精子抗原作为候选免疫避孕疫苗的研究进展

以精子抗原为基础的免疫避孕疫苗开发是一种大有希望的避孕途径。已被鉴定的几种涉及生育的精子表面抗原有：乳酸脱氢酶（ Ｌ Ｄ Ｈ） Ｃ４,兔精子自身抗原（ Ｒ Ｓ Ａｓ）, Ｐ Ｈ ２０, Ｓ Ｐ １０, Ｈ Ｓ Ａ ６３,受精抗原 １（ Ｆ Ａ １）, Ｆ Ａ ２,卵裂信号蛋白 １（ Ｃ Ｓ １）, Ｈ Ｓ Ｇ３ 等。本文综述了这些抗原对开发免疫避孕疫苗的重要意义。     

人精子有效抗原基因表达克隆的研究

我们从人睾丸组织中提取ＲＮＡ，并进一步纯化出ｍＲＮＡ；以此为模板，在反转录酶和ＤＮＡ多聚酶的作用下，合成ｃＤＮＡ；将ｃＤＮＡ与λｇＩＩ载体重组后转染大肠杆菌，构建人睾丸ｃＤＮＡ表达文库。运用遗传显色法和噬菌斑原位杂交法鉴定表达文库后，用兔抗人精子抗体筛选人精子抗原基因表达克隆（ＨＳＧ）。对ＨＳＧ表达抗原（ＨＳＧＡｇ）和特异抗体（ＨＳＧＡｂ）进行纯化和抗生育效应的测定。结果显示：（１）人睾丸ｃＤＮＡ表达文库容量为１．８２Ｘｌ０６ｐｆｕ，遗传显色法示重组率为６７％，噬菌斑原位杂交法示重组率为５１％。（２）经兔抗人精子抗体筛选２Ｘｌ０４ｐｆｕ，得８株人精子抗原基因表达克隆。（３）人血清、兔血清ＨＳＧ２Ａｂ和兔血清ＨＳＧ８Ａｂ对人精子具有补体依赖细胞毒作用。（４）兔血清ＨＳＧ３Ａｂ能阻断人精子在顶体反应时顶体后区ＣｏｎＡ受体的暴露。结果提示，ＨＳＧ２、ＨＳＧ３和ＨＳＧ８克隆的表达抗原是精子有效抗原，能作为精子免疫避孕疫苗的候选成分。     

人精子抗原基因表达克隆HSG_3生物学效应研究

本研究在已构建人睾丸ｃＤＮＡ表达文库，并用抗人精子抗体从中筛选出人精子抗原基因表达克隆（ＨＳＧ）的基础上，对其中ＨＳＧ３克隆进行了生物学效应的测定，结果显示①ＨＳＧ３克隆的溶原蛋白分子量为１４９ＫＤａ，并被兔抗人精子抗体识别。②ＨＳＧ３克隆表达抗原的特异抗体（ＨＳＧ３Ａｂ）对人精子ＳＩＴ和ＧＡＴ无明显影响，但能阻断人精子在顶体反应时，顶体后区ＣｏｎＡ受体的暴露。表明ＨＳＧ３克隆的表达抗原具有受精抗原的特性，能作为精子免疫避孕疫苗的候选成份。     

孕早期母血胎盘滋养层细胞的检测

为从孕妇血中检测和分离胎盘滋养层细胞，对５５例孕８～１４周母血中细胞滋养层Ｈ３１５和合体滋养层ＦＴ１－４１．１抗原阳性细胞分别进行了免疫细胞化学检测、流式细胞分析、荧光激活细胞分离（ＦＡＣＳ）及荧光原位杂交分析（ＦＩＳＨ）。结果在２８例和１４例孕妇外周血中分别检出了Ｈ３１５和ＦＴ１－４１．１抗原阳性细胞；而１３名怀男胎孕妇外周血Ｈ３１５阳性细胞经ＦＡＣＳ分选及Ｙ染色体探针的ＦＩＳＨ分析，其中杂交阳性细胞含量平均为１１．４±４．３％。认为：孕８～１４周母血循环中存在细胞滋养层和合体滋养层细胞，有可能利用这些细胞在孕早期对胎儿染色体非整倍性异常进行产前分子细胞遗传学诊断。     

抗精浆免疫抑制物抗体的抗生育机理研究

为了探讨抗精浆免疫抑制物抗体（ＳＰＩＭ－Ａｂ）的抗生育机理，对１００例不育症患者和３０例正常对照进行了ＳＰＩＭ－Ａｂ的补体结合功能测定（ＣＦＡ）和ＳＰＩＭ－Ａｂ对精子凝集、制动、穿透力和杀精子影响的研究。结果：ＳＰＩＭ－Ａｂ阳性不育患者（ｎ＝２９）ＣＦＡ值为６．４７±１．５５ｋＵ／Ｌ，明显低于ＳＰＩＭ－Ａｂ阴性患者（ｎ＝７１，８．１１±１．６２ｋＵ／Ｌ）和对照组（ｎ＝３０，８．６０±１．８０ｋＵ／Ｌ），Ｐ＜０．０１。经ＳＰＩＭ－Ａｂ阳性血清和ＳＰＩＭ－Ａｂ阴性血清作用后，两组精子凝集，制动和死精子百分率分别为４１．４％、２１．１％，６９．０％、１６．９％，６２．１％、４．２％，精子穿透高度分别为３１．６±１３．０ｍｍ、３８．０±１２．９ｍｍ，有显著性差异（Ｐ＜０．０５～Ｐ＜０．０１）。结论：ＳＰＩＭ－Ａｂ能够以抗原抗体复合物形式激活补体，对精子凝集、制动、杀伤和穿透力的影响是干扰生育的重要原因之一。     

人精子抗原基因表达产物HSG2Ag的纯化和鉴定

本研究运用离子交换层析法分离纯化人精子抗原基因表达克隆ＨＳＧ２的溶原蛋白，并用ＥＬＩＳＡ法鉴定其中的表达产物（ＨＳＧ２Ａｇ）。结果提示，用上述方法分离和纯化的ＨＳＧ２Ａｇ纯化度高，特异性高，适用应用于抗精子抗体检测试剂盒的制备，并为进一步研制精子抗原免疫避孕疫苗提供候选成分。     

抗精浆免疫抑制物抗体的抗生育机理研究

作者进行了抗精浆免疫抑制物抗体（ＳＰＩＭ－Ａｂ）的补体结合功能测定（ＣＦＡ）和ＳＰＩＭ－Ａｂ对精子凝集、制动、穿透力和杀精子影响的研究。结果表明，ＳＰＩＭ－Ａｂ阳性不育病人（ｎ＝２９）ＣＦＡ值为６．４７±１．５５ｋＵ／Ｌ，明显低于ＳＰＩＭ－Ａｂ阴性病人（ｎ＝７ｌ，８．１１±１．６２ｋＵ／Ｌ）和对照组（ｎ＝３０，８．６０±１．８０ｋＵ／Ｌ），Ｐ＜０．０１。经ＳＰＩＭ－Ａｂ阳性血清和ＳＰＩＭ－Ａｂ阴性血清作用后，两组精子凝集、制动和死精子百分率分别为４１．４％和２１．１％、６９．０％和１６．９％、６２．１％和４．２％，精子穿透高度分别为３１．６±１３．０ｍｍ和３８．Ｏ±１２．９ｍｍ，经统计学处理差异显著（Ｐ＜０．０５～ｐ＜０．０１）。提示ＳＰＩＭ－Ａｂ能够以抗原抗体复合物形式激活补体，其对精子凝集、制动、杀伤和穿透力的影响，可能是干扰生育的重要原因之一。     

黄芪对肾病综合征与充血性心力衰竭时血管加压素系统异常的不同改善作用

应用阿霉素所致大鼠肾病综合征（ＮＳ）模型与腹主动脉－下腔静脉造瘘所致大鼠充血性心力衰竭（ＣＨＦ）模型，研究了精氨酸血管加压素（ＡＶＰ）系统在其中的变化以及黄芪的保护作用。斑点杂交显示下丘脑ＡＶＰｍＲＮＡ表达在ＮＳ增加，在ＣＨＦ降低。逆转录－聚合酶链反应表明肾脏皮质ＡＶＰＶ１α受体ｍＲＮＡ表达在ＮＳ增加，在ＣＨＦ降低。黄芪对ＮＳ中ＡＶＰ系统的高表达与ＣＨＦ中ＡＶＰ系统的低表达均有改善作用。上述变化均不是通过渗透性调节机制，心房利钠肽（ＡＮＰ）在其中亦不是起主要作用，对此进行了讨论。     

蛋白激酶A在转化生长因子β-1刺激增生性瘢痕成纤维细胞增殖中的作用

目的：探讨蛋白激酶Ａ在转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）刺激增生性瘢痕和正常人皮肤皮纤维细胞（ＨＳ＿ＦＢ和ＮＳ－ＦＢ）增殖中的信号转导作用。方法：利用＾３２Ｐ掺入底物法测定ＨＳ－ＦＢ和ＮＳ－ＦＢ的ＰＫＡ活性;使用直接计数法和ＭＴＴ法测定ＴＧＦ－β１和ｃＡＭＰ、Ｈ７等刺激两种细胞后增殖能力的变化。结果：ＮＳ－ＦＢ被ＴＧＦ－β１刺激后ＰＫＡ的活性短暂升高后很快恢复（３０ｍｉｎ内,但Ｐ〉０．０５）。ＨＳ－ＦＢ则在３０～６０ｍｉｎ降低（Ｐ〈０．０５）,１ｈ后恢复;ＨＳ－ＦＢ的ＰＫＡ活性比ＮＳ－ＦＢ低（但Ｐ〉０．０５）。ＴＧＦ－β１能强烈刺激两种细胞增殖（３０ｍｉｎ后Ｐ〈０．０５）,对ＨＳ－ＦＢ的刺激作用更强（刺激６０ｍｉｎ后Ｐ〈０．０５）。ｃＡＭＰ可抑制两种细胞增殖（６０ｍｉｎ后Ｐ〈０．０５）,Ｈ７有拟ＴＧＦ－β１的刺     

平滑肌收缩蛋白在进行性肾病变中的变化

为了调查在进行性肾病变中平滑肌收缩蛋白（α－ＳＭＡ）的变化规律，我们采用自然发病的高脂血症白鼠（ＳＨＣ）［１，２，３］一种局灶性节段性肾小球硬化（ＦＳＧＳ）的动物模型，对α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）、肌球蛋白（Ｓｍｅｍｂ）、类肌钙蛋白（ｃａｌｌｐｏｎｉｎ）在整个肾病进展过程中的变化进行了系统观察，现将结果报告如下。 一、材料与方法 １ 动物及方法：雄性ＳＨＣ大白鼠由日本武田药品研究所提供，雄性ＳＤ大白鼠由日本　　 社提供。实验分两个阶段，第１阶段取雄性６周龄ＳＨＣ大鼠和ＳＤ大鼠各６只，每隔 ２周…     

抗人大肠癌免疫毫微球的制备及其抗癌效果观察

目的 制备抗人大肠癌免疫毫微球,并观察其活性及疗效。方法 抗人大肠癌单克隆抗体ＳＣ３Ａｂ通过异型双功能交联剂ＳＰＤＰ与载５－Ｆｕ人血清白蛋白毫球〔ＨＳＡ（５－Ｆｕ－ＮＳ〕偶联,制成抗人大肠癌免疫毫微球ＳＣ３Ａｂ－ＨＳＡ（５－Ｆｕ）－ＮＳ。使用凝集试验及免疫荧光检 春活性,光镜和电镜下观察其与大肠癌细胞ＳＷ１１１６的特异性结合。ＭＴＴ法检测该免疫毫微球的体外杀伤性。于人大肠癌裸鼠模型上分别使用ＳＣ３Ａｂ－ＨＳＡ（５－Ｆｕ）－ＮＳ、ＨＳＡ（５－Ｆｕ）－ＮＳ及５－Ｆｕ,检测三乾的肿瘤抑制率。结果 ＳＣ３Ａｂ－ＨＳＡ（５－Ｆｕ）－ＮＳ具有单抗活性,能与大肠癌细胞特异结合;其体外杀伤ＳＷ１１１６细胞ＩＣ５０值为２４．６ｕｇ／ｍｌ,与ＨＳＡ（５－Ｆｕ）－ＮＳ（３４５．３ｕｇ／ｍｌ）及５－Ｆｕ（３２５．６ｕｇ／ｍｌ）相比,明     

肾移植患者丙型肝炎病毒感染的研究

目的 了解肾移植患者ＨＣＶ感染情况及感染对临床影响。方法 对６７例肾移植患者进行至少１年的随访,用第二代酶联免疫吸附法（第二代ＥＬＩＳＡ法）和巢式多聚酶链反应（Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ法）测定血清中丙型肝炎病毒抗体（抗ＨＣＶ）和丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶＲＮＡ）,免疫组化链霉亲合 酶联法（ＬＳＡＢ法）测定丙型肝炎病毒非结构区３区、５区基因表达的抗原（ＨＣＶ－ＮＳ３、ＮＳ５抗原）。结果 抗ＨＣＶ阳性率５０     

重组人生长激素促进烧伤病人创面愈合机制初探

目的观察严重烧伤病人接受重组人生长激素（ｒｈＧＨ）治疗后血清生长激素（ＧＨ）、胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）、创面ＤＮＡ合成。细胞增殖活性及表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）表达的变化，探讨生长激素促进烧伤创面愈合的机制。方法３３例严重烧伤病人随机分成ｒｈＧＨ组（１８例）和对照组（１５例）。ｒｈＧＨ组每晚１０点接受ｒｈＧＨ皮下注射（０．１ｍｇ· ｋｇ~(－１)），疗程 １４ｄ。ＥＬＩＳＡ检测血清 ＧＨ和 ＩＧＦ－１浓度；流式细胞计检测细胞 ＤＮＡ增殖指数（ＰＩ）和合成期细胞百分数（ＳＰＦ）；免疫组化学检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）。ＥＧＦＲ、细胞角蛋白（ＣＫ）的表达。结果ｒｈＧＨ组血清ＧＨ、ＩＧＦ－１浓度较高，创面ＰＩ、ＳＰＦ明显高于用药前和对照组。免疫组化显示ＰＣＮＡ、ＥＧＦＲ、ＣＫ的表达明显增加。结论ｒｈＧＨ可以提高严重烧伤病人血清ＧＨ、ＩＧＦ－１水平，促进烧伤创面细胞ＤＮＡ合成和上皮细胞增殖，增加 ＥＧＦＲ表达，加速创面上皮化，促进烧伤创面愈合。     

快速ACTH刺激试验及其对女性多毛症的诊断价值

本研究以血皮质醇（Ｆ）、１７α－羟孕酮（１７αＯＨＰ）、脱氢表雄酮（ＤＨＥＡ）及睾酮（Ｔ）为指标，观察快速１一２４促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）刺激试验时正常妇女及女性多毛症病人，包括２１－羟化酶缺陷的先天性肾上腺皮质增生症（ＣＡＨ）、多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）、特发性多毛症（ＩＨ）及迟发型ＣＡＨ（ＬＯＡＨ）等对１一２４ＡＣＴＨ的反应。１０名正常妇女静注１－２４ＡＣＴＨ２５０ｕｇ后，血Ｆ、ＤＨＥＡ、１７α－ＯＨＰ明显升高，血Ｔ对１－２４ＡＣＴＨ刺激无反应。６例ＣＡＨ病人血１７αＯＨＰ及ＤＨＥＡ基础值均较正常人明显增高（Ｐ＜０００１）。２０例ＰＣＯｓ及１１例ＩＨ病人血１７αＯＨＰ基础值较正常女性为高（Ｐ＜０．０５）。１－２４ＡＣＴＨ刺激后，血１７αＯＨＰ净增值（△１７αＯＨＰ）与正常女性无明显差别（Ｐ＞０．０５）。２例ＬＯＡＨ病人血１７αＯＨＰ基础值较高，刺激后有效大幅度升高，呈高反应。根据以上结果，我们认为，以１７αＯＨＰ为指标进行快速１－２４ＡＣＴＨ刺激试验有助于鉴别各种原因的女性多毛     

不育男性精浆四种肿瘤标志物的检测及其与不育关系的探讨

目的：探讨不育男性精浆四种肿瘤标志物与不育之间关系。方法：用ＥＬＩＳＡ法 ４２例不育男性精浆和血清内的前列腺特异抗原（ＰＳＡ）、卵巢癌抗原（ＣＡ１２５）、乳腺癌抗的（ＣＡ１５－３）、胃肠癌抗的（ＣＡ１９－９）的浓度，并与精子密度、精液液化正常者进行比较。结果：所检测的四种肿瘤标志物精浆明显高于血清浓度，但与精子的运动特必均无明显相关；无精子者精浆内ＣＡ１９－９浓度明显主于精子密度正常者，精液液化不     

在正常和多囊性卵巢综合征卵巢编码胰岛素样生长因子（IGF－I，II），IGF及胰岛素受体和IGF结合蛋白1－6的其基因表达及基因产物的定位

在正常和多囊性卵巢综合征卵巢编码胰岛素样生长因子（ＩＧＦ－Ｉ，ＩＩ），ＩＧＦ及胰岛素受体和ＩＧＦ结合蛋白１－６的其基因表达及基因产物的定位ＡＬＢＥＲＴＥＬ－ＲＯＥＩＹ，ＸＩＡＯＨＯＵＣＨＥＮ，ＶＥＲＯＮＩＣＡＪ．ＲＯＢＥＲＴＳＳＨＵＮＩＣＨＩＳＨＩＭ...     

谷胱甘肽与促红细胞生成素治疗慢性肾功能衰竭贫血

慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）患者体内存在低水平还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）,高水平氧化型谷胱甘肽（ＧＳＳＨ）和高浓度自由基,提示ＣＲＦ贫血可能与ＧＳＨ以及相关的酶有关。因此,我们以外源性ＧＳＨ配合促红细胞生成素（ｒ－ＨｕＥＰＯ）治疗ＣＲＦ患者,证实其对ＣＲＦ贫血的疗效。 材料与方法 １．研究对象：ＣＲＦ贫血患者４２例。入选标准：血液透析（ＨＤ）或腹膜透析（ＣＡＰＤ）４周以上,未透析（Ｎｏｎ－Ｄ）者血肌酐＞ ６００μｍｏｌ／Ｌ,无铁缺乏及 １个月内未输血。 ２．方法：将患者随机分为治疗组和对照组。两组患者在年…     

无醋酸盐血液透析临床应用研究

对１８例常规透析患者进行了无醋酸盐透析（ＡＦＨＤ）治疗研究，并以同期１８例醋酸盐透析（ＡＨＤ）患者作对照。结果表明，ＡＦＨＤ对中小分子物质以及β２－Ｍ清除与ＡＨＤ比较无差异（Ｐ〉０．０５）。应用ＫＴ／Ｖ，ＰＣＲ，ＴＡＣｕｒｅａ评价透析效果，证明透析充分。ＡＨＤ后ＴＮＦ及ＩＬ－６基因表达显著高于ＡＦＨＤ，而ＴＧＦ－β组间无差异。ＡＨＤ后ＣＤ４＾＋升高，而ＡＦＨＤ后ＣＤ８＾＋降低。两组患者透析后ＳＯＤ     

检测细胞角蛋白19片段和腺苷脱氨酶对良,恶性胸水鉴别诊断的意义

目的：联合检测血清和胸水中细胞角蛋白１９片段（ＣＹＦＲＡ２１－１）和腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）活性,旨在探讨其对良、恶性胸水的鉴别诊断意义。方法：用免疫放射法（ＩＲＭＡ）检测血清及胸水ＣＹＦＲＡ２１－１并用Ｇirsti改良法检测ＡＤＡ活性。结果：非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）组胸水ＣＹＦＲＡ２１－１较结核组及水细胞肺癌（ＳＣＬＣ）组明显增高（Ｐ＜０．０１）;ＮＳＣＬＣ组胸水ＣＹＦＲＡ２１－１较血清ＣＹＦＲＡ２１     

HLA配型在致敏受者肾移植中的应用研究

目的 探讨人类白细胞抗原（ＨＬＡ）配型在致敏受者肾移植中的临床意义。方法 应用莱姆德细胞板通过补体领事微量细胞毒性试验检测受者的群体反应性抗体（ＰＲＡ）;应用单抗湿板进行供受者ＨＡＬ－Ⅰ类抗原分型;应用微量序列特异性引物（Ｍｉｃｒｏ－ＳＳＰ）进行ＨＡＬ－Ⅱ类基因分型。结果 １７例受者ＰＲＡ阳性率为５．１％￣８０％,平均３７．８９％;按交叉反应组（ＣＲＥＧｓ）配型原则,供受者ＨＬＡＣＲＡＥｓ０．１和