B细胞CD40信号分子经NF-κB途径对pim-1激酶表达的调控

pim 1是一种编码丝氨酸 /苏氨酸蛋白激酶的主要原癌基因。TNFR家族成员CD4 0信号分子可通过NF κB途径使pim 1基因转录增加并引起pim 1蛋白含量的增加 ,该实验证明了这一点。另外 ,研究表明 :BCR和LPS受体复合物也可调节B细胞中pim 1的含量 ,其与B细胞生长增殖有一致性 ,所以 ,pim 1含量多少可能是B细胞生长、增殖的关键决定性因素     

戊四氮及NF-κB圈套结构对神经元样细胞GAP-43表达的影响

目的:观测戊四氮(PTZ)及NF-κB圈套寡核苷酸结构对神经元样PC12细胞生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响。方法:应用免疫印迹检测PTZ干预前后神经元样PC12细胞GAP-43的表达情况,进而运用基因转染技术将NF-κB圈套寡核苷酸转入神经元样PC12细胞中,应用激光共聚焦成像技术(CLSM)检测转染前后NF-κB的活性变化,免疫印迹观察转染前后GAP-43的变化情况。结果:①PTZ干预后神经元样PC12细胞GAP-43的表达显著增高;②CLSM检测显示转染NF-κB圈套寡核苷酸后神经元样PC12细胞中NF-κB活性明显下降,但GAP-43表达水平未降低。结论:PTZ可促进GAP-43的表达,NF-κB对GAP-43的表达不具有调控作用。     

p62参与人恶性黑色素瘤细胞NF-κB活性调控

目的探讨多功能蛋白p62参与调控人恶性黑色素瘤细胞NF-κB活性的机制。方法选取人恶性黑色素瘤标本20例,免疫组化方法检测p50、p65、p62表达。人黑色素瘤A375细胞,转染p62-siRNA特异性表达载体。MTT法检测细胞生存率,western blot检测p62蛋白表达,NF-κB荧光素酶报告基因分析检测NF-κB活性。结果 Spearman等级相关性分析p50与p65、p65与p62表达呈正相关均有统计学意义（P〈0.05）。与对照组相比,A375细胞转染p62-siRNA特异性表达载体24h、48h和72h,p62蛋白表达、细胞生存率和NF-κB活性均明显降低（P〈0.05）。结论人恶性黑色素瘤中p62表达与NF-κB高表达呈正相关,降低p62表达能通过抑制NF-κB活性降低A375细胞存活率,表明p62参与NF-κB活性调控。     

胆红素对新生儿脐血单核细胞NF-κB表达的影响

目的 探讨胆红素对新生儿脐血单核细胞(CBMC)核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 选择10例健康足月新生儿作为研究对象,收集脐血,采用明胶/自体血浆贴壁法(gelatin/plasma coatedflasks)分离CBMC.经含有不同浓度胆红素的牛血清白蛋白溶液孵育1 h,再给予脂多糖(LPS)刺激培养细胞,收集单核细胞.采用间接免疫荧光法,观察CBMC NF-κB的活化水平.结果 LPS可促进CBMC NF-κB的活化,而胆红素对其有抑制作用,6 mg/dl浓度的胆红素单独即可抑制CBMC NF-κB的活化.先经不同浓度(2.5 mg/dl、6 ms/dl、9 mg/dl、12.9 mg/dl、18mg/dl)胆红素孵育,CBMC NF-κB的活化受到不同程度的抑制;再接受LPS刺激,低浓度(2.5 mg/d和6 mg/dl)胆红素孵育后的CBMC NF-κB的活化可以恢复,高浓度(12.9 mg/dl和18 mg/dl)胆红素孵育后的CBMC NF-kB的活化仍然受抑制,当胆红素浓度由12.9 mg/dl上升至18 mg/dl时,CBMC NF-κB的活化受抑制程度的差异,没有统计学意义.随着胆红素浓度的升高,这种抑制作用越明显.结论 胆红素可以通过抑制CBMC NF-κB的活性影响单核细胞的免疫功能.     

miR-155调控前列腺癌细胞NF-κB通路机制研究

目的探讨miR-155调控前列腺癌细胞核因子转录κB(NF-κB)通路的分子机制。方法前列腺癌DU145和PC-3细胞株经Anti-miRTM miR-155抑制剂(anti-miR-155)转染后(实验组),采用蛋白印迹法(Western blot)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测转染后细胞中RelA和RelB蛋白及mRNA表达水平,同时检测NF-κB活性及细胞因子水平。以转染AntimiR~(TM)阴性对照的DU145和PC-3细胞株为对照组。结果与对照组相比,实验组细胞RelA、白细胞介素(IL-6)、白细胞介素(IL-21)表达水平,以及NF-κB活性显著降低(P0.05),RelB表达水平比较差异无统计学意义(P0.05)。结论降低人前列腺癌细胞NF-κB活性和RelA表达水平,可能是miR-155参与调控前列腺癌生物学行为的分子机制之一。     

缬沙坦对糖尿病大鼠视网膜组织NF-κB表达影响

目的探讨缬沙坦对糖尿病大鼠视网膜组织核因子-κB（NF-κB）表达的影响。方法将20只Wistar大鼠随机分为正常对照组、高糖诱导视网膜病变模型组、缬沙坦处理组和缓冲液处理组,每组5只大鼠。正常对照组和模型组不做处理,缬沙坦组给予缬沙坦40 mg/kg灌胃,缓冲液组给予相同体积缓冲液灌胃,用免疫组织化学法检测视网膜组织中NF-κB的表达水平。结果正常对照组大鼠视网膜组织NF-κB无阳性表达,模型组、缬沙坦组、缓冲液组NF-κB表达水平均明显高于正常对照组（F=262.00,q=18.06~34.59,P〈0.01）;缬沙坦组NFκ-B表达水平较模型组明显降低（q=15.29,P〈0.01）。结论缬沙坦能降低大鼠视网膜组织中NF-κB表达水平,对糖尿病大鼠视网膜病变具有保护作用。     

调控NF-κB/IκB炎症信号转导通路对MODS大鼠炎性反应的影响

目的建立大鼠MODS模型,将IκB通过腺病毒载体导入体内,以了解其对MODS大鼠炎性反应的影响。方法50只大鼠随机分为五组:A组(正常对照组),B组(MODS损伤1d组),C组(MODS损伤7d组),D组(腺病毒转载IκB治疗1d组),E组(腺病毒转载IκB治疗7d组)。观察五组大鼠从致伤开始后1、7d的各脏器功能的生化指标,病理组织学及血清TNF-α、IL-6的表达。结果经中心静脉途径导入腺病毒转载的IκB基因,可降低MODS大鼠血肌酐、谷丙转氨酶、总胆红素、肌酸磷酸肌酶水平,改善动脉血氧分压;减轻大鼠病理组织学损伤,降低血液中TNF-α、IL-6含量。结论通过中心静脉途径注入腺病毒转载的IκB基因,直接增加了体内IκB的表达,抑制了NF-κB的活化,阻断其所调控的炎症因子的合成,从而消除炎性细胞在体内的大量聚集最终达到阻断炎症反应的恶性循环,成为治疗MODS新的方向。     

糖基化终末产物对视网膜色素上皮细胞表达NF-κB及VEGF的影响

目的研究糖基化终末产物(AGEs)对人视网膜色素上皮(RPE)细胞表达核因子kappaB(NF-κB)及血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法体外培养人RPE细胞,分别加入浓度为50mg/L、100 mg/L、200 mg/L的AGEs,采用免疫细胞化学法检测VEGF蛋白的表达,免疫荧光染色观察NF-κB活化情况,应用Western Blot方法检测VEGF的蛋白水平。结果免疫细胞化学染色结果表明,对照组仅少量细胞有VEGF弱阳性表达,AGEs各浓度可见细胞浆黄色或棕黄色着染,随作用浓度的增加其表达逐渐增强。免疫荧光染色显示AGEs各浓度组可见NF-κB p65向细胞核内转移,但未见明显的浓度依赖性。Western Blot检测显示VEGF蛋白在50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L AGEs组比空白组及对照组VEGF含量明显升高(P0.05),200 mg.L-1组较其它组VEGF含量明显升高(P0.01)。结论AGEs能促使人RPE细胞VEGF表达上调,并可促进RPE细胞NF-κB的活化。     

NF-κB在上颌窦鳞状细胞癌中的表达

[目的]探讨核因子-κB（NF-κB）在上颌窦鳞状细胞癌中的表达及其与主要临床指标间的关系.[方法]采用免疫组化SP法检测42例上颌窦鳞状细胞癌和20例正常上颌窦黏膜组织中NF-κB的表达情况.[结果]20例正常上颌窦黏膜组织表达全部为阴性,42例上颌窦鳞状细胞癌中28例NF-κB表达上调（阳性率66.7%）.NF-κB的表达与肿瘤分期、淋巴结转移之间无明显相关性,而与组织分化程度显著相关,低分化上颌窦鳞状细胞癌较中、高度分化上颌窦鳞状细胞癌NF-κB的表达明显增高（P〈0.05）;具有NF-κB阳性表达的上颌窦鳞状细胞癌患者3年生存率明显低于阴性患者（P〈0.05）.[结论]NF-κB的表达在上颌窦鳞状细胞癌的发生、发展中起一定作用,并可作为判断上颌窦鳞状细胞癌生物学行为和预后的一个参考指标.     

Satraplatin联合放疗对鼻咽癌裸鼠STAT3及NF-κB表达的影响

目的观察并分析Satraplatin(赛特铂)联合放疗对鼻咽癌裸鼠信号传导及转录激活因子(STAT3)及核因子κB(NF-κB)表达的影响。方法取健康裸鼠120只,按照随机数字表法将其分为对照组和观察组,每组60只。所有裸鼠均鼻咽癌造模成功(经过低分化鼻咽癌CNE-2细胞接种)。对照组裸鼠又随机分为未处理组、处理后1周组(放疗)、处理后3周组(放疗),每组20只。观察组裸鼠又随机分为未处理组、处理后1周组(放疗+Satraplatin)、处理后3周组(放疗+Satraplatin),每组20只。观察两组裸鼠处理前、处理后1周、处理后3周肿瘤凋亡率、瘤体重量、STAT3、NF-κB相对表达量。结果两组裸鼠处理前后肿瘤凋亡率差异显著(P <0. 05),两组裸鼠处理前肿瘤凋亡率比较无显著差异(P>0. 05),随着处理后时间的延长,两组裸鼠肿瘤凋亡率显著升高,但观察组裸鼠处理1周、3周肿瘤凋亡率显著高于对照组(P <0. 05)。两组裸鼠处理前后瘤体重量差异显著(P <0. 05),两组裸鼠处理前瘤体重量比较无显著差异(P>0. 05),处理后,两组裸鼠瘤体重量显著降低(P <0. 05),处理1周、3周瘤体重量显著低于对照组(P<0. 05)。两组裸鼠处理前后STAT3、NF-κB水平差异显著(P <0. 05),两组裸鼠处理前STAT3、NF-κB水平比较无显著差异(P>0. 05),处理后,两组裸鼠STAT3、NF-κB水平显著降低(P <0. 05),处理1周、3周观察组裸鼠STAT3、NF-κB水平明显低于对照组(P <0. 05)。结论 Satraplatin联合放疗能有效降低鼻咽癌裸鼠STAT3及NF-κB表达,增加鼻咽癌裸鼠肿瘤细胞凋亡,减轻瘤体重量。     

sRAGE对动脉粥样硬化家兔主动脉组织ICAM-1及NF-κB表达的影响

目的观察可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)对动脉粥样硬化(AS)家兔主动脉组织细胞间粘附分子-1(ICAM-1)及核转录因子κB(NF-κB)表达的影响,探讨sRAGE抗动脉粥样硬化的可能机制。方法 24只家兔随机分为对照组、动脉粥样硬化模型组、sRAGE组及辛伐他汀组,每组各6只。对照组饲喂普通饲料,其余三组均饲喂高脂饲料10周,第6周起sRAGE组开始腹腔注射sRAGE,辛伐他汀组添加药物饲料。10周后检测家兔血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;采用免疫组织化学法检测主动脉组织ICAM-1和NF-κB表达水平;蛋白质印迹法检测主动脉组织ICAM-1蛋白表达水平。结果与对照组比较,AS模型组血清TC、TG、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低(P0.05);sRAGE组血清总胆固醇、甘油三酯、LDL-C水平均低于AS模型组(P0.05),血清HDL-C水平高于AS模型组(P0.05),而与辛伐他汀组比较差异无统计学意义(P0.05)。与对照组相比,AS模型组主动脉组织中ICAM-1、NF-κB的表达水平明显升高(P0.05);与AS模型组比较,sRAGE组主动脉组织中ICAM-1、NF-κB的表达水平显著下降(P0.05),而与辛伐他汀组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 sRAGE可能通过抑制NF-κB及ICAM-1的表达,从而发挥抗动脉粥样硬化作用。     

NF-κB在类风湿性关节炎中的作用及调控机制

正类风湿性关节炎(RA)是1种慢性、系统性自身免疫性疾病,可累及人体许多组织与器官,对关节的破坏尤为严重。主要病理特征为炎性细胞浸润、滑膜组织增生、血管生成、血管翳形成、软骨的破坏及骨的侵蚀。目前认为炎性反应介质的持续作用是RA病变加重的主要原因。NF-κB是1种影响广泛的转录因子,能促进多种基因转录和表达,与炎性反应、免疫应答     

电针对脑缺血大鼠NF-κB及TNF-α表达的影响

目的:探讨核转录凶子-κB(NF-κB)活性和肿瘤坏死因子(TNF-α)在脑缺血再灌注大鼠海马表达变化的规律和电针干预对其影响.方法:将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针治疗组.采用改良线栓法制备局灶型脑缺血(MCAO)再灌模型,电针"大椎"、双侧"内关"穴.运用免疫组化检测法观察海马组织NF-κB-p65蛋白的表达及核转位:用放射免疫法测定各组大鼠海马组织中TNF-α含量的变化.结果:模型各组大鼠缺血侧海马CA1区NF-κB-p65蛋白表达和海马组织TNF-α含量显著增高(P＜0.01).与模型各组大鼠相比,电针治疗组缺血侧海马组织CA1区NF-κB-p65蛋白表达和TNF-α含量均显著降低.结论:TNF-α的表达上调后可活化NF-KB,参与脑损伤后继发性炎症反应过程,电针能抑制其活化可以减轻脑缺血再灌注时的炎症反应,发挥神经保护作用.     

大鼠颅脑损伤后脑NF-κB的活性和NF-κB mRNA表达的变化及意义

目的 观察颅脑损伤后不同阶段脑NF-κB的活性和NF-κB mRNA表达的变化,探讨其在颅脑损伤后继发性损伤中意义及相关机制.方法 建立颅脑损伤模型,通过光镜观察颅脑损伤后病灶周围脑组织变化,采用免疫组化方法检测脑组织中NF-κB及TNF-α的表达情况,RT-PCR检测NF-κB mRNA表达情况.结果 颅脑损伤后不同阶段NF-κB蛋白表达及mRNA表达明显高于对照组（P＜0.05）,并且NF-κB表达水平与TNF-α呈正相关关系（r=0.519,P＜0.05）,且与组织炎症损伤程度一致.结论 颅脑损伤后各时间点脑NF-κB呈过度激活状态,与TNF-α水平的变化一致,且病理上颅脑损伤炎症损害严重程度相平行,这可能是颅脑损伤后继发性损伤发生的一个机制.     

丹参酮ⅡA通过调控NF-κB信号通路对胶质瘤的作用机制分析

目的 分析丹参酮ⅡA通过调控核转录因子(NF)-κB信号通路对胶质瘤的作用机制。方法 体外培养人神经胶质瘤U87细胞,分别加入0、5、10 mg/kg的丹参酮ⅡA培养72 h(即0 mg/kg组、5 mg/kg组、10 mg/kg组),并在培养24、48、72 h时采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwells小室检测细胞迁移和侵袭情况,并比较各组细胞培养72 h后的细胞各炎症因子水平、Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白及mRNA水平。结果 使用不同浓度丹参酮ⅡA对人神经胶质瘤U87细胞处理72 h,随处理时间的延长各组细胞吸光度值均升高,培养24、48和72 h时,5 mg/kg组、10 mg/kg组的细胞吸光度值均低于0 mg/kg组,且10 mg/kg组低于5 mg/kg组,差异均有统计学意义(P<0.05),呈剂量-反应关系。随处理时间的延长各组细胞凋亡率均升高,培养24、48、72 h时,5 mg/kg组、10 mg/kg组的细胞凋亡率均高于0 mg/kg组,且10 mg/kg组高于5 mg/kg组,差异均有统计学意...     

弥漫大B细胞淋巴瘤患者TLR4、NF-κB蛋白的表达及临床意义

目的探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)蛋白的表达及临床意义。方法选取2015年4月至2017年1月该院诊治的118例DLBCL患者作为观察组,118例体检健康者作为健康对照组,对比2组研究对象TLR4、NF-κB蛋白的表达水平及与不同病理学特征的关系,并分析与DLBCL患者预后的关系。结果观察组的TLR4、NF-κB蛋白阳性表达率明显高于健康对照组(P<0.05);DLBCL患者的临床分期、乳酸脱氢酶(LDH)及国际预后指数(IPI)与TLR4及NF-κB蛋白阳性表达率有关(P<0.05),年龄、性别、结外累及、B症状等指标均与TLR4、NF-κB蛋白阳性表达率无关(P>0.05);TLR4、NF-κB蛋白表达为阳性的患者生存率显著低于阴性表达的患者(P<0.05)。结论TLR4及NF-κB蛋白在DLBCL患者中高表达,且与DLBCL患者的临床分期、LDH及IPI相关,可作为DLBCL发展及预后的评定指标之一。     

NF-κB表达与胃癌的相关性研究

目的探讨NFκB在胃癌发生过程中的作用以及NFκB p65与胃癌临床病理学参数之间的关系. 方法采用免疫组织化学En Vision二步法,检测52例胃癌与癌旁组织,20例胃肠化粘膜及20例正常胃粘膜中的NFκB p65亚单位蛋白的阳性表达情况. 结果在胃癌、胃肠化组织、癌旁组织和正常胃粘膜中,NFκB p65阳性表达率分别为59.71%, 40% ,17.31%,0(P<0.01).在胃癌、胃肠化组织、癌旁组织中的NFκB p65表达与正常胃粘膜相比存在显著性差异(P<0.05).在低级别分化胃癌组中,NFκB p65表达明显高于高级别分化组(P<0.05). 结论 NFκB p65是胃癌相关的一种蛋白,其阳性表达与胃癌细胞的分化程度呈负相关.NFκB p65的检测可作为对胃癌癌前病变、胃癌转移的一项判断指标.     

出血性休克大鼠脑组织NF-κB的表达

目的:通过观察脑组织中核因子-κB(NF-κB)活性的变化,探讨出血性休克与脑缺血损伤的关系.方法:将SD大鼠随机分成5组,对照组(sham组)、休克组、全部自体血复苏组、3倍出血量的复方氯化钠液(林格液)复苏组、2倍出血量的林格液加1/2出血量的自体血复苏组.采用大鼠股动脉放血休克模型,休克1 h.分别于股动脉、股静脉插管后,休克后和不同液体复苏30 min后取脑组织.常规病理形态学检查,观察脑水肿和炎性细胞浸润的程度;免疫组化方法检测脑组织NF-κB的表达.结果:与sham组比较,休克组、各复苏组脑组织中NF-κB表达均明显增加(P＜0.01),并可见不同程度的脑水肿和炎性细胞浸润;但3倍出血量的林格液复苏和2倍出血量的林格液加1/2出血量的自体血复苏后,脑组织中NF-κB的表达增加明显低于全部自体血复苏组(P＜0.05或P＜0.01),脑水肿和炎性细胞浸润亦较轻.结论:出血性休克(出血量达总血量35%,维持60 min)可通过炎性级联反应使脑组织中NF-κB激活,引起脑缺血损伤.3倍出血量的林格液或2倍出血量的林格液加1/2出血量的自体血复苏,使脑组织NF-κB的表达增加明显减少,可能对减轻脑缺血损伤有益.