双氢青蒿素与三氧化二砷对急性髓系白血病细胞凋亡的影响

目的：观察双氢青蒿素（DHA）联合三氧化二砷（ATO）对急性髓系白血病（AML）FLT3-ITD突变MOLM13细胞活力和凋亡的影响及其机制。方法：采用DHA和ATO单药或联合作用于MOLM13细胞,CCK-8法检测细胞活力,细胞平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡及活性氧（ROS）产生,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达水平。结果：与对照组相比,DHA和ATO单药或联合处理均可抑制细胞生长,激活ROS产生,从而诱导细胞凋亡,而DHA和ATO之间具有协同作用。Western blot结果显示,DHA能促进ATO通过降低Mcl-1、FLT3-ITD表达,显著上调c-PARP表达水平,激活细胞凋亡。结论：DHA联合ATO通过抑制Mcl-1表达、诱导FLT3-ITD蛋白降解诱导FLT3-ITD AML细胞株MOLM13发生凋亡。     

PTEN/PI3K/AKT信号通路与儿童急性淋巴细胞白血病原代细胞凋亡耐药的相关性

目的:探讨儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)原代细胞中PTEN/PI3K/AKT信号通路蛋白表达与细胞凋亡和柔红霉素(daunorubicin,DNR)耐药的关系。方法:分离45例初诊未治儿童急性B系ALL(B-ALL)骨髓单个核细胞进行原代细胞培养,用终浓度0.5 mg/L的DNR干预24 h后使用细胞凋亡试剂盒检测凋亡率;于培养开始时和药物干预完成后取标本应用Western blot方法检测PTEN、PI3K、AKT蛋白表达水平,并进行各检测指标间的相关性分析。结果:DNR干预后,PTEN低表达组凋亡率较PTEN高表达组低(P0.05),显示凋亡率与干预前PTEN表达呈强正相关;PI3K-AKT低表达组凋亡率较PI3K-AKT高表达组高(P0.01);DNR干预后PI3K-AKT蛋白表达降低(P0.01)。结论:儿童B-ALL原代细胞中PTEN表达存在差异,DNR干预后PTEN表达变化不显著,提示PTEN表达与DNR耐药相关。DNR可通过下调PI3K-AKT信号通路蛋白表达,诱导儿童B-ALL原代细胞凋亡。     

双氢青蒿素通过激活氧化应激诱导人急性T淋巴细胞白血病细胞凋亡

目的:观察双氢青蒿素(DHA)对人急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)Jurkat细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用CCK-8法检测DHA对Jurkat细胞的增殖抑制作用及N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对DHA抑制的细胞活力的的恢复;流式细胞术测定细胞凋亡、活性氧(ROS)产生; Western blot法检测DNA损伤和凋亡相关基因的蛋白表达。结果:DHA对Jurkat细胞增殖有明显抑制作用,具有剂量依赖性(r=-0.936),NAC能部分恢复DHA对细胞增殖抑制的活力。流式细胞术检测显示,随着药物浓度的增高,细胞凋亡率增高(r=0.946),ROS累积量也增高(r=0.965);Western blot结果显示,DHA处理Jurkat细胞后,DNA损伤相关基因γ-H2AX和凋亡相关基因p53、c-Caspase3、BAX、cPARP的蛋白表达明显增加,BCL-2蛋白表达降低。结论:DHA诱导Jurkat细胞产生ROS,引起DNA损伤,激活P53凋亡通路,促使细胞凋亡。     

信号通路抑制剂XL765对人白血病KG-1细胞株的抑制效应研究

目的:探讨PI3K/mTOR信号通路抑制剂XL765(SAR245409, Voxtalisib)对人急性髓系白血病细胞株KG-1细胞的抑制效应及可能的作用机制。方法:应用CCK-8法检测XL765对KG-1细胞增殖的影响;平板集落形成实验检测XL765对KG-1细胞集落形成的抑制情况;Annexin V/PI双染色流式细胞术检测XL765对细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR检测细胞凋亡相关基因的表达;Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达水平及信号通路分子磷酸化水平的变化。结果:XL765能有效抑制KG-1细胞的增殖,抑制率呈剂量依赖性增加;与DMSO处理组相比,加入XL765后,KG-1细胞的集落形成能力显著下降(P=0.0002);XL765能有效诱导细胞凋亡(P0.001);XL765作用KG-1细胞48 h后,细胞的凋亡相关基因BCL-2表达下调,BAX及Caspase3表达上调,其差异均有统计学意义(P0.05);与DMSO组对比,实验组BAX及Caspase3活化蛋白表达上调,同时BCL-2蛋白表达下调,信号蛋白PI3K、AKT及S6K磷酸化表达下调,其差异均有统计学意义(P值均0.005)。结论:XL765能有效抑制KG-1细胞增殖及集落形成,并诱导细胞凋亡,其机制可能与调节凋亡蛋白BCL2、BAX及Caspase3水平及抑制PI3K、AKT及S6K磷酸化水平相关。     

双氢青蒿素诱导前列腺癌DU145细胞凋亡的实验研究

目的:观察双氢青蒿素(dihydroarteannuin,DHA)对前列腺癌DU145细胞作用并对其抗癌机制进行初步探讨.方法:进行前列腺癌DU145细胞培养,MTT法测定不同浓度和时间DHA对DU145细胞的抑制作用;流式细胞术(FCM)检测DU145细胞凋亡率:Western blot检测不同浓度DHA作用48 h凋亡蛋白caspase-3、survivin的表达情况.结果:MTT法显示与对照组比较,各实验组DHA可显著抑制DUl45细胞增殖(P＜0.01);FCM检测表明DU145细胞凋亡率各实验组均明显高于对照组(P＜0.01),且呈时间剂量依赖性;Westem blot显示与对照组相比,各实验组DHA可显著下调DU145细胞survivin的表达(P＜0.01),而caspase-3的表达增加(P＜0.01).结论:DHA可能通过下调survivin的表达,上调caspase-3而诱导DU145细胞凋亡.     

淫羊藿素对K562细胞增殖及细胞内活性氧的影响

目的:探讨淫羊藿素(icaritin,ICT)对慢性髓系白血病K562细胞增殖及细胞内活性氧(ROS)的影响。方法:MTT法检测ICT对K562细胞增殖的影响;流式细胞术检测K562细胞的凋亡情况;Western blot法检测PARP蛋白表达变化;流式细胞术检测细胞中ROS水平。结果:ICT对K562细胞增殖有明显的抑制作用,且呈一定的浓度依赖性(r=0.837);凋亡细胞比例增多;PARP蛋白表达量增加;细胞内活性氧水平明显增高。结论:淫羊藿素具有抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡的作用,其机制可能与升高细胞内活性氧有关。     

双氢青蒿素通过激活氧化应激诱导急性髓系白血病细胞自噬性死亡

目的：探讨双氢青蒿素（DHA）对急性髓系白血病（AML）的潜在治疗价值及其作用机制。方法：通过CCK-8检测细胞活力,明确DHA对AML细胞活力的影响;通过荧光探针染色及流式细胞术检测DHA对AML细胞内氧化还原状态的影响;通过免疫印迹技术、腺病毒转染和激光共聚焦分析DHA对细胞自噬水平的影响,并利用不同小分子抑制剂进行实验,进一步探究DHA诱导AML细胞死亡的可能机制。结果：DHA可抑制AML细胞株HL-60和Kasumi-1的活力,同时可显著提高细胞内氧化应激水平,经10μmol/L DHA处理后,HL-60细胞内活性氧含量可升至原来的2.6倍,Kasumi-1细胞内活性氧含量可升至原来的2.0倍。此外,DHA还可上调AML细胞内自噬相关蛋白的表达,增加胞内自噬流,激活自噬。进一步检测发现,自噬抑制剂可降低DHA诱导的细胞死亡,而且通过清除胞内自由基抑制氧化应激水平可抑制自噬的发生进而恢复细胞活力。结论：DHA可通过诱导氧化应激激活AML细胞发生自噬性死亡。     

酪氨酸激酶抑制剂通过下调Mcl-1和Bcl-xl诱导K562细胞凋亡

本研究观察酪氨酸激酶抑制剂STl571对CML细胞增殖和凋亡以及抗凋亡蛋白Mcl—l表达的影响，探讨Mcl一1在BCR／ABL抗凋亡信号传导中的作用。应用STl571处理慢性髓系白血病K562细胞株，采用台盼蓝拒染法和MTT法检测STl571对K562细胞增殖的影响，用AnnexinV和碘化丙锭双染法及流式细胞术检测K562细胞凋亡情况，蛋白印迹法检测STl571对细胞内蛋白酪氨酸磷酸化水平和凋亡相关蛋白表达的影响。结果发现：STl57l可有效地抑制K562细胞增殖并诱导K562细胞凋亡，这种作用呈剂量和时间依赖性，同时降低细胞内蛋白酪氨酸磷酸化水平和下调抗凋亡蛋白Mcl—l和Bcl-xl的表达。STl571抑制K562细胞增殖和诱导凋亡与抗凋亡蛋白Mcl—l和Bcl—xl的表达下调一致。结论：STl571通过阻断CML细胞内信号传导途径，下调Mcl—l和Bcl—xl的表达，抑制K562细胞增殖并诱导凋亡，表明Mcl—l和Bcl—xl一起在CML抗凋亡过程中发挥重要作用.     

中华眼镜蛇毒对K562/ADM和难治性急性髓性白血病细胞作用研究

目的:探讨中华眼镜蛇毒(NNAV)对人红白血病/阿霉素细胞(K562/ADM细胞)及原代难治性急性髓性白血病细胞的作用。方法:以K562/ADM细胞及10例急性髓性白血病(AML)患者的原代初发难治性急性髓性白血病细胞为研究对象进行实验,应用不同剂量的NNAV作用于细胞后,采用噻唑蓝实验法(MTT)测定细胞增殖情况,免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白Bcl2表达,流式细胞仪测定凋亡率,蛋白质印迹法检测Caspase-3表达。流式细胞仪检测NNAV对细胞周期的影响,检测原代初发难治性急性髓性白血病细胞细胞周期蛋白D(Cyclin-D)的表达情况;观察以上指标在Cyclin-D阳性表达组和阴性表达组有无差异。结果:经过不同浓度的NNAV处理后,无论是K562/ADM细胞还是初发难治性急性髓性白血病细胞,Bcl-2表达下调,Caspase-3表达上调;细胞增殖抑制明显,并具有时间依赖性及剂量依赖性。流式细胞仪检测证实0.8 mg/L和1.0 mg/L的NNAV均能够使原代初发难治性细胞阻滞于细胞周期的G0/G1期,而处于G2/M期的细胞含量减少。10例原发难治性急性髓性白血病细胞中Cyclin-D表达阳性7例,Cyclin-D表达阴性3例,但以上指标在Cyclin-D阳性表达组和阴性表达组无显著差异。结论:NNAV在体外可明显抑制K562/ADM细胞和原代初发难治性AML细胞增殖;调节细胞周期停滞于G0/G1期,减少G2/M期的细胞含量,提示NNAV有可能通过干预Bcl-2、Caspase-3表达而诱导细胞凋亡,细胞周期进程可能是中华眼镜蛇毒组分对原发难治性AML细胞的发挥增殖抑制作用的机制。     

人参皂苷Rh2对人急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞诱导凋亡的作用及其机制

目的:探讨人参皂苷Rh2诱导人急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)Jurkat细胞的凋亡及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度的Rh2(0、10、20、40和80μg/ml)对Jurkat细胞增殖活性的影响,并计算48 h下Rh2对Jurkat细胞的半抑制浓度(IC_(50));采用形态学方法及Hoechst 33258荧光染色观察IC_(50)剂量下Rh2共培养48 h的Jurkat细胞凋亡状况。后将细胞实验分为4组:对照组、Rh2(IC_(50))组、PI3K抑制剂LY294002(50μmol/l)组以及Rh2(IC_(50))+LY294002(50μmol/l)组。同步培养48 h后,采用PI单染和Annexin V-FITC/PI双染分别检测Jurkat细胞凋亡及细胞周期变化;采用Western blot检测各组Jurkat细胞凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、Cleaved-Caspase 3,细胞周期相关蛋白Cyclin D1以及PI3K/AKT信号通路相关蛋白AKT、p-AKT的表达水平。结果:Rh2(10-80μg/ml)呈剂量-时间依赖性抑制Jurkat细胞增殖(r_(48h)=0.999,P 0.01;r_(80μg/ml)=0.991,P 0.05),并伴有明显的细胞凋亡形态学改变。流式细胞术检测结果显示,与对照组比较,Rh2组和LY294002组细胞凋亡率显著增加,且细胞多数被阻滞在G0/G1期;而与Rh2组和LY294002组比较,Rh2+LY294002组细胞凋亡及细胞阻滞现象更为显著。Western blot结果显示,与对照组比较,Rh2能显著促进BAX、Cleaved-Caspase 3蛋白表达,抑制BCL-2、Cyclin D1及p-AKT的表达,且LY294002对这一效应具有显著的促进作用。结论:Rh2能够呈时间-剂量依赖性地诱导Jurkat细胞的凋亡;且能对Jurkat细胞产生明显的G0/G1期阻滞;这可能与Rh2抑制PI3K/AKT通路进而介导的一系列凋亡信号级联反应密切相关。     

双氢青蒿素抗人结肠癌HCT116细胞作用的研究

目的:研究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响,观察人结肠癌HCT116细胞中肿瘤转移相关因子尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)表达的变化。方法:MTT法观察不同浓度和时间DHA对HCT116细胞增殖抑制作用;AO/EB双染法及流式细胞仪AnnexinⅤ-FITC法检测HCT116细胞凋亡率;免疫组化及图像分析法观察uPA蛋白的表达的动态变化。结果:MTT显示与对照组相比,各实验组DHA可以显著抑制HCT116细胞增殖(P<0.05);AO/EB双染法可观察到各实验组典型的凋亡细胞,流式细胞仪AnnexinⅤ-FITC法显示DHA可以诱导HCT116细胞凋亡具有浓度依赖性;免疫组化及图像分析显示uPA蛋白阳性单位明显下降。结论:DHA能够有效抑制HCT116细胞增殖并诱导其凋亡,DHA能够下调HCT116细胞中uPA蛋白的表达。     

β-咔啉类生物碱对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的观察β-咔啉类生物碱对体外培养的人胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法不同浓度β-咔啉类生物碱处理人胃癌SGC-7901细胞48 h后,检测细胞增殖、凋亡情况,并以荧光定量聚合酶链反应(RTPCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别测定细胞中抑癌基因PTEN、蛋白激酶B(AKT)基因mRNA及其蛋白表达。结果不同浓度的β-咔啉类生物碱均能抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,其中40μg/m L浓度的抑制效果较其他浓度及5-Fu干预组更显著(P0.01),并可诱导细胞凋亡。不同浓度β-咔啉类生物均可引起PTEN mRNA和蛋白表达增加,AKT mRNA和蛋白表达减少,其中40μg/m L浓度的调节效果较其他浓度及5-Fu干预组更显著(P0.01)。结论β-咔啉类生物碱可抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,诱导凋亡,其作用机制可能是通过上调PTEN及下调AKT蛋白的表达实现。     

淫羊藿素对KG-1a细胞增殖和凋亡的影响及其相关作用机制

目的:分析淫羊藿素抑制Wnt/β-catenin信号通路干预急性髓系白血病KG-1a细胞增殖的可能机制,为开发治疗急性髓系白血病药物提供实验依据。方法:50只c57BL/6小鼠编号后随机分为空白对照、模型对照和淫羊藿素高、中、低剂量共5组(n=10只),除空白对照组外均采用腹腔注射人急性髓系白血病细胞KG-1a的方法建模。淫羊藿素高、中、低剂量组分别按80、40和20 mg/kg剂量肌肉注射淫羊藿素治疗3周,模型对照组和空白对照组肌肉注射生理盐水。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测S期激酶相关蛋白2(SKP2)、β-连环蛋白(β-catenin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及多聚腺素二磷酸核糖多聚酶[poly(ADP-ribose)polymerase;PARP]蛋白表达;采用分光光度法检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和天冬酶-3酶原(Procaspase-3)活性;流式细胞术分别检测经淫羊藿素处理后的细胞周期时相分布和细胞凋亡率情况。结果:淫羊藿素可增强Caspase-3活性,降低Procaspase-3的水平,还可上调E-cadherin蛋白的表达,下调SKP2和β-catenin蛋白的表达,呈剂量依赖性增加PARP蛋白表达,经淫羊藿素处理后细胞凋亡明显,KG-1a细胞被阻滞于G_0/G_1期,KG-1a细胞生长明显受到抑制。结论:淫羊藿素能够剂量依赖性地裂解PARP,以诱导人急性髓系白血病细胞株KG-1a细胞凋亡,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路及其下游相关基因表达有关。     

抗CD44单克隆抗体A3D8对HL-60细胞AP-1表达的影响

目的:探讨抗CD44单克隆抗体A3D8对急性髓系白血病细胞转录因子AP-1表达的影响。方法:用A3D8干预人白血病细胞株HL-60,采用MTT法和流式细胞术检测细胞增殖、细胞周期变化;RT-PCR及Western blot检测A3D8对HL-60细胞中c-JUN及c-FOS在mRNA及蛋白水平的表达变化。结果:A3D8对HL-60细胞生长有抑制作用;A3D8可诱导细胞周期G_0/G_1期阻滞;A3D8可降低HL-60细胞c-JUN mRNA及蛋白表达水平,而对cFOS mRNA及蛋白表达无影响。结论:A3D8通过下调c-JUN转录及蛋白表达影响急性白血病细胞转录因子AP-1活性,抑制白血病细胞生长。     

伊利司莫-铜诱导急性髓系白血病细胞发生铜死亡

目的:研究伊利司莫-铜(ES-Cu)对人急性髓系白血病(AML)细胞的增殖抑制和铜死亡的诱导作用。方法:采用CCK-8试剂盒检测ES-Cu诱导的AML细胞存活率以及AML细胞经铜螯合剂TTM预处理后ES-Cu诱导的细胞存活率;Calcein/PI检测试剂盒检测ES-Cu诱导引起的细胞活性与细胞毒性变化;采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧水平;GSH和GSSG检测试剂盒检测细胞内谷胱甘肽(GSH)含量;Western blot检测细胞铜死亡相关蛋白ATP7B、FDX1、DLAT、DPYD的表达。结果:ES-Cu对人急性髓系白血病细胞系Kasumi-1及HL-60的毒性呈现出明显的剂量依赖性(r_Kasumi-1=-0.99,r_HL-60=-0.98)。随着ES-Cu浓度升高,细胞内活性氧水平随之升高(P<0.01-0.001)。铜螯合剂TTM可以显著逆转ES-Cu对细胞增殖的抑制作用以及对活性氧的促进作用。随着ES-Cu浓度升高,Kasumi-1细胞内GSH含量逐渐降低(r=-0.98),ATP7B、FDX1、DLAT和DPYD蛋白...     

氯法拉滨对NB4细胞的增殖抑制作用及对Bcl-2表达的影响

本研究观察氯法拉滨对人急性髓系白血病NB4细胞的增殖抑制作用并探讨其可能的作用机制。用MTT法观察氯法拉滨0.01-0.1μmol/L作用于NB4细胞48 h的增殖抑制作用;氯法拉滨0.01-0.1μmol/L作用于NB4细胞24 h后,用流式细胞术分析其细胞的凋亡水平,Western blot检测细胞内Bcl-2的蛋白表达。结果表明,氯法拉滨对NB4细胞具有浓度依赖性增殖抑制作用。氯法拉滨作用24 h后,NB4细胞凋亡率明显增加,Bcl-2蛋白表达下调。结论:氯法拉滨能抑制NB4细胞增殖,其作用机制可能与下调Bcl-2的蛋白表达,诱导NB4细胞凋亡有关。     

LncRNA-HOTAIRM1下调对Jurkat细胞增殖、凋亡及KIT/AKT通路的影响

目的:观察长链非编码-HOX反义基因间RNA髓样1(LncRNA-HOTAIRM1)下调对人白血病T淋巴细胞Jurkat增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机理。方法:体外培养Jurkat细胞,随机分为对照组、HOTAIRM1siRNA-NC组、HOTAIRM1 siRNA组;利用实时荧光定量PCR法检测转染后各组Jurkat细胞LncRNA-HOTAIRM1mRNA、KIT受体酪氨酸激酶(KIT) mRNA、丝氨酸-苏氨酸激酶(AKT) mRNA的表达情况;采用CCK-8法检测各组Jurkat细胞的增殖情况;利用Annexin V-FITC/PI双染法检测各组Jurkat细胞的凋亡情况;采用蛋白印迹分析法检测KIT、AKT、p-KIT、p-AKT、B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)及半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)蛋白表达的情况。结果:与对照组和HOTAIRM1 siRNA-NC组相比,HOTAIRM1 siRNA组Jurkat细胞LncRNA-HOTAIRM1 mRNA表达水平、细胞存活率、KIT mRNA、AKT mRNA、p-KIT、p-AKT及BCL-2蛋白表达水平均显著降低(P0.05),Cleared Caspase-3蛋白表达水平、Jurkat细胞凋亡率显著升高(P0.05)。结论:LncRNA-HOTAIRM1可能通过KIT/AKT信号通路,抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡。     

齐墩果酸诱导Jurkat细胞凋亡及对PTEN表达的影响

本研究旨在探讨齐墩果酸诱导人T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡及对PTEN表达的影响。应用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,用Hoechst33258染色观察凋亡细胞形态,Annexin V/PI双染色后流式细胞仪检测细胞凋亡,并应用实时定量RT-PCR和Western blot方法分别检测PTEN基因及其蛋白表达水平。结果表明:齐墩果酸以时间和剂量依赖方式抑制Jurkat细胞增殖,12、24和48小时的半数抑制浓度(IC50)分别约为85.35、53.66和33.18μmol/L。流式细胞术检测显示,齐墩果酸以0、40、80和160μmol/L浓度作用细胞24小时凋亡率分别为6.72%、19.8%、28.72%和30.12%(p<0.05)。80和160μmol/L齐墩果酸分别处理Jurkat细胞24小时后PTEN-mRNA及蛋白表达上调。结论:PTEN基因和蛋白表达上调可能参与齐墩果酸对Jurkat细胞的抑制增殖和诱导凋亡作用。     

三氧化二砷诱导卵巢癌细胞系SKOV3细胞凋亡的作用和机制

目的观察三氧化二砷(ATO)诱导人卵巢癌细胞系SKOV3细胞的凋亡作用和凋亡通路分子caspase 3、PARP,凋亡相关蛋白p-AKT、AKT蛋白表达的变化。方法分别用不同剂量的三氧化二砷作用人卵巢癌细胞系SKOV3细胞,应用MTT比色法检测培养48 h的细胞存活率,应用流式细胞仪测定培养48 h细胞凋亡的变化,免疫印迹法检测凋亡蛋白caspase 3、PARP和凋亡相关蛋白p-AKT、AKT的表达情况。结果 MTT示三氧化二砷能明显抑制SKOV3细胞增殖;流式细胞术显示三氧化二砷诱导SKOV3细胞凋亡,且具有明显的剂量依赖性;Western blotting检测发现药物能显著下调caspase 3、PARP、p-AKT的表达水平。结论三氧化二砷能显著抑制人卵巢癌细胞系SKOV3细胞增殖,诱导其凋亡,激活凋亡通路分子caspase 3、PARP,下调p-AKT蛋白表达水平,这可能是三氧化二砷诱导人卵巢癌细胞SKOV3细胞凋亡的作用机制。     

大剂量维生素C对急性髓系白血病细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨大剂量维生素C对急性髓系白血病细胞株HL-60、U937及原代急性髓系白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用免疫磁珠的方法分选CD34~+细胞,体外培养CD34~+细胞及急性髓系白血病细胞株HL-60、U937。给予不同浓度的维生素C处理各组细胞,采用MTT法检测细胞存活率,Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率,并通过Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-9及cleaved PARP的表达情况。结果:大剂量维生素C可以抑制HL-60及U937细胞的增殖,且呈浓度依赖性(r=-0.9664;r=-0.9796)。采用不同浓度维生素C(8及20 mmol/L)分别处理HL-60、U937细胞24 h的结果显示,随着维生素C浓度的增加,细胞凋亡率明显增加(r=0.9905;r=0.9971),且凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-9及cleaved PARP的表达也明显增加。无论有无TET2基因的突变,大剂量维生素C均可抑制原代CD34~+急性髓系白血病细胞的增殖(r=-0.9719;r=-0.9699)、促进其凋亡(r=0.9998;r=0.9901),且呈浓度依赖性。但是却对正常的CD34~+细胞的增殖(r=-0.2032)及凋亡(r=0.1912)无影响。结论:大剂量维生素C能够抑制急性髓系白血病细胞的增殖、促进其凋亡,并且具有选择性杀伤原代CD34~+急性髓系白血病细胞的作用。