4,12周,分别在停药时麻醉处死留取睾丸组织,称重检测脏器指数,苏木素伊红(HE)染色观察睾丸组织病理变化,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)及免疫印迹法(Western blot)检测雄激素受体(AR)mRNA及蛋白表达。结果:给药4,12周时多苷组大鼠体重、睾丸质量较空白组显著降低(P0.01);黄酮组大鼠体重、睾丸质量较多苷组显著提高(P0.01);黄酮中剂量组大鼠体重、睾丸质量较黄酮高、低剂组明显增高(P0.05)。给药4周时,多苷组大鼠睾丸曲细精管间距变宽、曲细精管扭曲、水肿,严重者曲细精管破裂,间质细胞散乱,精原细胞、精母细胞明显减少,12周时损伤程度更重;黄酮组中剂量上述病理损伤较轻。给药4,12周后,多苷组大鼠睾丸组织AR mRNA及蛋白表达明显下调(P0.05,P0.01),黄酮中剂量可以明显提高大鼠睾丸组织AR mRNA及蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:GTW可以明显降低大鼠体重、睾丸质量;下调睾丸组织AR mRNA及蛋白水平表达;GTW对雄性大鼠睾丸组织有明显的损伤作用,且随剂量的增加和时间延长损伤程度越重;菟丝子黄酮中剂量组保护这种损伤作用更加显著。     

雷公藤多苷对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞α7nAChR及炎症因子的作用

目的 :观察雷公藤多苷对类风湿关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞α7 N型乙酰胆碱受体(α7nAChR)及炎症因子的作用。方法:取行膝关节置换术的RA患者的关节滑膜组织6例,采用酶消化法进行分离培养成成纤维样滑膜细胞(FLS),采用HE染色、免疫组化法鉴定FLS。分为模型组、激动剂组、抑制剂组、西药组、雷公藤多苷组,分别用生理盐水、PNU-282987、α-银环蛇毒素、甲氨蝶呤、雷公藤多苷进行药物干预。结果:①α7nAChR的mRNA表达:与模型组、抑制剂组比较,雷公藤多苷组α7nAChR mRNA表达的差异均有统计学意义(P0.05)。雷公藤多苷组较激动剂组α7nAChR mRNA的表达减少,差异有统计学意义(P0.05),雷公藤组较西药组α7nAChR mRNA的表达增加,差异有统计学意义(P0.05)。②α7nAChR、NF-κBp65、p-STAT3蛋白表达:与模型组、抑制剂组比较,雷公藤多苷组α7nAChR表达均增多,NF-κBp65表达减少;p-STAT3表达均减少,差异均有统计学意义(P0.05);雷公藤多苷组较激动剂组p-STAT3表达减少,差异有统计学意义(P0.05);雷公藤多苷组较西药组α7nAChR表达增多,差异有统计学意义(P0.05)。③炎症因子:雷公藤多苷组IL-17、HMGB1含量较模型组均降低,差异有统计学意义(P0.05);雷公藤多苷IL-17较激动剂组均升高,差异有统计学意义(P0.01),较抑制剂组降低(P0.05);雷公藤多苷组HMGB1水平较抑制剂明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:雷公藤多苷可能通过促进α7nAChR的表达,激活胆碱能抗炎通路,抑制NF-κB信号通路活化及炎症因子的生成,干预RA滑膜炎的发生。     

雷公藤多苷对BALB/c裸小鼠诱发性狼疮的干预机制研究

目的探讨雷公藤多苷对BALB/c裸小鼠诱发性狼疮的干预机制。方法将40只BALB/c雌性裸小鼠随机均分为空白组、模型组、激素组和雷公藤多苷组,每组10只。除空白组外,其余组均单次腹腔注射Pristane(0.5 mL/鼠)建立BALB/c裸小鼠诱发性狼疮模型。成模后,空白组和模型组均给予生理盐水灌胃,激素组给予1%醋酸泼尼松灌胃,雷公藤多苷组给予1%雷公藤多苷灌胃,均1mL/只,1次/d,连续4周。采用Western blot法检测各组小鼠外周血单核细胞糖皮质激素受体(GR)蛋白表达水平,采用ELISA法检测外周血狼疮特异性自身抗体(Sm)蛋白表达水平及免疫球蛋白G(IgG)水平,采用直接免疫荧光方法检测脾脏T细胞亚群分类和B细胞计数,采用SP法和RT-PCR法分别检测腹腔内脂肪肉芽肿结节组织匀浆液中血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)蛋白和mRNA表达水平。结果模型组GR蛋白表达水平明显低于空白组(P0.05),Sm蛋白表达水平和IgG水平均明显高于空白组(P均0.05);激素组和雷公藤多苷组GR蛋白表达水平均明显高于模型组(P均0.05),Sm蛋白表达水平和IgG水平均明显低于模型组(P均0.05)。模型组裸小鼠脾脏组织中CD4~+、CD8~+百分率和B细胞总数均明显高于空白组(P均0.05),激素组和雷公藤多苷组CD4~+、CD8~+百分率和B细胞总数均明显低于模型组(P均0.05)。模型组和激素组VEGF、VEGFR1蛋白及mRNA表达水平均明显高于空白组(P均0.05),雷公藤多苷组VEGF、VEGFR1蛋白及mRNA表达水平均明显低于模型组和激素组(P均0.05)。结论雷公藤多苷通过提高GR蛋白表达水平,抑制T、B细胞功能调控免疫反应及减少血管新生而发挥对红斑狼疮的治疗作用。     

凋膜止崩液宫腔靶向给药对ADUB模型大鼠子宫内膜组织中MMP-1、TIMP-1、ER及亚型表达的影响

目的 探讨凋膜止崩液宫腔靶向给药治疗无排卵功血( ADUB)子宫内膜增生症的可能机制,为临床治疗ADUB提供一种新方法.方法 卵巢去势后利用雌激素负荷法建立ADUB子宫内膜增生症大鼠模型,凋膜止崩液宫腔内给药后处死,留取子宫标本,采用RT-PCR检测法测定各组大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)基因表达水平的变化;采用免疫组化技术检测各组大鼠子宫内膜组织中雌激素受体( estrogenreceptor,ER)、ERα、β亚型的表达变化.结果 ①模型对照组与空白组比较,MMP-1mRNA表达明显升高,TIMP-1 mRNA表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).实验大、小剂量组与模型对照组比较,MMP-1 mRNA表达降低,TIMP-1 mRNA表达升高,差异有统计学意义(P＜0.05),而大小剂量组间比较无显著性差异(P＞0.05).②模型对照组与空白组比较,ER、ERα、β表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).实验大、小剂量组与模型对照组比较,ER、ERα、β表达下调,差异有统计学意义(P＜0.05),而实验大、小剂量组间比较无显著性差异(P＞0.05).结论 凋膜止崩液宫腔靶向给药后ADUB模型大鼠子宫内膜组织中MMP-1mRNA表达下降,TIMP-1 mRNA表达升高,ER、ERα、β表达下调,可能是其治疗子宫内膜增生症的机制.     

不同产源雷公藤多苷对睾丸组织病理及生精细胞凋亡的影响

目的比较不同产源的雷公藤多苷对大鼠睾丸组织病理改变及生精细胞凋亡的影响。方法 SD大鼠,随机分为4组,给予不同产源的雷公藤多苷灌胃,8周后取睾丸组织检测指标。光镜观察睾丸组织的形态学变化,原位末端标记法检测生精细胞凋亡率,免疫组化法检测凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的表达。结果睾丸生精细胞凋亡率和Bax/Bcl-2表达各组间有差异,其中Bax表达各给药组和空白组比较,差异有统计学意义(P0.05),Bcl-2表达比较,各组间差异没有统计学意义(P0.05)。结论促进Bax表达是雷公藤多苷生殖损伤的机理之一;三种不同产源的雷公藤多苷对雄性生殖的损伤作用有差异。     

补肾法对雷公藤多苷片致大鼠生殖功能损伤保护作用的研究

目的:研究补肾法对雷公藤多苷片致大鼠生育功能损伤的保护作用。方法:将24只SPF级4~5周龄SD雄性大鼠随机分为4组:空白组(蒸馏水)、雷公藤多苷组(30mg/kg·d~(-1))、六味地黄丸组(六味地黄丸1g/kg·d~(-1)+多苷30mg/kg·d~(-1))、肾气丸组(肾气丸1g/kg·d~(-1)+多苷30mg/kg·d~(-1))。持续混悬液灌胃4周后,处死大鼠,留取睾丸组织,并称取重量,计算脏器指数;采用HE染色观察组织形态学变化,免疫组化法检测睾丸C-kit蛋白的表达。结果:与空白组比较,雷公藤多苷组大鼠睾丸重量、脏器指数、C-kit的表达均明显下降(P0.01);六味地黄丸组、肾气丸组与雷公藤多苷组相比可以明显提高C-kit蛋白表达(P0.05);空白组大鼠睾丸重量、脏器指数、生精细胞数、C-kit蛋白表达较六味地黄丸组、肾气丸组高,差异不具有统计学意义(P0.05);肾气丸组大鼠睾丸重量、脏器指数、C-kit蛋白表达高于六味地黄丸组,但差异不具有统计学意义(P0.05);HE染色比较:空白组睾丸组织病理形态正常,雷公藤多苷组睾丸组织中细胞排列紊乱,各级生精细胞明显减少,精子量减少,六味地黄丸组与肾气丸组睾丸损伤较雷公藤多苷组轻。结论:温补肾气及填补肾精法对雷公藤多苷所致雄性生殖损伤皆具有修复作用,可能与促进睾丸C-kit蛋白的表达,进而促进精原细胞的增殖分化有关。     

调经助孕方对卵巢储备功能下降模型大鼠围着床期子宫内膜CTmRNA的影响

目的:探讨调经助孕方对卵巢储备功能下降(DOR)模型大鼠围着床期子宫内膜CTmRNA的影响。方法:选取SD大鼠随机分为空白组、西药组、中药组及中西药联合组,空白组大鼠以生理盐水灌胃,其余大鼠复制卵巢储备功能下降动物模型(DOR模型)[1~4],以雷公藤多苷片灌胃。造模成功后西药组大鼠予HRT加促排卵治疗,中药组予调经助孕中药复方颗粒,联合组给予中药及西药同时用药。于大鼠妊娠第4天解剖子宫获取全部内膜组织,采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测各组内膜中CT mRNA的表达量。结果:西药组大鼠围着床期时内膜CT mRNA表达水平较空白组、联合组与中药组低,其间的差异均存在极显著的统计学意义(P0.01),中药组表达水平稍高于空白组及联合组,但其三者间的差异均没有显著性(P0.05)。结论:调经助孕方可改善DOR模型大鼠子宫内膜容受性,增加胚胎着床率。     

临床高剂量雷公藤多苷对幼年大鼠生育能力的影响

目的探讨儿科临床高剂量(1.5mg/㎏)雷公藤多苷(GTW)对幼年大鼠生育能力的影响。方法雄性、雌性SD幼鼠各50只,均随机分为空白组与GTW组,每组25只,GTW按每日9mg/kg给药,用药12周后,雄鼠按1:1与健康成年雌性大鼠合笼,雌鼠按2:1与健康成年雄鼠合笼,分3次合笼,每次合笼时间为2周,合笼后观察雌鼠受孕率、仔鼠离乳存活率。结果雌、雄鼠每次合笼后GTW组受孕率、离乳存活率与空白组比较差异均无统计学意义。结论临床高剂量GTW对幼年大鼠发育为成年大鼠后生育能力和所生仔鼠的生长发育未见明显影响。     

补肾中药对雷公藤多苷所致雄性幼鼠生殖损伤的保护作用及最终生育能力的影响

目的: 探讨雷公藤多苷(glycosides of Tripterygium wilfordii,GTW)对雄性幼鼠生殖损伤和损伤后最终生育能力的影响及补肾中药(菟丝子黄酮、六味地黄丸)的保护作用。方法: ①生殖损伤研究:3~4周龄SD雄性幼鼠48只,随机分为4组:空白组(CMC-Na)、雷公藤多苷组(9 mg·kg^-1·d^-1)单独ig,六味组(六味地黄丸1 g·kg^-1·d^-1＋GTW 9 mg·kg^-1·d^-1),黄酮组(菟丝子黄酮0.1 g·kg^-1·d^-1+GTW 9 mg·kg^-1·d^-1)混合ig,持续12周后,处死取一侧睾丸、附睾立即称质量,计算脏器指数,称重后放入固定液中保存,待观察睾丸组织形态学改变;②生育能力研究:成年大鼠100只,每组25只,分组喂养方法同上,持续12周后,将所有大鼠分笼喂养,每笼1只,按照1:1比例放入成年雌性大鼠1只,分3次合笼,每次合笼时间为15 d,合笼后观察雌鼠受孕率、仔鼠离乳存活率、仔鼠生长发育情况。结果: 雷公藤多苷对睾丸病理组织生精细胞肿胀变性,精原细胞、精母细胞、精子细胞明显减少,菟丝子黄酮、六味地黄丸能明显减轻这种损伤;用药12周后雄性幼鼠体重、睾丸质量、睾丸指数、附睾质量、附睾指数与空白组相比无显著性差异(P＞0.05);每次合笼后受孕率、离乳存活率、幼鼠的生长发育与空白组相比无显著性差异。结论: 雷公藤多苷对雄性幼鼠生殖系统的损伤是可逆的,对睾丸的病理组织损伤是可以恢复的,补肾中药具有保护这种病理组织损伤作用;雷公藤多苷对最终的生育能力没有影响,对幼仔生长发育没有影响。     

肾炎康复片联合雷公藤多苷片治疗肾小球肾炎临床及护理研究

目的：观察肾炎康复片联合雷公藤多苷片对肾小球肾炎患者临床及护理疗效。方法：将 110 例肾小球肾炎患者按随机数字表法分成 2 组,对照组 55 例患者采用雷公藤多苷片治疗,观察组 55 例患者采用肾炎康复片联合雷公藤多苷片治疗,再配合护理干预。对比 2 组患者干预后临床症状评分,干预前后肾功能指标、炎症指标。结果：干预后,观察组神疲乏力、尿频、腰肌酸痛、夜尿增多及浮肿纳呆等临床症状评分较对照组降低,差异有统计学意义 （P＜0.05）。2 组干预前血肌酐、血浆白蛋白、尿素氮及 24 h 尿蛋白比较,差异无统计学意义 （P＞0.05）。干预后,2 组各指标较前改善,观察组血肌酐、尿素氮及 24 h 尿蛋白较对照组降低,而血浆白蛋白则较对照组升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。2 组干预前 CRP、IL-13 及 TNF-α 比较,差异无统计学意义 （P＞0.05）。干预后,2 组炎症指标较前改善,观察组 CRP、IL-13 及 TNF-α 较对照组降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：肾小球肾炎应用肾炎康复片联合雷公藤多苷片治疗再配合护理干预,可有效改善临床症状,减轻其炎症反应,提高肾功能。     

基于高通量转录组测序的菟丝子黄酮改善雷公藤多苷片致大鼠生殖损伤的机制研究

雷公藤多苷片具有较好的抗炎和免疫调节活性,但其生殖损伤显著。课题组前期研究发现,菟丝子黄酮可通过对生精细胞周期、凋亡及相关蛋白表达的调节改善雷公藤多苷片导致的生精细胞损伤,但其基因层面的作用机制尚不清楚。该研究采用Illumina高通量测序平台对菟丝子黄酮和雷公藤多苷片干预后大鼠生精细胞进行转录组测序,筛选出差异表达基因,并进行差异基因的GO富集和KEGG通路分析,探讨菟丝子黄酮改善雷公藤多苷片所致生殖损伤的作用机制。结果发现,与空白组相比,雷公藤多苷片组筛选出794个上调基因和491个下调基因;与雷公藤多苷片组相比,菟丝子黄酮+雷公藤多苷片组筛选出440个上调基因和784个下调基因。其中,与生殖功能密切相关的基因为DNMT3L。GO功能和KEGG信号通路富集分析显示,上述差异基因主要富集在细胞、细胞过程、催化活性、结合、卵巢类固醇合成和甲状腺激素等功能和通路上。其中甲状腺激素信号通路为2个对比组共同富集通路。总之,菟丝子黄酮改善雷公藤多苷片所致雄性生殖损伤的作用机制与DNMT3L基因及甲状腺激素信号通路密切相关,发现的多种差异基因为菟丝子黄酮和雷公藤多苷片的配伍减毒增效机制研究提供了有价值的信息。     

菟丝子-枸杞子改善少弱精子症机制的实验研究

目的 探讨菟丝子-枸杞子(SC-FL)改善雷公藤多苷(GTW)诱导的少弱精子症模型的机制。方法 将40只SD大鼠随机分为空白组(NC组)、模型组(GTW组)、模型+左卡尼汀处理组(GTW+LEV组)和模型+SC-FL处理组(GTW+SC-FL组)。予GTW 40 mg/(kg·d) 4周构建生精障碍模型。成模后分别予LEV和SC-FL治疗,连续4周。通过精液质量、激素水平、蛋白表达、睾丸超微结构等观察SC-FL对大鼠产生的影响。结果 药物干预后,精子浓度及前向运动级+非前向运动级精子比率(PR+NP)上调(P<0.01);激素分泌和PI3K及p-Akt蛋白表达改善;超微组织结构得到一定恢复。结论 SC-FL对能够有效减轻GTW造成的生精功能障碍,其机制可能与相关激素及PI3K/Akt通路有关。     

密骨胶囊对骨Ⅰ型胶原代谢影响的实验研究

目的:运用去卵巢大鼠骨丢失动物模型,观察密骨胶囊对骨内Ⅰ型胶原代谢的影响。方法:3月龄清洁级健康雌性Wistar大鼠110只,体质量(120±10)g,采用卵巢切除动物模型,造模后将大鼠随机分为假切组、模型组和密骨胶囊组,分别于给药4周、8周、12周处死大鼠。运用酶联免疫吸附法检测尿脱氧吡啶啉(DPD)、吡啶啉(PYD);运用蛋白印迹免疫法检测骨内Ⅰ型胶原蛋白的表达,运用实时荧光定量聚合酶链式反应检测骨内COLIα1和COLIα2基因的表达及赖氨酸羟化酶2b(LH2b)基因表达。结果:药物干预4周后各组尿PYD/DPD比值比较未见明显差异;而药物干预8周后,模型组尿PYD/DPD比值减小,密骨胶囊组未见明显变化,且与模型组相比差异有统计学意义(P0.05)。大鼠去卵巢造模成功后,模型组骨内Ⅰ型胶原蛋白的表达处于低水平,与假切组比较差异有统计学意义(P0.05);药物干预4周、8周和12周后,模型组骨内Ⅰ型胶原蛋白表达始终较低,而密骨胶囊组的Ⅰ型胶原蛋白在上述三个时间点的表达均较模型组高,且差异有统计学意义(P0.05)。实时PCR结果提示,模型组骨内COL1α1mRNA和COL1α2mRNA的表达明显降低,与假切组比较差异有统计学意义(P0.05).干预12周后,密骨胶囊组骨内COL1α1mRNA和COL1α2mRNA表达均明显升高,且均与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。去卵巢后大鼠骨内LH2bmRNA表达异常升高,且与假切组比较差异有统计学意义(P0.05);密骨胶囊干预后,大鼠显示出降低因去卵巢引起LH2bmRNA表达异常增高的作用,且与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:密骨胶囊能上调骨内Ⅰ型胶原的表达,并且通过恢复去卵巢后LH2b异常表达改善Ⅰ型胶原代谢,进而改善骨基质结构。     

枸杞多糖与雷公藤多苷含药血清对生精细胞Caspase3表达的影响

目的：观察枸杞多糖与雷公藤多苷含药血清对生精细胞Caspase3表达的影响。方法：将45只SD大鼠按随机分为无药血清组、雷公藤多苷血清组、雷公藤多苷与枸杞多糖混合血清组,每组各15只,灌胃给药。无药血清组予双蒸水0.5 mL·100 g-1,雷公藤多苷血清组予雷公藤多苷0.9 mg·100 g-1,雷公藤多苷与枸杞多糖混合血清组予雷公藤多苷0.9 mg·100 g-1和枸杞多糖16 mg·100 g-1,均每天1次,连续1周制备含药血清;分离生精细胞并原代培养;将细胞分为4组,分别是无药血清组、胎牛血清组、雷公藤多苷血清组、枸杞多糖与雷公藤多苷混合血清组,加各组相应血清并培养;分别在24 h、48 h后用MTT法检测细胞的增值率、用免疫细胞化学法检测Caspase3表达。结果：24 h、48 h细胞生长增值率组间比较均有显著性差异,枸杞多糖与雷公藤多苷混合血清组OD值均显著高于雷公藤多苷血清组（P〈0.05）,枸杞多糖与雷公藤多苷混合血清组生长增值率几乎接近无药血清组,差异无统计学意义（P〉0.05）;24 h时,混合血清组与FBS组OD值相差不大,差异无统计学意义（P〉0.05）,而48 h时,差异有统计学意义（P〈0.05）;各组表达位置均在支持细胞或生精细胞的胞质或胞核,Caspase3的表达强度雷公藤多苷血清组明显高于其他3组（P〈0.05）;混合血清组与无药血清组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,与FBS组比较有统计学意义（P〈0.05）;各组间比较差异较显著（P〈0.01）。结论：枸杞多糖可以下调生精细胞的Caspase3表达,从而促进生殖损伤的恢复。     

凋膜止崩方对大鼠子宫内膜增生症子宫内膜组织中MMP-1及乏TIMP-1mRNA表达的影响

目的:探究凋膜止崩方治疗大鼠子宫内膜增生症的可能机制,为临床治疗无排卵型功血(ADUB)的新方法——中药靶向干预子宫内膜增生症提供理论依据.方法:采用RT-PCR检测法测定凋膜止崩方宫腔靶向干预对ADUB大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1)基因表达水平的变化.结果:模型对照组与空白组比较,MMP-1mRNA表达明显升高,TIMP-1 mRNA表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).实验大、小剂量组与模型对照组比较,MMP- lmRNA表达降低,TIMP-1mRNA表达升高,差异有统计学意义(P＜0.05),而大小剂量组间比较无统计学意义.结论:凋膜止崩方治疗子宫内膜增生症的机制可能与下调MMP- 1mRNA表达有关.     

雷公藤多苷对糖尿病肾病模型肾小球损伤的影响

目的:观察雷公藤多苷(multi-glycoside of Tripterygium wilfordii,GTW)对糖尿病肾病模型肾小球损伤的改善效果.方法:运用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立糖尿病肾病模型,以GTW干预,并设立正常、安慰剂以及贝那普利对照组.比较体重、尿微量白蛋白(urine albumin,UAlb)、血糖(blood glucose,BG)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)、血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)以及肾小球形态(细胞总数、细胞外基质)的变化,并检测肾小球中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),Ⅰ型胶原的表达水平.结果:GTW和贝那普利都可以减少模型鼠UAlb;对于模型鼠肾小球硬化性损伤,如系膜细胞增生,α-SMA和Ⅰ型胶原异常表达等,GTW的作用强于贝那普利,肾小球总细胞数GTW组(54.44±2.41),贝那普利组(67.83±4.41),P＜0.05;α-平滑肌肌动蛋白积分GTW组(1.98±0.52),贝那普利组(2.27±0.46),P＜0.05;Ⅰ型胶原积分GTW组(2.11±0.37),贝那普利组(2.88±0.58),P＜0.05.结论:GTW改善DN肾小球损伤的效果包括减少蛋白尿和改善肾小球硬化.     

姜黄素对血管紧张素Ⅱ刺激大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1及smad7表达的影响

目的：观察姜黄素对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)刺激大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1及smad7表达的影响,探讨姜黄素改善肾间质纤维化的作用机制。方法培养大鼠肾小管上皮细胞,按随机数字表法分为空白组,AngⅡ对照组,姜黄素低、中、高剂量组。除空白组外,于其余各组细胞培养液中加入10-8mol/L的AngⅡ溶液进行干预;姜黄素低、中、高剂量组分别加入2.5、5.0、10.0μmol/L姜黄素溶液进行干预。干预48 h后,采用Western blot检测各组肾小管上皮细胞TGF-β1、smad7蛋白表达,采用RT-PCR检测肾小管上皮细胞TGF-β1、smad7 mRNA表达。结果与空白组比较,AngⅡ对照组肾小管上皮细胞TGF-β1蛋白[(0.23±0.03)比(0.16±0.01)]、TGF-β1 mRNA[(1.89±0.20)比(1.00±0.00)]表达升高(P＜0.05),smad7蛋白[(0.19±0.03)比(0.24±0.02)]、smad7 mRNA[(0.48±0.05)比(1.00±0.00)]表达降低(P＜0.05);与 AngⅡ对照组比较,姜黄素低、中、高剂量组 TGF-β1蛋白[(0.18±0.02)、(0.17±0.02)、(0.16±0.03)比(0.23±0.03)]、TGF-β1 mRNA[(1.58±0.11)、(1.34±0.16)、(0.97±0.19)比(1.89±0.20)]表达下降(P＜0.05),smad7蛋白[(0.28±0.04)、(0.31±0.03)、(0.34±0.04)比(0.19±0.03)]、smad7 mRNA[(0.68±0.07)、(0.80±0.06)、(0.98±0.09)比(0.48±0.05)]表达升高(P＜0.05)。结论姜黄素可对抗AngⅡ介导的肾间质纤维化从而发挥肾脏保护作用,其作用机制可能与降低TGF-β1蛋白及其mRNA表达、上调smad7蛋白及其mRNA表达有关。