分枝杆菌液体培养和微孔板法分枝杆菌药敏实验在结核感染中的应用

目的：探究分枝杆菌液体培养和微孔板法分枝杆菌药敏实验在结核感染中的应用价值。方法：选取医院2021年6～8月肺结核门诊疑似和确诊后复发结核感染患者痰标本共60例,所有标本分别予以分枝杆菌液体培养与传统固体罗氏培养法,并采用微孔板法进行分枝杆菌药敏实验,对比分枝杆菌培养报阳时间、阳性符合率,并分析微孔板法药敏结果检测效能。结果：分枝杆菌液体培养法对疑似新发病例、复诊患者报阳天数均短于传统固体罗氏培养法;疑似新发患者及复诊患者分枝杆菌液体培养阳性率高于传统固体罗氏培养法,差异有统计学意义（P<0.05）;微孔板法药敏结果显示,利福平耐药16个,异烟肼耐药14个,阿米卡星耐药1个,左氧沙星耐药2个。微孔板法药敏法对阿米卡星耐药检测特异性高于传统比例法药敏法,差异显著（P<0.05）。结论：分枝杆菌液体培养能够缩短检测周期,提高阳性检出率,微孔板法分枝杆菌药敏试验灵敏度、特异性高。微孔板法分枝杆菌药物试验可以提供多种药物敏感试验,且能检测到最小抑菌浓度,可以为临床监测药物疗效以及精准治疗提供客观依据,助力结核病耐药防控。     

刘金花 罗一钧 彭海英 刘平庆

目的：探究分枝杆菌液体培养和微孔板法分枝杆菌药敏实验在结核感染中的应用价值。方法：选取我院 2021年6月至2021年8月肺结核门诊疑似和确诊后复发结核感染患者痰标本共60例,所有标本分别予以分枝杆菌液体培养与固体罗氏培养法,并采用微孔板法进行分枝杆菌药敏实验,对比分枝杆菌培养报阳时间、阳性符合率,并分析微孔板法药敏结果检测效能。结果：分枝杆菌液体培养法对疑似新发病例、复诊患者报阳天数均短于固体罗氏培养法;疑似新发患者及复诊患者分枝杆菌液体培养阳性率高于固体罗氏培养法,差异有统计学意义(P<0.05);微孔板法药敏结果显示,利福平耐药16个,异烟肼耐药14个,阿米卡星耐药1个,左氧沙星耐药2个。微孔板法药敏法对阿米卡星耐药检测特异性高于传统比例法,差异显著(P<0.05)。结论：分枝杆菌液体培养能够缩短检测周期,提高阳性检出率,微孔板法分枝杆菌药敏试验灵敏度、特异性高。微孔板法分枝杆菌药物试验可以提供多种药物敏感试验,且能检测到最小抑菌浓度,可以为临床监测药物疗效以及精准治疗提供客观依据,助力结核病耐药防控。     

微量MIC法和罗氏比例法对结核分枝杆菌药敏检测比对及一致性观察分析

<正>结核病是由于感染结合分枝杆菌而引发的慢性传染病,治疗方法为都药物联合短程化疗,近年来,抗结核药物耐药性结核分支杆菌出现,且钢钒传播,使得控制结核病存在一定难度。当前,全球结核疫情控制的一个最大障碍为结耐药结核病。有关研究数据表明[1],广泛耐药结核病具有传染期常、痰菌转阴慢等特点,其诊断与治疗过程较为复杂,所需治疗费用较高,且具有较多不良反应[2]。本文将以200株结核分枝杆菌菌株为对象,探究微量液体培养基最低抑菌浓度(微量MIC法)和罗氏比例法对结核     

结核分枝杆菌对氟喹诺酮类药物敏感性的实验研究

目的 获得四种氟喹诺酮（FQ）对结核分枝杆菌的最小抑菌浓度（MIC）,评价PCR探针熔解曲线法（PMAA）检测结核分枝杆菌对氟喹诺酮药物耐药性的临床价值.方法 124例对氧氟沙星敏感的菌株和78例对氧氟沙星耐药的菌株,在96孔细菌培养板中,用Middlebrook 7H9液体培养基将药物进行连续倍比稀释后,加入5×10^-2 mg/ml菌液100 μl,用刃天青显色法测定MIC;并用PCR探针熔解曲线法（PMAA）检测结核分枝杆菌对氟喹诺酮（FQ）药物的耐药突变.结果 氧氟沙星折点浓度为2 μg/ml,加替沙星和莫西沙星对结核分枝杆菌的MIC90比氧氟沙星和左氧氟沙星要低4-8倍,具有比氧氟沙星和左氧氟沙星更好的抗结核分枝杆菌的活性.以罗氏比例法为金标准,PCR-PMAA检测敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和符合率分别为96.2％,97.6％,96.2％,97.6％和97.0％.结论 利用微量MIC方法较常规药敏方法可以获得更多的耐药信息.用PCR-PMAA法能高效快速的检出耐药突变菌株.两种方法结合应用,对临床肺结核疾病早期用药具有更好的指导价值.     

比例法与绝对浓度法检测结核分枝杆菌药敏试验的比较

结核分枝杆菌的药物敏感性试验对于结核病的治疗起着举足轻重的作用.WHO把比例法作为结核分枝杆菌药物敏感性检测的"金标准"[1],而多年来我国各级实验室普遍沿用绝对浓度法进行常规的结核分枝杆菌药敏试验.这两种检测方法的一致性始终是争论的焦点.为了便于我国结核菌药敏信息与国外进行比较,为临床提供更为准确的药敏信息,本研究对比例法与绝对浓度法检测结核分枝杆菌的药物敏感性的比较作了探讨.     

微孔板法检测结核分枝杆菌对利福平的药物敏感性分析

目的分析微孔板法检测结核分枝杆菌(MTB)对利福平(RIF)的药物敏感性。方法选取2017年6月～2019年6月本院收治的40例肺结核患者,分别对其痰标本中的MTB进行微孔板法检测与罗氏比例法检测,分离培养后行药敏试验。并且以罗氏比例法检测为"金标准",分析微孔板法检测在MTB对RIF的药物敏感性分析中的检测价值,并统计该检测法中RIF的最低抑茵浓度(MIC),判断其界值。结果微孔板法检测MTB临床分离出来的菌株最佳耐药阈值在0.5ug/ml;微孔板检测法MTB对RIF的药物敏感性的准确性为97.50%(39/40)、灵敏度为97.05%(33/34)、特异度为100%(6/6)。结论微孔板检测法检测的准确性、灵敏度、特异度均高,检测价值较好。     

分枝杆菌快速培养鉴定及耐药性检测的结果分析

目的评价变色液体培养基快速一步法检测试剂对分枝杆菌培养、鉴定和药敏测定的效果。方法采用快速变色液体培养基和传统酸性罗氏培养法对198例痰标本进行结核分枝杆菌检测。结果快速变色液体培养法和酸性罗氏培养法,整个试验完成平均检出时间分别为28、62 d。与传统酸性罗氏培养基相比,快速一步法可缩短30~60 d完成;两法阳性检出率(37.9%和37.4%)与初治耐药率结果(35.6%和36.9%)之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论变色液体培养基快速一步法是一种快速、简便、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,具有重要的应用价值。     

变色液体培养基系统快速鉴定结核分枝杆菌和耐药性测定

由于固体培养基鉴定结核分枝杆菌(结核菌)及药敏试验均需28 d,其制作过程需加热,且培养基中蛋白质对药物有吸附作用,故仅用于常规抗结核药敏试验,不适合用于分枝杆菌最低抑菌浓度(MIC)测定.多耐药结核菌和非结核菌对常用抗结核药物耐药,因此急需一种快速测定分枝杆菌药敏的方法,筛选新的药物.尽管Bactec系统可用于分枝杆菌药敏试验和MIC测定[1],但试剂和仪器昂贵.因此,我们采用快速变色液体培养基系统鉴定结核与非结核分枝杆菌,并测定了结核菌常规药物的敏感性和非结核分枝杆菌对9种药物的MIC,结果如下. 一、材料和方法 1.标本来源:128株结核菌,34株非结核分枝杆菌(其中15株龟分枝杆菌脓肿亚种、4株龟分枝杆菌龟亚种、14株偶发分枝杆菌和1株胞内分枝杆菌).上述菌株为深圳地区和广州地区分离株. 2.结核菌快速鉴定及药敏试剂、分枝杆菌MIC测定试剂和菌株鉴定试剂:对硝基苯甲酸(PNB)培养基、5%氯化钠耐受试验、芳香硫酸酯酶(3、14     

结核分枝杆菌检测阳性报告时间探讨——罗氏培养、7H9培养及MPB64胶体金法

[目的]通过改良酸性罗氏培养、7H9液体培养及MPB64的免疫胶体金法对分枝杆菌的检测阳性报告时间进行比较,以了解现有结核分泌蛋白抗原MPB64检测试剂在肺结核诊断尤其是早期诊断中的应用价值。[方法]收集90例确诊为结核病患者的临床标本,分别用改良罗氏培养基培养、7H9液体培养及MPB64的免疫胶体金法检测结核分枝杆菌,并对检测阳性报告时问进行比较。[结果]早期MPB64抗原胶体金检测试剂盒的阳性率明显高于7H9液体培养法和改良酸性罗氏培养法。[结论]MPB64抗原可以作为一种较为敏感、快速简便的检测结核分枝杆菌感染的方法,有助于结核病临床的快速诊断。     

刃天青显色法检测结核分枝杆菌的耐药性

目的用刃天青显色法检测结核分枝杆菌对4种一线抗结核药物的耐药性,并探讨该法的临床应用价值。方法来自河南省3家结核病医院的共240株结核分枝杆菌分别用刃天青显色法检测异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、硫酸链霉素(SM)的耐药性,并与比例法作比较。结果刃天青显色法检测平均时间为8d,与比例法相比结果一致性好,INH、RFP、EMB、SM 4种药物的折点浓度分别为0.25、2.0、4.0、2.0μg/mL。结论刃天青显色法检测结核分枝杆菌的耐药性具有成本低、快捷、操作简便、准确等优点,为结核耐药检测提供了一种较好的方法。     

BACTEC MGIT960在二线抗结核药物药敏试验应用中的效果评价

目的 评价BACTEC MGIT 960进行4种二线抗结核药物药敏试验的效果.方法 用MGIT 960对结核分枝杆菌临床分离菌株进行二线抗结核药物卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星和乙硫异烟胺的药敏检测,并将结果与L-J比例法结果进行比较分析.结果 111 株结核分枝杆菌临床分离株用MGIT960法与L-J比例法卷曲霉索、卡...     

结核分枝杆菌快速培养基临床应用研究

目的 评价分枝杆菌变色液体培养基快速检测痰标本结核分枝杆菌的可靠性.方法 将230例疑似肺结核患者痰标本接种于分枝杆菌变色液体培养基和酸性罗氏培养基培养,进行对照平行测定.结果 230例痰涂片标本检出阳性率为27.8%;变色液体培养基和酸性罗氏培养基培养阳性率分别为47.4%,47.0%,两种方法阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 分枝杆菌变色液体培养基检测结核分枝杆菌具有特异、快速、可靠等优点,对结核病患者的早发现、早治疗具有积极意义.     

微量MIC检测判断结核分枝杆菌药敏的方法学研究

目的 建立用微量MIC值判断结核分枝杆菌药物敏感性的方法 ,并进行初步临床应用评价.方法 采用液体培养基MIC测定技术,在96孔U型板中进行检测,以60株已知药敏结果 的本院菌株库保存菌株作为试验菌株, 根据Bactec MGIT结果采用ROC曲线分析建立微量MIC药敏判断界值,最后用80株连续时间段内收集的结核分枝杆菌临床分离株对微量MIC药敏判断界值进行验证和修正.结果 微量MIC药敏法的最佳接种菌量为10~(-3)mg/ml数量级,7～10 d即可报告结果 ,链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇、氧氟沙星、阿米卡星和卷曲霉素的最佳判断界值分别为2、0.25、1、2、1、4和4 μg/ml,其敏感度分别为93.5%、97.7%、93.5%、84.4%、95.8%、91.7%和88.9%, 特异度分别为95.6%、94.6%、100.0%、93.8%、92.9%、95.6%和91.5%.其准确性分别达95.0%、96.3%、97.5%、90.0%、93.8%、95.0%和91.3%. 结论 微量MIC药敏检测方法 具有快速、准确、低成本和操作简单的优点,具有良好的推广应用前景,适合在我国各级结核病专业收治机构使用.     

DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用

目的 探讨DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用.方法 采用抗酸杆菌涂片法、罗氏培养法、比例法药敏试验及DNA微阵列芯片法对海南地区的2069例疑似结核病患者痰标本进行检测,并对结核分枝杆菌检出率、耐药性及耐药基因突变特征进行分析.结果 DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌检出率为明显高于罗氏培养法和...     

米氏7H9液体培养联合MPB64胶体金法快速检测结核分枝杆菌

目的观察米氏7H9液体培养联合MPB64免疫胶体金法快速检测结核分枝杆菌(MTB)的应用价值。方法选取247例临床确诊肺结核患者的痰标本进行痰涂片抗酸染色,米氏7H9液体培养基和改良酸性罗氏培养基培养,7H9液体培养联合MPB64免疫胶体金法检测,对结果进行比较分析。选取其中的12例,单独用米氏7H9液体培养和米氏7H9液体培养联合MPB64免疫胶体金法进行检出时间对比。结果247例肺结核患者痰涂片阳性率为14.6%,改良罗氏培养基阳性率为20.2%,米氏7H9液体培养基阳性率24.3%,米氏7H9液体培养联合MPB64免疫胶体金法阳性率为24.7%。7H9液体培养结合MPB64免疫胶体金法在培养的第15d检出11例(19.7%)阳性;而单纯的7H9液体培养加抗酸染色法在第15d只检出4例(33.3%)阳性。结论米氏7H9液体培养联合MPB64免疫胶体金法可作为较为敏感和特异的检测MTB感染的方法,并可以有效地区分MTB和非MTB。     

绝对浓度法与比例法检测结核分枝杆菌药物敏感性的探讨

目的 将比例法与绝对浓度法检测结核分枝杆菌的药物敏感性进行比较.方法 分别用比例法与绝对浓度法检测128株结核分枝杆菌对4种抗结核药物异烟肼(INH)、链霉素(SM)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)的敏感性.结果 以比例法为标准,绝对浓度法检测4种药物的灵敏度分别为81.3%、90.9%、100.0%、30.4%,特异度分别为96.8%、95.0%、94.1%、97.1%.对SM敏感性的检测,绝对浓度法和比例法差异无统计学意义;而对INH、RFP和EMB的检测,两种方法差异有统计学意义(P＜0.05).结论 建议有条件的实验室可以开展比例法药物敏感性试验.     

利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术应用于儿童肺结核快速诊断的效果

目的探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(XpertMTB/RIF)在快速诊断儿童肺结核中的应用价值。方法我院收治经临床诊断的120例肺结核患儿,采集肺泡灌洗液标本,分别行结核分枝杆菌罗氏培养、比例法药敏试验及XpertMTB/RIF检测。结果 120例灌洗液,罗氏培养显示,25例阳性,阳性率20. 83%(25/120); XpertMTB/RIF检测显示,74例阳性,阳性率61. 67%(74/120)。25例罗氏培养阳性的标本中,XpertMTB/RIF检测结核分枝杆菌阳性率为96. 00%(24/25),95例罗氏培养阴性标本中,XpertMTB/RIF检测结核分枝杆菌阳性率为52. 63%(50/95)。以比例法药敏试验结果为"金标准",XpertMTB/RIF检测利福平耐药的敏感度为100. 00%(3/3),特异度为95. 45%(21/22)。结论 XpertMTB/RIF可快速检测儿童肺泡灌洗液中结核分枝杆菌及利福平耐药情况,敏感度较高,对儿童肺结核诊疗有一定价值。     

痰标本中结核分枝杆菌培养及药敏检测结果分析

目的 探讨结核分枝杆菌在变色液体培养基中快速培养及药敏试验可靠性.方法 分别采用新型变色液体培养基和改良罗氏培养基对198例痰标本进行分枝杆菌培养及药敏试验,对比分析试验结果.结果 变色液体培养基及改良罗氏培养基检出阳性率分别是37.9%和37.4%.变色液体培养基试验结果平均时间为28 d,耐药率分别为链霉素8.00%、异烟肿5.33%、利福平4.00%和乙胺丁醇4.00%;改良罗氏培养基试验结果平均时间为62天,耐药率分别为链霉素8.11%、异烟肿5.41%、利福平4.05%和乙胺丁醇4.05%;两者结果差异无统计学意义(P＞0.05).多重耐药结果分别为5.33%和5.41%.结论 变色液体培养基是一种适合在基层实验室推广应用的结核分枝杆菌辅助诊断方法,具有快速、简单、灵敏度高的优点.     

噬菌体法与比例法在结核分枝杆菌药敏检测的比较研究

目的 探讨噬菌体检测技术(PhaB)同时快速检测4种一线抗结核药物耐药性的可能性,分析其临床应用价值.方法 应用PhaB同时测定53株结核分枝杆菌(MTB)临床分离株对链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇的耐药性,并与比例法的药敏结果比较,对2种方法检测结果不符的菌株进行Bactec-960药敏测定.结果 PhaB检测链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇药敏结果与比例法药敏结果符合率分别为94.3%、90.6%、96.2%和88.7%.共有7株菌株16个药敏结果PhaB与比例法检测结果不符.Bactec-960检测结果有5株12个药敏结果支持PhaB结果,2株4个药敏结果支持比例法结果.结论 PhaB同时检测链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇药敏结果与比例法检测结果有较高的符合率,可作为MTB耐药性的快速筛选方法.     

PCR-荧光探针法检测分枝杆菌的临床应用价值

目的 比较PCR-荧光探针法和改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的一致性,探讨两种方法在临床上的应用价值.方法 应用PCR-荧光探针法检测69例改良罗氏培养阳性的分枝杆菌核酸,比较两种方法检测结果的一致率;两种方法检测结果不一致样本进行测序验证,以测序结果作为金标准,分析两种方法检测结果的正确率及不一致的可能原因.结果 两种方法检测总一致率为89.9%,结核分枝杆菌检测一致率为87.5%,非结核分枝杆菌检测一致率为90.6%.PCR-荧光探针法和改良罗氏培养法共有7例检测结果不一致,与测序结果比对后,改良罗氏培养法检测的正确率为94.2%,PCR-荧光探针法检测的正确率为92.8%.结论 操作简单、快速,灵敏的PCR-荧光探针法与作为传统金标准的改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的一致性良好、正确率高,可作为临床分枝杆菌感染诊断的重要检测手段.